B淋巴細胞發(fā)育課件

B淋巴細胞發(fā)育B淋巴細胞的分化發(fā)育B細胞亞群B細胞膜表面分子B細胞檢測方法B淋巴細胞發(fā)育B細胞的發(fā)育過程?

抗原非依賴階段：在胚肝或骨髓淋巴干細胞原B細胞前B細胞未成熟細胞成熟B細胞Ig基因重排sIgM+?

抗原依賴階段：外周淋巴器官成熟B細胞sIgM+sIgD+sIgM+sIgD+活化B細胞sIgM+sIgD+抗原記憶B細胞sIgG+sIgA+漿細胞胞漿IgB淋巴細胞發(fā)育B細胞在中樞免疫器官的分化發(fā)育過程B細胞在骨髓（胎肝或脾）的發(fā)育也同樣經歷陽性選擇和陰性選擇，通過這兩次選擇大約75%的B細胞經歷凋亡過程。只有少量經歷功能性免疫球蛋白基因重排的B細胞進入外周淋巴器官。B淋巴細胞發(fā)育（1）原B細胞（proB）原B細胞階段首先發(fā)生Ig重鏈DHJH的重排，編碼無V片段基因產物的μ鏈。輕鏈仍處于胚系（germline)狀態(tài).，但出現替代輕鏈。DHJHCμ重鏈輕鏈（胚系）VH

VL

JHCμ5基因編碼DHJHCμVpro-B基因編碼5蛋白編碼Vpro-B蛋白替代BCRB淋巴細胞發(fā)育B淋巴細胞發(fā)育（2）前B細胞（pre-B）早期DHJHCμ重鏈VH

編碼完整μ鏈輕鏈（胚系）VL

JHCμ5基因編碼5蛋白編碼Vpro-B蛋白前受體前受體對B細胞分化早期起著十分重要作用，它介導的信號可導致：A、細胞大量增殖；B、RAG-1/RAG-2的表達短暫下調；C、上述重排終止;D、等位基因排斥B淋巴細胞發(fā)育晚期前B細胞DHJHCμ重鏈VH

編碼完整μ鏈輕鏈（重排）VL

JHCμ5基因編碼5蛋白編碼Vpro-B蛋白前受體此階段若重鏈與輕鏈發(fā)生無功能的基因重排或發(fā)生錯位時，這些細胞將因無功能性IgM分子而發(fā)生凋亡。即B細胞的陽性選擇.B淋巴細胞發(fā)育DHJHCμ重鏈VH

編碼完整μ鏈輕鏈VL

JHCμBCR編碼完整輕鏈（3）不成熟B細胞這個階段的B細胞表面最早表達sIgM分子。此時若受到抗原的刺激，易致膜受體交聯而產生負信號，使B細胞不能進一步分化成熟。這可能是自身反應性B細胞克隆發(fā)生流產，形成B細胞耐受性的機制之一。即B細胞的陰性選擇.B淋巴細胞發(fā)育（4）成熟B細胞DHJHCμ重鏈出現類別轉換VH

編碼完整μ/δ鏈輕鏈VL

JHCμsIgM/sIgD編碼完整輕鏈這個階段的B細胞表面同時表達sIgM及sIgD分子,稱為處女B細胞。此時若受到抗原的刺激，B細胞可得到充分活化。B淋巴細胞發(fā)育B淋巴細胞發(fā)育骨髓中B細胞分化發(fā)育的微環(huán)境基質細胞（stromacell)：包括巨噬細胞、血管內皮細胞、纖維母細胞等。作用方式：基質細胞直接作用；其分泌的細胞因子及細胞外基質。功能：調節(jié)造血干細胞的定向、增殖、分化和成熟造血細胞的遷出。B淋巴細胞發(fā)育細胞因子IL-3和SCF是造血干細胞向未定向原B細胞分化所必需的細胞因子。IL-7是原B細胞（proB)和前B細胞（preB)的生長因子。Kee發(fā)現，IL-11+IL-7+SCF三種細胞因子在無基質細胞的條件下，即可誘導干細胞分化為漿細胞。B淋巴細胞發(fā)育調控Ig基因重排及轉錄的一些胞內蛋白

參與調控Ig基因重排的胞內蛋白也與B細胞分化階段相一致的順序改變。包括：A、重組活化基因1/2（重鏈和輕鏈重排時表達）（recombinationactivationgene1and2,RAG1/2）B、末端脫氧核苷酸轉移酶（重鏈重排時表達）（terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT）C、E2AD、轉錄因子B細胞特異性活化蛋白（BSAP）E、Oct-2及NF-κB等B淋巴細胞發(fā)育A、重組活化基因1/2（recombinationactivationgene1and2,RAG1/2）B淋巴細胞發(fā)育B、末端脫氧核苷酸轉移酶（terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT）TdTDt/A/C/GTPDt/A/C/GTPAGCTAGCTAG連接酶AGCTAGCTAG隨機核苷酸加減B淋巴細胞發(fā)育轉錄因子IkarosPU.1E2A+Pax5細胞因子IL-3SCFEBFIL-7-Pax5SCproBpreBBsIgMTNKDC嗜中性粒細胞等C、B細胞分化需要pax5B淋巴細胞發(fā)育B細胞在外周淋巴細胞中的分化發(fā)育過程

B細胞在骨髓成熟后，遷移至各個外周淋巴器官，構成外周B細胞庫。這些大多是未接觸過抗原的“處女”細胞。當接受抗原后可發(fā)生活化、增殖，大部分分化為漿細胞，小部分停止分化為記憶性B細胞。接受抗原刺激后的活化B細胞，大量增殖，并經歷體細胞突變、親和力成熟和Ig同型轉換等過程。B淋巴細胞發(fā)育A、B細胞對TI-Ag的應答在外周淋巴細胞的胸腺依賴區(qū)，產生IgM。

副皮質區(qū)AgB細胞活化IgMIL-5B淋巴細胞發(fā)育B、B細胞對TD-Ag的應答初次應答：在胸腺依賴區(qū)AgB細胞活化、增殖、分化漿細胞IgM（親和力低；量少）再次應答：在胸腺非依賴區(qū)少部分進入初級淋巴濾泡，并大量增殖。體細胞突變、親和力成熟、Ig同型轉換記憶性B細胞壽命較長漿細胞離開生發(fā)中心進入再循環(huán)AgIgG為主（親和力高；量大）生發(fā)中心B淋巴細胞發(fā)育生發(fā)中心的形成分三個階段1、中央母細胞階段

2、中央細胞階段3、記憶性/效應性B細胞階段活化B細胞漿細胞遷移克隆增殖增殖中央細胞，形成基底亮區(qū)（抗原選擇）大部分凋亡次級母細胞，形成頂亮區(qū)（發(fā)生類別轉換）高親和力FDCs/Th中央母細胞，形成暗區(qū)（體細胞高突變）記憶性B細胞/長命漿細胞，進入外周血抗原B淋巴細胞發(fā)育生發(fā)中心暗區(qū)（增殖、體細胞突變、類別轉換）基底亮區(qū)（凋亡、生存選擇）頂亮區(qū)（生存細胞成熟）記憶細胞漿細胞前體BB淋巴細胞發(fā)育關于生發(fā)中心的DC及T細胞１、ＤＣ：來源：不明表面標志：IgFc、C3受體,共刺激受體.功能：表面的IgFc、C3受體與Ag-Ab復合物結合，可長期潴留Ag，對維持免疫記憶及血中抗體的濃度有重要作用。２、Ｔ細胞：占生發(fā)中心的５％，是抗原特異性的，通過直接接觸和分泌細胞因子作用與Ｂ細胞，并發(fā)生類別轉換。B淋巴細胞發(fā)育體細胞超突變即重排后的V/D和V/D/J外顯子發(fā)生高頻率的點突變，常伴有親和力成熟。特點：1、只有在次級淋巴結；抗原刺激下；有T細胞輔助2、突變頻率很高3、只發(fā)生在V區(qū)及其5’和3’的旁側區(qū)，不發(fā)生在C區(qū)4、主要為點突變5、與類別轉化無關B淋巴細胞發(fā)育抗原選擇基底亮區(qū)的中央細胞，由FDCs上的抗原對其選擇。高親和力：被選擇低親和力：凋亡免于凋亡的細胞需要兩種信號：第一信號：B細胞FDCs-Ag合成抗凋亡分子（BCL-2）第二信號：CD40-CD40LB淋巴細胞發(fā)育Ig類轉換μαγδε重組活化基因？V/D/JB淋巴細胞發(fā)育B淋巴細胞發(fā)育記憶性Ｂ細胞表達高親和力的ＢＣＲ，壽命長，是參與ＴＤ－Ａg的再次應答細胞，與靜止Ｂ細胞有明顯的差別。

Bm與Ｂr的不同點

特點Bm

Ｂr抗原激活易不易耐受不易易壽命較長較短分布再循環(huán)胸腺非依賴區(qū)表型

IgMhiIgDlo伴IgG/IgAIgMloCD21loCD44hiCD23-CD21hiCD44loCD23+B淋巴細胞發(fā)育二、Ｂ細胞亞群將Ｂ外周靜止Ｂ細胞分為兩群細胞，分別稱為Ｂ１和Ｂ２細胞，其中Ｂ２細胞為上述講的常規(guī)Ｂ２細胞。而Ｂ１細胞在個體發(fā)生、表型、分布及功能都與Ｂ２有明顯的不同。１、個體發(fā)育：

胚胎干細胞分化為Ｂ１細胞，定位于大網膜、胸腔及腸黏膜固有層,具有自我增殖的能力。胚肝分化為Ｂ２細胞，在骨髓發(fā)育，分布外周淋巴器官。B淋巴細胞發(fā)育２、Ｂ１細胞的表型根據細胞表面有無ＣＤ５分子，Ｂ１細胞可分為Ｂ１a和Ｂ１b.Ｂ１a、Ｂ１b和Ｂ２細胞亞群的表型表面標記Ｂ１aＢ１bB2

IgM+++++++IgD+/-+/-+++CD5+--CD11++-CD23--+CD44++-MHCⅡ++++++++B淋巴細胞發(fā)育3、Ｂ１的分布胚胎期：大網膜和肝臟新生期：脾臟、腹腔成年：腹腔及胸腔另外，Ｂ１細胞主要在胚胎期及新生期內出現，隨后為逐漸增多的Ｂ２細胞代替。胚胎的脾臟絕大多數為ＣＤ５＋Ｂ細胞，成年后僅有１０％－２５％B淋巴細胞發(fā)育４、Ｂ１細胞的功能功能還不完全清楚，一般認為有三方面。１、產生抗細菌抗體２、產生多反應性自身抗體３、產生致病性自身抗體參與非特異免疫抗感染免疫清除變性的自身抗原介導自身免疫性損傷B淋巴細胞發(fā)育5、Ｂ１細胞抗體應答的特點１、可通過表面抗原受體直接與多糖抗原交聯結合而被激活，ＩＬ－５等細胞因子可作為活化第二信號。２、４８小時之內即可產生以IgM為主的低親和性抗體。３、在增殖分化過程中不發(fā)生類別轉換。４、不產生免疫記憶。B淋巴細胞發(fā)育B-1細胞與B-2細胞的異同性質B-1B-2初次產生時間胎兒出生后更新方式自我更新骨髓產生自發(fā)性產生高低特異性多反應單特異性Ig同種性IgM為主IgG為主體細胞高頻突變低高對碳水化合物抗原應答是可能對蛋白質抗原的應答可能是B淋巴細胞發(fā)育三、Ｂ細胞的表面標志B淋巴細胞發(fā)育B淋巴細胞發(fā)育

B細胞重要膜分子1）B細胞抗原識別受體（BCR)

即SmIg(surfacemembraneimmunoglobulin)

B細胞特異標志

Ig

,Ig

(CD79a,CD79b)相當于CD3BCR復合物，胞漿區(qū)尾部含有ＩＴＡＭ。

BCR識別抗原特點:游離抗原,空間構像表位，無MHC限制性

B淋巴細胞發(fā)育B淋巴細胞發(fā)育2)B細胞活化輔助受體：

由CD19/ＣＤ２０／CD21/CD81/Leu13五種成分組成，促進B細胞活化。

CD19／ＣＤ２０／ＣＤ