2025年外研版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年外研版選擇性必修3生物上冊月考試卷207考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、利用基因重組技術(shù)制造的全新致病菌比一般生物武器的危害性大；其原因是（）

①人類從來沒有接觸過這種致病菌②無藥可醫(yī)。

③具有某種易感基因的民族容易感染，而施放國的人卻不易感染A.①B.②C.②③D.①②2、下列屬于卵裂期特點(diǎn)的是（）A.細(xì)胞分裂方式為減數(shù)分裂B.胚胎總體積增加C.胚胎總DNA增加D.胚胎有機(jī)物總量增加3、某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是（）A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌B.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.微生物培養(yǎng)過程中每隔三天或一周觀察一次4、將運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌的丙酮酸脫羧酶基因和乙醇脫氫酶基因?qū)氪竽c桿菌，構(gòu)建新的乙醇合成途徑，顯著提高了產(chǎn)乙醇效率。在此過程中A.只有獲取目的基因這一步才可能利用PCR技術(shù)B.根據(jù)是否產(chǎn)生乙醇篩選含有質(zhì)粒的大腸桿菌C.可通過測定酶活性檢測目的基因的表達(dá)水平D.產(chǎn)乙醇重組大腸桿菌的無氧呼吸沒有變化5、慢性病人常出現(xiàn)白蛋白值偏低的狀況，缺乏白蛋白的病人容易出現(xiàn)水腫，臨床上對(duì)白蛋白需求量很大。下圖是利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用白蛋白的流程圖，下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.已知白蛋白基因的堿基序列，可通過人工合成的方法獲取目的基因B.過程③得到的表達(dá)載體包括目的基因、乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因C.過程⑤之前需選取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析、性別鑒定等D.進(jìn)行胚胎移植之前需用促性腺激素和孕激素處理代孕奶山羊C評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)6、下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-）；在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是（）

A.可用滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.未融合的細(xì)胞和融合的同種核細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的選擇透過性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)7、用XhoI和SalI兩種限制性內(nèi)切核酸酶分別單獨(dú)酶切同一種DNA片段；酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果如圖。以下敘述錯(cuò)誤的是（）

A.XhoI和SalI兩種酶識(shí)別的核糖核苷酸序列不同B.泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物C.泳道②中的酶切產(chǎn)物可用DNA連接酶拼接成一個(gè)重組DNA分子D.圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA8、B基因存在于水稻基因組中；其僅在體細(xì)胞（2n）和精子中正常表達(dá)，但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)，培育轉(zhuǎn)基因植株。以下鑒定篩選轉(zhuǎn)基因植株的方式正確的是（）

A.將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DNA分子雜交B.以Luc基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針進(jìn)行DNA分子雜交C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交D.檢測加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光9、蛋白質(zhì)工程就是通過對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)晶體學(xué)和蛋白質(zhì)動(dòng)力學(xué)的研究，獲得有關(guān)蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對(duì)編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行有目的的設(shè)計(jì)和改造，通過基因工程技術(shù)獲得可以表達(dá)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物，中華鱘是一種瀕危野生動(dòng)物。研究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B.改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)C.改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘不再是同一物種D.改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)10、聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，它具有類似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可用于制造無污染的“綠色塑料”。科學(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上B.步驟③所用的培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)嗜鹽細(xì)菌的生長越有利C.步驟④所用到的培養(yǎng)基應(yīng)加入瓊脂，以便挑取單菌落獲得純化菌株D.挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量11、下列關(guān)于基因工程中幾種工具的敘述，正確的是（）A.限制酶可水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可將末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段連接起來C.DNA聚合酶能夠從核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因12、體細(xì)胞核移植胚胎組的蛋白甲基化可導(dǎo)致克隆效率降低；毛殼素是組蛋白H3K9甲基化轉(zhuǎn)移酶SUV39H1/2的特異性化學(xué)抑制劑，使用毛殼素處理供體細(xì)胞，可降低SUV39H1/2在供體細(xì)胞和核移植胚胎中的表達(dá)水平，提高豬胚胎的發(fā)育率，如圖是利用不同濃度毛殼素處理對(duì)豬胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)成功率的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，下列敘述正確的是（）

A.克隆豬的遺傳物質(zhì)來自供體細(xì)胞和代孕母豬B.過程①使用的培養(yǎng)液需添加動(dòng)物血清或血漿C.過程④采用滅活的病毒處理以促進(jìn)精卵結(jié)合D.過程⑤成功與否與代孕母豬的生理狀態(tài)有關(guān)13、黑尿癥是一種單基因遺傳病；該病在人群中的發(fā)病率大約為百萬分之一?；颊咭蛉狈δ蚝谒嵫趸?，使得尿黑酸不能被氧化分解而導(dǎo)致尿液呈黑色。下圖是該遺傳病的某家系圖。下列說法正確的是（）

A.該實(shí)例說明基因通過控制蛋白質(zhì)的合成而直接控制性狀B.控制黑尿癥的基因?yàn)殡[性基因，且位于X染色體上C.Ⅱ4和Ⅱ5婚配，所生男孩患黑尿癥的概率約為1/3003D.若用該致病基因制作的探針檢測，則Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定會(huì)出現(xiàn)雜交帶評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)14、一般包括______、______等技術(shù)15、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________16、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。17、獲取目的基因的方法______、______、______18、基因工程取得了突飛猛進(jìn)的發(fā)展。_____、_____等技術(shù)的應(yīng)用不僅使生命科學(xué)的研究發(fā)生了前所未有的變化，而且在實(shí)際應(yīng)用領(lǐng)域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的應(yīng)用前景?？瓜x棉中的抗蟲基因來自_____，抗蟲基因作物的使用，不僅減少了_____，降低了____，而且還減少了_____。19、隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現(xiàn)，它們的危害可能更大。通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館搜集近年發(fā)現(xiàn)的致病微生物的相關(guān)資料，分析和歸納這些資料__________。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)20、金黃色葡萄球菌是一種常見的食源性致病微生物；該菌具耐高鹽的特性。哥倫比亞血平板含無菌脫纖維羊血，金黃色葡萄球菌可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。如圖為檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答：

（1）從功能上看7．5％NaCl（高鹽）肉湯培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，用該培養(yǎng)基對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行培養(yǎng)的主要目的是提高_(dá)__________。

（2）從培養(yǎng)過程分析，振蕩培養(yǎng)可以____________________________；更有利于微生物的生長。

（3）在配制哥倫比亞血平板時(shí)，添加無菌脫纖維羊血是在高壓蒸汽滅菌________（填“之前”或“之后”），原因是________________________。

（4）圖中血平板上的接種方法是________________。經(jīng)規(guī)范操作并多次重復(fù)，血平板上均出現(xiàn)__________的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌。但牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非牛奶所攜帶，因此需要對(duì)本次操作進(jìn)行完善，具體方案是________________。21、化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)、用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過實(shí)驗(yàn)比較不同碳源對(duì)菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表。碳源細(xì)胞干重（g/L）S產(chǎn)量（g/L）葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18

回答下列問題。

(1)通常在實(shí)驗(yàn)室分離純化培養(yǎng)微生物時(shí)，需要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，如果自變量設(shè)為培養(yǎng)基不同，則是檢測____________________________。如果自變量設(shè)為_________________；則是檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底。

(2)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，菌株C生長的最適碳源是______；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是______。菌株C的生長除需要碳源外，還需要______（答出2點(diǎn)即可）等營養(yǎng)物質(zhì)。

(3)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，碳源為淀粉時(shí)菌株C不能生長，其根本原因是______。

(4)若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請簡要寫出實(shí)驗(yàn)思路：______。

(5)為測定菌株C的含量，常用_________________進(jìn)行接種，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，原因是_____________。22、兩只克隆小猴“中中”和“華華”是世界首例非人靈長類動(dòng)物的體細(xì)胞克隆猴；這是我國的研究成果。一年后5只世界首例生物節(jié)律紊亂的體細(xì)胞克隆猴誕生。下圖為培育克隆猴的流程，回答下列問題：

(1)在“中中”“華華”之前，科學(xué)家已培育了胚胎細(xì)胞克隆猴，胚胎細(xì)胞核移植難度明顯低于體細(xì)胞核移植的原因是_____。

(2)科學(xué)家首先將采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)至____期，然后去核，這里的“去核”實(shí)際上是指去除____。核移植過程中用滅活的仙臺(tái)病毒進(jìn)行了短暫處理，其目的是_____。形成的重構(gòu)胚具有_____的能力。體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，需提供適宜的營養(yǎng)及環(huán)境條件，推測環(huán)境條件包括_____（答出2點(diǎn)）。

(3)我國科研團(tuán)隊(duì)采集一只睡眠紊亂最明顯的BMAL1基因敲除的獼猴的體細(xì)胞，通過核移植技術(shù)獲得了5只克隆猴，理論上這5只克隆猴之間的細(xì)胞核基因型_____（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。為驗(yàn)證上述5只基因敲除獼猴存在晝夜節(jié)律紊亂問題，科學(xué)家用檢測設(shè)備監(jiān)測實(shí)驗(yàn)猴，通過行為學(xué)分析檢測其是否明顯表現(xiàn)出睡眠紊亂的癥狀，對(duì)照組的設(shè)置應(yīng)為_____。在研究人類疾病致病機(jī)制、研發(fā)人類新藥時(shí)，選用“模型猴”更優(yōu)于“模型鼠”的原因是_____。23、下圖是某同學(xué)設(shè)計(jì)的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請?jiān)O(shè)計(jì)簡單的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般以天然存在的______發(fā)酵，品質(zhì)不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質(zhì)較高。自制的果酒并非商品意義上的產(chǎn)品，在實(shí)際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，觀察并統(tǒng)計(jì)到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個(gè)，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個(gè)。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時(shí)，操作上的最主要的區(qū)別是______。評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題，共20分)24、啟動(dòng)子可分為組成型啟動(dòng)子和誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。35S啟動(dòng)子是組成型啟動(dòng)子，能夠持續(xù)、高效地啟動(dòng)目的基因在植物各種組織中表達(dá)，但往往也會(huì)阻礙植物的生長發(fā)育；Rd29A啟動(dòng)子是一種逆境誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。沙冬青脫水素基因（AmDHN基因）能使植株具有較強(qiáng)的抗旱作用?？蒲腥藛T構(gòu)建Rd29A啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)AmDHN基因表達(dá)的載體，過程如下圖。再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化“敖漢苜?！迸嘤秃敌缕贩N，以期在干旱地區(qū)發(fā)展苜蓿產(chǎn)業(yè)。請回答下列問題：。限制酶BclⅠSacⅠBamHⅠPstⅠSmaⅠ識(shí)別序列切割位點(diǎn)T↓GATCAGAGCT↓CG↓GATCCCTGCA↓GCCC↓GGG

注：neor是新霉素抗性基因；aadA是鏈霉素抗性基因。

（1）Rd29A啟動(dòng)子的基本組成單位是_________；能識(shí)別啟動(dòng)子的酶是_________。

（2）科研人員擴(kuò)增Rd29A啟動(dòng)子所設(shè)計(jì)的引物如下，根據(jù)引物的堿基序列及限制酶的識(shí)別序列分析，構(gòu)建載體2時(shí)選用的限制酶是_________。

上游引物P1:5'-GACCCGGGTTTCCAAAGATTTTTTTC-3'

下游引物P2:5'-GAGAGCTCTGGGGTTTTGCTTTTGAATGT-3'

（3）選用_________酶切割載體1、2，構(gòu)建載體3的成功率較高。研究人員在保存目的基因AmDHN時(shí)，構(gòu)建載體4導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)有_________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達(dá)④方便取用。

（4）載體5需先轉(zhuǎn)入_________后再轉(zhuǎn)化苜蓿，轉(zhuǎn)化后應(yīng)在培養(yǎng)基中添加_________篩選轉(zhuǎn)化成功的愈傷組織。

（5）為檢測轉(zhuǎn)基因苜蓿中AmDHN基因的轉(zhuǎn)錄水平；挑選10株轉(zhuǎn)基因植株，利用自來水和20%PEG（模擬干旱條件）處理8h，提取RNA通過RT-PCR檢測AmDHN基因和MtActin基因（一種骨架蛋白基因）的表達(dá)水平，其結(jié)果如下圖：

①選擇MtActin基因轉(zhuǎn)錄水平作為參照的依據(jù)是MtActin基因在各種細(xì)胞中表達(dá)相對(duì)恒定。

②自來水處理和20%PEG條件下的AmDHN基因表達(dá)水平的差異說明_________。25、根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)；回答下列問題：

(1)限制性內(nèi)切核酸酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有__________和___________。

(2)下圖這種限制性內(nèi)切核酸酶的切點(diǎn)在__________，形成__________個(gè)黏性末端。由圖可知限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別特點(diǎn)是___________。

(3)按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即___________DNA連接酶和___________DNA連接酶。

(4)限制酶EcoRI來自大腸桿菌卻不切割細(xì)菌本身的DNA，可能的原因是___________；用限制酶EcoRI處理煙草花葉病毒的核酸，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物，理由是__________。

(5)基因工程中除質(zhì)粒外，__________和__________也可作為載體。26、第一代DNA測序技術(shù)是由桑格等科學(xué)家發(fā)明的；又稱為鏈終止法測序，科學(xué)家用該技術(shù)測定了噬菌體X174的基因組序列，操作流程如下圖所示，回答下列問題：

(1)將碎片化的DNA片段連接到質(zhì)粒載體中，需要用到______、_______等工具酶。

(2)為保證放射自顯影觀察條帶，應(yīng)選用_______（填“18O”或“32P”）標(biāo)記ddNTP。

(3)在凝膠電泳中DNA分子的遷移速率與DNA分子的_______、_____有關(guān)。

(4)ddNTP法循環(huán)測序中，用到PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是______，加入ddNTP會(huì)使PCR反應(yīng)終止的原因可能是______。27、硒作為生物體內(nèi)的微量元素；具有抗氧化；增強(qiáng)抵抗力等功能，是生物體內(nèi)不可或缺的。研究人員以從實(shí)驗(yàn)室冷藏的饅頭上提取的酵母作為出發(fā)菌株，利用紫外線進(jìn)行物理誘變以篩選富硒能力強(qiáng)的菌株?；卮鹣铝袉栴}：

(1)酵母菌細(xì)胞呼吸的類型屬于___________型。研究人員挑選饅頭酵母接種到30mL選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，培養(yǎng)基中需要添加的物質(zhì)主要有____________。將錐形瓶在180r/min的恒溫?fù)u床上培養(yǎng)，搖床培養(yǎng)有助于加速培養(yǎng)液中酵母菌的繁殖，原因是___________（答出一點(diǎn)即可）；搖床培養(yǎng)后可添加，以進(jìn)行梯度稀釋獲得酵母菌懸液。

(2)將制成的酵母菌懸液用紫外線誘變后，實(shí)驗(yàn)人員采用梯度稀釋法對(duì)誘變菌種稀釋105倍，再分別將0.1mL稀釋液涂布在3個(gè)牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上，三個(gè)平板上統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為251，265和276，則原酵母菌懸液中每10mL含有的酵母菌個(gè)數(shù)為____________。為了計(jì)算紫外線誘變的致死率，應(yīng)設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，對(duì)照實(shí)驗(yàn)的處理方式為___________。

(3)富硒酵母是制作果酒的優(yōu)良菌株，在制作果酒的過程中密封不嚴(yán)會(huì)導(dǎo)致果酒變酸，其原因是___________；工業(yè)發(fā)酵時(shí)，培養(yǎng)富硒酵母的培養(yǎng)基中還需要添加一定量的抗生素，以___________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。生物武器的特點(diǎn)：1、單位面積效應(yīng)大；2、有特定的傷害對(duì)象；3、具有傳染性；4、危害時(shí)間久；5、不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；6、使用者本身易受傷害；7、生物武器造價(jià)低，技術(shù)難度不大，隱秘性強(qiáng)，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。

【詳解】

①人類從來沒有接觸過這種病菌；可以讓大批被感染者突然發(fā)病，①正確；

②由于從來沒有接觸過這種病菌；故該病無藥可醫(yī)，②正確；

③生物武器使用時(shí)不易控制；使用不當(dāng)可危害本方安全，故施放國的人也會(huì)感染，③錯(cuò)誤，D正確。

故選D。2、C【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過程：

（1）卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；

（2）桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎（之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞）；

（3）囊胚：細(xì)胞開始分化；其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔，囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化；

（4）原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層；下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔，細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度。

【詳解】

A；卵裂期細(xì)胞分裂方式為有絲分裂；A錯(cuò)誤；

B；胚胎總體積不變甚至略微減小；B錯(cuò)誤；

C；隨著細(xì)胞分裂；細(xì)胞數(shù)目增多，每個(gè)細(xì)胞的DNA含量不變，但胚胎總DNA增加，C正確；

D；卵裂期沒有吸收外來的有機(jī)物；消耗的是細(xì)胞中原有的有機(jī)物，因此，胚胎有機(jī)物總量減少，D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】3、B【分析】【分析】

1；微生物的篩選與分離過程一般是：樣品取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)（或劃線培養(yǎng)）和篩選菌株。

2；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是防止雜菌的污染；無菌技術(shù)的主要內(nèi)容：①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

【詳解】

A；培養(yǎng)基應(yīng)該先滅菌；然后再分裝到培養(yǎng)皿中，A錯(cuò)誤；

B；轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線；B正確；

C；接種后的培養(yǎng)皿須放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；C錯(cuò)誤；

D；微生物培養(yǎng)過程中觀察的間隔時(shí)間不能太長；適宜條件下一般不超過24h，D錯(cuò)誤。

故選B。4、C【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；PCR技術(shù)可用于目的基因的獲取、擴(kuò)增目的基因以及目的基因的檢測等；A錯(cuò)誤；

B；分析題意可知；本技術(shù)結(jié)果是提高乙醇的產(chǎn)率，即未轉(zhuǎn)基因之前也可產(chǎn)生乙醇，故不能根據(jù)是否產(chǎn)生乙醇篩選含有質(zhì)粒的大腸桿菌，B錯(cuò)誤；

C；分析題意；本技術(shù)是將運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌的丙酮酸脫羧酶基因和乙醇脫氫酶基因?qū)氪竽c桿菌，構(gòu)建新的乙醇合成途徑，而基因的表達(dá)產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)（酶的本質(zhì)多數(shù)是蛋白質(zhì)），故可通過測定酶活性檢測目的基因的表達(dá)水平，C正確；

D；結(jié)合題意可知；經(jīng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)后顯著提高了產(chǎn)乙醇效率，乙醇是無氧呼吸的產(chǎn)物，故推測產(chǎn)乙醇重組大腸桿菌的無氧呼吸增強(qiáng)，D錯(cuò)誤。

故選C。5、D【分析】【分析】

分析題圖：圖示是利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用白蛋白的流程圖；其中①表示卵細(xì)胞的采集和培養(yǎng)；②表示精子的采集和獲能；③表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；④表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；⑤表示胚胎移植。

【詳解】

A；已知白蛋白基因的堿基序列；可通過PCR技術(shù)等人工合成的方法獲取目的基因，A正確；

B；③表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；得到的表達(dá)載體包括目的基因、乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因，B正確；

C；過程⑤表示胚胎移植；移植之前需選取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析、性別鑒定等，C正確；

D；促性腺激素可促進(jìn)排卵；進(jìn)行胚胎移植之前不需要對(duì)代孕奶山羊C進(jìn)行促排卵，因此不需要對(duì)其用促性腺激素處理，D錯(cuò)誤。

故選D。二、多選題(共8題，共16分)6、A:C【分析】【分析】

（1）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖；誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞，主要用于制備單克隆抗體。

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

A；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺(tái)病毒）等；A正確；

B；兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞；骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無法生長，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長，B錯(cuò)誤；

C；因每個(gè)免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體；因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進(jìn)一步通過專一抗體陽性檢測，把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的；D錯(cuò)誤。

故選AC。

【點(diǎn)睛】7、A:D【分析】【分析】

1；DNA一般是雙螺旋結(jié)構(gòu)；限制酶可以識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列；并在每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割。

2；圖1中SaLl有3個(gè)識(shí)別位點(diǎn)；能將DNA片段切成4段，Xhol有2個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，能將DNA片段切成3段。

【詳解】

A；限制酶識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列；不同的限制酶能識(shí)別不同的脫氧核苷酸序列，A錯(cuò)誤；

B；Sall將DNA片段切成4段；Xhol將DNA片段切成3段，根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為Sall，泳道②為XhoⅠ，B正確；

C；同種限制酶切割出的DNA片段；具有相同的粘性末端，再用DNA連接酶進(jìn)行連接，可以構(gòu)成重組DNA，C正確；

D；限制酶切割雙鏈DNA；酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA，D錯(cuò)誤。

故選AD。8、B:C:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中①表示將目的基因?qū)朕r(nóng)桿菌；②表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株。

【詳解】

A；探針是指用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段；因此要以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針，而不是將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針，A錯(cuò)誤；

B；可用DNA分子雜交技術(shù)；即以Luc基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針進(jìn)行DNA分子雜交，B正確；

C；用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交；即以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交，C正確；

D；檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)；由圖可知B基因與Luc基因連接形成B-Luc融合基因，因此可通過Luc基因表達(dá)，檢測加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光，D正確。

故選BCD。9、C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。

基本流程：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程可以通過改造基因來定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)；A正確；

B；因?yàn)榛蛑笇?dǎo)蛋白質(zhì)的合成；所以改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)，B正確；

C；改造后的中華鱘具有新的性狀；但其和現(xiàn)有中華鱘之間沒有生殖隔離，仍是同一物種，C錯(cuò)誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是基因；可以遺傳給子代，因此改造后的中華鱘的后代也具有改造的蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。

故選CD。10、A:B:C【分析】【分析】

聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯；要從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種，首先要進(jìn)行目的菌株的篩選，可將咸湖水接種在含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，篩選培養(yǎng)得到嗜鹽細(xì)菌；然后，從選擇培養(yǎng)基上挑選多個(gè)單菌落分別進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基；最后檢測嗜鹽細(xì)菌的數(shù)目和PHA的產(chǎn)量，選擇PHA產(chǎn)量最高的嗜鹽細(xì)菌作為目的菌株。

【詳解】

A；PHA是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯；要篩選嗜鹽細(xì)菌，步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，A錯(cuò)誤；

B；步驟③培養(yǎng)基濃度過高；會(huì)導(dǎo)致菌體失水死亡，不利于嗜鹽細(xì)菌的生長，B錯(cuò)誤；

C；步驟④擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基；液體培養(yǎng)基中無需加入瓊脂，C錯(cuò)誤；

D；要挑選高產(chǎn)聚羥基脂肪酸酯（PHA）的嗜鹽菌；挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量，進(jìn)行比較，D正確。

故選ABC。11、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

A；限制酶可識(shí)別并在特定位置水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵；A正確；

B；DNA連接酶可以連接黏性末端相同；即末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段之間的磷酸二酯鍵，B正確；

C；DNA聚合酶只能從核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C錯(cuò)誤；

D；標(biāo)記基因可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來；故作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因，D正確。

故選ABD。12、B:D【分析】【分析】

細(xì)胞核移植是指通過顯微操作將一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移植到一個(gè)去核的卵母細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)過程。體細(xì)胞核移植技術(shù)包括核供體細(xì)胞與受體細(xì)胞的準(zhǔn)備；細(xì)胞核移植、重構(gòu)胚的融合、激活、培養(yǎng)和移植等過程。

【詳解】

A；克隆豬的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來自提供細(xì)胞核的胎豬成纖維細(xì)胞；克隆豬的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自去核的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；過程①不僅需要在培養(yǎng)液中添加毛殼素；還需要在培養(yǎng)液中添加動(dòng)物血清或者血漿，提供一個(gè)類似生物體內(nèi)的環(huán)境，B正確；

C；過程④使用顯微操作技術(shù)使胎豬成纖維細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合；C錯(cuò)誤；

D；過程⑤是胚胎移植；胚胎移植時(shí)供體與受體的生理狀態(tài)要相同，否則無法成功妊娠，D正確。

故選BD。13、C:D【分析】【分析】

單基因遺傳病指的是受一對(duì)等位基因控制的遺傳?。豢捎肈NA分子雜交技術(shù)進(jìn)行基因檢測進(jìn)而鑒定某胚胎是否攜帶有某致病基因；DNA分子雜交技術(shù)利用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的致病基因片段作為基因探針，通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與待測分子進(jìn)行配對(duì)，能配對(duì)的說明某胚胎攜帶某致病基因存在。

【詳解】

A；該實(shí)例中；患者因缺乏尿黑酸氧化酶，使得尿黑酸不能被氧化分解而導(dǎo)致尿液呈黑色，即基因通過控制酶的合成，進(jìn)而控制代謝過程，從而間接控制生物的性狀，A錯(cuò)誤；

B、遺傳家系譜圖中，不患黑尿癥的Ⅰ1與Ⅰ2生下了患黑尿癥的女兒Ⅱ3；確定黑尿癥屬于常染色體隱性遺傳，B錯(cuò)誤；

C、假設(shè)控制該病的基因?yàn)锳a，該病在人群中的發(fā)病率約為1/1000000，即aa概率為1/1000000，則a占1/1000，A占999/1000，Aa的概率為2×1/1000×999/1000=1998/1000000，因此人群中正常人為雜合子Aa的概率為（2×1/1000×999/1000）÷（2×1/1000×999/1000+999/1000×999/1000）=2/1001，Ⅱ4的基因型為1/3AA或2/3Aa，Ⅱ5為正常人，為雜合子的概率為2/1001，Ⅱ4和Ⅱ5婚配；所生男孩患黑尿癥的概率約為2/3×2/1001×1/4=1/3003，C正確；

D、由前面的分析可知，Ⅰ1和Ⅰ2為雜合子，Ⅱ3為患者，均含有該致病基因，若用該致病基因制作的探針檢測，則Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定會(huì)出現(xiàn)雜交帶；D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共6題，共12分)14、略

【解析】①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體15、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)16、略

【解析】①.接種②.平板劃線法③.稀釋涂布平板法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫人工合成PCR技術(shù)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因轉(zhuǎn)移基因擴(kuò)增醫(yī)藥衛(wèi)生農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè)環(huán)境保護(hù)蘇云金桿菌農(nóng)藥的用量生產(chǎn)成本農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染。19、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物和蠕蟲等，其中以細(xì)菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個(gè)宿主轉(zhuǎn)移到另一個(gè)宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時(shí)近年來由于溫室效應(yīng)加劇，也會(huì)使致病微生物的繁殖周期變短，可能會(huì)使危害性更大，因此我們需要積極開展科學(xué)研究，掌握防范的措施和防范，實(shí)現(xiàn)最好的防護(hù)，目前對(duì)致病微生物最好的防護(hù)措施還是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物和蠕蟲等，其中以細(xì)菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對(duì)致病微生物最好的防護(hù)措施還是疫苗的研究和使用。四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)20、略

【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基：人為提供有利于目的菌株生長的條件；同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基。

2；根據(jù)題意分析；金黃色葡萄球菌可破壞哥倫比亞血平板上菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。

【詳解】

（1）金黃色葡萄球菌具耐高鹽的特性；可用7.5％NaCl（高鹽）肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，可進(jìn)一步提高金黃色葡萄球菌的濃度。

（2）振蕩培養(yǎng)的目的是使微生物與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，增加O2濃度；更有利于微生物生長。

（3）因?yàn)闊o菌脫纖維羊血上有紅細(xì)胞；而高溫會(huì)破壞紅細(xì)胞。故添加無菌脫纖維羊血是在高壓蒸汽滅菌之后。

（4）根據(jù)圖中最右邊的圖示可知；接種方法是平板劃線法。已知金黃色葡萄球菌可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。故若要初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，則血平板上要均出現(xiàn)周圍出現(xiàn)透明溶血圈的菌落。本實(shí)驗(yàn)缺乏對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)不完善，還需要設(shè)置不加（鮮）牛奶但其他操作和培養(yǎng)條件均相同的對(duì)照組。

【點(diǎn)睛】

本題旨在考查學(xué)生理解選擇培養(yǎng)基的原理和應(yīng)用、平板劃線法的使用要點(diǎn)，把握知識(shí)的內(nèi)在聯(lián)系并應(yīng)用相關(guān)知識(shí)綜合解決問題的能力?！窘馕觥窟x擇金黃色葡萄球菌的濃度使微生物與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸/增加O2之后防止高溫破壞紅細(xì)胞平板劃線法周圍出現(xiàn)透明溶血圈設(shè)置不加（鮮）牛奶但其他操作和培養(yǎng)條件均相同的對(duì)照組21、略

【分析】【分析】

微生物的接種方法包括稀釋涂布平板法和平板劃線法，二者都可以用于篩選單菌落，但是前者可以用于計(jì)數(shù)，后者不行。培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。微生物培養(yǎng)基需要為微生物繁殖提供碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足微生物對(duì)特殊營養(yǎng)物質(zhì)，pH和O2的需求。稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。利用稀釋涂布平板法得到數(shù)值往往偏小，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

【詳解】

（1）在實(shí)驗(yàn)室分離純化培養(yǎng)微生物時(shí)；常見的對(duì)照實(shí)驗(yàn)有兩種，當(dāng)用不同的培養(yǎng)基作為自變量進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)時(shí)，常用來檢測所配制的培養(yǎng)基是否具有選擇作用，例如以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，可以后者篩選分解尿素的微生物，驗(yàn)證其起到選擇培養(yǎng)基的作用；當(dāng)用同一種培養(yǎng)基進(jìn)行接種和不接種微生物的對(duì)照實(shí)驗(yàn)時(shí)，則可檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格，若未接種的空白培養(yǎng)基上生長出部分菌落，說明該培養(yǎng)基滅菌不合格。

（2）由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知；當(dāng)碳源為葡萄糖時(shí)，菌株C的細(xì)胞干重最大，為3.12g/L，因此，菌株C生長的最適碳源是葡萄糖。當(dāng)碳源為制糖廢液時(shí)，S產(chǎn)量最大，為0.18g/L，因此菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是制糖廢液。

微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源；氮源、無機(jī)鹽、水等。

（3）碳源為淀粉時(shí)菌株C細(xì)胞干重為0.01g/L；幾乎不能生長，其直接原因是該菌細(xì)胞內(nèi)不含有分解淀粉的酶，因此無法分解淀粉作為碳源，根本原因是菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

（4）若要探究生產(chǎn)S的最適制糖廢液的濃度；則實(shí)驗(yàn)自變量為不同濃度的制糖廢液，因變量為S產(chǎn)量，因此需要配制一系列不同濃度梯度的制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基，接種菌株C，然后將其置于相同且適宜的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，一段時(shí)間后，測定并比較不同濃度制糖廢液中的S產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。

（5）微生物接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者可以用于計(jì)數(shù)，前者不行，在進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此該計(jì)數(shù)方法得到的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少?！窘馕觥?1)選擇培養(yǎng)基是否具有選擇性接種與不接種。

(2)葡萄糖制糖廢液氮源；無機(jī)鹽、水。

(3)菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

(4)分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基；培養(yǎng)菌株C，其他條件相同且適宜，一段時(shí)間后，測定并比較不同濃度制糖廢液中的S的產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對(duì)應(yīng)的制糖廢液濃度即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。

(5)稀釋涂布平板法當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落22、略

【分析】【分析】

1；克隆動(dòng)物概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

2；原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。

3；動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。原因：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低；恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。

【詳解】

（1）體細(xì)胞分化程度高；表現(xiàn)全能性困難，而胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性容易，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。

（2）去核前應(yīng)保證采集的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂II中期；去核是指去除紡錘體—染色體復(fù)合物；核移植前需用滅活的仙臺(tái)病毒對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行短暫處理，在此過程中，滅活的仙臺(tái)病毒的作用是誘導(dǎo)體細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合。目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)普遍使用的去核方法是顯微操作法，核移植的具體操作是將體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞，從而得到重構(gòu)胚，使其具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力；體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入動(dòng)物血清等一些天然成分，并將其置于含有95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)基，并創(chuàng)造無菌；無毒環(huán)境。胚胎移植前還需對(duì)代孕母猴進(jìn)行同期發(fā)情處理，這樣可以使移植的胚胎獲得相同的生理環(huán)境，以保證胚胎能夠繼續(xù)發(fā)育。

（3）通過核移植技術(shù)獲得了5只克隆猴，理論上這5只克隆猴之間的細(xì)胞核基因型相同，細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞；為了驗(yàn)證這5只基因敲除獼猴是否存在晝夜節(jié)律紊亂問題，該實(shí)驗(yàn)的自變量是BMAL1基因是否敲除，因變量是是否出現(xiàn)睡眠紊亂癥狀。所以對(duì)照組的設(shè)置應(yīng)為與克隆獼猴生理狀態(tài)相同的正常的獼猴個(gè)體(或不存在BMAL1缺失）。在研究人類疾病致病機(jī)制、研發(fā)人類新藥時(shí)，因?yàn)楹锱c人的親緣關(guān)系更近，故選用“模型猴”更優(yōu)于“模型鼠”?！窘馕觥?1)胚胎細(xì)胞分化程度低；表現(xiàn)全能性相對(duì)容易。

(2)MⅡ紡錘體-染色體復(fù)合物誘導(dǎo)細(xì)胞融合發(fā)育成完整個(gè)體無菌；無毒的環(huán)境；溫度、pH、滲透壓，氣體環(huán)境。

(3)相同與克隆猴生理狀態(tài)相同的正常個(gè)體（或不存在BMAL基因缺失個(gè)體）猴與人的親緣關(guān)系更近23、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進(jìn)行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；變成灰綠色，該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精，因此實(shí)驗(yàn)自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對(duì)照組中應(yīng)加入酒精作為陽性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)遵循等量原則；單一變量原則等，因此實(shí)驗(yàn)思路是：取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實(shí)驗(yàn)組，B試管中各加入2ml酒精，作為對(duì)照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗(yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般不進(jìn)行嚴(yán)格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種?，F(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經(jīng)過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/1mL=1個(gè)中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實(shí)驗(yàn)中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關(guān)閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣?！窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實(shí)驗(yàn)思路：取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時(shí)需關(guān)閉充氣口，釀醋時(shí)則需向充氣孔中充入無菌空氣五、綜合題(共4題，共20分)24、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1；目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2；基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4；目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動(dòng)子；終止子都是一段DNA序列；故其基本單位為脫氧核苷酸。啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和的結(jié)合位點(diǎn)，能啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。

（2）分析引物的堿基序列和限制酶識(shí)別序列切割位點(diǎn)；引物5'端是SmaⅠ的識(shí)別序列CCCGGG和SacⅠ的識(shí)別序列GAGCTC，SmaI和SacI能識(shí)別并切割質(zhì)粒，故構(gòu)建載體2時(shí)選用的限制酶是SmaⅠ和SacⅠ。

（3）構(gòu)建載體③時(shí)要將35S啟動(dòng)子切掉；將Rd29A啟動(dòng)子連接在T-DNA上，故由載體1和2可得，選用BclⅠ酶和SacⅠ酶成功率較高。構(gòu)建載體4導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)是可以穩(wěn)定保存；準(zhǔn)確復(fù)制、方便取用。故選①②④。

（4）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，故載體5需先轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌后再轉(zhuǎn)化苜蓿，載體5含有的neor是新霉素抗性基因；是標(biāo)記基因，轉(zhuǎn)化后應(yīng)在培養(yǎng)基中添加新霉素篩選轉(zhuǎn)化成功的愈傷組織。

（5）MtActin基因（一種骨架蛋白基因）在各種細(xì)胞中都有表達(dá)并且表達(dá)相對(duì)恒定；故選MtActin基因轉(zhuǎn)錄水平作為參照。自來水條件下AmDHN基因不轉(zhuǎn)錄，20%PEG條件下AmDHN基因轉(zhuǎn)錄，說明干旱能誘導(dǎo)Rd29A啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖示，考查基因工程的原理和技術(shù)，意在考查學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解與掌握程度，培養(yǎng)了學(xué)生分析圖示、獲取信息、解決問題的綜合應(yīng)用的能力。【解析】脫氧核苷酸RNA聚合酶SmaI和SacIBclI和SacI①②④農(nóng)桿菌新霉素干旱能誘導(dǎo)Rd29A啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄25、略

【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

(1)

限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；用于切割DNA分子，經(jīng)限制性內(nèi)切核酸酶切割后能形成兩種類型的末端，即平末端和黏性末端。

(2)

限制酶能識(shí)別特定的核苷酸序列；并在特定的位點(diǎn)切割，所以該限制酶能識(shí)別的堿基序列是ACCGGT，切點(diǎn)在C和A之間，形成2個(gè)黏性末端，其特點(diǎn)是堿基序列完全相同。由圖可知，此限制酶識(shí)別特點(diǎn)是只能識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中