2025年浙科版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙科版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷614考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下圖表示核移植與克隆動(dòng)物的相關(guān)圖解；有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.用于核移植的供體細(xì)胞①一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞B.圖示過程說明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞仍具有發(fā)育的全能性C.采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到的②時(shí)期表示減數(shù)第二次分裂中期D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中添加5%C02的目的是維持培養(yǎng)液的pH2、下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育和細(xì)胞工程的敘述，正確的是（）A.卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加B.胚胎分割時(shí)需將原腸胚的細(xì)胞團(tuán)均等分割C.胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)D.胚胎干細(xì)胞是一類未分化細(xì)胞，可從早期胚胎中分離獲取3、限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)分別如下：-C↓AATTC-和-G↓AATTC-，下圖表示某一目的基因片段與質(zhì)粒拼接形成重組質(zhì)粒的過程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.限制酶在特定位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵B.兩種限制酶切割后形成的黏性末端的堿基可以互補(bǔ)配對(duì)C.每一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別特定的核苷酸序列D.將重組質(zhì)粒同時(shí)用以上2種限制酶切割則會(huì)再形成2種DNA片段4、科學(xué)家采用體細(xì)胞雜交技術(shù)得到了“番茄—馬鈴薯”雜種植株，但該植株并沒有地上結(jié)番茄、地下長(zhǎng)馬鈴薯。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.體細(xì)胞雜交之前用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞B.番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體可采用聚乙二醇融合法得到雜種細(xì)胞C.雜種細(xì)胞需經(jīng)過誘導(dǎo)形成愈傷組織后再發(fā)育成完整的雜種植株D.“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒達(dá)預(yù)期目標(biāo)與基因無法有序表達(dá)有關(guān)5、如下圖所示，a表示現(xiàn)代生物工程技術(shù)，b表示其結(jié)果；下面說法正確的是（）

A.如果a是核移植技術(shù)，b的產(chǎn)生說明了動(dòng)物細(xì)胞具有全能性B.如果a是體外受精技術(shù)，則形成的b屬于克隆動(dòng)物C.如果a是胚胎分割技術(shù)，b中個(gè)體的基因型和表型一定相同D.如果a是基因工程，b是乳腺生物反應(yīng)器，則需對(duì)移植的胚胎進(jìn)行性別選擇評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)6、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是我國(guó)文化中的精髓，是我國(guó)人們利用勤勞的雙手、機(jī)智的頭腦所探究出來的智慧結(jié)晶。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.利用發(fā)酵技術(shù)，在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品B.制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制乳酸菌繁殖C.白酒的釀造過程中利用了霉菌和酵母菌兩種微生物的發(fā)酵作用D.將做好的發(fā)酵食品冷藏于地窖中，其目的是促進(jìn)微生物代謝產(chǎn)物的累積7、如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是（）

A.某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板，該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果常會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目少B.3號(hào)試管中的樣品溶液稀釋倍數(shù)為104倍C.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個(gè)D.該實(shí)驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照，用以判斷選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用8、進(jìn)行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)時(shí)，利用的培養(yǎng)基組分及含量如表所示。下列分析錯(cuò)誤的是（）。組分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4?7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mL

A.KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無機(jī)鹽，又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pHB.尿素既可為尿素分解菌提供氮源，又可對(duì)培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用C.瓊脂既可為尿素分解菌提供碳源，又起到凝固劑的作用D.蒸餾水既可進(jìn)行定容，又可對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于計(jì)數(shù)9、生活中常見的果酒、果醋和泡菜的制作離不開傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.家庭釀酒、制果醋和酸奶均需要選純種菌進(jìn)行發(fā)酵B.果醋制作的溫度一般控制在30～35℃，果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18～25℃C.制作泡菜壇口密封的目的是保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵時(shí)所需的無氧環(huán)境D.果醋制作中期通入氮?dú)?，有利于醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?0、通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。下圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能與目的基因片段配對(duì)，但不影響引物與模板鏈的整體配對(duì)，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識(shí)別位點(diǎn)。下列敘述正確的是（）

A.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入載體B.PCR的過程主要包括變性→延伸→復(fù)性（退火），溫度逐漸降低C.第3輪PCR，引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長(zhǎng)的突變基因D.每一輪PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及時(shí)補(bǔ)充11、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥?；步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源12、CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯是一種對(duì)靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)；其原理是由一個(gè)向?qū)NA(sgRNA)分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。受此機(jī)制啟發(fā)，科學(xué)家們通過設(shè)計(jì)sgRNA中堿基的識(shí)別序列，即可人為選擇DNA上的任一目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行切割（如圖所示）。CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成脫靶。下列相關(guān)錯(cuò)誤的是（）

A.Cas9蛋白通過破壞目標(biāo)DNA的氫鍵實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA的切割，與解旋酶的作用類似B.若脫靶率與sgRNA序列的長(zhǎng)度有關(guān)，則sgRNA的序列越短脫靶率越高C.利用此技術(shù)對(duì)目標(biāo)基因部分DNA片段進(jìn)行切除可能導(dǎo)致染色體變異D.sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與目標(biāo)基因的雙鏈區(qū)域不同13、治療性克隆的做法是先從需要救治的患者身上提取細(xì)胞，然后將該細(xì)胞的遺傳物質(zhì)植入一個(gè)去除了細(xì)胞核的卵細(xì)胞中，該卵細(xì)胞開始自行分裂，直至形成一個(gè)早期胚胎，從早期胚胎中提取胚胎干細(xì)胞后將其培養(yǎng)成人們所需要的各種人體器官。下列有關(guān)說法正確的是（）A.可采用開放式培養(yǎng)的方式，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞B.該早期胚胎發(fā)育始于受精卵，胚胎是由囊胚內(nèi)部的細(xì)胞團(tuán)不斷增殖分化而來C.治療性克隆中運(yùn)用胚胎移植技術(shù)，一般不選擇原腸胚進(jìn)行胚胎移植D.我國(guó)不贊成、不允許、不支持、不接受任何克隆性實(shí)驗(yàn)評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)14、下圖表示哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會(huì)發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開始的時(shí)期是__________；雌性動(dòng)物卵泡的形成的時(shí)期是__________。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ過程是在__________時(shí)期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。15、目的基因是指：______16、將DNA粗提取液在____________℃的恒溫水浴箱中保溫10—15分鐘。17、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。18、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識(shí)別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請(qǐng)分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對(duì)肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時(shí)可通過適度使用_________對(duì)病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測(cè)相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測(cè)病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對(duì)病毒抑制效果最好的單抗是__________號(hào)。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。19、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對(duì)植物無害。（選擇性必修3P111）()20、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)21、培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正確B.錯(cuò)誤22、從牛卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接用于體細(xì)胞核移植。（選擇性必修3P53）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共40分)23、為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶；研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個(gè)堿基對(duì)），利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見下圖。請(qǐng)回答下列問題：

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因前；需先獲得細(xì)菌的_________。

（2）為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接；需在引物的____端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是________________。

（3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)；反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定，下列選項(xiàng)中_______的設(shè)定與引物有關(guān)，________的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度有關(guān)。（填序號(hào)）

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時(shí)間⑤退火時(shí)間⑥延伸時(shí)間。

（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：

圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含___個(gè)密碼子；如虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有__種。

（5）獲得工程菌表達(dá)的α-淀粉酶后；為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測(cè)定酶活性，結(jié)果如下：

。緩沖液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相對(duì)活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為______。24、如圖是從土壤中篩選纖維素分解菌的流程圖；回答下列問題：

（1）土壤取樣時(shí)，一般選擇__________________豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是________________________。

（2）若測(cè)得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過計(jì)算得知每毫升樣品中有5.1×107個(gè)纖維素分解菌，則該稀釋液的稀釋倍數(shù)為_________。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入CR染料，它可以與纖維素形成_________色復(fù)合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落（如圖），則降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落__________。

25、下圖是某同學(xué)設(shè)計(jì)的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般以天然存在的______發(fā)酵，品質(zhì)不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質(zhì)較高。自制的果酒并非商品意義上的產(chǎn)品，在實(shí)際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測(cè)定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，觀察并統(tǒng)計(jì)到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個(gè)，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個(gè)。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時(shí)，操作上的最主要的區(qū)別是______。26、科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接種預(yù)防，簡(jiǎn)要過程如圖所示。回答下列問題：

(1)新冠病毒是一種RNA病毒，一般先通過_____________________得到cDNA，再經(jīng)PCR技術(shù)獲取大量S蛋白基因，PCR的中文全稱是_____________________。

(2)PCR技術(shù)還需用到_____________________酶，該酶能夠使脫氧核苷酸從引物的_____________________端開始連接，據(jù)下圖分析，可選擇的引物是_____________________。

(3)為了驗(yàn)證表達(dá)的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性；請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的檢測(cè)方案并預(yù)期檢測(cè)結(jié)果。

方案:_________________________________。

結(jié)果:_________________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)27、科學(xué)家利用單克隆抗體技術(shù)；分別獲得鼠抗體與人抗體，再將抗體進(jìn)行改造，生產(chǎn)出效果更好的鼠—人嵌合抗體，用于癌癥治療。下圖表示形成鼠—人嵌合抗體的過程。請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞時(shí)；需用___________________處理一段時(shí)間，這樣組織就會(huì)分散成單個(gè)細(xì)胞，此外還應(yīng)定期更換____________，以清除代謝產(chǎn)物。

（2）制備單克隆抗體時(shí)；先用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，獲得________________；然后對(duì)上述細(xì)胞進(jìn)行抗體檢測(cè)，選取___________________________的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；最終獲得單克隆抗體，其優(yōu)點(diǎn)是____________________________________________。

（3）有人提出：將經(jīng)特定抗原刺激產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核骨髓瘤細(xì)胞中來產(chǎn)生單克隆抗體；該技術(shù)稱為________________。

（4）改造鼠源雜交瘤抗體，生產(chǎn)鼠—人嵌合抗體，屬于_______________（生物工程）的范疇。該過程要根據(jù)________________________，設(shè)計(jì)嵌合抗體的結(jié)構(gòu)，最終對(duì)基因進(jìn)行操作。28、鴨梨醋飲屬綠色健康飲品；既保存了鴨梨中的多種氨基酸；維生素、礦物質(zhì)、有機(jī)酸等營(yíng)養(yǎng)成分又兼具果醋醒酒護(hù)肝、助消化、降低血脂、軟化血管等養(yǎng)生保健功能，深受廣大消費(fèi)者青睞。如圖為鴨梨醋飲的制作流程圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）若得到的鴨梨汁非常渾濁，解決的方法是__________________。

（2）為了提高過程①所用微生物的利用率，最好用________法對(duì)其進(jìn)行固定，而固定化酶一般不采用此法，理由是______________________________。

（3）過程②所用的微生物是__________________，其新陳代謝類型為______________。

（4）果酒制作過程中，在不滅菌的情況下，酵母菌是如何成為優(yōu)勢(shì)菌種的？_______________________________________________________________。

（5）在氧氣充足，糖源匱乏時(shí)，果醋制作原理的反應(yīng)式：____________________________。29、科研人員培育了一種能夠降解餐廚廢棄物并生成乳酸的轉(zhuǎn)基因畢赤酵母。基本思路是在乳酸脫氫酶基因（LDH）的單基因表達(dá)載體中逐個(gè)接入糖化酶基因（Ga）表達(dá)盒與α-淀粉酶基因（Amy）表達(dá)盒；構(gòu)建出AGL-三基因表達(dá)載體，如下圖1所示。

(1)快速獲得大量目的基因的技術(shù)是___________，獲得的產(chǎn)物通常采用___________技術(shù)來鑒定。

(2)培育轉(zhuǎn)基因畢赤酵母的關(guān)鍵步驟是___________，將圖1所示結(jié)構(gòu)“導(dǎo)入”畢赤酵母后，將畢赤酵母轉(zhuǎn)移至含___________的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；篩選出能夠生存的菌落。

(3)構(gòu)建三基因表達(dá)載體的難點(diǎn)在于構(gòu)建目的基因的表達(dá)盒，下圖2為Amy表達(dá)盒的構(gòu)建過程。（pro為啟動(dòng)子；AOXTT為終止子；Bsp119Ⅰ、XbaⅠ；BglⅡ、BamHⅠ為不同限制酶；①②為操作過程。）

操作①的處理是：將質(zhì)粒1與α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ與XbaⅠ兩種不同的限制酶處理，然后拼接。與用一種限制酶處理相比，優(yōu)點(diǎn)是___________（答出兩點(diǎn)）；操作②中必須用___________酶對(duì)質(zhì)粒2處理，才能獲得能正常表達(dá)的α-淀粉酶基因表達(dá)盒。30、目前，新型冠狀病毒（屬于RNA病毒）仍在全球肆虐橫行，S蛋白是新冠病毒感染機(jī)體的關(guān)鍵組分，也是研制新冠疫苗的關(guān)鍵起點(diǎn)。我國(guó)目前獲批使用的新冠病毒疫苗主要有：滅活疫苗、重組蛋白疫苗、腺病毒載體疫苗。這三種疫苗的生產(chǎn)技術(shù)路線如下表，回答下列問題：。疫苗種類研制思路滅活疫苗活病毒→培養(yǎng)擴(kuò)增→物理或化學(xué)方法滅活→純化→滅活病毒顆?！梭w腺病毒載體疫苗S蛋白基因→腺病毒基因表達(dá)載體→人體重組蛋白疫苗S蛋白基因→基因表達(dá)載體→重組工程化細(xì)胞→S蛋白→人體

(1)新冠病毒滅活疫苗能激活人體產(chǎn)生體液免疫反應(yīng)是由于所注射的疫苗保留了____________________。

(2)腺病毒載體疫苗是利用復(fù)制缺陷型腺病毒作為載體，即將腺病毒中負(fù)責(zé)__________________________的基因片段用限制酶剪切掉。若制備腺病毒載體新冠病毒疫苗，首先需要在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以__________________為模板經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄獲得含有S蛋白基因的DNA。對(duì)獲得的重組腺病毒除用PCR檢測(cè)S蛋白基因外，還需用________________________的方法檢測(cè)S蛋白。

(3)生產(chǎn)重組蛋白疫苗，首先需要將編碼S蛋白關(guān)鍵序列的基因克隆出來，插入到一個(gè)表達(dá)載體里面，該步驟在基因工程中被稱為_________________________________________，最終將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法是_______________________________________________________________________。

(4)新冠疫苗也可能通過蛋白質(zhì)工程來生產(chǎn)。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，通過_______________________對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的需求。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、B【分析】用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，A正確；供體細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中，能發(fā)育成克隆動(dòng)物，這只能說明分化動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，B錯(cuò)誤；采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到的②時(shí)期表示減數(shù)第二次分裂中期，才能使融合細(xì)胞更容易表達(dá)其全能性，C正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要在95%空氣+5%C02環(huán)境中培養(yǎng)，其中添加5%C02的目的就是維持培養(yǎng)液的pH，D正確。2、D【分析】【分析】

動(dòng)物胚胎發(fā)育過程為：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。

【詳解】

A；卵裂期細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂增殖；且需要進(jìn)行呼吸作用消耗有機(jī)物，故胚胎中細(xì)胞數(shù)目在不斷增加，有機(jī)物總量在不斷減少，A錯(cuò)誤；

B；胚胎分割時(shí)需將發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割；B錯(cuò)誤；

C；胚胎干細(xì)胞體積?。患?xì)胞核大，核仁大且明顯，蛋白質(zhì)合成旺盛，C錯(cuò)誤；

D；胚胎干細(xì)胞是一類未分化的細(xì)胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物胚胎發(fā)育和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生熟記并辨識(shí)各時(shí)期的特點(diǎn)。3、D【分析】【分析】

據(jù)圖分析：圖示過程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；圖中質(zhì)粒上存在兩個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)，而限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列存在于標(biāo)記基因中，使用該種限制酶會(huì)導(dǎo)致標(biāo)記基因失活，因此應(yīng)選擇限制酶MunⅠ切割質(zhì)粒。

【詳解】

A；限制酶的作用是使特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；并具有專一性，A正確；

B；由題干信息給出的兩種酶的識(shí)別序列可知；兩種限制酶切割后形成的黏性末端的堿基可以互補(bǔ)配對(duì)，B正確；

C；每一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別特定的核苷酸序列；并在特定位點(diǎn)進(jìn)行切割，C正確；

D；將重組質(zhì)粒同時(shí)用2種限制酶切割；標(biāo)記基因和目的基因中的EcoRⅠ酶切割位點(diǎn)能被斷開，則會(huì)形成3種DNA片段，D錯(cuò)誤。

故選D。4、A【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素果膠；根據(jù)酶的專一性可知，植物細(xì)胞使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；

B；番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體可采用聚乙二醇融合法得到雜種細(xì)胞；此外還可通過物理方法等誘導(dǎo)其融合，B正確；

C；雜種細(xì)胞需經(jīng)過誘導(dǎo)經(jīng)脫分化形成愈傷組織后再經(jīng)再分化過程發(fā)育成完整的雜種植株；C正確；

D；生物體中基因的作用是相互的；且基因控制相關(guān)性狀，“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒達(dá)預(yù)期目標(biāo)與基因無法有序表達(dá)有關(guān)，D正確。

故選A。5、D【分析】【分析】

體細(xì)胞核移植的大致過程是：將供體體細(xì)胞核導(dǎo)入受體去核卵母細(xì)胞；形成重組細(xì)胞，用電脈沖刺激形成早期胚胎，導(dǎo)入代孕母羊的子宮，妊娠；出生后即克隆動(dòng)物。胚胎移植概念：是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體叫供體（遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀），接受胚胎的個(gè)體叫受體（有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力）。

【詳解】

A、如果a是核移植技術(shù)，b的產(chǎn)生說明了動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；A錯(cuò)誤；

B、如果a是體外受精技術(shù)，則形成的b屬于有性生殖產(chǎn)生的動(dòng)物；B錯(cuò)誤；

C、如果a是胚胎分割技術(shù)，b中個(gè)體的基因型一定相同；表型由于受到環(huán)境影響不一定相同，C錯(cuò)誤；

D、如果a是基因工程，b是乳腺生物反應(yīng)器；目的基因表達(dá)的產(chǎn)物在雌性動(dòng)物的乳汁中提取，則需對(duì)移植的胚胎進(jìn)行性別選擇，D正確。

故選D。二、多選題(共8題，共16分)6、B:D【分析】【分析】

（1）微生物的發(fā)酵在食品的制作中具有重要意義；如制饅頭；面包、釀酒要用到酵母菌，制酸奶要用到乳酸菌。

（2）低溫能抑制細(xì)菌；真菌的生長(zhǎng)和繁殖。

（3）制作泡菜的原理就是利用乳酸菌使蔬菜中的有機(jī)物生成乳酸。

【詳解】

A；制酸奶要用到乳酸菌；乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，使得酸奶有一種特殊的酸味，所以在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品，A正確；

B；制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制需氧型微生物繁殖；B錯(cuò)誤；

C；白酒的釀造過程中利用了酵母菌的發(fā)酵作用；同時(shí)利用霉菌產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉糖化，C正確；

D；地窖中溫度低；能抑制細(xì)菌、真菌等微生物的生長(zhǎng)和繁殖，使其繁殖速度慢，數(shù)量少，不能充分分解食物，達(dá)到保鮮的目的，所以將做好的發(fā)酵食品冷藏于地窖中是為了抑制微生物的生長(zhǎng)，D錯(cuò)誤。

故選BD。7、A:B:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中5支試管為梯度稀釋；最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)在30~300的平板，取其平均值，進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)公式為（C÷V）×M。（C為平均菌落數(shù)，V為涂布液體積，M為稀釋倍數(shù)）。

【詳解】

A；設(shè)置重復(fù)組；增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性，故某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板。稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落，使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低，A正確；

B、據(jù)圖可知，將10g土樣加入到90mL無菌水中定容至100mL后，此時(shí)土樣稀釋倍數(shù)為10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號(hào)試管中的樣品，故3號(hào)試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍；B正確；

C、5號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109個(gè)；C錯(cuò)誤；

D；要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用；需設(shè)置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基上的菌落種類數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落類型，則說明起到了選擇作用，D正確。

故選ABD。8、C:D【分析】【分析】

實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基按照功能劃分；可以分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

A、KH2PO4和Na2HPO4可為尿素分解菌提供無機(jī)鹽，H2PO4-和HPO42-又是一種調(diào)節(jié)pH的緩沖對(duì)；A正確；

B；培養(yǎng)基中除了尿素?zé)o其他含氮物質(zhì)；只有尿素分解菌能通過分解尿素進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖，故尿素既能為尿素分解菌提供氮源，又可對(duì)培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用，B正確；

C；瓊脂不能被微生物利用；只能充當(dāng)凝固劑，C錯(cuò)誤；

D、表中的H2O為蒸餾水；起定容作用，蒸餾水不能對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋，稀釋所用的溶劑應(yīng)該是無菌水，D錯(cuò)誤。

故選CD。9、B:C【分析】【分析】

制作果醋的菌種為原核生物中的醋酸菌。醋酸菌是一種好氧菌。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)；醋酸菌將果汁中的糖分分解成醋酸；當(dāng)氧氣充足、糖源缺乏時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；家庭制作果酒、果醋和酸奶過程中有多種微生物參與發(fā)酵過程；因此均不是純種發(fā)酵，A錯(cuò)誤；

B；果醋制作的溫度一般控制在30～35℃；果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18～25℃，B正確；

C；泡菜腌制時(shí)需要乳酸菌發(fā)酵；乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸，因此壇子加水密封的目的是營(yíng)造缺氧環(huán)境，利于乳酸菌發(fā)酵，C正確；

D；當(dāng)氧氣充足、糖源缺乏時(shí)；醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?，D錯(cuò)誤。

故選BC。

【點(diǎn)睛】

本題考查考生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決問題的能力。10、A:C【分析】【分析】

PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制；步驟包括高溫變性；復(fù)性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料。根據(jù)圖中可得，由于引物的一個(gè)堿基在不影響與模板鏈整體配對(duì)的前提下不與目的基因配對(duì)，再利用PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)了目的基因的定點(diǎn)誘變。其技術(shù)原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。

【詳解】

A；引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn)；可以配合載體的限制酶識(shí)別位點(diǎn)，幫助目的基因定向定點(diǎn)插入運(yùn)載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，A正確；

B；在PCR反應(yīng)過程中變性大約94℃→復(fù)性大約55℃→延伸大約72℃；B錯(cuò)誤；

C；第3輪PCR中；物質(zhì)②是引物2以引物1拓展得到的DNA鏈為模板進(jìn)行復(fù)制得到的，故引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長(zhǎng)的突變基因，C正確；

D；PCR一次大概有30個(gè)循環(huán)；每一輪PCR都消耗引物和原料，是在最初加入，不是后期補(bǔ)充，D錯(cuò)誤。

故選AC。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應(yīng)取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或稀釋涂布平板法來計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯(cuò)誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源，利用的是空氣中的氮?dú)?，D正確。

故選ACD。12、A:C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：①限制酶；能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；②DNA連接酶，連接兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；③運(yùn)載體，質(zhì)粒是最常用的運(yùn)載體，除此之外，還有λ噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒。

2；基因治療：把正常的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細(xì)胞中；使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的?；蛑委煼譃轶w外基因治療和體內(nèi)基因治療兩種類型。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息“由一個(gè)向?qū)NA（sgRNA）分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割”；再結(jié)合圖解可知能夠行使特異性識(shí)別DNA序列并切割特定位點(diǎn)功能的分子是向?qū)NA（sgRNA）分子和Cas9蛋白，其類似于基因工程中限制酶，作用的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；

B；非基因編輯對(duì)象也可能含有與sgRNA配對(duì)的堿基序列；造成sgRNA選錯(cuò)對(duì)象與之錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶，sgRNA的序列長(zhǎng)短影響成功率，序列越短，脫靶率越高，B正確；

C；染色體變異會(huì)引起基因的數(shù)目或排列順序改變；利用此技術(shù)對(duì)目標(biāo)基因部分DNA片段進(jìn)行切除屬于基因內(nèi)部堿基對(duì)的改變，不改變基因的數(shù)目和排列順序，故不屬于染色體變異，C錯(cuò)誤；

D；sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則遵循的是DNA與RNA之間的配對(duì)關(guān)系；而目標(biāo)基因的雙鏈區(qū)域遵循的是DNA之間的配對(duì)方式，故兩者不同，D正確。

故選AC。13、C【分析】【分析】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚；神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。中國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；不反對(duì)治療性克隆。

【詳解】

A；開放式組織培養(yǎng)一般是指使組織培養(yǎng)脫離嚴(yán)格無菌的操作環(huán)境；在自然、開放的有菌環(huán)境中進(jìn)行操作。，動(dòng)物細(xì)胞一般不能采用這種方式，A錯(cuò)誤；

B；胚胎是由整個(gè)受精卵發(fā)育而來的；囊胚內(nèi)部的細(xì)胞不能發(fā)育為完整的胚胎，B錯(cuò)誤；

C；胚胎移植技術(shù)；一般采用桑椹胚或囊胚進(jìn)行移植，C正確；

D；我國(guó)不贊成、不允許、不支持、不接受任何形式的生殖性克?。坏遣环磳?duì)治療性克隆，D錯(cuò)誤。

故選C。三、填空題(共7題，共14分)14、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動(dòng)物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場(chǎng)所唯一（MⅠ和MⅡ的場(chǎng)所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場(chǎng)所不唯一，（MⅠ場(chǎng)所在卵巢，MⅡ場(chǎng)所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時(shí)間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動(dòng)物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動(dòng)物精子產(chǎn)生的時(shí)期是初情期；雌性動(dòng)物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時(shí)期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點(diǎn)睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過程和受精作用等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生識(shí)記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】60—7517、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代傳代18、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對(duì)被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時(shí)可通過適度使用免疫抑制劑對(duì)病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識(shí)記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識(shí)記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶19、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說法錯(cuò)誤?！窘馕觥垮e(cuò)誤20、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記四、判斷題(共2題，共8分)21、A【分析】【分析】

液體培養(yǎng)基主要是模擬動(dòng)物體內(nèi)環(huán)境；動(dòng)物體細(xì)胞是生活在組織液當(dāng)中，而且細(xì)胞要直接從組織液里獲得營(yíng)養(yǎng)和排出廢物。所以液體培養(yǎng)基相當(dāng)于組織液的液體環(huán)境。

【詳解】

為了保證細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子的供給，培養(yǎng)基中需添加一定量的動(dòng)物血清等天然成分，可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，故該表述正確。22、B【分析】【詳解】

從牛卵巢中采集到卵母細(xì)胞后；接著對(duì)其進(jìn)行的操作是先在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，再通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，獲得去核的卵母細(xì)胞，再經(jīng)核移植獲得重組的受體細(xì)胞。

故該表述錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共40分)23、略

【分析】【分析】據(jù)圖分析；圖示為利用基因工程大量制備α-淀粉酶的過程，目的基因是α-淀粉酶基因，與體構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后將目的基因?qū)氪竽c桿菌，接著對(duì)目的基因進(jìn)行檢測(cè)與鑒定，最后利用工程菌培養(yǎng)獲得大量的α-淀粉酶產(chǎn)品。

【詳解】（1）α-淀粉酶基因來自于海洋細(xì)菌；因此為了利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因，必須先獲得細(xì)菌的基因組DNA。

（2）目的基因與運(yùn)載體結(jié)合前需要用限制酶對(duì)兩者進(jìn)行切割；延伸是在引物的3’端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位點(diǎn)，且為了使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)。

（3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)；退火溫度的設(shè)定與引物有關(guān)，延伸時(shí)間的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度有關(guān)。

（4）根據(jù)題意分析；虛線框內(nèi)mRNA片段內(nèi)含有24個(gè)堿基，每3個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)密碼子，因此包含24÷3=8個(gè)密碼子；構(gòu)成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有4×4-3=13種。

（5）根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析可知，在pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下；α-淀粉酶相對(duì)活性為99.5%，活性最高。

【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是基因工程的四個(gè)基本步驟以及PCR技術(shù)的過程、條件，回憶相關(guān)知識(shí)點(diǎn)和注意事項(xiàng)，結(jié)合提示分析答題?！窘馕觥炕蚪MDNA5’使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連②⑥813pH為8．5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl24、略

【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物；僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

2；分解纖維素的微生物的分離的實(shí)驗(yàn)原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖能被微生物利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

3；統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：

（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：

①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；

②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；

③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）：

①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。

②操作：

a；設(shè)置重復(fù)組；增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。

b；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M；其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

（1）土壤取樣時(shí)；一般選擇纖維素豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的數(shù)量。

（2）若測(cè)得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過計(jì)算得知每毫升樣品中有5.1×107個(gè)纖維素分解菌，則由每mL樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M可得，該稀釋液的稀釋倍數(shù)＝5.1×107÷51×0.1=105。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入CR染料；它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落，透明圈越大說明降解纖維素能力越強(qiáng)，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落1。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合流程圖，考查微生物的分離和培養(yǎng)，解題關(guān)鍵是識(shí)記土壤微生物分離的原理及方法；識(shí)記培養(yǎng)基的種類及作用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥坷w維素增加纖維素分解菌的數(shù)量105紅①25、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測(cè)發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進(jìn)行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；變成灰綠色，該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精，因此實(shí)驗(yàn)自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對(duì)照組中應(yīng)加入酒精作為陽性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)遵循等量原則；單一變量原則等，因此實(shí)驗(yàn)思路是：取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實(shí)驗(yàn)組，B試管中各加入2ml酒精，作為對(duì)照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗(yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般不進(jìn)行嚴(yán)格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種?，F(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經(jīng)過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/1mL=1個(gè)中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實(shí)驗(yàn)中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關(guān)閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣?！窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實(shí)驗(yàn)思路：取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時(shí)需關(guān)閉充氣口，釀醋時(shí)則需向充氣孔中充入無菌空氣26、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）利用RNA得到相應(yīng)DNA的方法為逆轉(zhuǎn)錄；起作用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶。在體外將DNA擴(kuò)增的技術(shù)是PCR，中文名稱為多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)能夠使脫氧核苷酸從引物的3'端開始連接，使子代DNA從5'向3'延伸；進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，還應(yīng)選擇一對(duì)方向相反的引物，且與模板的3'端結(jié)合，據(jù)圖可知，應(yīng)選擇Ⅱ；Ⅲ。

（3）細(xì)胞內(nèi)是否合成了由目的基因控制的蛋白質(zhì)，使用抗原-抗體雜交法檢測(cè)，為了檢驗(yàn)表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行檢測(cè)，本實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是唯一的，因此本實(shí)驗(yàn)結(jié)果是出現(xiàn)雜交帶?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。

(2)熱穩(wěn)定DNA聚合酶##Taq酶3'II；Ⅲ

(3)用表達(dá)的S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)雜交帶六、綜合題(共4題，共16分)27、略

【分析】【分析】

1.單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)；使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在經(jīng)過兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體；又能大量增殖雜交瘤細(xì)胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。

2.蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

【詳解】

（1）培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞時(shí)；需要將所選取的組織細(xì)胞分散開，以利于細(xì)胞融合，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理離體組織細(xì)胞使之分散開，此外還應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝產(chǎn)物，有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。

（2）根據(jù)分析可知；制備單克隆抗體時(shí)，因?yàn)榧?xì)胞的融合過程是隨機(jī)的，因此融合后需要先用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞；然后對(duì)上述細(xì)胞進(jìn)行抗體檢測(cè)，選取專一抗體檢驗(yàn)陽性（或能產(chǎn)生專一抗體）的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；最終獲得單克隆抗體，單克隆抗體表現(xiàn)的優(yōu)點(diǎn)為特異性強(qiáng)；靈敏度高、可大量制備。

（3）有人設(shè)計(jì)用體細(xì)胞核移植技術(shù)將經(jīng)特定抗原刺激產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核骨髓瘤細(xì)胞中來產(chǎn)生單克隆抗體；這是獲得單克隆抗體的新舉措。

（4）從免疫的角度考慮；對(duì)人體來說鼠源抗體為抗原，若利用人的抗體與之嵌合，則排斥作用會(huì)減輕，對(duì)人體的副作用會(huì)減少，因此設(shè)計(jì)改造鼠源雜交瘤抗體，生產(chǎn)鼠—人嵌合抗體，這屬于蛋白質(zhì)工程的技術(shù)范疇。該過程首先需要根據(jù)預(yù)期的嵌合抗體功能，設(shè)計(jì)嵌合抗體的結(jié)構(gòu)，然后推測(cè)相應(yīng)的基因片段，最終對(duì)基因進(jìn)行操作，因此該工程又叫做第二代基因工程。

【點(diǎn)睛】

熟知單克隆抗體的制備過程及其原理是解答本題的關(guān)鍵，蛋白質(zhì)工程的設(shè)計(jì)思路也是本題的考查點(diǎn)，掌握單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是解答本題的另一關(guān)鍵?！窘馕觥恳鹊鞍酌福ɑ蚰z原蛋白酶）培養(yǎng)液雜交瘤細(xì)胞專一抗體檢驗(yàn)陽性（或能產(chǎn)生專一抗體）特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)蛋白質(zhì)工程預(yù)期的嵌合抗體功能28、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：圖示表示鴨梨醋飲的制作流程圖；其中①表示果酒發(fā)酵，②表示果醋發(fā)酵。

2、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：(1)在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；(2)在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。

3；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型，是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：若氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

（1）

植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠；因此