第二章儀器檢測技術(shù)分光光度法講解

第二章儀器檢測技術(shù)分光光度法三、應(yīng)用1、定性（1）比較光譜吸收特征的一致性按質(zhì)量標準，將供試品與對照品用規(guī)定溶劑分別配成一定濃度的溶液，照紫外-可見分光光度法在規(guī)定波長范圍內(nèi)繪制吸收曲線，供試品和對照品的圖譜應(yīng)一致。所謂一致是指吸收曲線的峰位、峰形和相對強度均一致。例如地蒽酚軟膏的鑒別方法為：取含量測定項下的溶液，照紫外-可見分光光度法測定，供試品溶液在440~470nm波長范圍內(nèi)的吸收光譜應(yīng)與對照品溶液的吸收光譜一致。（2）比較光譜吸收特征數(shù)據(jù)的一致性例：取維生素B1，精密稱定，加鹽酸溶液（9→1000）溶解并定量稀釋制成每1ml約含12.5μg的溶液，照紫外-可見分光光度法，在246nm的波長處測定吸光度，吸收系數(shù)（E1%

1cm

）為406~436。例丙硫異煙胺的鑒別：取本品的細粉適量，加乙醇溶解制成每1ml中含丙硫異煙胺20μg的溶液，濾過，取濾液照分光光度法測定，在291nm的波長處有最大吸收。

（3）比較光譜吸收特征數(shù)據(jù)比值的一致性（比較吸收度或吸收系數(shù)比值的一致性）例丙酸倍氯米松的鑒別：取本品，精密稱定，加乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含20μg的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄ⅣA）測定，在239nm的波長處有最大吸收，吸收度為0.57～0.60；在239nm與263nm波長處的吸光度比值應(yīng)為2.25～2.45。

2、純度檢查例：華法林鈉（抗凝血藥）檢查：酚酮：取本品，加5%氫氧化鈉溶液制成每1ml中含0.125g的溶液，在385nm處測定吸收度，不得過0.30A=ECL例：葡萄糖注射液檢查：5-羥甲基糠醛：操作方法：①測定液的配制：精密量取10%葡萄糖注射液10ml于100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻即得。②測定：取配制的測定液盛于1cm厚的石英池中，置預(yù)先校正好的紫外分光光度計的樣品室中，以水為空白，在284±1nm波長處，測定其吸收度，重復(fù)三次，取其平均值。吸收度不得大于0.32.3、定量依據(jù)：朗伯-比爾定律A=ECL（1）標準曲線法取標準品，配制成一系列不同濃度的標準溶液，在相同條件下，分別測定其吸收度

（2）標準對照法（對照品比較法）在相同條件下配制標準溶液和供試品溶液，在選定的波長處分別測定吸收度

A對/A供=C對/C供（3）吸收系數(shù)法利用待測物質(zhì)的吸收系數(shù)與測得的一定濃度時的吸收度進行含量測定的方法。例2、已知VB12在361nm處的E%1cm為207，現(xiàn)測得VB12水溶液的吸收度為0.414，L=1cm，計算溶液的濃度例3、精密稱取VB12供試品0.02500g，加水溶解并定量稀釋成1000ml，于1cm厚的吸收池中，在361nm處測得吸收度為0.507，E%1cm按207計算，計算VB12百分含量例4、取對乙酰氨基酚約40mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻；精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶10ml，加水至刻度，搖勻。照分光光度法在257nm處測定吸收度，E%1cm按715計算，即得。W=0.04005g，A=0.571，計算對乙酰氨基酚百分含量

例5、精密稱取某供試品0.04986g，溶于100ml的0.01mol/L的硫酸溶液中，再精密量取此溶液2.0ml稀釋至100ml，用1Cm厚的石英比色皿，在245nm處測得吸收度為0.552，計算其的百分含量。已知在245nm處，該藥品的吸收系數(shù)E%1cm為560．四、紅外光譜法簡介定性介紹齊二藥事件2006年4月22日和4月24日，廣東某醫(yī)院住院的重癥肝炎病人中先后出現(xiàn)2例急性腎功能衰竭癥狀，至4月29日、30日又出現(xiàn)多例相同病癥病人，引起該院高度重視，及時組織肝腎疾病專家會診，分析原因，懷疑可能是患者新近使用齊齊哈爾第二制藥有限公司生產(chǎn)的“亮菌甲素注射液”引起。

5月3日，廣東藥監(jiān)局報告，發(fā)現(xiàn)部分患者使用齊齊哈爾第二制藥公司生產(chǎn)的“亮菌甲素注射液”后，出現(xiàn)嚴重不良反應(yīng)。國家藥監(jiān)局立即責(zé)成黑龍江藥監(jiān)局暫停了該企業(yè)“亮菌甲素注射液”的生產(chǎn)，封存了庫存藥品，并派