PCR崗位技能考核試題及答案

PCR崗位技能考核試題

一、選擇題

1、PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是（）［多選題］*

A、目的基因V

B、引物V

C、四種脫氧核昔酸V

D、DNA聚合酶等V

E、mRNA

F、核糖體

2、鎂離子在DNA或RNA體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為（）［單選題］*

A、0.3-lmmol/L

B、0.5-lmmol/L

C、0.3-2mmol/L

D、0.5-2mmol/LV

3、多重PCR需要的引物對(duì)為（）［單選題］*

A、一對(duì)引物

B、半對(duì)引物

C、兩對(duì)引物

D、多對(duì)引物V

4、PCR是在引物、模板和4種脫氧核糖核昔酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)，其

特異性決定因素為（）［單選題］*

A、模板

B、引物V

C、dNTP

D、鎂離子

5、在PCR反應(yīng)中，下列哪項(xiàng)可以引起非靶序列的擴(kuò)增（）［單選題］*

A、TaqDNA聚合酶加量過多

B、引物加量過多

C、A、B都可V

D、緩沖液中鎂離子含量過高

6.PCR技術(shù)的發(fā)明人是（）［單選題］*

A、MullisV

B、史蒂文.沙夫

C、蘭德爾.才木

7.PCR產(chǎn)物短期存放可在（）保存。［單選題］*

A、4℃V

B、常溫

C、-80℃

D、局溫

8.PCR產(chǎn)物長(zhǎng)期儲(chǔ)存最好置于（X［單選題］*

A、4℃

B、常溫

C-、20℃V

9.PCR的基本反應(yīng)過程包括（）［單選題］*

A、變性、退火、延伸V

B、變性、延伸

C、變性、退火

10.在實(shí)際工作中，基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室污染類型包括（）［單選題］*

A.試劑污染和標(biāo)本間交叉污染

B擴(kuò)增產(chǎn)物的污染

C.天然基因組DNA的污染

D.A、B、C都可能V

11、PCR技術(shù)于哪一年發(fā)明（）［單選題］*

A、1983年V

B、1971年

C、1987年

D、1993年

12.TaqDNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為（）［單選題］*

A、37℃

B、50-55℃

C、70-75℃V

D、80-85℃

13.以下哪種物質(zhì)在PCR反應(yīng)中不需要（）［單選題］*

A、TaqDNA聚合酶

B、dNTPs

C、鎂離子

D、RNA酶V

14.PCR檢測(cè)中，經(jīng)過n個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，拷貝數(shù)將增加（）［單選題］*

A、n

B、2n

C、2AnV

D、nA2

15.PCR基因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是（）［單選題］*

A、溫度控制系統(tǒng)V

B、熒光檢測(cè)系統(tǒng)

C、軟件系統(tǒng)

D、熱蓋

16.以下哪項(xiàng)不是臨床PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一般原則（）［單選題］*

A、各區(qū)合并V

B、注意風(fēng)向

C、因地制宜

D、方便工作

17.PCR實(shí)驗(yàn)室一般包括（）［單選題］*

A.試劑準(zhǔn)備區(qū)

B標(biāo)本制備區(qū)

C.擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)

D.A、B、C都含V

18.PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利，而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測(cè)一個(gè)人是

否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的（1［單選題］*

A、白細(xì)胞DNA

B、病毒蛋白質(zhì)

C、血漿抗體

D、病毒核酸V

19.如果反應(yīng)體系中加入模板DNA分子100個(gè)，則經(jīng)過30個(gè)循環(huán)后,DNA分子的數(shù)量將達(dá)到（）個(gè)。

［單選題］*

A、100x30

B、100x30x2

C、100x300

D、100x2A30V

20.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析方法主要有（）［單選題］*

A、凝膠電泳分析法

B、點(diǎn)雜交法

C、熒光探針定量PCR法

D、A、B、C都是V

21、陽性室內(nèi)質(zhì)控品出現(xiàn)假陰性失控的常見原因分析（）［多選題］*

A、核酸提取中的隨機(jī)誤差，如核酸提取中的丟失，有機(jī)溶劑的去除不徹底，標(biāo)本中擴(kuò)增抑制物的殘留，

所用耗材如離心管有PCR抑制物等V

B、儀器的問題，如擴(kuò)增儀孔間溫度的不一致性，孔內(nèi)溫度與所示溫度的不一致性等V

C、試劑的問題，如Taq酶和/或反轉(zhuǎn)錄酶的失活，探針的純度及標(biāo)記效率和核酸提取試劑的效率等V

22.陰性室內(nèi)質(zhì)控品出現(xiàn)假陽性失控的常見原因分析（）［多選題］*

A、擴(kuò)增產(chǎn)物的污染V

B、臨床標(biāo)本的核酸提取過程中發(fā)生的樣本間的交叉污染V

C、移液槍頭等關(guān)鍵耗材污染V

D、試劑污染V

E、儀器故障

23.出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染怎么辦？（）［多選題］*

A、開窗通風(fēng)V

B、用次氯酸鈉溶液清洗地面，實(shí)驗(yàn)臺(tái)、墻面V

C、增加紫外燈照射時(shí)間，

D、用核酸清除劑空中噴霧等方法去除V

E、每天進(jìn)行上述過程，直到污染消除V

24.生物安全柜、超凈工作臺(tái)、通風(fēng)柜的區(qū)別（）［多選題］*

A、生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，用來保護(hù)工

作人員、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)品，使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)

的。V

B、超凈工作臺(tái)是為了保護(hù)試驗(yàn)品或產(chǎn)品而設(shè)計(jì)的通過吹過工作區(qū)域的垂直或水平層流空氣防止試驗(yàn)品

或產(chǎn)品受到工作區(qū)域外粉塵或細(xì)菌的污染。一旦微生物樣品放置于工作區(qū)域，層流空氣將把帶有微生物介質(zhì)

的空氣吹向前臺(tái)工作人員而產(chǎn)生危險(xiǎn)。V

C、通風(fēng)柜是為在化學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中清除腐蝕性化學(xué)氣體和有毒煙霧而設(shè)計(jì)的。分為外接管道通風(fēng)柜和凈

氣型通風(fēng)柜，凈氣型通風(fēng)柜主要用于保護(hù)實(shí)驗(yàn)室人員免受有毒化學(xué)氣體和煙霧吸入危害，也可用于防止粉末

吸入危害V

D、通風(fēng)柜和超凈工作臺(tái)不屬于生物安全柜,不可使用在涉及微生物材料的實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)過程中V

二、判斷題

1、PCR引物設(shè)計(jì)的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間取得平衡。

對(duì)V

錯(cuò)

2、在PCR反應(yīng)中,dATP在DNA擴(kuò)增中可以提供能量，同時(shí)作為DNA合成的原料。

對(duì)V

錯(cuò)

3、DNA擴(kuò)增過程未加解旋酶，可以通過先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵，使模板DNA解旋。

對(duì)V

錯(cuò)

4、PCR反應(yīng)中，復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成。

對(duì)V

錯(cuò)

5、PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。

對(duì)V

錯(cuò)

6、PCR技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等。

對(duì)V

錯(cuò)

7、PCR技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。

對(duì)

錯(cuò)V

8、PCR反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液。

對(duì)V

錯(cuò)

9、核酸的復(fù)制是由5'-3'方向進(jìn)行的。

對(duì)V

錯(cuò)

10、配對(duì)的堿基總是A與T和G與C。

對(duì)V

錯(cuò)

11、HBsAg轉(zhuǎn)陰性后一段時(shí)間才出現(xiàn)可檢測(cè)的HBsAb,此段間隔期稱之為“窗口期"。

對(duì)V

錯(cuò)

12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán)Q基團(tuán)和報(bào)告基團(tuán)R基團(tuán)來標(biāo)記熒光定量PCR的探針。

對(duì)V

錯(cuò)

13、PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用是促進(jìn)TaqDNA聚合酶活性。

對(duì)V

錯(cuò)

14、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑（如甲醛），PH、離子強(qiáng)度、Mg2+等有較大改變都會(huì)影響Taq酶活性。

對(duì)V

錯(cuò)

15.每個(gè)子代DNA分子中均保留一條親代DNA鏈和一條新合成的DNA鏈，這種復(fù)制方式稱之為半保

留復(fù)制。()［單選題］*

對(duì)V

錯(cuò)

16.發(fā)生溶血的標(biāo)本對(duì)PCR結(jié)果沒影響。

對(duì)

錯(cuò)V

17."平臺(tái)效應(yīng)”是描述PCR后期循環(huán)產(chǎn)物對(duì)數(shù)累積趨于飽和。

對(duì)V

錯(cuò)

18.逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)就是在應(yīng)用PCR方法檢測(cè)RNA病毒時(shí)，以RNA為模板，在逆

轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成cDNA鏈，然后以cDNA為模板進(jìn)行正常的PCR循環(huán)增。

對(duì)V

錯(cuò)

19.在定量PCR中，72P這一步對(duì)熒光探針的結(jié)合有影響，故去除，實(shí)際上55℃仍可充分延伸，完成

擴(kuò)增復(fù)制。

對(duì)V

錯(cuò)

20.PCR可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測(cè)三大方面。

對(duì)V

錯(cuò)

21.PCR方法檢測(cè)GBS-DNA檢測(cè)的敏感度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為95.05%、98.74%、

92.31%和99.21%。

對(duì)V

錯(cuò)

22.使用無菌拭子取生殖道、直腸樣本進(jìn)行GBS核酸檢測(cè)。

對(duì)V

錯(cuò)

23.GBS核酸樣本在2(-8℃保存條件下必需7天內(nèi)檢測(cè)完成。

對(duì)V

錯(cuò)

24.使用無菌拭子取生殖道、直腸樣本進(jìn)行GBS核酸檢測(cè)。

對(duì)V

錯(cuò)

25.內(nèi)標(biāo)對(duì)照CT值＞38或未檢出，說明樣本中含有PCR反應(yīng)的抑制物，建議重新進(jìn)行

樣本提取。

對(duì)V

錯(cuò)

26.20、睡氯匹定、氯叱格雷、普拉格雷通過抑制ADP受體，而發(fā)揮抗血小板的作用。

對(duì)V

錯(cuò)

27.氯毗格雷治療可明顯改善經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)(PQ)術(shù)后患者的主要心血管預(yù)后，但仍有

5%~15%的患者在1年內(nèi)會(huì)出現(xiàn)包括死亡、心肌梗死和腦卒中在內(nèi)的臨床終點(diǎn)事件。與CYP2C19基因多

態(tài)性有關(guān)。

對(duì)V

錯(cuò)

28.氯叱格雷屬于前體藥物，15%通過肝臟代謝后生成活性硫醇代謝物。

對(duì)V

錯(cuò)

29.CYP2C19基因分型檢測(cè)可以使用肝素抗凝管采血。

對(duì)

錯(cuò)V

30.CYP2cl9*2:是指5號(hào)外顯子的第681位發(fā)生G-A突變；CYP2cl9*3:是指4號(hào)外顯子的第636

位發(fā)生G-A突變。

對(duì)V

錯(cuò)

31.CYP2C19基因型為*1/*3(*2GG;*3GA),為中代謝，臨床可以考慮增加用藥劑量或更

換其它抗血小板藥物。

對(duì)V

錯(cuò)

32抗血小板藥物相關(guān)基因檢測(cè)結(jié)合血栓彈力圖實(shí)施個(gè)體化藥物治療，如果發(fā)現(xiàn)基因型與表型存在矛盾,

制定個(gè)體化給藥方案時(shí)，應(yīng)以基因型為主。

對(duì)

錯(cuò)V

33.亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFR是體內(nèi)葉酸代謝當(dāng)中的關(guān)鍵酶。

對(duì)V

錯(cuò)

34.血清中同型半胱氨酸的升高與MTHFR、MTR、MTRR酶的活性降低有關(guān)。

對(duì)V

錯(cuò)

35.中國(guó)人群中，約29%的人MTHFR基因?yàn)?77TT型。

對(duì)V

錯(cuò)

36.MTHFRC677T發(fā)生純合突變(TT型)后酶的活性僅有正常的30%.

對(duì)V

錯(cuò)

37.用于MTHFR基因檢測(cè)的標(biāo)本常溫條件下可以保存3天。

對(duì)V

錯(cuò)

38.核酸包括兩種類型:脫氧核糖核酸(ATCG)和核糖核酸(AUCG)。

對(duì)V

錯(cuò)

39.根據(jù)遺傳中心法則,遺傳信息的流動(dòng)方向?yàn)椋篋NAoRNA今蛋白質(zhì)。

對(duì)V

錯(cuò)

40.核酸樣品含量可根據(jù)260nm處波長(zhǎng)的吸光度算出。

對(duì)V

錯(cuò)

41.核酸樣品純度可根據(jù)(260/280nm)處波長(zhǎng)的吸光度比值算出。

對(duì)V

錯(cuò)

42.Taq酶是決定PCR特異性的關(guān)鍵因素。

對(duì)

錯(cuò)V

43.PCR中，全血樣本采集一般使用EDTA或枸椽酸鹽抗凝，不使用肝素抗凝。

對(duì)V

錯(cuò)

44.Taqman探針兩端標(biāo)記有:熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)。

對(duì)V

錯(cuò)

45.dNTPs呈顆粒狀，保存不當(dāng)容易變性失活。

對(duì)V

錯(cuò)

46.PCR基本反應(yīng)過程包括:變性、退火、延伸。

對(duì)V

錯(cuò)

47.核酸基本結(jié)構(gòu)單位是:核苜酸，其組成包括堿基、核糖或脫氧核糖和磷酸。

對(duì)V

錯(cuò)

48.DNA雙鏈中:堿基A-T之間以兩個(gè)氫鍵相連，G-C以三個(gè)氫鍵相連。

對(duì)V

錯(cuò)

49.核酸的解鏈