2025年新科版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年新科版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、現(xiàn)階段與克隆問(wèn)題有關(guān)的看法多種多樣，你認(rèn)為以下比較正確的是（）A.最好暫時(shí)不要克隆人B.克隆個(gè)體與原母本一樣，沒(méi)有必要搞克隆C.克隆可用于科研，不能投入生產(chǎn)D.“多莉”之死的原因是沒(méi)有將它放到自然羊群中2、獼猴桃是原產(chǎn)我國(guó)的野生藤本果樹(shù)，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，我國(guó)現(xiàn)有54個(gè)種。毛花獼猴桃為二倍體，果實(shí)大，維生素C含量高；軟棗獼猴桃為四倍體，極耐寒，在-40℃下可安全越冬。某農(nóng)科所利用這兩種獼猴桃體細(xì)胞，通過(guò)細(xì)胞工程的方法培育出了獼猴桃新品種，培育過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法不正確的是（）

A.過(guò)程①需用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行去壁處理B.過(guò)程②利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性原理實(shí)現(xiàn)a和b的融合C.獼猴桃新品種的培育體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性D.新品種的培育屬于雜交育種3、A種植物細(xì)胞和B種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如圖所示（僅顯示細(xì)胞核）；將A；B兩種植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合，形成單核的雜種細(xì)胞，若經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)得到了雜種植株，則該雜種植株是（）

A.二倍體，基因型是DdYyRrB.三倍體，基因型是DdYyRrC.四倍體，基因型是DdYyRrD.四倍體，基因型是DDddYYyyRRrr4、下列關(guān)于哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.由受精卵發(fā)育為囊胚的過(guò)程中每個(gè)細(xì)胞的核質(zhì)比逐漸增大，胚胎中DNA總量逐慚增加B.胚胎發(fā)育至囊胚期即開(kāi)始了細(xì)胞分化，細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果C.囊胚從透明帶中伸展出來(lái)稱(chēng)為孵化，這之前屬于卵裂期D.滋養(yǎng)層細(xì)胞在囊胚期已發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)并可用于性別鑒定5、對(duì)某一線(xiàn)性DNA分子用一系列限制酶進(jìn)行酶切處理，根據(jù)酶切的電泳分析結(jié)果，對(duì)照酶切片段大小的數(shù)據(jù)進(jìn)行邏輯推理，然后確定各酶切片段的排列順序和各酶切位點(diǎn)的相對(duì)位置，即可繪出限制性酶切圖譜。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。根據(jù)表中數(shù)據(jù)分析，下列限制性酶切圖譜正確的是（）。已知一線(xiàn)性DNA序列共有5000bp第一步水解產(chǎn)物/bp第二步水解產(chǎn)物/bpA酶切割2100將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用B酶切割19002001900200140080060014008006001000100010001000500500500500B酶切割2500將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用A酶切割19006001900600130080050013008005001200100020012001000200經(jīng)A酶和B酶同時(shí)切割1900100080060050020019001000800600500200

A.B.C.D.評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、下圖表示選用具有同一外源目的基因?qū)δ称贩N奶牛進(jìn)行遺傳特性改造的三種途徑；下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.獲得奶牛1通常采用顯微注射法導(dǎo)入外源基因B.奶牛2體內(nèi)不同組織細(xì)胞的基因組成一定相同C.成功獲得奶牛1、2、3表明三個(gè)受體細(xì)胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的獲得均需在體外進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)7、下圖為科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡(jiǎn)要過(guò)程；下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強(qiáng)的肌肉母細(xì)胞B.生物反應(yīng)器內(nèi)應(yīng)控制好適宜的溫度，并沖入純氧保證細(xì)胞呼吸C.培養(yǎng)液中的支架提供了更多的細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)D.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠(chǎng)化生產(chǎn)，減少環(huán)境污染8、下圖是我國(guó)科學(xué)家制備小鼠孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞的相關(guān)研究流程；其中Oct4基因在維持胚胎干細(xì)胞全能性和自我更新中發(fā)揮極其重要的作用。下列敘述正確的是（）

A.受精卵發(fā)育過(guò)程中桑椹胚前的細(xì)胞都是全能性細(xì)胞B.推測(cè)Oct4基因的表達(dá)有利于延緩衰老C.過(guò)程③胚胎干細(xì)胞細(xì)胞核大、核仁明顯D.從卵巢中獲取的卵母細(xì)胞可直接用于過(guò)程①9、驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對(duì)人體無(wú)害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，優(yōu)點(diǎn)是克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B.驅(qū)蚊草培育過(guò)程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或電刺激等方法C.驅(qū)蚊草培育過(guò)程不同于植物組織培養(yǎng)，無(wú)細(xì)胞脫分化和再分化的過(guò)程D.驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，育種原理是基因突變10、近年來(lái)；全人源化單克隆抗體技術(shù)發(fā)展迅速，利用轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)進(jìn)行全人源化單克隆抗體的制備流程如圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）

A.該技術(shù)能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應(yīng)B.過(guò)程①②采用核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性C.過(guò)程⑧要經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選、克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)等過(guò)程D.體外培養(yǎng)B細(xì)胞也可以大量獲得針對(duì)該抗原的單克隆抗體11、轉(zhuǎn)基因作物的推廣種植，大幅度提高了糧食產(chǎn)量，取得了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益碩果累累的轉(zhuǎn)基因成果在帶給人們喜悅的同時(shí)，也促使人們關(guān)注轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題。下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因作物的安全性的敘述，正確的是（）A.轉(zhuǎn)入抗性基因的植物可能成為“入侵物種”，影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性B.抗性基因可能會(huì)隨花粉傳播到田間近緣野生植物體內(nèi)，造成基因污染C.若目的基因來(lái)自自然界，則培育出的轉(zhuǎn)基因植物不會(huì)有安全性問(wèn)題D.大面積種植抗蟲(chóng)棉，有可能會(huì)導(dǎo)致棉鈴蟲(chóng)群體中相關(guān)抗性基因頻率增大12、黃粉蟲(chóng)可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染進(jìn)行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲(chóng)腸道中分離、純化目的微生物的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是（）

A.富集培養(yǎng)基中含有酵母膏、蛋白胨、瓊脂等，蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和維生素B.分離、純化目的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源C.將轉(zhuǎn)接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱長(zhǎng)期保存D.與傳統(tǒng)填埋、焚燒相比，黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染的降解不會(huì)造成二次污染13、甲流試劑盒中的抗血凝素單克隆抗體能與甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特異性結(jié)合，發(fā)揮診斷作用。利用小鼠制備抗HA單克隆抗體的流程如圖，下列敘述正確的是（）

A.制備抗HA單克隆抗體使用的B淋巴細(xì)胞取自注射過(guò)HA的小鼠脾臟B.在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡C.放入96孔板的細(xì)胞為多種雜交瘤細(xì)胞，均能產(chǎn)生所需抗體D.將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體14、2019年，中國(guó)科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細(xì)胞通過(guò)克隆技術(shù)培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運(yùn)用該基因編輯技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人的研究評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)15、請(qǐng)回答下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題：

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于不同物種間存在__________，同時(shí)花粉的傳播距離和__________有限；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物很難與其它植物雜交，因而不大可能對(duì)生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過(guò)程中，絕大多數(shù)科學(xué)家都能自覺(jué)遵守科學(xué)研究道德。例如，把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有___________的生物上；對(duì)外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對(duì)人體有毒性或過(guò)敏的___________．

（3）一些持反對(duì)態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于克隆技術(shù)尚不成熟，現(xiàn)在就做克隆人很可能孕育出有嚴(yán)重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為，一些技術(shù)問(wèn)題可以通過(guò)胚胎分級(jí)、______和__________等方法得到解決。

（4）對(duì)于克隆技術(shù)，中國(guó)政府的態(tài)度是___________．但不反對(duì)___________。16、（1）致病菌：第二次世界大戰(zhàn)期間，侵華日軍在中國(guó)領(lǐng)土上修建了幾十座_____工廠(chǎng)，曾用數(shù)千名中國(guó)人做實(shí)驗(yàn)，還曾在中國(guó)20多個(gè)地區(qū)使用了_____；造成了幾十萬(wàn)中國(guó)老百姓死亡。日本戰(zhàn)敗投降時(shí)，侵華日軍又一次把培養(yǎng)的細(xì)菌釋放出來(lái)，在中國(guó)造成傳染病大流行。

（2）生化毒劑：如_____分子可以阻滯神經(jīng)末梢釋放_(tái)____；從而引起肌肉麻痹。

（3）病毒：如_____病毒；在年輕人普遍都沒(méi)有接種天花疫苗的情況下，若有人用天花病毒或某些動(dòng)物的痘病毒作為生物武器，后果不堪設(shè)想。

（4）基因重組致病菌：這些致病菌是人類(lèi)的_____致病菌，可讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無(wú)藥可醫(yī)。17、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。18、功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中______部位的兩個(gè)核苷酸之間的______斷開(kāi)，因此具有______。19、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。20、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80℃的高溫，而DNA在_________℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解或破壞_______，食鹽能____________細(xì)胞膜。21、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。22、在我國(guó)市場(chǎng)上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問(wèn)題，進(jìn)行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對(duì)該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認(rèn)同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認(rèn)為：目前我國(guó)市場(chǎng)上根本沒(méi)有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀(guān)點(diǎn)是什么_____？23、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過(guò)蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請(qǐng)教或通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)24、人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大；通常從人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人類(lèi)感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對(duì)血液制品顧慮重重，如果應(yīng)用基因工程等技術(shù)，將人的血消白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中，那么利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。其大致過(guò)程如下：

I．采用良種供體奶牛的卵母細(xì)胞和精子；通過(guò)體外受精，形成受精卵；

II．將人血消白蛋白基因?qū)肽膛Ｊ芫眩恍纬芍亟M細(xì)胞；

III．電脈沖刺激重組細(xì)胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ．將胚胎移植到受體母牛的子宮中；最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）實(shí)驗(yàn)步驟Ⅰ中，受精時(shí)，防止多精入卵的生理反應(yīng)包括____________________。

（2）實(shí)驗(yàn)步驟Ⅱ中，需先構(gòu)建基因表達(dá)載體，將HSA基因與__________等調(diào)控組件重組在一起；再導(dǎo)入奶牛受精卵。

（3）實(shí)驗(yàn)步驟Ⅲ中，進(jìn)行動(dòng)物早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了含有各種無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類(lèi)、維生素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分外，還要添加__________。培養(yǎng)過(guò)程需要定期更換培養(yǎng)液，目的是__________。

（4）實(shí)驗(yàn)步驟Ⅳ中，應(yīng)選擇性別為_(kāi)_________的奶牛胚胎進(jìn)行移植；對(duì)早期胚胎（如囊胚）進(jìn)行性別鑒定的常用方法是____________________。移植前還需要檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受精卵，檢測(cè)方法是采用__________技術(shù)。25、蘋(píng)果樹(shù)腐爛病是由黑腐皮殼菌引起的；是限制蘋(píng)果產(chǎn)量的重要因素之一。生產(chǎn)上主要以化學(xué)藥劑防治該病。為開(kāi)發(fā)生物防治途徑，科研人員擬從土壤中分離篩選出能抑制黑腐皮殼菌生長(zhǎng)的枯草芽孢桿菌，實(shí)驗(yàn)流程圖如圖1：

（1）①中木糖和硝酸鉀的作用分別是______________。

（2）②→③中梯度稀釋的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培養(yǎng)基中水分過(guò)快蒸發(fā)之外，還有______________。

（4）現(xiàn)有經(jīng)純化后獲得的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系，為探究哪個(gè)品系對(duì)黑腐皮殼菌的抑制效果更好，科研人員在如圖2平板中的A處接種黑腐皮殼菌，在距離A處等距離的B1～B4處分別接種等量的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系，在適宜條件下培養(yǎng)3﹣5天后，通過(guò)觀(guān)察_________________________篩選出抑菌更好的枯草芽孢桿菌菌株。

圖2

（5）在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土樣中活菌的數(shù)目時(shí)，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在______________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法所得結(jié)果往往比實(shí)際細(xì)菌的數(shù)目要少，原因是__________________________________。26、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過(guò)污染飼料引起畜禽中毒反應(yīng)。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級(jí)”或“次級(jí)”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進(jìn)入豬細(xì)胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動(dòng)子上游的兩個(gè)調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)的機(jī)理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動(dòng)子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達(dá)載體，再分別導(dǎo)入豬肝細(xì)胞，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；24h后檢測(cè)LUC酶活性，計(jì)算啟動(dòng)子活性相對(duì)值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對(duì)CYP3A的誘導(dǎo)；B2是Spl的結(jié)合位點(diǎn)。研究者推測(cè)，NF-Y通過(guò)與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達(dá)。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點(diǎn)，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細(xì)胞核蛋白提取物混合，實(shí)驗(yàn)分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進(jìn)而推測(cè)第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了NF-Y和Spl通過(guò)互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測(cè)CYP3A基因的啟動(dòng)子活性。據(jù)此分析，實(shí)驗(yàn)假設(shè)是_____。評(píng)卷人得分五、綜合題(共2題，共20分)27、人乳鐵蛋白（hLF）對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開(kāi)展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究，主要流程如下圖，圖中AseI、NheI、SalI、BamHI代表相關(guān)限制酶切點(diǎn)，neor為新霉素抗性基因；BLG基因?yàn)锽乳球蛋白基因，GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。請(qǐng)回答：

（1）過(guò)程①中，不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR，是因?yàn)開(kāi)______________。在RT—PCR過(guò)程中，加入的引物需在5’端添加_______________兩種限制酶的識(shí)別序列；以便于hLF基因插入pEB中。

（2）過(guò)程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是_______________。

（3）將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠存活的細(xì)胞應(yīng)該是導(dǎo)入_______________的細(xì)胞，再利用熒光顯微鏡觀(guān)察山羊乳腺上皮細(xì)胞中_______________；以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。

（4）要獲得轉(zhuǎn)基因山羊，還需要將成功表達(dá)hLF的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊去核卵母細(xì)胞中，再借助_________________技術(shù)孕育出羊羔。28、研究發(fā)現(xiàn)；新冠病毒外殼中的S蛋白具有很強(qiáng)的抗原性，可利用其制作疫苗。人類(lèi)已通過(guò)基因工程合成S蛋白基因，并采用倉(cāng)鼠乳腺細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來(lái)獲取產(chǎn)物S蛋白，其過(guò)程如圖所示。

回答下列問(wèn)題：

(1)可利用PCR技術(shù)特異性地快速擴(kuò)增S蛋白基因，該反應(yīng)需要在一定的_____中才能進(jìn)行，且需要引物等。已知DNA復(fù)制子鏈的延伸方向是5'→3'，應(yīng)該選用圖甲中_____（填字母）作為引物。若S蛋白基因擴(kuò)增了4次，則需要_____個(gè)引物，該過(guò)程可以在_____中自動(dòng)完成，完成以后，常采用_____來(lái)鑒定PCR的產(chǎn)物。

(2)基因工程的核心工作是_____，其目的是_____。圖乙中過(guò)程④⑦分別涉及_____、_____技術(shù)。早期胚胎的_____階段開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞分化，其中的細(xì)胞分化去向是_____。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

我國(guó)對(duì)克隆人持四部態(tài)度是在任何情況；任何場(chǎng)合、任何條件下都不贊成、不允許、不支持、不接受生殖性克隆人。但可設(shè)計(jì)試管嬰兒滿(mǎn)足醫(yī)療所需。

【詳解】

A；克隆人會(huì)引發(fā)一系列倫理問(wèn)題；中國(guó)禁止生殖性克隆人，A正確；

B；我國(guó)不支持生殖性克?。坏渌问接糜谥委煹目寺〖夹g(shù)可進(jìn)行，B錯(cuò)誤；

C；克隆可用于科研；如用于治療而進(jìn)行的設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)，C錯(cuò)誤；

D；“多莉”之死患由嚴(yán)重的肺病導(dǎo)致的；D錯(cuò)誤。

故選A。2、D【分析】【分析】

題圖分析；表示植物體細(xì)胞雜交過(guò)程，過(guò)程①表示酶解法去除細(xì)胞壁獲得細(xì)胞原生質(zhì)體的過(guò)程，過(guò)程②表示原生質(zhì)體融合的過(guò)程，過(guò)程③表示再生出新的細(xì)胞壁的過(guò)程。

【詳解】

A；由分析可知；過(guò)程①是利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁獲得細(xì)胞原生質(zhì)體的過(guò)程，因?yàn)橹参锛?xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，A正確；

B、過(guò)程②是原生質(zhì)體融合的過(guò)程，可采用離心、振動(dòng)、電刺激、聚乙二醇為誘導(dǎo)劑等方法，原生質(zhì)體a和b的融合過(guò)程依賴(lài)細(xì)胞膜的流動(dòng)性；B正確；

C；獼猴桃新品種的培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)；該過(guò)程中運(yùn)用了植物細(xì)胞全能性的原理，C正確；

D；由題干信息可知；毛花獼猴桃為二倍體，軟棗獼猴桃為四倍體，二者為不同的物種，不能通過(guò)雜交育種完成新品種的培育，圖中運(yùn)用的技術(shù)是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、C【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交利用的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的全能性，其操作流程為：首先獲得植物的體細(xì)胞，而后去除細(xì)胞壁以獲得原生質(zhì)體，然后利用離心；電刺激、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，當(dāng)該原生質(zhì)體再生出新的細(xì)胞壁意味著雜種細(xì)胞誘導(dǎo)成功，而后對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)技術(shù)，獲得雜種植株，該過(guò)程的意義是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

【詳解】

據(jù)圖可知，A物種基因型為Dd，屬于二倍體，B物種的基因型為YyRr，也屬于二倍體。植物細(xì)胞融合后形成的雜種細(xì)胞含有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)，基因型為DdYyRr；屬于異源四倍體，即C正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】4、D【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過(guò)程：

（1）卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；

（2）桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎（之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞）；

（3）囊胚：細(xì)胞開(kāi)始分化；其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔（注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化）；

（4）原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層；下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔（細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度）。

【詳解】

A；從受精卵到囊胚的發(fā)育為卵裂期；卵裂期因細(xì)胞有絲分裂導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)量增加，但胚胎總體積并不增大，所以每個(gè)細(xì)胞的核質(zhì)比增大，胚胎中DNA因細(xì)胞數(shù)量的增加而增加，A正確；

B；胚胎發(fā)育至囊胚時(shí)即開(kāi)始了細(xì)胞分化；細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，B正確；

C；胚胎的早期發(fā)育在透明帶內(nèi)進(jìn)行的階段稱(chēng)為卵裂期；囊胚發(fā)育到一定階段會(huì)被從透明帶內(nèi)擠壓出來(lái)，這一過(guò)程稱(chēng)為孵化，C正確；

D；囊胚分為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層；其中滋養(yǎng)層將發(fā)育為胎膜和胎盤(pán)，但這發(fā)生在囊胚期之后，D錯(cuò)誤。

故選D。5、B【分析】【分析】

限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的；能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。

【詳解】

分析表格中的數(shù)據(jù)：線(xiàn)性DNA序列共有5000bp（2100+1400+1000+500=5000），經(jīng)A酶切割后形成2100bp、1400bp、1000bp、500bp共4個(gè)片段，說(shuō)明酶A有3個(gè)切割位點(diǎn)；如果用B酶切割形成了2500bp、1300bp、1200bp三個(gè)片段；所以B酶有2個(gè)酶切位點(diǎn)；

如果先用A酶處理再經(jīng)B酶切割后，2100bp被切割成了1900bp和200bp，1400bp被切割成了800bp和600bp，1000bp和500bp沒(méi)有被切割；說(shuō)明酶B的酶切位點(diǎn)位于酶A之間。

因此限制性酶切圖譜是：

故選B。二、多選題(共9題，共18分)6、A:D【分析】【分析】

分析題圖：奶牛1的培育采用了基因工程技術(shù)；早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；奶牛2的培育采用可基因工程技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。

【詳解】

A；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；A正確；

B；奶牛2的培育過(guò)程中；在囊胚階段注入了含有外源基因的受體細(xì)胞，因此其體內(nèi)不同組織細(xì)胞的基因型可能不同，B錯(cuò)誤；

C；奶牛3表明受體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；C錯(cuò)誤；

D；結(jié)合分析可知；奶牛1、2、3的獲得均需在體外進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)，D正確。

故選AD。7、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中懸液中的細(xì)胞會(huì)很快貼附在瓶壁上。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2?！叭嗽炫Ｈ狻钡呐囵B(yǎng)不僅產(chǎn)量高；并可以減少成本和降低環(huán)境污染。

【詳解】

A；胰蛋白酶處理動(dòng)物組織；可以使組織分散成單個(gè)細(xì)胞，利于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，A正確。

B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2；B錯(cuò)誤。

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中懸液中的細(xì)胞會(huì)很快貼附在瓶壁上。所以細(xì)胞貼附瓶壁的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑；無(wú)毒，易于貼附，如果想得到大量的產(chǎn)物，可以增大細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，C正確。

D；人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠(chǎng)化生產(chǎn)；同時(shí)也可減少對(duì)土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會(huì)減少，D正確。

故選ACD。8、A:B:C【分析】【分析】

分析圖示可知；將卵子去核，然后注入Oct4轉(zhuǎn)基因小鼠的精子，用氧化鍶激活，可使該換核的細(xì)胞形成雄原核，并分裂分化形成單倍體囊，最終形成孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞。

【詳解】

A；由于桑椹胚期的細(xì)胞沒(méi)有出現(xiàn)分化；桑椹胚前的細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，是全能性細(xì)胞，A正確；

B；從題干可知；Oct4基因在維持胚胎干細(xì)胞全能性和自我更新中發(fā)揮極其重要的作用，可推測(cè)Oct4基因的表達(dá)有利于延緩衰老，B正確；

C；過(guò)程③胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性；體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯，C正確；

D；卵巢中取出來(lái)的是未成熟的卵細(xì)胞；要進(jìn)行培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂的中期才能受精，不能直接用于過(guò)程①，D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】9、C:D【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)?？筛鶕?jù)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。植物體細(xì)胞雜交的意義：在克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙；培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的；采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，A正確；

B；要獲得天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體；需要采用酶解法（纖維素酶、果膠酶），誘導(dǎo)天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體的融合可采用化學(xué)法（PEG等試劑）或物理法（電刺激等），B正確；

C；驅(qū)蚊草培育過(guò)程不同于植物組織培養(yǎng)；但需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此有細(xì)胞脫分化和再分化的過(guò)程，C錯(cuò)誤；

D；驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；育種原理是染色體數(shù)目變異，D錯(cuò)誤。

故選CD。10、A:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞，將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；利用轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)進(jìn)行全人源化單克隆抗體；能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應(yīng)，A正確；

B；過(guò)程①②利用的是轉(zhuǎn)基因技術(shù)；B錯(cuò)誤；

C；融合后的細(xì)胞需要用選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞；還要經(jīng)過(guò)克隆化培養(yǎng)、（專(zhuān)一性）抗體檢測(cè)等，C正確；

D；B細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下不能無(wú)限增殖；體外培養(yǎng)B細(xì)胞不能獲得大量的單克隆抗體，D錯(cuò)誤。

故選AC。11、A:B:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題包括：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因生物具有某些特殊性質(zhì)；他們?cè)谀车貐^(qū)的競(jìng)爭(zhēng)能力較強(qiáng)，可能成為“外來(lái)入侵物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的存在，從而影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因作物的基因可以通過(guò)花粉傳播到田間近緣野生植物體內(nèi)；該近緣物種在通過(guò)授粉會(huì)造成基因進(jìn)一步擴(kuò)散和污染，B正確；

C；即使目的基因來(lái)自自然界；培自出的轉(zhuǎn)基因植物仍然可能會(huì)有潛在的安全性向題，C錯(cuò)誤；

D；大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉；有可能會(huì)導(dǎo)致棉鈴蟲(chóng)群體中相關(guān)抗性基因頻率增加，D正確。

故選ABD。12、B:D【分析】【分析】

1；分離菌株的思路:

(1)自然界中目的菌株的篩選:

①依據(jù)：根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。

②實(shí)例：PCR技術(shù)過(guò)程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶；就是從熱泉中篩選出來(lái)的Taq細(xì)菌中提取出來(lái)的。

(2)實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選:

①原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)；溫度、pH等）；同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

2；統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：

(1)稀釋涂布平板法（間接）：

①當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。

②通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中大約含有的活菌數(shù)。

(2)利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

【詳解】

A；富集培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基；不應(yīng)含有瓊脂，A錯(cuò)誤；

B；分離、純化能降解PVC塑料膜的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源；B正確；

C；轉(zhuǎn)接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱臨時(shí)保存；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可用甘油管藏的方法，C錯(cuò)誤；

D；如果對(duì)白色污染進(jìn)行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染；黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染的降解不會(huì)，D正確。

故選BD。13、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗原與抗體的結(jié)合具有特異性；為制備抗HA單克隆抗體，則使用的B淋巴細(xì)胞應(yīng)取自注射過(guò)HA的小鼠脾臟，A正確；

B；在特定的選擇培養(yǎng)基上；未融合的親本細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞類(lèi)型、骨髓瘤細(xì)胞類(lèi)型）和融合的具有同種核的細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞型和骨髓瘤-骨髓瘤細(xì)胞型）都會(huì)死亡，B正確；

C；將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后；放入96孔板，不一定都能產(chǎn)生所需抗體，還需進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)圖可知；圖中細(xì)胞群a在加入HA抗原后呈陽(yáng)性，說(shuō)明細(xì)胞群a產(chǎn)生了抗HA抗原的抗體，故將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體，D正確。

故選ABD。14、B:D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細(xì)胞通過(guò)克隆技術(shù)（屬于無(wú)性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯(cuò)誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)藥物；C正確；

D；不能利用該技術(shù)進(jìn)行克隆人的研究；D錯(cuò)誤。

故選BD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共9題，共18分)15、略

【分析】1；試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

3；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；生物安全主要是指轉(zhuǎn)基因生物釋放到環(huán)境中，可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅。

【詳解】

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為；由于不同物種間存在生殖隔離，同時(shí)花粉的傳播距離和存活時(shí)間有限，不會(huì)造成轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物與其它植物的雜交，因而也不太可能對(duì)生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過(guò)程中；為保證轉(zhuǎn)基因生物的安全，要把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有特定缺陷的生物上；對(duì)外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對(duì)人體有毒性或過(guò)敏的蛋白質(zhì)等等。

（3）堅(jiān)持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為；一些技術(shù)問(wèn)題可以通過(guò)胚胎分級(jí)；基因診斷和染色體檢查等方法得到解決。

（4）中國(guó)政府對(duì)于克隆技術(shù)的態(tài)度是禁止生殖性克?。坏环磳?duì)治療性克隆。

【點(diǎn)睛】

本題難度一般，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的要求，結(jié)合基因工程的應(yīng)用，綜合考查了基因工程、試管嬰兒和轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題，并且深入考查了相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)，要求考生能夠構(gòu)建一定的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)．面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食?！窘馕觥竣?生殖隔離②.存活時(shí)間③.特定缺陷④.蛋白質(zhì)⑤.基因診斷⑥.染色體檢查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治療性克隆16、略

【分析】【詳解】

（1）早在第二次世界大戰(zhàn)中；侵華日軍就組建了從事細(xì)菌戰(zhàn)的731部位和100部隊(duì)，并在中國(guó)領(lǐng)土上修建了幾十座細(xì)菌武器工廠(chǎng)，大量培養(yǎng)鼠疫；霍亂、傷寒、炭疽和菌痢等一系列能使人致命的傳染性疾病。曾用數(shù)千名中國(guó)人做實(shí)驗(yàn)，還曾在中國(guó)20多個(gè)地區(qū)使用了細(xì)菌武器，造成了幾十萬(wàn)中國(guó)老百姓死亡。日本戰(zhàn)敗投降時(shí)，侵華日軍又一次把培養(yǎng)的細(xì)菌釋放出來(lái)，在中國(guó)造成傳染病大流行。

（2）某些國(guó)家或恐怖組織大量生產(chǎn)肉毒桿菌毒素；肉毒桿菌毒素分子可以阻滯神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，從而引起肌肉麻痹。

（3）1978年天花就已經(jīng)在地球上消滅；但是某些國(guó)家至今保留著天花病毒菌株，今天，在年輕人普遍都沒(méi)有接種天花疫苗的情況下，若有人用天花病毒或某些動(dòng)物的痘病毒作為生物武器，后果不堪設(shè)想。

（4）目前，有一些國(guó)家對(duì)重組基因技術(shù)制造全新的致病菌表現(xiàn)了極大的興趣，這些人類(lèi)從來(lái)沒(méi)有接觸過(guò)的致病菌，可以讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無(wú)藥可醫(yī)。【解析】①.細(xì)菌武器②.細(xì)菌武器③.肉毒桿菌毒素④.乙酰膽堿⑤.天花⑥.從未接觸過(guò)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫、18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】特定磷酸二酯鍵特異性19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩(wěn)定存在遺傳至下一代表達(dá)和發(fā)揮20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80細(xì)胞膜溶解21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)22、略

【分析】【詳解】

目前我國(guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來(lái)源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國(guó)市場(chǎng)上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?！窘馕觥磕壳拔覈?guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來(lái)源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。23、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過(guò)蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過(guò)程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)24、略

【分析】1；體外受精過(guò)程包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、體外受精；其中卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)的方法：

（1）主要方法是：用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精。

（2）第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞。

（3）第三種方法：是直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞；叫活體采卵。

2；受精過(guò)程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開(kāi)始。

【詳解】

（1）受精時(shí)；往往一個(gè)卵母細(xì)胞只能和一個(gè)精子結(jié)合，透明帶反應(yīng)是阻止多精入卵的第一道屏障，卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的第二道屏障。

（2）該實(shí)驗(yàn)是利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)血清白蛋白；因此實(shí)驗(yàn)步驟Ⅱ中構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要先將HSA基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，再導(dǎo)入奶牛受精卵。

（3）動(dòng)物早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)；培養(yǎng)液中除了含有各種無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類(lèi)；維生素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分外，還要添加激素和動(dòng)物血清。培養(yǎng)過(guò)程需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（4）血清白蛋白要從乳汁中提??；只有雌性奶牛才能產(chǎn)生乳汁，因此胚胎移植時(shí)，必須選取雌性奶牛的胚胎進(jìn)行移植；對(duì)早期胚胎（如囊胚）進(jìn)行性別鑒定的常用方法是取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行染色體檢查或DNA分析；移植前還需要檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受精卵，通常采用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握體外受精、受精過(guò)程、基因工程等知識(shí)，要求考生識(shí)記體外受精技術(shù)的過(guò)程及方法、受精作用的過(guò)程、基因工程的操作步驟及應(yīng)用，并能夠聯(lián)系實(shí)際答題?！窘馕觥客该鲙Х磻?yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子激素和動(dòng)物血清清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害雌性取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行染色體檢查或DNA分析DNA分子雜交25、略

【分析】【分析】

微生物的分離：①利用該分離對(duì)象對(duì)某一營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的“嗜好”；專(zhuān)門(mén)在培養(yǎng)基中加入該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使該微生物大量增殖。這些物質(zhì)主要是一些特殊的碳源；氮源，如纖維素可用來(lái)富集纖維素分解微生物，尿素可用來(lái)富集尿素分解微生物。②利用該分離對(duì)象對(duì)某種抑制物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物質(zhì)，經(jīng)培養(yǎng)后，由于原來(lái)占優(yōu)勢(shì)的它種微生物的生長(zhǎng)受到抑制，而分離對(duì)象卻可趁機(jī)大量增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)。如篩選酵母菌和霉菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素，因青霉素可抑制細(xì)菌和放線(xiàn)菌的細(xì)胞壁的合成，從而抑制兩類(lèi)微生物的生長(zhǎng)，而酵母菌和霉菌正常生長(zhǎng)增殖。

【詳解】

（1）微生物的生長(zhǎng)需要碳源；氮源、水和無(wú)機(jī)鹽；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸鉀中含有N元素，可以提供氮源和無(wú)機(jī)鹽。

（2）分離篩選枯草芽孢桿菌需要得到單菌落；②→③中梯度稀釋的目的是將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在固體培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培養(yǎng)基中水分過(guò)快蒸發(fā)之外；還可以防止冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。

（4）分析題意可知，A處接種黑腐皮殼菌，在距離A處等距離的B1~B4處分別接種等量的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系；在適宜條件下培養(yǎng)3－5天，由于枯草芽孢桿菌能抑制黑腐皮殼菌生長(zhǎng)，通過(guò)觀(guān)測(cè)黑腐皮殼菌菌落的形狀（黑腐皮殼菌菌落邊緣與4個(gè)枯草芽孢桿菌菌落的距離），就能篩選出抑菌更好的枯草芽孢桿菌菌株。

（5）在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土樣中活菌的數(shù)目時(shí)；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)菌落，故該方法所得結(jié)果往往比實(shí)際細(xì)菌的數(shù)目要少。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生利用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力，難度中等?！窘馕觥刻峁┨荚?，提供氮源和無(wú)機(jī)鹽將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在固體培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落防止冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染觀(guān)測(cè)黑腐皮殼菌菌落的形狀（黑腐皮殼菌菌落邊緣與4個(gè)枯草芽孢桿菌菌落的距離）30～300當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)菌落26、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見(jiàn)的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)其表達(dá)水平升高，當(dāng)用兩種調(diào)控序列同時(shí)連接啟動(dòng)子，啟動(dòng)子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級(jí)代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動(dòng)所必需的，大多存在于細(xì)胞內(nèi)。次級(jí)代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動(dòng)必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴(kuò)散的方式進(jìn)入細(xì)胞。

（2）實(shí)驗(yàn)的自變量是有無(wú)調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對(duì)照組的目的是為了排除無(wú)光變量的影響，除了沒(méi)有調(diào)控序列，其他處理和實(shí)驗(yàn)組相同，所以對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組豬肝細(xì)胞均導(dǎo)入含CYP3A基因啟動(dòng)子及LUC基因的表達(dá)載體，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個(gè)調(diào)控序列和對(duì)照組活性一致，缺失一個(gè)比對(duì)照組活性略強(qiáng)，兩個(gè)都存在活性最高，說(shuō)明這兩個(gè)調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件。故缺失兩個(gè)調(diào)控序列或其中任一個(gè)，T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動(dòng)子活性明顯增強(qiáng)。

（3）①實(shí)驗(yàn)的目的是要驗(yàn)證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點(diǎn)野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點(diǎn)突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會(huì)競(jìng)爭(zhēng)NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過(guò)互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會(huì)降低CYP3A基因的啟動(dòng)子的活性。【解析】(1)次級(jí)自由擴(kuò)散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個(gè)調(diào)控