抗體偶聯(lián)藥物

抗體偶聯(lián)藥物目錄定義原理對(duì)Ag、Ab、連接子和藥物分子的要求抗體的突變幾種ADC定點(diǎn)偶聯(lián)方法的比較連接方式ADC偶聯(lián)比的測(cè)定方法上市的藥品前景挑戰(zhàn)一、什么是ADC二、原理藥物分子藥物分子高毒性靶點(diǎn)分子量溶解度穩(wěn)定性三、對(duì)抗體、藥物、連接子、靶標(biāo)和抗原的要求藥物分子藥物分子高毒性靶點(diǎn)分子量溶解度穩(wěn)定性因?yàn)镮gG有限的腫瘤穿透能力、低抗原表達(dá)性、內(nèi)化效率不足和連接子代謝，均可能使細(xì)胞內(nèi)的毒素濃度降低。通常為IC50：藥物分子藥物分子高毒性靶點(diǎn)分子量溶解度穩(wěn)定性必須位于細(xì)胞內(nèi),若ADC無(wú)法轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)將嚴(yán)重影響藥物的有效性和毒性。在細(xì)胞外還可能影響，藥物解離后可能對(duì)旁邊的正常細(xì)胞有害。藥物分子藥物分子高毒性靶點(diǎn)分子量溶解度穩(wěn)定性藥物的分子量較小，從而減少發(fā)生免疫原性的風(fēng)險(xiǎn)；抗體的分子量也要很小，IgG抗體的分子量約為150kD，毛細(xì)管內(nèi)皮層和細(xì)胞外間隙難以透過(guò)如此巨大的抗體或偶聯(lián)分子，抗體的分子量太小，會(huì)影響其在體內(nèi)的半衰期。

藥物分子藥物分子高毒性靶點(diǎn)分子量溶解度穩(wěn)定性應(yīng)在水性緩沖溶液中具有適當(dāng)?shù)娜芙舛?，以便于偶?lián)抗體藥物分子藥物分子高毒性靶點(diǎn)分子量溶解度穩(wěn)定性負(fù)載應(yīng)在血漿中具有充分的穩(wěn)定性。美登素類(lèi)化合物1作用機(jī)制：通過(guò)抑制微管組裝來(lái)抑制細(xì)胞的分裂2DM1臨床研究發(fā)現(xiàn)：穩(wěn)定、非裂解的硫醚鍵連接子（MCC)具有高效的療效毒素主要在細(xì)胞增殖過(guò)程中發(fā)揮作用，對(duì)其非分裂和靜息的細(xì)胞沒(méi)有作用01與分子的疏水性有關(guān)（連接子也是疏水性的：在血液或代謝器官（肝臟、腎臟）中意外釋放游離型毒素可穿透細(xì)胞膜，并可能引起嚴(yán)重的副作用02耐藥腫瘤細(xì)胞可能會(huì)限制ADC的活性（由藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)或活性增加，加快疏水性化合物外排造成03作用微管的ADC藥物的缺陷目前開(kāi)發(fā)帶有負(fù)電荷α-磺酸基或極性短PEG的高度水溶性親水性連接子，以增加溶解性14

-Descriptionofthesubcontents1.在血漿中穩(wěn)定，避免細(xì)胞毒素提前釋放損傷正常的組織或細(xì)胞ptionofthesubcontents2.當(dāng)ADCs被內(nèi)吞到靶細(xì)胞后，能夠快速釋放藥物（非必須）

-Descriptionofthesubcontents-Descriptionofthesubcontents3.抗體的連接位點(diǎn)和連接位點(diǎn)的數(shù)量要明確且合適

-Descriptionofthesubcontents-Descriptionofthesubcontents23

4.連接子的分子量和極性escriptionofthesubcontents-Descriptionofthesubcontents連接子5、親和素和生物素能否作為連接臂？③一定的內(nèi)吞速率①抗原大量特異性的表達(dá)在靶細(xì)胞表面在正常組織或細(xì)胞表面不表達(dá)或少表達(dá)②抗原應(yīng)盡量不分泌，因?yàn)榉置谛涂乖膳c血液循環(huán)中抗體結(jié)合，從而導(dǎo)致與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的抗體減少④有合適的內(nèi)吞轉(zhuǎn)運(yùn)途徑要求

理想化的抗原

（四）理想化的抗體

靶向功能，能夠有效地將細(xì)胞毒分子輸送到靶細(xì)胞；

具有較低的免疫原性。

具有合適的連接位點(diǎn)，偶聯(lián)毒素后，不影響ADC的穩(wěn)定性、親和力、內(nèi)吞及藥效

④與靶細(xì)胞表面的抗原結(jié)合后，能夠誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)行內(nèi)吞作用，進(jìn)入胞內(nèi)，最終進(jìn)入溶酶體并導(dǎo)致細(xì)胞毒分子在胞內(nèi)的有效釋放；（內(nèi)化-流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)；細(xì)胞內(nèi)化后定位檢測(cè)-共聚焦顯微鏡）

⑤保持裸抗體全部或部分功能，如細(xì)胞介導(dǎo)的抗體依賴(lài)性細(xì)胞毒作用（ADCC)、補(bǔ)體依賴(lài)性細(xì)胞毒作用(CDC)，即裸抗體也是有效的藥物。四、抗體的突變?nèi)秉c(diǎn)：偶聯(lián)的藥物分子數(shù)目不定、位置不定和各種產(chǎn)物在體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)、藥效、安全性等問(wèn)題。方法：抗體進(jìn)行誘導(dǎo)突變，現(xiàn)有報(bào)道在抗體的特定部位設(shè)計(jì)丙氨酸定點(diǎn)突變成半胱氨酸、引入非天然氨基酸、酶法和二硫鍵改造法等，可以獲得固定偶聯(lián)比的ADC。五、幾種ADC定點(diǎn)偶聯(lián)的方法比較

連接方式

機(jī)制缺點(diǎn)改進(jìn)應(yīng)用SGN-75(抗CD70，Val-Cit-MMAF）肽鏈接血液的pH高于溶酶體內(nèi)的pH，溶酶體內(nèi)的蛋白水解酶在血液中的活性很低，ADC在胞內(nèi)被蛋白水解酶水解，釋放藥物藥物直接連接到肽連接子上，會(huì)導(dǎo)致蛋白水解釋放出細(xì)胞毒素藥物的氨基酸加合物，會(huì)降低細(xì)胞毒活性加入間隔基，常用是雙功能性對(duì)氨基芐醇基團(tuán)，他通過(guò)氨基與肽連接，形成酰胺鍵而含胺細(xì)胞毒性藥物側(cè)通過(guò)氨基甲酸酯官能團(tuán)與連接子（PABC)的芐基羥基相連。七、ADC藥物偶聯(lián)比的測(cè)定方法1、紫外可見(jiàn)分光光度法抗體為蛋白質(zhì),其含有苯環(huán)的氨基酸在280nm有其特征性的吸收峰；若藥物有紫外吸收其在特定的波長(zhǎng)產(chǎn)生消光系數(shù)，產(chǎn)生特征性的吸收峰。可以用雙波長(zhǎng)發(fā)測(cè)定藥物的偶聯(lián)比。2.液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定ADC藥物的偶聯(lián)比利用Ab、連接臂和藥物極性的不同，選用合適的流動(dòng)相，使其彼此分開(kāi)，然后分別流入質(zhì)譜儀，各樣品被離子化后，經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開(kāi)，經(jīng)檢測(cè)器得到質(zhì)譜圖，讀出其相對(duì)分子質(zhì)量，進(jìn)而測(cè)定其偶聯(lián)比。八、上市ADC藥品九、前景與挑戰(zhàn)

用于精確治療疾病，減少藥物在體內(nèi)的毒副作用

用于腫瘤的治療，特別是后期，減少對(duì)人體的傷害挑戰(zhàn)

ADCs產(chǎn)業(yè)化制備工藝復(fù)雜，包括重組抗體制備、化學(xué)藥物與抗體的偶聯(lián)反應(yīng)、ADCs的制劑與質(zhì)控等環(huán)節(jié)，任一環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題，都會(huì)影響其安全性和有效性。

ADCs中連接臂、抗體和藥物三者的連接效率和穩(wěn)定性

抗體與藥物的偶聯(lián)比不確定，影響藥物的療效④開(kāi)發(fā)不同作用機(jī)制的新型細(xì)胞毒素⑤ADCs藥物特殊靶點(diǎn)的尋找挑戰(zhàn)1、字體安裝與設(shè)置如果您對(duì)PPT模板中的字體風(fēng)格不滿(mǎn)意，可進(jìn)行批量替換，一次性更改各頁(yè)面字體。在“開(kāi)始”選項(xiàng)卡中，點(diǎn)擊“替換”按鈕右側(cè)箭頭，選擇“替換字體”。（如下圖）在圖“替換”下拉列表中選擇要更改字體。（如下圖）在“替換為”下拉列表中選擇替換字體。點(diǎn)擊“替換”按鈕，完成。272、替換模板中的圖片模板中的圖片展示頁(yè)面，您可以根據(jù)需要替換這些圖片，下面介紹兩種