2025年滬教版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬教版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷540考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、限制酶a和b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示；下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）

A.一個(gè)DNA分子中，酶a與酶b的識(shí)別序列可能有多個(gè)B.酶a與酶b切出的黏性末端不能相互連接C.酶a與酶b切斷的化學(xué)鍵不完全相同D.用酶a切割有3個(gè)切割位點(diǎn)的質(zhì)粒，得到4種切割產(chǎn)物2、蛋白質(zhì)工程的基本操作程序正確是（）

①蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)合成②DNA合成③mRNA合成。

④蛋白質(zhì)的預(yù)期功能⑤根據(jù)氨基酸的序列推出脫氧核苷酸的序列A.①→②→③→④→⑤→①B.⑤→④→③→②→①→②C.④→①→⑤→②→③→①D.②→③→⑤→①→②→④3、我國(guó)政府不贊成；不允許、不支持、不接受任何形式的生殖性克隆人。下列屬于其原因的一組是（）

①克隆人只是某些人出于某種目的制造出的“產(chǎn)品”；沒(méi)有“父母”，這可能導(dǎo)致他們?cè)谛睦砩鲜艿絺Α?/p>

②生殖性克隆技術(shù)可能帶有一定的致癌風(fēng)險(xiǎn)。

③由于技術(shù)問(wèn)題；可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆人。

④克隆人的家庭地位難以認(rèn)定；可能使以血緣為紐帶的父子；兄弟和姐妹等人倫關(guān)系消亡。

⑤生殖性克隆人沖擊了現(xiàn)有的一些有關(guān)婚姻；家庭和兩性關(guān)系的倫理道德觀念。

⑥克隆人作為一項(xiàng)科學(xué)研究屬于中性的；但可能帶來(lái)嚴(yán)重的基因歧視。

⑦生殖性克隆人是對(duì)人類尊嚴(yán)的侵犯⑧生殖性克隆人破壞了人類基因多樣性的天然屬性，不利于人類的生存和進(jìn)化A.①②③④⑤⑥B.①③④⑤⑦⑧C.①②③⑤⑦⑧D.①④⑤⑥⑦⑧4、下列關(guān)于試管嬰兒技術(shù)的敘述，正確的是（）A.在采集卵母細(xì)胞之前，需要給供卵者注射大量的性激素，促進(jìn)排卵B.受精卵移入一定濃度的肝素溶液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力C.受精過(guò)程中，卵母細(xì)胞會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，阻止多精入卵D.設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)，有利于生育健康的下一代，不會(huì)造成社會(huì)危害5、某些國(guó)家已經(jīng)立法允許醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”；三親嬰兒的培育過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代B.捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C.三親嬰兒的核遺傳物質(zhì)分別來(lái)自捐獻(xiàn)者等三個(gè)親本D.三親嬰兒的培育還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)6、咔唑是一種含N有機(jī)物；有潛在致癌性，其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定難以清除。為了獲得高效降解咔唑的微生物，研究人員設(shè)計(jì)了下圖所示的實(shí)驗(yàn)方案下列針對(duì)該方案的表述錯(cuò)誤的是（）

A.加入無(wú)菌水稀釋前的油田淤泥樣品無(wú)需滅菌B.在CNFM中加入咔唑的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C.固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是分離得到降解咔唑的微生物D.利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)測(cè)量經(jīng)多瓶培養(yǎng)后培養(yǎng)瓶中目標(biāo)微生物的數(shù)量小于實(shí)際值7、隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，動(dòng)物的生殖方式變得越來(lái)越多樣化，下圖表示胚胎工程技術(shù)研究及應(yīng)用的相關(guān)情況，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.應(yīng)用1中獲得的小牛為克隆牛，其遺傳物質(zhì)來(lái)源于供體1和供體2B.應(yīng)用2、3過(guò)程胚胎移植技術(shù)中需要同時(shí)對(duì)供、受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理C.應(yīng)用3通過(guò)胚胎分割技術(shù)獲得二分胚，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割D.應(yīng)用2、3、4過(guò)程必須對(duì)精子進(jìn)行獲能處理，不需要對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)評(píng)卷人得分二、多選題(共5題，共10分)8、科學(xué)家通過(guò)“治療性克隆”研究發(fā)現(xiàn)；利用病人本身的細(xì)胞可治療其患有的某些疾病。一般將胚胎干細(xì)胞進(jìn)行基因修飾后，經(jīng)誘導(dǎo)分化成相應(yīng)的組織器官用于移植。其過(guò)程如下圖所示。下列關(guān)于“治療性克隆”的敘述不正確的是（）

A.人類“治療性克隆”屬于生物工程中的細(xì)胞工程B.該治療過(guò)程中應(yīng)用的主要技術(shù)有核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等C.此過(guò)程體現(xiàn)了胚胎干細(xì)胞具有全能性D.“治療性克隆”與“異體器官移植”相比，其優(yōu)點(diǎn)之一是避免了免疫排斥反應(yīng)9、聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，它具有類似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可用于制造無(wú)污染的“綠色塑料”?？茖W(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上B.步驟③所用的培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)嗜鹽細(xì)菌的生長(zhǎng)越有利C.步驟④所用到的培養(yǎng)基應(yīng)加入瓊脂，以便挑取單菌落獲得純化菌株D.挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測(cè)定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量10、下列關(guān)于微生物發(fā)酵的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.制備培養(yǎng)基過(guò)程中，需要在滅菌后進(jìn)行pH的調(diào)節(jié)B.制作果酒時(shí)適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌生長(zhǎng)C.現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后即可進(jìn)行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵D.醋酸菌能將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜幔氏奶扉_(kāi)瓶后的紅酒容易變酸11、下列敘述中錯(cuò)誤的是（）A.改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B.細(xì)胞代謝產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性C.在pH和溫度相同時(shí)加酶洗衣粉的洗滌效果好于普通洗衣粉D.透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障12、2019年12月以來(lái)，新型冠狀病毒導(dǎo)致的肺炎在世界范圍爆發(fā)，造成多人死亡?？茖W(xué)工作者經(jīng)研究，發(fā)現(xiàn)了數(shù)種快速檢驗(yàn)新冠肺炎病原體的方法，以正確診斷。下列與新型冠狀病毒研究、診斷有關(guān)的說(shuō)法中正確的是（）A.鏡檢法：在光學(xué)顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液，以發(fā)現(xiàn)病原體B.PCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)，可把病原體的基因逆轉(zhuǎn)錄后在幾十分鐘內(nèi)擴(kuò)增到數(shù)百萬(wàn)倍C.抗原—抗體法：用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合，發(fā)現(xiàn)病原體D.DNA探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標(biāo)記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理來(lái)檢測(cè)病原體評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)13、人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為_(kāi)_______________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）14、在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，人們發(fā)明了___________，這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。剛果紅(CongoRed，簡(jiǎn)稱__________)是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成____________，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅一纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的______________。這樣，我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生________________來(lái)篩選纖維素分解菌。15、_________℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_______________℃。16、常用的轉(zhuǎn)化方法：

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是_______，其次還有______和______等。

將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是_______。此方法的受體細(xì)胞多是_______。

將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是_______，最常用的原核細(xì)胞是_____，其轉(zhuǎn)化方法是：先用______處理細(xì)胞，使其成為_(kāi)_____，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。17、通過(guò)____________的方式，來(lái)控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。18、沙門氏菌是一種常見(jiàn)的食源性致病菌；被感染了沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食品，會(huì)使人發(fā)生食物中毒。沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對(duì)熱抵抗力不強(qiáng)，在60℃的條件下15min就能被殺死。肉桂精油是從肉桂樹(shù)中提煉獲得的，具有不溶于水；易溶于有機(jī)溶劑且易揮發(fā)的特性，能抑制沙門氏菌的繁殖?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）培養(yǎng)沙門氏菌時(shí)要進(jìn)行無(wú)菌操作，常用的滅菌方法有________（答出兩種）。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時(shí)一般需要將平板________（填“倒置”或“正置”）。單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________。

（2）從雞糞便取樣，經(jīng)選擇培養(yǎng)后需要經(jīng)過(guò)一系列________才能將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上。對(duì)獲得的沙門氏菌常采用________的方法長(zhǎng)期保存。

（3）根據(jù)題干信息，為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中儲(chǔ)存、加工食品的方法是________。

（4）根據(jù)肉桂精油的化學(xué)特性，可采用________法來(lái)提取，提取過(guò)程中影響精油品質(zhì)的因素有________。19、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲(chóng)等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對(duì)植物無(wú)害。（選擇性必修3P111）()評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題，共32分)20、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽(tīng)之任之，不管不問(wèn)（______）A.正確B.錯(cuò)誤21、胚胎發(fā)育早期，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。()A.正確B.錯(cuò)誤22、胚胎發(fā)育早期，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯(cuò)誤23、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共15分)24、某化工廠為了處理排出污水中的一種有害的；難以降解的有機(jī)化合物A；其研究團(tuán)隊(duì)用化合物A、磷酸鹽鎂鹽和微量元素等配制了培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示，請(qǐng)分析回答問(wèn)題。

（1）在培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是______________，這種培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。

（2）培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量__________的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使目的菌的數(shù)量____________。

（3）若要研究目的菌的生長(zhǎng)規(guī)律，可挑取單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，再采用______方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。請(qǐng)你預(yù)測(cè)目的菌的種群數(shù)量會(huì)發(fā)生怎樣的變化。

（4）將目的菌用于環(huán)境保護(hù)實(shí)踐時(shí)，還有哪些問(wèn)題需要解決？_______

（5）有人提出，可以通過(guò)改造細(xì)菌的基因來(lái)獲得能夠降解化合物A的細(xì)菌，請(qǐng)分析這種方法是否可行。_______25、化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)、用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較不同碳源對(duì)菌體生長(zhǎng)和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見(jiàn)表。碳源細(xì)胞干重（g/L）S產(chǎn)量（g/L）葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18

回答下列問(wèn)題。

(1)通常在實(shí)驗(yàn)室分離純化培養(yǎng)微生物時(shí)，需要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，如果自變量設(shè)為培養(yǎng)基不同，則是檢測(cè)____________________________。如果自變量設(shè)為_(kāi)________________；則是檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底。

(2)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，菌株C生長(zhǎng)的最適碳源是______；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是______。菌株C的生長(zhǎng)除需要碳源外，還需要______（答出2點(diǎn)即可）等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

(3)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，碳源為淀粉時(shí)菌株C不能生長(zhǎng)，其根本原因是______。

(4)若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路：______。

(5)為測(cè)定菌株C的含量，常用_________________進(jìn)行接種，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，原因是_____________。26、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會(huì)發(fā)生落葉、落果，嚴(yán)重時(shí)葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來(lái)自水稻的Xa27基因?qū)敫涕倏色@得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術(shù)則可培育無(wú)病毒植株?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)為了獲得脫毒苗，通?？梢赃x取植株______附近的組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉(zhuǎn)基因植株的過(guò)程：

①基因表達(dá)載體必需的結(jié)構(gòu)除復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時(shí)，Ti質(zhì)粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過(guò)程中，誘導(dǎo)愈傷組織生根、生芽的先后順序?yàn)開(kāi)_____。

⑤從個(gè)體生物學(xué)水平鑒定柑橘再生植株時(shí)可采用______（填具體操作）的方法。經(jīng)鑒定有幾棵植株沒(méi)有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據(jù)______的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后利用______進(jìn)行檢測(cè)；結(jié)果如圖2。

據(jù)圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)27、結(jié)核病是由結(jié)核桿菌引起的人畜共患病。結(jié)核桿菌通常以氣溶膠形式傳播；氣溶膠顆粒被肺泡吞噬細(xì)胞吞噬，吞噬細(xì)胞破裂導(dǎo)致結(jié)核桿菌在機(jī)體內(nèi)進(jìn)一步傳播。羊癢病是由正常細(xì)胞的非致病性朊蛋白異構(gòu)化為癢病朊蛋白所致。為研制既能抗結(jié)核病又能抗羊癢病的雙抗羊，科學(xué)家進(jìn)行了如下操作。

（1）將山羊吞噬細(xì)胞特異性啟動(dòng)子MRS與小鼠SP110基因形成融合基因，用_______將融合基因與質(zhì)粒構(gòu)建成重組質(zhì)粒，導(dǎo)入山羊肺泡吞噬細(xì)胞（組2）。以_________（組3）和轉(zhuǎn)入空質(zhì)粒的山羊吞噬細(xì)胞為對(duì)照組（組1）。分別接種等量的結(jié)核桿菌，72h后加入_________使吞噬細(xì)胞破裂，取裂解液進(jìn)行涂布培養(yǎng)，結(jié)果如圖1。由圖可知小鼠SP110基因可用于雙抗羊的研制，依據(jù)是_________。

（2）非致病性朊蛋白是由山羊13號(hào)染色體上的PRNP基因的第三外顯子控制合成的；PRNP基因的結(jié)構(gòu)如圖2。

以L4和R1為識(shí)別位點(diǎn)設(shè)計(jì)TALEN敲除載體，對(duì)山羊成纖維細(xì)胞L4與R1之間的序列實(shí)施定點(diǎn)敲除。請(qǐng)根據(jù)上述信息，寫出檢測(cè)敲除是否成功的思路，并描述敲除成功的實(shí)驗(yàn)結(jié)果_________。

（3）將TALEN敲除載體與供體DNA載體共轉(zhuǎn)化幼羊成纖維細(xì)胞；可將SP110基因定點(diǎn)敲入PRNP基因的第三外顯子中，原理如圖3。請(qǐng)指出圖4中的數(shù)字分別代表的結(jié)構(gòu)。

1_________2________3_________4___________經(jīng)_________檢測(cè)；成纖維細(xì)胞的SP110基因表達(dá)量明顯下降。

（4）欲用上述細(xì)胞獲得雙抗羊，需要用到的技術(shù)有__________。28、IKK激酶由IKKα；IKKβ和IKKγ三種亞基組成；該酶參與動(dòng)物體內(nèi)免疫細(xì)胞的分化。臨床上發(fā)現(xiàn)某重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）患兒IKKB基因編碼區(qū)第1183位堿基T突變?yōu)镃，導(dǎo)致IKKβ上第395位酪氨酸被組氨酸代替。為研究該患兒發(fā)病機(jī)制，研究人員應(yīng)用大引物PCR定點(diǎn)誘變技術(shù)培育出SCID模型小鼠，主要過(guò)程如下圖1、2。

(1)在PCR反應(yīng)體系中，需要加入引物和IKKB基因外，還需要加入____________________等。在圖1獲取突變基因過(guò)程中；需要以下3種引物：

引物A：5'-CCCCAACCGGAAAGTGTCA-3'（下劃線字母為突變堿基）

引物B：5'-T____CGAACATCCTA-3'（下劃線部分為限制酶HindⅢ識(shí)別序列）

引物C：5'-GT____GCTGCCCCAA-3'（下劃線部分為限制酶SacⅠ識(shí)別序列）

則PCR1中使用的引物有________，PCR2中使用的引物有________和圖中大引物的________（填“①”或“②”）鏈。

(2)圖2模型鼠培育過(guò)程中雜合模型鼠（F0）的培育涉及了一系列現(xiàn)代生物技術(shù)，下表是其中的一些步驟，請(qǐng)根據(jù)題意完成表格內(nèi)容。過(guò)程實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟襟E要點(diǎn)導(dǎo)入a．處理突變基因與載體①________________________b．構(gòu)建重組載體利用DNA連接酶催化突變基因和載體連接利用DNA連接酶催化突變基因和載體連接c．導(dǎo)入目的基因②________________________②________________________發(fā)育d．獲取早期胚胎利用專用培養(yǎng)液培養(yǎng)受精卵，并檢測(cè)其發(fā)育狀況e．代孕獲得小鼠利用合適的早期胚胎進(jìn)行胚胎移植利用合適的早期胚胎進(jìn)行胚胎移植f．鑒定、篩選F0小鼠利用PCR鑒定基因，篩選出雜合鼠F0利用PCR鑒定基因，篩選出雜合鼠F0

(3)根據(jù)圖2雜交結(jié)果，可以確認(rèn)突變基因已經(jīng)較穩(wěn)定地整合到小鼠細(xì)胞的染色體上，在遺傳時(shí)遵循________定律。研究人員對(duì)三種基因型小鼠胸腺淋巴細(xì)胞中組成IKK激酶的三種亞基進(jìn)行提純和電泳，結(jié)果如圖3。請(qǐng)依據(jù)此結(jié)果提出SCID患者免疫缺陷產(chǎn)生的機(jī)制：________________________________。

29、黃酒是消耗原料少；營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的釀造酒；我國(guó)釀制黃酒的歷史悠久，釀造黃酒的傳統(tǒng)發(fā)酵工藝包括浸米、蒸煮、前后發(fā)酵、壓榨、勾兌、過(guò)濾及煎酒?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)與果酒發(fā)酵類似，黃酒發(fā)酵主要利用的微生物也是________，黃酒發(fā)酵的適宜溫度約是____________。若要繼續(xù)發(fā)酵制醋，在_______________條件下；微生物可將葡萄糖直接轉(zhuǎn)化為醋酸。

(2)在蒸煮前可拌入適量蔗糖，該做法的目的是________________。發(fā)酵結(jié)束時(shí)，因發(fā)酵液中糖分耗完引起______________而使發(fā)酵終止。判定發(fā)酵結(jié)束可采用的最簡(jiǎn)單的觀察方法是__________________________。

(3)黃酒中的低聚糖能促進(jìn)腸道內(nèi)乳酸桿菌等益生菌的增殖。某同學(xué)認(rèn)為有氧環(huán)境下乳酸桿菌在MRS培養(yǎng)基(乳酸桿菌能溶解MRS培養(yǎng)基中的碳酸鈣而使菌落周圍形成溶鈣圈)上增殖的速度會(huì)加快，你_______(填“同意”或“不同意”)該同學(xué)的觀點(diǎn)。請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)探究方案以證明你的觀點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路：______________________；

預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果：_____________________。30、下圖表示某生物DNA結(jié)構(gòu)的一部分及限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)；請(qǐng)回答以下問(wèn)題。

限制酶EcoRIBamHIHindlⅢSacI識(shí)別序列和切割位點(diǎn)G↓AATTCG↓GATCCA↓AGCTTGAGCT↓C

(1)若目的基因?yàn)榭瓜x(chóng)基因，需要在連接Ti質(zhì)粒前進(jìn)行PCR擴(kuò)增，需要在樣本中再加入_____________、________和_______酶，一般要經(jīng)歷多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為_(kāi)______、_______、__________三步。擴(kuò)增后切割目的基因，應(yīng)使用表中的限制酶是_________。

(2)若目的基因?yàn)橐葝u素基因，科研人員構(gòu)建了如圖所示的重組載體，tetr為四環(huán)素抗性基因，ampr為氨芐青霉素抗性基因。

構(gòu)建重組載體需要的酶有_________、_________。圖中的啟動(dòng)子上有_________的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，從而驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。將重組載體導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)后，將其涂布于含____的選擇培養(yǎng)基上。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

DNA重組技術(shù)需要三種基本工具：限制性核酸內(nèi)切酶；DNA連接酶和運(yùn)載體。

【詳解】

A、一個(gè)DNA分子中，可能存在一個(gè)至多個(gè)酶a與酶b的識(shí)別序列；A正確；

B、由題圖可知，酶a與酶b的識(shí)別序列雖然不同；但切出的黏性末端相同，相同的黏性末端能相互連接，B錯(cuò)誤；

C、酶a與酶b切斷的化學(xué)鍵均為相鄰脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵；C錯(cuò)誤；

D；質(zhì)粒為小型環(huán)狀DNA分子；用酶a切割有3個(gè)切割位點(diǎn)的質(zhì)粒，最多有3種切割產(chǎn)物，無(wú)法得到4種切割產(chǎn)物，D錯(cuò)誤。

故選A。2、C【分析】【詳解】

分析：蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

詳解：蛋白質(zhì)工程的基本途徑為：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）；最后按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。因此，蛋白質(zhì)工程的基本操作程序正確的是④→①→⑤→②→③→①，故選C。

點(diǎn)睛：解答本題的關(guān)鍵是了解蛋白質(zhì)工程的一般步驟，明確蛋白質(zhì)過(guò)程從預(yù)期蛋白質(zhì)功能和結(jié)構(gòu)開(kāi)始，推測(cè)DNA序列，然后按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。3、B【分析】【分析】

1；生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個(gè)體。

2；中國(guó)政府：禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆人。

【詳解】

①克隆人只是某些人出于某種目的制造出的“產(chǎn)品”；沒(méi)有“父母”，這可能導(dǎo)致他們?cè)谛睦砩鲜艿絺Γ俜项}意；

②生殖性克隆人不會(huì)帶有致癌風(fēng)險(xiǎn)；②不符合題意；

③由于技術(shù)問(wèn)題；可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆人，③符合題意；

④克隆人的家庭地位難以認(rèn)定；可能使以血緣為紐帶的父子；兄弟和姐妹等人倫關(guān)系消亡，④符合題意；

⑤生殖性克隆人沖擊了現(xiàn)有的一些有關(guān)婚姻；家庭和兩性關(guān)系的倫理道德觀念；⑤符合題意；

⑥生殖性克隆人不涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)；因此不存在基因歧視，⑥不符合題意；

⑦生殖性克隆人是對(duì)人類尊嚴(yán)的侵犯；⑦符合題意；

⑧生殖性克隆人破壞了人類基因多樣性的天然屬性；不利于人類的生存和進(jìn)化，⑧符合題意。

故選B。

【點(diǎn)睛】

4、C【分析】【分析】

1；采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才可受精；

2；可用一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液誘導(dǎo)精子獲能；

3；需在獲能溶液中或?qū)Ｓ檬芫芤褐惺芫?/p>

【詳解】

A；在采集卵母細(xì)胞之前；需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進(jìn)超數(shù)排卵，A錯(cuò)誤；

B；受精卵需移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)；以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力，B錯(cuò)誤；

C；受精過(guò)程中；卵母細(xì)胞會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞反應(yīng)，這是防止多精入卵的兩道屏障，C正確；

D；以治療為目的的設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)；是救治患者最好、最快捷的辦法之一，不是有利于生育健康的下一代，并且存在倫理問(wèn)題，D錯(cuò)誤。

故選C。5、C【分析】【分析】

分析題圖：圖示表示“三親嬰兒”的培育過(guò)程；該過(guò)程中采用了核移植技術(shù)；體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)及胚胎移植技術(shù)。

【詳解】

A；母親為三親嬰兒提供的是卵母細(xì)胞的細(xì)胞核；該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代，A正確；

B；捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因位于其細(xì)胞核內(nèi)；而捐獻(xiàn)者給三親嬰兒提供的是卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，故捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒，B正確；

C；圖中“三親嬰兒”是經(jīng)過(guò)核移植和體外受精產(chǎn)生的；其核遺傳物質(zhì)來(lái)自母親和父親提供的細(xì)胞核，C錯(cuò)誤；

D；根分析可知；三親嬰兒的培育還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，D正確。

故選C。6、D【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分；根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)；物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率。例如加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌。

鑒別培養(yǎng)基：加入某種試劑或化學(xué)藥品；依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)。例如伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌。

【詳解】

A；樣品不能進(jìn)行滅菌；否則會(huì)殺死目的微生物，A正確；

B；咔唑是一種含N有機(jī)物；能為降解咔唑的微生物提供氮源，而不能分解咔唑的微生物不能利用咔唑而缺少氮源而不能在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，該方案中的CNFM僅含生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水，添加咔唑?yàn)槲ㄒ坏吹呐囵B(yǎng)基是典型的選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；微生物能在固體平板培養(yǎng)基上形成菌落；固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是篩選出降解咔唑的微生物，C正確；

D；利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)的菌體數(shù)量包括了死亡的菌體；所以測(cè)出的微生物數(shù)量大于實(shí)際值，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】7、D【分析】【分析】

分析題圖：應(yīng)用1中：供體1提供細(xì)胞核；供體2提供細(xì)胞質(zhì)，經(jīng)過(guò)核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞，并發(fā)育形成早期胚胎，再將胚胎移植到受體子官發(fā)育成小牛，稱為克隆牛；應(yīng)用2中：優(yōu)良公牛和供體1配種形成受精卵，并發(fā)育成早期胚胎，再將胚胎移植到受體子宮發(fā)育成小牛，屬于有性生殖;應(yīng)用3中：采用了胚胎分割技術(shù)；應(yīng)用4中：從早期胚胎和原始性腺中獲取胚胎干細(xì)胞，并進(jìn)行體外干細(xì)胞培養(yǎng)。

【詳解】

A；應(yīng)用1中獲得的小牛為克隆牛；其細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來(lái)源于供體1，細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)源于供體2，因此其遺傳物質(zhì)來(lái)源于供體1和供體2個(gè)體，A正確；

B；應(yīng)用2、3為胚胎移植；需要同時(shí)對(duì)供、受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，B正確；

C；內(nèi)細(xì)胞團(tuán)以后會(huì)發(fā)育成完整的個(gè)體；應(yīng)用3通過(guò)胚胎分割技術(shù)獲得二分胚，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，C正確；

D；應(yīng)用2、3、4過(guò)程必須對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；需要對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)至成熟，D錯(cuò)誤。

故選D。二、多選題(共5題，共10分)8、B:C【分析】【分析】

1；治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克隆：指將克隆技術(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個(gè)體。2、分析題圖：圖示為治療性克隆的大概過(guò)程，即從患者身上提取一個(gè)體細(xì)胞核，移植到去核的卵細(xì)胞中，形成一個(gè)新細(xì)胞，經(jīng)過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)成胚胎干細(xì)胞，經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂、分化形成組織和器官。

【詳解】

A；人類“治療性克隆”應(yīng)用的主要技術(shù)有核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；屬于生物工程中的動(dòng)物細(xì)胞工程，A正確；

B；由圖可知；該治療過(guò)程中應(yīng)用的主要技術(shù)有核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，沒(méi)有應(yīng)用胚胎移植技術(shù)，B錯(cuò)誤；

C；此過(guò)程沒(méi)有形成完整個(gè)體；不能體現(xiàn)胚胎干細(xì)胞的全能性，C錯(cuò)誤；

D；“治療性克隆”與“異體器官移植”相比；器官來(lái)自于同一個(gè)體，其優(yōu)點(diǎn)之一是避免了免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選BC。9、A:B:C【分析】【分析】

聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯；要從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種，首先要進(jìn)行目的菌株的篩選，可將咸湖水接種在含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，篩選培養(yǎng)得到嗜鹽細(xì)菌；然后，從選擇培養(yǎng)基上挑選多個(gè)單菌落分別進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基；最后檢測(cè)嗜鹽細(xì)菌的數(shù)目和PHA的產(chǎn)量，選擇PHA產(chǎn)量最高的嗜鹽細(xì)菌作為目的菌株。

【詳解】

A；PHA是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯；要篩選嗜鹽細(xì)菌，步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，A錯(cuò)誤；

B；步驟③培養(yǎng)基濃度過(guò)高；會(huì)導(dǎo)致菌體失水死亡，不利于嗜鹽細(xì)菌的生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；

C；步驟④擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基；液體培養(yǎng)基中無(wú)需加入瓊脂，C錯(cuò)誤；

D；要挑選高產(chǎn)聚羥基脂肪酸酯（PHA）的嗜鹽菌；挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測(cè)定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量，進(jìn)行比較，D正確。

故選ABC。10、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；醋酸菌在糖源；氧氣充足時(shí)；直接將葡萄糖氧化為醋酸；在糖源不足、氧氣充足時(shí)，可利用酒精，即乙醇作為呼吸底物，先將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜幔ù姿幔?/p>

【詳解】

A；制備培養(yǎng)基過(guò)程中；pH的調(diào)節(jié)應(yīng)在滅菌前進(jìn)行，A錯(cuò)誤；

B；制作果酒時(shí)適當(dāng)加大接種量；酵母菌菌體的基數(shù)增大，可使其快速形成優(yōu)勢(shì)菌群，抑制雜菌生長(zhǎng)，提高發(fā)酵速率，B正確；

C；現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后；為滿足發(fā)酵過(guò)程的需要，還要對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，之后才可進(jìn)行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵，C錯(cuò)誤；

D；醋酸菌能夠氧化酒精產(chǎn)生醋酸；造成葡萄酒的敗壞。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天開(kāi)瓶后的紅酒容易變酸，D正確。

故選AC。11、A:B:C【分析】【分析】

1；DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

2；植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理為植物體細(xì)胞的全能性；即已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能；培養(yǎng)過(guò)程的順序是離體植物器官、組織或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化形成根、芽等器官進(jìn)而形成新的植物體。

【詳解】

A；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同；當(dāng)NaCl溶液的濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA溶解度最小，因此改變NaCl溶液的濃度既能使DNA溶解也能使其析出，A錯(cuò)誤；

B；細(xì)胞代謝產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)利用的是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；原理是細(xì)胞增殖，未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，B錯(cuò)誤；

C；相同時(shí)加酶洗衣粉洗滌效果好于普通洗衣粉酶的催化作用需適宜的pH值；pH不適宜時(shí)，加酶洗衣粉洗滌效果不一定好于普通洗衣粉，C錯(cuò)誤；

D；精子與卵子相遇后；會(huì)發(fā)生頂體反應(yīng)，釋放頂體酶，透明帶反應(yīng)和卵黃膜封閉作用是阻止其他精子入卵的兩道屏障，其中透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障，D正確。

故選ABC。12、B:C:D【分析】【分析】

1；PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；原理：DNA復(fù)制。前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈；

2；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

A；鏡檢法：在電子顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液；以發(fā)現(xiàn)病原體，但光學(xué)顯微鏡不能觀察到新冠病毒，A錯(cuò)誤；

B；PCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)；可在幾十分鐘內(nèi)把病原體的基因擴(kuò)增到數(shù)百萬(wàn)倍，再經(jīng)過(guò)電泳與病毒樣本進(jìn)行對(duì)比，便能知道是否感染病毒，B正確；

C；病毒進(jìn)入人體后會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)；產(chǎn)生相應(yīng)抗體，由于抗體與抗原結(jié)合具有特異性，因此抗原通過(guò)用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合以發(fā)現(xiàn)病原體，C正確；

D；DNA探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標(biāo)記的DNA分子做探針；利用核酸分子雜交原理來(lái)檢測(cè)病原體，鑒定被檢測(cè)標(biāo)本上的遺傳信息，達(dá)到檢測(cè)是否感染病毒的目的，D正確。

故選BCD。三、填空題(共7題，共14分)13、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】剛果紅染色法CR紅色復(fù)合物透明圈透明圈15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2018～2516、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體DNA分子17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液18、略

【分析】【分析】

微生物實(shí)驗(yàn)中常用的滅菌方法有干熱滅菌；高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌；其中對(duì)于培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌，對(duì)于接種環(huán)一般用灼燒滅菌，對(duì)于培養(yǎng)皿等可以用干熱滅菌。培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中需要倒置培養(yǎng)，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法，即將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當(dāng)菌落長(zhǎng)成后將試管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6個(gè)月都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中裝入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后放在-20℃的冷凍箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法，如玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，常采用蒸餾法提??；對(duì)于如橘皮精油，其主要儲(chǔ)存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊問(wèn)題，所以一般采用壓榨法提取。

【詳解】

（1）微生物培養(yǎng)中常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌法；灼燒滅菌法、干熱滅菌法等。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時(shí)一般需要將平板倒置；可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物。

（2）從雞糞便取樣；經(jīng)選擇培養(yǎng)后，如果要將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上，需要經(jīng)過(guò)一系列梯度稀釋。對(duì)獲得的沙門氏菌進(jìn)行長(zhǎng)期保存常采用甘油管藏法。

（3）根據(jù)題干信息；沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對(duì)熱抵抗力不強(qiáng)，在60℃的條件下15min就能被殺死，因此為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中可采取低溫儲(chǔ)存；高溫加工方法進(jìn)行處理。

（4）根據(jù)題意；肉桂精油不溶于水；易溶于有機(jī)溶劑且易揮發(fā)，故可采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行提取，提取過(guò)程中蒸餾的溫度、時(shí)間都會(huì)影響精油品質(zhì)。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查現(xiàn)代生物科技的原理和運(yùn)用，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力?！窘馕觥孔茻郎缇?、高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征梯度稀釋甘油管藏低溫儲(chǔ)存、高溫加工水蒸氣蒸餾蒸餾的溫度、時(shí)間19、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲(chóng)等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說(shuō)法錯(cuò)誤?！窘馕觥垮e(cuò)誤四、判斷題(共4題，共32分)20、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯(cuò)誤。21、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯(cuò)誤。22、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯(cuò)誤。23、A【分析】【詳解】

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織；滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤。

正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共15分)24、略

【分析】【分析】

分析題干信息；該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選出高效降解化合物A的細(xì)菌，在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長(zhǎng)繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無(wú)法生長(zhǎng)繁殖。

【詳解】

（1）由題意可知；本實(shí)驗(yàn)是分離出降解的有機(jī)化合物A的菌種，所以培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機(jī)化合物A的菌種，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）由于“目的菌”有降解的有機(jī)化合物A的作用；所以培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量低的培養(yǎng)基，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量進(jìn)一步增加。

（3）若研究“目的菌”的群體生長(zhǎng)規(guī)律；將單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，再采用稀釋涂布平板方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。培養(yǎng)液中目的菌的種群數(shù)量在開(kāi)始一段時(shí)間范圍內(nèi)，由于營(yíng)養(yǎng)充分；空間充裕，種群數(shù)量類似于“J”形增長(zhǎng)，隨著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗，種群增長(zhǎng)速率逐漸下降，最終會(huì)達(dá)到K值，繼續(xù)培養(yǎng)，由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏、有害代謝物積累、pH改變等，種群數(shù)量將會(huì)下降。

（4）將目的菌用于環(huán)境保護(hù)實(shí)踐之前；還要對(duì)目的菌進(jìn)行研究，檢測(cè)其是否會(huì)產(chǎn)生對(duì)環(huán)境有害的代謝物；當(dāng)使用大量目的菌時(shí)會(huì)不會(huì)使目的菌成為優(yōu)勢(shì)菌群，對(duì)其他微生物的生存構(gòu)成威脅，從而打破微生物菌群的平衡等。

（5）可以利用基因工程的方法；將能降解化合物A的基因?qū)胧荏w菌中來(lái)實(shí)現(xiàn)。但在使用之前要檢驗(yàn)其安全性。

【點(diǎn)睛】

本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)條件，掌握微生物分離與純化的方法與步驟，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確判斷?！窘馕觥亢Y選出能降解化合物A的細(xì)菌選擇低增多稀釋涂布平板培養(yǎng)液中目的菌的種群數(shù)量在開(kāi)始一段時(shí)間范圍內(nèi)，由于營(yíng)養(yǎng)充分、空間充裕，種群數(shù)量類似于“J”形增長(zhǎng)，隨著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗，種群增長(zhǎng)速率逐漸下降，最終會(huì)達(dá)到K值，繼續(xù)培養(yǎng)，由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏、有害代謝物積累、pH改變等，種群數(shù)量將會(huì)下降將目的菌用于環(huán)境保護(hù)實(shí)踐之前，還要對(duì)目的菌進(jìn)行研究，檢測(cè)其是否會(huì)產(chǎn)生對(duì)環(huán)境有害的代謝物；當(dāng)使用大量目的菌時(shí)會(huì)不會(huì)使目的菌成為優(yōu)勢(shì)菌群，對(duì)其他微生物的生存構(gòu)成威脅，從而打破微生物菌群的平衡等可以利用基因工程的方法，將能降解化合物A的基因?qū)胧荏w菌中來(lái)實(shí)現(xiàn)。但在使用之前要檢驗(yàn)其安全性25、略

【分析】【分析】

微生物的接種方法包括稀釋涂布平板法和平板劃線法，二者都可以用于篩選單菌落，但是前者可以用于計(jì)數(shù)，后者不行。培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。微生物培養(yǎng)基需要為微生物繁殖提供碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足微生物對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，pH和O2的需求。稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。利用稀釋涂布平板法得到數(shù)值往往偏小，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

【詳解】

（1）在實(shí)驗(yàn)室分離純化培養(yǎng)微生物時(shí)；常見(jiàn)的對(duì)照實(shí)驗(yàn)有兩種，當(dāng)用不同的培養(yǎng)基作為自變量進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)時(shí)，常用來(lái)檢測(cè)所配制的培養(yǎng)基是否具有選擇作用，例如以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，可以后者篩選分解尿素的微生物，驗(yàn)證其起到選擇培養(yǎng)基的作用；當(dāng)用同一種培養(yǎng)基進(jìn)行接種和不接種微生物的對(duì)照實(shí)驗(yàn)時(shí)，則可檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格，若未接種的空白培養(yǎng)基上生長(zhǎng)出部分菌落，說(shuō)明該培養(yǎng)基滅菌不合格。

（2）由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知；當(dāng)碳源為葡萄糖時(shí)，菌株C的細(xì)胞干重最大，為3.12g/L，因此，菌株C生長(zhǎng)的最適碳源是葡萄糖。當(dāng)碳源為制糖廢液時(shí)，S產(chǎn)量最大，為0.18g/L，因此菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是制糖廢液。

微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源；氮源、無(wú)機(jī)鹽、水等。

（3）碳源為淀粉時(shí)菌株C細(xì)胞干重為0.01g/L；幾乎不能生長(zhǎng)，其直接原因是該菌細(xì)胞內(nèi)不含有分解淀粉的酶，因此無(wú)法分解淀粉作為碳源，根本原因是菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

（4）若要探究生產(chǎn)S的最適制糖廢液的濃度；則實(shí)驗(yàn)自變量為不同濃度的制糖廢液，因變量為S產(chǎn)量，因此需要配制一系列不同濃度梯度的制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基，接種菌株C，然后將其置于相同且適宜的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，一段時(shí)間后，測(cè)定并比較不同濃度制糖廢液中的S產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。

（5）微生物接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者可以用于計(jì)數(shù)，前者不行，在進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此該計(jì)數(shù)方法得到的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少?！窘馕觥?1)選擇培養(yǎng)基是否具有選擇性接種與不接種。

(2)葡萄糖制糖廢液氮源；無(wú)機(jī)鹽、水。

(3)菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

(4)分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基；培養(yǎng)菌株C，其他條件相同且適宜，一段時(shí)間后，測(cè)定并比較不同濃度制糖廢液中的S的產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。

(5)稀釋涂布平板法當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落26、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無(wú)病毒，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無(wú)病毒。

（2）①基因表達(dá)載體上除有復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子、目的基因外；還有標(biāo)記基因（便于篩選目的基因）；

②農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細(xì)胞；

④先誘導(dǎo)生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導(dǎo)愈傷組織生芽，待長(zhǎng)出芽后，再將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上，進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗；

⑤在個(gè)體生物學(xué)水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來(lái)直接鑒定再生植株；分析再生植株沒(méi)有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據(jù)Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后用（凝膠）電泳分離PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)；植株B、C沒(méi)有出現(xiàn)條帶，則可能是因?yàn)闆](méi)有導(dǎo)入目的基因；植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力，則可能是因?yàn)閷?dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質(zhì)沒(méi)有活性等?！窘馕觥?1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無(wú)病毒。

(2)標(biāo)記基因攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細(xì)胞先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導(dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能表達(dá)（或不能轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質(zhì)沒(méi)有活性等，合理即可）沒(méi)有導(dǎo)入目的基因六、綜合題(共4題，共24分)27、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要限制酶切割目的基因和質(zhì)粒；然后用DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接，形成重組質(zhì)粒，組2是實(shí)驗(yàn)組，導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，對(duì)照分別導(dǎo)入空質(zhì)粒和只含目的基因，分別為組3和組1，組3中轉(zhuǎn)入廣泛表達(dá)小鼠SP110基因的重組質(zhì)粒的山羊吞噬細(xì)胞。吞噬細(xì)胞破裂的方式是加入蒸餾水。由圖可知小鼠SP110基因可用于雙抗羊的研制，依據(jù)是組2的吞噬細(xì)胞裂解后釋放的結(jié)核桿菌數(shù)量與組3接近，顯著小于組1。

（2）檢測(cè)敲除是否成功的思路及實(shí)驗(yàn)結(jié)果為：提取成纖維細(xì)胞DNA；根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR，并對(duì)PCR產(chǎn)物用BamHI進(jìn)行切割，電泳，若僅有一條帶，則敲除成功。（或提取成纖維細(xì)胞DNA，根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR，并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，若不存在GGATCC序列，則敲除成功。）

（3）圖4表示基因表達(dá)載體；其上包括有啟動(dòng)子；終止子、目的基因和標(biāo)記基因等，所以1是L4序列，2是MRS啟動(dòng)子，3是終止子，4是R1序列，MRS是山羊吞噬細(xì)胞特異性啟動(dòng)子，經(jīng)抗原抗體雜交技術(shù)檢測(cè)，成纖維細(xì)胞的SP110基因表達(dá)量明顯下降。

（4）欲用上述細(xì)胞獲得雙抗羊；需要用到的技術(shù)有：核移植；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生能從題圖中提取有效信息并結(jié)合這些信息，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確結(jié)論的能力。【解析】限制酶和DNA連接酶轉(zhuǎn)入廣泛表達(dá)小鼠SP110基因的重組質(zhì)粒的山羊吞噬細(xì)胞蒸餾水組2的吞噬細(xì)胞裂解后釋放的結(jié)核桿菌數(shù)量與組3接近，顯著小于組1提取成纖維細(xì)胞DNA，根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR，并對(duì)PCR產(chǎn)物用BamHI進(jìn)行切割，電泳，若僅有一條帶，則敲除成功。（或提取成纖維細(xì)胞DNA，根據(jù)第三外顯子的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR，并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，若不存在GGATCC序列，則敲除成功。）L4序列MRS啟動(dòng)子終止子R1序列抗原抗體雜交技術(shù)核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植28、略

【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對(duì)引物。4、過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈，PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)。

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）在PCR反應(yīng)體系中，需要加入引物和IKKB基因外，還需要加入Taq酶（耐高溫DNA聚合酶）、4種脫氧核苷酸（原料）、緩沖液（維持PH）、Mg2+（激活DNA聚合酶）等；在圖1獲取突變基因過(guò)程中；分析題圖可知，在PCR1中，需要兩種引物，將來(lái)在切取IKKB基因時(shí)，需要在基因的左側(cè)用限制酶HindⅢ來(lái)切割，在基因的右側(cè)用限制酶SacI來(lái)切割，因此在該基因的左端應(yīng)有限制酶HindⅢ識(shí)別的序列，在基因的右端應(yīng)有限制酶SacI識(shí)別的序列，因此在PCR1中結(jié)合到基因右端的引物序列從5′到3′端的開(kāi)始部位應(yīng)含有限制酶SacI識(shí)別的序列，所以要用到引物C，從題圖中看，另一個(gè)引物從5′到3′端的序列中開(kāi)始部位應(yīng)含有突變堿基C，所以要用到引物A。從圖中看，在PCR2中，有一個(gè)引物結(jié)合到了基因的左端，在它從5′到3′的序列的開(kāi)始部位應(yīng)含有限制酶HindⅢ識(shí)別的