人民醫(yī)院檢驗(yàn)科常規(guī)分析項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP

寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件

分析項(xiàng)目S0P文件編號(hào)：LJ-FXXMS0P-01/01版本：2010-A/0生效日期：20101001

一、SysmexXTT800i型血液分析儀分析項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)共8頁(yè)

1檢驗(yàn)申請(qǐng)

血液學(xué)分析是組合項(xiàng)目，以“血液常規(guī)測(cè)定”作為單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)。臨床醫(yī)

生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。

2標(biāo)本采集和處理

2.1采血前受檢者保持安靜、放松狀態(tài)，環(huán)境溫暖，防止靜脈攣縮。一般采用坐姿

采血。

2.2用真空采血器采集靜脈血2.0ml,置于含150g/LEDTA-K?紫色抗凝管里，顛倒

混勻抗凝，及時(shí)送檢。

2.3采血時(shí)壓脈帶綁扎時(shí)間不能超過Imin,順利采血，血液與抗凝劑混勻要充分，

不能產(chǎn)生氣泡，避免溶血，否則均影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。

2.5采血后在4h內(nèi)完成檢測(cè)。檢測(cè)前標(biāo)本置室溫即可，不能放置4?8℃環(huán)境（否

則血小板易被激活發(fā)生聚集）。已檢測(cè)的標(biāo)本保持完整的編號(hào)，加蓋后在普通冰箱保

存3d。

3方法原理

31鞘流DC檢測(cè)方法（RBC、PLT、HCT）

在該檢測(cè)器內(nèi)，樣品噴嘴定位在孔的前面且與中心對(duì)齊。將稀釋后的樣品由樣

品噴嘴推入錐形室以后，由前鞘流內(nèi)的試劑包裹通過小孔的中心。通過小孔以后，

經(jīng)過稀釋的樣品由后鞘流中的試劑包裹送入捕集管中。這樣就可以防止該區(qū)域的血

細(xì)胞回流，并防止產(chǎn)生假性血小板脈沖。鞘流方法改善了血液計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)

性。同時(shí)由于血細(xì)胞通過在一條直線上的小孔，所以也可防止產(chǎn)生異常血細(xì)胞脈沖。

3.2使用半導(dǎo)體激光器的流式細(xì)胞計(jì)數(shù)方法

使用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞和其它生物粒子的物理和化學(xué)性質(zhì)。使用流式細(xì)

胞計(jì)數(shù)法只需很少的樣品就可對(duì)這些細(xì)胞和粒子進(jìn)行檢測(cè)。一個(gè)血液樣品經(jīng)過吸液

和定量、稀釋至指定的稀釋比，并進(jìn)行染色。然后將該樣品送入流動(dòng)池中。這種鞘

流裝置改進(jìn)了細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。同時(shí)，由于血細(xì)胞顆粒成行通過該流動(dòng)

池的中心，故而防止產(chǎn)生異常血液脈沖并可減少流動(dòng)池的污染。一個(gè)半導(dǎo)體激光束

通過該流動(dòng)池照射到血細(xì)胞上。前向散射光由光電二極管接收，側(cè)向散射光和側(cè)向

熒光則由光電倍增管接收。光信號(hào)被轉(zhuǎn)化為電脈沖，從而可以得到有關(guān)血液細(xì)胞的

信息。

3.3前向散射光和側(cè)向散射光

當(dāng)一?束激光照射到血細(xì)胞顆粒上時(shí)，就產(chǎn)生光散射。XT-1800i檢測(cè)前向散射光

和側(cè)向散射光，前向散射光的強(qiáng)度反映血液細(xì)胞體積大小。側(cè)向散射光的強(qiáng)度反映

細(xì)胞內(nèi)部(如細(xì)胞核的體積大小)的信息。

側(cè)向熒光

3.4當(dāng)光照射到經(jīng)過熒光染色的血液細(xì)胞上時(shí)，就產(chǎn)生比入射光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光。

隨著染色集團(tuán)濃度的增加，熒光強(qiáng)度也增加。通過測(cè)量熒光強(qiáng)度，可以得到有關(guān)血

細(xì)胞染色的信息，XT-18001檢測(cè)側(cè)向熒光。

3.5SLS-血紅蛋白測(cè)定法

在稀釋的血液中加入溶血素，紅細(xì)胞中的血紅蛋白被釋放出來(lái)。血紅蛋白在月

桂洗硫酸鈉的作用下，二價(jià)鐵轉(zhuǎn)變成三價(jià)鐵，并與月桂洗硫酸鈉結(jié)合形成SLSTIb,

SLS-Hb進(jìn)入血紅蛋白檢測(cè)系統(tǒng)。測(cè)定SLS-Hb在555nm波長(zhǎng)下的吸光度值，并通過與

加入樣品前稀釋液的吸光度進(jìn)行對(duì)比進(jìn)行計(jì)算。

3.6計(jì)算(紅細(xì)胞指數(shù))

紅細(xì)胞指數(shù)(MCV、MCH和MCHC)通過RBC計(jì)數(shù)(RBC)、Hb濃度(HGB)和紅細(xì)

胞壓積(HCT)的值計(jì)算出。計(jì)算公式如下：

HCTXIO'5

MCV(fl)=

RBC/L

HGB(g/L)X1012

MCH(pg)-

RBC/L

HGB(g/L)

MCHC(g/L)=

HCT

4試劑

4.1抗凝劑：150g/L的EDTA-Kz水溶液。

4.2稀釋液(CELLPACK)：試劑品牌：Sysmex、代碼：PK-30L、包裝規(guī)格：20L

4.3嗜堿細(xì)胞溶血素(STR0MAT0LYSER-FB)試劑品牌：Sysmex、代碼：FBA-200A、包

裝規(guī)格：5L

4.4白細(xì)胞分類溶血素(STR0MAT0LYSER-4DL)試劑品牌：Sysmex、代碼：FFD-200A.

包裝規(guī)格：5L

4.5白細(xì)胞分類染液(STROMATOLYSER-4DS)試劑品牌：Sysmex、代碼：FFS-800A、包

裝規(guī)格：42mlX3袋

4.6血紅蛋白溶血素(SULFOLYSER)試劑品牌：Sysmex、代碼：SLS-220A、包裝規(guī)

格：5L

4.7清潔劑(CELLCLEAN)

4.8添加與更換同一批號(hào)的試劑，可連續(xù)添加使用

4.9試劑在室溫保存可穩(wěn)定至失效期。

5校準(zhǔn)品與質(zhì)控品

5.1校準(zhǔn)品：使用與儀器配套的校準(zhǔn)品。

5.2質(zhì)控品：使用與儀器配套的質(zhì)控品，有正常值與異常值兩種濃度水平。

6適用儀器

SysmexXTT800i型自動(dòng)血液學(xué)分析儀

7校準(zhǔn)

7.1將校準(zhǔn)品連續(xù)測(cè)定11次，取2?11次的均值，與定值比較，計(jì)算相差百分?jǐn)?shù)。

7.2校準(zhǔn)確認(rèn)：各參數(shù)相差百分?jǐn)?shù)在規(guī)定范圍內(nèi)，不需調(diào)整；超過范圍，調(diào)整新系

數(shù)。

7.3儀器維修后要重新校準(zhǔn)，平時(shí)每6個(gè)月應(yīng)校準(zhǔn)一次。

7.4校準(zhǔn)驗(yàn)證的方法：用校準(zhǔn)品連續(xù)測(cè)定11次，取2?11次的均值，與定值比較,

計(jì)算相差百分?jǐn)?shù)，其值應(yīng)在規(guī)定范圍內(nèi)。

8分析操作步驟

開機(jī)自檢~質(zhì)控檢測(cè)~輸入工作表~加載標(biāo)本一測(cè)定操作一結(jié)果審核

一報(bào)告。

9檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告

9.1結(jié)果的報(bào)告

9.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。

9.1.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考值范圍、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審

核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。

9.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上提示。

10室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則

10.1采用L-J質(zhì)控規(guī)則，應(yīng)用1個(gè)水平質(zhì)控品。質(zhì)控的項(xiàng)目為RBC、WBC、PLT和

HB四項(xiàng)。

10.2同時(shí)用浮動(dòng)均值法（嚏-B）質(zhì)控監(jiān)測(cè)。

10.3當(dāng)質(zhì)控結(jié)果達(dá)不到預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，按血液分析儀的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程處理。

11參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平

血液學(xué)分析儀測(cè)定參數(shù)及參考范圍

項(xiàng)目名稱英文縮寫參考范圍

白細(xì)胞計(jì)數(shù)WBC4.0-10.0X107L

(兒童5~12X109/L)

嗜中性細(xì)胞絕對(duì)值NEU(L)3.0~5.8xlOftL

淋巴細(xì)胞絕對(duì)值LYMPH#1.5~3.0X109/L

單核細(xì)胞絕對(duì)值MON#0.1~1.5xl07L

嗜酸性細(xì)胞絕對(duì)值EOS#0.05~0.5xl07L

嗜堿性細(xì)胞絕對(duì)值BAS#0.01~0.05x109/L

嗜中性細(xì)胞百分比NEU%50%?70%

淋巴細(xì)胞百分比LYMPH%20%—40%

單核細(xì)胞百分比MON3%-13%

嗜酸性細(xì)胞百分比EOS%1%?6%

嗜堿性細(xì)胞百分比BAS%0%?1%

紅細(xì)胞計(jì)數(shù)RBCM:4.0~5.5X10'7L

F:3.5~5.0X10I2/L

紅細(xì)胞壓積HCTM:0.4—0.5

F:0.37-0.48

平均紅細(xì)胞體積MCV82?94fl

紅細(xì)胞分布寬度RDW-CVIL6%?14.8%

血紅蛋白HGBM:120?160g/L

F:110?150g/L

B:170-190g/L

平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量MCH26?32pg

平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度MCHC320-360g/L

血小板計(jì)數(shù)PLT100?300x10"

血小板體積分布寬度PDW15%?18%

平均血小板體積MPV6.5—13.0fl

血小板壓積PCT0.11%-0.28%

12臨床意義

12.1白細(xì)胞計(jì)數(shù)

12.1.1由于中性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的50%-70%,其增高和減低直接影響白細(xì)胞

總數(shù)的變化，因此大多數(shù)病例白細(xì)胞總數(shù)的變化實(shí)際反映中性粒細(xì)胞的變化。

12.1.2生理性增高：初生兒白細(xì)胞較高，以后逐漸降至成人水平。早晨較低，下

午較高，運(yùn)動(dòng)后升高，妊娠和分娩時(shí)也升高。極度恐懼與疼痛可致白細(xì)胞增高。

12.1.2病理性增高：在急性感染，嚴(yán)重組織損傷，急性大出血，急性中毒，某些

白血病時(shí)白細(xì)胞呈不同程度升高。大部分細(xì)菌性感染、尿毒癥、燒傷、手術(shù)后、傳

染性單核細(xì)胞增多癥、白血病等白細(xì)胞增高。

12.1.3減少：病毒性感染、傷寒、副傷害、瘧疾、再生障礙性貧血、放療、化療、

非白血性白血病等。再障，脾亢，電離輻射，自身免疫性疾病時(shí)白細(xì)胞減少。

12.2白細(xì)胞分類

12.2.1中性粒細(xì)胞增多：見于各種細(xì)菌性感染、急性出血與溶血、手術(shù)后、重金

屬中毒、劇烈運(yùn)動(dòng)、妊娠與分娩、極度恐懼與疼痛、嚴(yán)重的組織損傷、某些激素的

應(yīng)用、心肌梗死、痛風(fēng)、重金屬中毒、粒細(xì)胞白血病與其他惡性腫瘤的晚期等。

12.2.2中性粒細(xì)胞減少：傷寒桿菌感染，一些病毒感染如流感時(shí)，再生障礙性貧

血白細(xì)胞總數(shù)與中性粒細(xì)胞均減少，分類時(shí)兒乎均為淋巴細(xì)胞。慢性理、化損傷如

電離幅射或服用氯霉素后，可因抑制骨髓細(xì)胞的有絲分裂而致白細(xì)胞減少。自身免

疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等、脾功能亢進(jìn)時(shí)白細(xì)胞總數(shù)與中性粒細(xì)胞均可減少。

12.2.3白細(xì)胞分群直方圖的意義

12.2.3.1判斷白細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)是否受到其他因素的干擾。紅細(xì)胞溶解不完全、有核

紅細(xì)胞存在時(shí)、血小板聚凝等影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)，白細(xì)胞直方圖呈現(xiàn)相應(yīng)的改變。

12.2.3.2判斷直方圖是否符合篩選標(biāo)準(zhǔn)，決定涂片鏡檢。

12.2.4淋巴細(xì)胞增多：百日咳、結(jié)核、心肌梗死、急性心力衰竭、休克、類風(fēng)濕

關(guān)節(jié)炎、乳腺癌、胸腺瘤、各種病毒性感染、淋巴細(xì)胞白血病等。

12.2.5淋巴細(xì)胞減少：各種感染急性期、肝炎、流感、活動(dòng)性結(jié)核病、燒傷、鋅

缺乏、酒精中毒、細(xì)胞免疫缺陷癥等。

12.2.6單核細(xì)胞增多：結(jié)核、傷寒、扁桃腺炎、敗血癥、梅毒、黑色素瘤、乳腺

癌、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、亞急性心內(nèi)膜炎、瘧疾、單核細(xì)胞白血病等。

12.2.7嗜酸性粒細(xì)胞增多：變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲病、皮膚病、燒傷后、某些白血病

等。

12.2.8嗜酸性粒細(xì)胞減少：傷寒、副傷寒、使用腎上腺皮質(zhì)激素后。

12.2.9嗜堿性粒細(xì)胞增多：重金屬中毒、霍奇金病、變態(tài)反應(yīng)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、

放射病、潰瘍性結(jié)腸炎、甲狀腺功能減退、骨髓纖維化、原發(fā)性血小板增多癥等、

慢性粒細(xì)胞白血病等。

12.3血紅蛋白

12.3.1生理性增高：新生兒、高原地區(qū)居住者。

12.3.2病理性增高：真性紅細(xì)胞增多癥、慢性支氣管炎肺心病、先天性心臟病、

血紅蛋白病、腎癌、脫水等。

12.3.3病理性降低：各種貧血、白血病、產(chǎn)后、術(shù)后大量失血。

12.4血小板計(jì)數(shù)

12.4.1增多：慢性粒細(xì)胞性白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥、

出血性血小板增多癥、急性失血、急性溶血、脾切除后。慢性粒細(xì)胞性白血病、多

發(fā)性骨髓瘤和許多惡性腫瘤的早期?？梢娧“逶龆?。

12.4.2減少：常見于血小板生成障礙如急性白血病、再生障礙性貧血、原發(fā)性血

小板減少性紫瘢，血小板破壞過多如放療、化療、脾功能亢進(jìn)、體外循環(huán)時(shí)、彌漫

性血管內(nèi)凝血、血栓性血小板減少性紫瘢、巨大血小板綜合征等。

12.4.3正常人血小板計(jì)數(shù)一天內(nèi)可有6%—10%變化；月經(jīng)前降低，月經(jīng)后升高；

妊娠中晚期升高，分娩后即降低；運(yùn)動(dòng)后升高，休息后恢復(fù)。

12.5網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

12.5.1增高：表示骨髓增生旺盛，多數(shù)貧血均可增高（再障性貧血除外），對(duì)于惡

性貧血或缺鐵性貧血，在藥物治療有效時(shí)網(wǎng)織紅細(xì)胞可急劇增高。

12.5.2減低：見于原發(fā)或繼發(fā)性再生障礙性貧血。

12.6紅細(xì)胞有關(guān)參數(shù)的臨床意義

12.6.1紅細(xì)胞增多見于真紅細(xì)胞增多癥，慢性肺心病，某些腫瘤及某些紫綃型先

天性心臟病。血漿中水分丟失，紅細(xì)胞也會(huì)暫時(shí)增加，多見于脫水血濃縮時(shí)。

12.6.2新生兒由于在母體內(nèi)以彌散方式從母體血液獲得氧氣，通常處于生理性缺

氧狀態(tài)，故紅細(xì)胞明顯增高，在出生2周后逐漸下降。

12.6.3興奮，恐懼，冷水浴刺激可使腎上腺素增多，導(dǎo)致紅細(xì)胞暫時(shí)性增多。劇

烈體力勞動(dòng)時(shí)耗氧量增加也導(dǎo)致紅細(xì)胞增多。高原地區(qū)和登山運(yùn)動(dòng)員受低氧刺激，

血漿中紅細(xì)胞生成素水平升高引起紅細(xì)胞增多。

12.6.4由于各種病因?qū)е轮車t細(xì)胞減少，即病理性貧血。按病因可將貧血分

成造血不良，紅細(xì)胞過渡破壞和失血三大類。

各類貧血的形態(tài)學(xué)參數(shù)改變

診斷HGBMCHMCVMCHCRDW常見疾病

大細(xì)胞非均一性貧血TTNT巨幼細(xì)胞性貧血，骨髓增生異常

綜合征，部分慢性粒細(xì)胞白血病，

自身免疫性溶血性貧血

大細(xì)胞均一性貧血jTTNN部分急性再生障礙性貧血

正細(xì)胞非均?性貧血jNNNT慢性再生障礙性貧血，骨髓纖維

化，陳發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿，

急性白血病

正細(xì)胞均一性貧血jNNNN急性失血，溶血，惡性腫瘤，中

毒，感染

小細(xì)胞非均?性貧血JJJT缺鐵性貧血，鐵粒幼細(xì)胞貧血

小細(xì)胞均一性貧血JJJ1/NN腎小球腎炎，惡性腫瘤（病程長(zhǎng)），

珠蛋白生成障礙性貧血

附注：T增高；J降低;N正常

12.7紅細(xì)胞壓積

12.7.1增高：失水所致的血液濃縮，缺氧代償，高海拔地區(qū)生活，慢性心肺疾病，

急性和慢性心肺功能不全，尤其以先天性紫維型心臟病為甚。某些肝、腎腫瘤，真

性紅細(xì)胞增多癥。

12.7.2減少：見于各種原因的貧血或血液稀釋

12.8血小板壓積(PLT)

12.8.1PCT增高：見于骨髓纖維化、脾切除、慢粒等。

12.8.2PCT降低：見于再障、化療后、血小板減少癥等。

12.9平均血小板體積(MPV)

12.9.1MPV就是血小板直方圖該曲線所含的群體算術(shù)平均體積,MPV也就是PLT

大小分布的直方圖的產(chǎn)物。

12.9.2MPV用來(lái)鑒別血小板減少的原因。

12.9.3MPV增大作為骨橢造血功能恢復(fù)的較早期指征。

12.10血小板體積分布寬度(PDW)

12.10.1PDW是反映血小板體積大小的異質(zhì)性參數(shù)。

12.10.2PDW增大，見于急非淋化療后、巨幼細(xì)胞性貧血、慢粒、脾切除、巨大

血小板綜合癥、血栓性疾病。

13對(duì)儀器分析結(jié)果進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢的要求

13.1按省臨檢中心2000(6)文件要求，有下列情況鏡檢涂片復(fù)查并及時(shí)報(bào)告，檢

驗(yàn)報(bào)告單上要有明確標(biāo)識(shí)，復(fù)檢結(jié)果作登記以備查詢。

13.1.1腫瘤、化療、發(fā)熱病人。

13.1.2白細(xì)胞低于3.5x107L或大于12.0X109/LO

13.1.3血小板低于50xl0!,/L或大于400x10'/Lo

13.1.4白細(xì)胞分類異常圖形時(shí)或儀器提示。

13.1.5.發(fā)現(xiàn)其中一項(xiàng)過高時(shí)，或是臨床指定要鏡檢時(shí)。

14結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系

14.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。

14.2審核符合鏡檢要求的標(biāo)本是否已作鏡檢并有相應(yīng)的標(biāo)識(shí)與記錄

14.3認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，審核者對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，

并在報(bào)告單的審核者處簽名。

13.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與異常結(jié)果相關(guān)的參數(shù)間的關(guān)系。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相

悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。

14威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定

14.1.1血小板＜40xl09/L,考慮出血。血小板AIOOOXIOVL,血小板增多癥，預(yù)防血

栓形成。

14.1.2血紅蛋白V50g/L,顯示重度貧血，應(yīng)考慮輸血治療，血紅蛋白＞200g/L,

紅細(xì)胞增多癥。

14.1.3白細(xì)胞〉30X1()9/L,嚴(yán)重感染或白血病可能。白細(xì)胞＜2.5X1()9/L,放療后的骨髓

抑制等。

14.2處理程序

14.2.1檢測(cè)人員立即報(bào)告審核者。

14.2.2審核者首先根據(jù)審核程序，分析質(zhì)控、定標(biāo)、試劑的情況是否正常，當(dāng)日

其他已做標(biāo)本本項(xiàng)目的總體情況有無(wú)異常，確認(rèn)實(shí)驗(yàn)有關(guān)的基礎(chǔ)是正常狀態(tài)中。

14.2.3出現(xiàn)緊急值的標(biāo)本有無(wú)異常，該標(biāo)本其他相關(guān)項(xiàng)目有無(wú)異常。

14.2.4對(duì)該標(biāo)本進(jìn)行一次重復(fù)測(cè)定，確認(rèn)緊急值是否重現(xiàn)。

14.2.5報(bào)告技術(shù)質(zhì)量主管與科主任，馬上與臨床聯(lián)系，了解臨床相關(guān)情況。

14.2.6確認(rèn)此緊急值是可報(bào)告的，由技術(shù)主管或科主任立即電話向負(fù)責(zé)臨床醫(yī)生

報(bào)告，同時(shí)作好電話報(bào)告記錄，包括電話報(bào)告時(shí)間和對(duì)方接聽人員的標(biāo)識(shí)。并及時(shí)

簽發(fā)正式檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告。

15方法的有限性及干擾因素

15.1白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法特性

15.1.1檢測(cè)靈敏度：0.1X107L

15.1.2測(cè)量范圍：0?140X107L

15.1.3精密度:白細(xì)胞總數(shù)在OTOOXIO'L范圍時(shí)為3%；白細(xì)胞總數(shù)在100.1-140

X107L范圍時(shí)為12%0

15.2紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法特性

15.2.1檢測(cè)靈敏度：0.1X1012/L

15.2.2精密度:CV<1%

15.3血紅蛋白檢測(cè)的分析范圍為47?269g/L

15.4血小板計(jì)數(shù)的方法特性

15.4.1檢測(cè)靈敏度：1X107L

15.4.2測(cè)量范圍：0—999X107L

15.4.3精密度：CV<7%o

15.5脂濁、黃疸、溶血標(biāo)本可干擾部分測(cè)定結(jié)果。

16有關(guān)引用程序與文件

16.1SYSMEXXTT800i型自動(dòng)血液學(xué)分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

16.2血液檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

16.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。

16.4標(biāo)本送檢和接收程序。

17參考文獻(xiàn)

17.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州:浙江大學(xué)出版社,2004.

17.2葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第三版）.東南大學(xué)

出版社，2006.

17.3SYSMEXXT-18001中文操作手冊(cè)。

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分析項(xiàng)目SOP文件編號(hào):LJ-FXXMS0P-01/02版本：2010-A/0生效日期：20101001

二、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（目視計(jì)數(shù)法）標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)共2頁(yè)

1檢驗(yàn)申請(qǐng)

單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（目視計(jì)數(shù)法）；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血液常規(guī)測(cè)定。

臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。

2標(biāo)本采集與處理

2.1采血前受檢者保持安靜、放松，環(huán)境溫暖，防止靜脈攣縮。一般采用坐姿采血。

2.2用一次性無(wú)菌注射器采靜脈血2.0ml,置于含EDTA-K?的真空管中，顛倒混勻

抗凝，及時(shí)送檢。也可以皮膚采血法從耳垂、指端、（嬰幼兒）足跟等處采集末稍血。

2.3采血時(shí)壓脈帶綁孔時(shí)間不能超過Imin,順利采血，血液與抗凝劑混勻要充分，

不能產(chǎn)生氣泡，避免溶血，否則均影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4采集未梢血時(shí)，先拭去自然流出（或適當(dāng)力度擠出）的第一滴血，再按PLT、RBC、

HGB、WBC的標(biāo)本采集順序采集標(biāo)本。

2.5檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯的標(biāo)識(shí)符。在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本

采集時(shí)間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識(shí)。

2.6采血后在4h內(nèi)完成檢測(cè)。檢測(cè)前標(biāo)本置室溫即可，不能放置4?8℃環(huán)境（否

則血小板易被激活發(fā)生聚集）。

2.7檢測(cè)后的標(biāo)本處理：EDTA-K2抗凝血標(biāo)本保持完整的編號(hào)，加蓋后于室溫中保

存2天，末稍血稀釋標(biāo)本密封條件下保存4?6h,以備復(fù)查。

3方法原理

用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，于顯微鏡下計(jì)數(shù)一定

體積內(nèi)的RBC數(shù)，經(jīng)換算得出每升血液中的RBC。

4試劑及其他用品

4.1試劑：紅細(xì)胞稀釋液：0.9%氯化鈉溶液，含適量伊紅，自配試劑。

4.2血液細(xì)胞計(jì)數(shù)板和蓋玻片；血紅蛋白吸管。

5適用儀器顯微鏡。

6檢測(cè)步驟

6.1小試管1支，加紅細(xì)胞稀釋液2.0mlo

6.2用微量血紅蛋白吸管準(zhǔn)確吸取抗凝全血(或末梢血)10微升，擦去管尖外部余

血，將吸管插入小試管中稀釋液的底部，輕輕將血放出，并吸取上層清液，漱洗吸

管二次，最后用手搖動(dòng)試管混和。

6.3將血細(xì)胞混和液小心地滴入血液細(xì)胞計(jì)數(shù)板，充滿計(jì)數(shù)池，靜置2?3分鐘，

待細(xì)胞下沉。

6.4用高倍鏡依次計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中5個(gè)中方格內(nèi)的RBC,。

6.5操作注意事項(xiàng)

6.5.1大小方格內(nèi)壓線細(xì)胞應(yīng)按數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則進(jìn)行計(jì)數(shù)。

6.5.2稀釋液應(yīng)過濾，小試管和計(jì)數(shù)板須清潔，以免雜質(zhì)、微粒等被誤認(rèn)為細(xì)胞。

6.5.3計(jì)數(shù)時(shí)，兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過10機(jī)

7結(jié)果計(jì)算

計(jì)算公式：紅細(xì)胞數(shù)/L=5個(gè)中方格內(nèi)RBC總數(shù)X5X10X201X106

=5個(gè)中方格內(nèi)RBC總數(shù)/100X10’2

8檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告

8.1結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。

8.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者

簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。

8.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。

9參考范圍與醫(yī)學(xué)決定水平

9.1參考范圍：男性：(4.0~5.5)XlO'VL；女性：(3.5~5.0)X10l2/L

9.2醫(yī)學(xué)決定水平：高于6.8XIO'L應(yīng)采取相應(yīng)的治療措施；低于3.5X10'L為

診斷貧血的界限；低于ITXIOVL是輸血的指標(biāo)。

10臨床意義

10.1顯微鏡RBC計(jì)數(shù)目前已不常做，本室保留這一方法一般用于對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

分析結(jié)果有疑問結(jié)果的復(fù)查，和某些特殊標(biāo)本的檢查。

10.2本法另一個(gè)重要的用途是用于對(duì)血球計(jì)數(shù)分析儀的校準(zhǔn)。嚴(yán)格按本程序操作

重復(fù)計(jì)數(shù)10-20次新鮮血液標(biāo)本的結(jié)果可作為血球計(jì)數(shù)分析儀校準(zhǔn)的靶值。

11有關(guān)引用程序與文件標(biāo)本送檢和接收程序。

12參考文獻(xiàn)

12.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.浙江大學(xué)出版社，2004.

12.2葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社，2006.

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分析項(xiàng)目SOP文件編號(hào)：LJ-FXXMS0P-01/03版本：2010-A/0生效日期：20101001

三、血紅蛋白氧化高鐵法測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)共3頁(yè)

1檢驗(yàn)申請(qǐng)

單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：血紅蛋白氟化高鐵法測(cè)定；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血液常規(guī)測(cè)定。

臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。

2標(biāo)本采集與處理

2.1采血前受檢者保持安靜、放松狀態(tài)，環(huán)境溫暖，防止靜脈攣縮。一般采用坐姿

采血。

2.2用一次性無(wú)菌注射器采靜脈血2.0ml,置于含EDTA-4的真空管中，顛倒混勻

抗凝，及時(shí)送檢。也可以皮膚采血法從耳垂、指端、（嬰幼兒）足跟等處采集末稍血。

2.3采血時(shí)壓脈帶綁扎時(shí)間不能超過Imin,順利采血，血液與抗凝劑混勻要充分，

不能產(chǎn)生氣泡，避免溶血，否則均影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4采集末梢血時(shí)，先拭去自然流出（或適當(dāng)力度擠出）的第一滴血，再按PLT、RBC、

HGB、WBC的標(biāo)本米集順序米集標(biāo)本。

2.5檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本

采集時(shí)間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識(shí)。

2.6采血后在4h內(nèi)完成檢測(cè)。檢測(cè)前標(biāo)本置室溫即可，不能放置4?8℃環(huán)境（否

則血小板易被激活發(fā)生聚集）。

2.7檢測(cè)后的標(biāo)本處理：EDTA-K2抗凝血標(biāo)本保持完整的編號(hào)，加蓋后于室溫中保

存2天，末稍血稀釋標(biāo)本密封條件下保存4?6h,以備復(fù)查。

3方法原理

血液中除硫化血紅蛋白（HbS）外，其余各種HGB均可被高鐵氟化鉀氧化為Hi,

Hi再和鼠根離子（CN-）結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色復(fù)合物HiCN。HiCN在540nm波長(zhǎng)處

有吸收峰，用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，再與HGB的標(biāo)準(zhǔn)吸光度比較即可求得HGB的

濃度。

4試劑及其他用品

4.1試劑：HiCN試劑，含KCN50mg/L,高鐵氟化鉀200mg/L,磷酸氫二鉀

140mg/L,TritonX-100o自配試劑。

4.2HGB校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

5適用儀器

分光光度計(jì)、XK-2血紅蛋白比色儀、XF-1血紅蛋白儀。

6檢測(cè)步驟

6.1小試管1支，加HiCN試劑5.0mlo

6.2用微量血紅蛋白吸管準(zhǔn)確吸取抗凝全血(或末梢血)20微升，擦去管尖外部余

血，將吸管插入小試管試劑中，輕輕將血放出，并吸取上層清液，漱洗吸管二次，

最后用手搖動(dòng)試管混和。

6.3靜置5min,在分光光度計(jì)上比色，讀取540nm波長(zhǎng)處的吸光度

6.4用血紅蛋白儀可直接讀取HGB濃度。

7結(jié)果計(jì)算

計(jì)算公式：HGB(g/L)=測(cè)定管吸光度X64458/44000X251X367.7

注：64458是國(guó)際公認(rèn)的HGB分子量，44000是1965年ICSH公布的HGB毫摩爾消光

素?cái)?shù)，251是稀釋倍數(shù)。

8檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告

8.1結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。

8.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者

簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。

8.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。

9參考范圍與醫(yī)學(xué)決定水平

9.1參考范圍：男性：120?160g/L；

女性：110?150g/L

新生兒：170?200g/L

10臨床意義

10.11996年，ICSH推薦HiCN分光光度法作為HGB測(cè)定的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)參考方法。其

他廣泛的HGB測(cè)定結(jié)果都必須以HiCN法為標(biāo)準(zhǔn)。

10.2本法另一個(gè)重要的用途是用于對(duì)血球計(jì)數(shù)分析儀的校準(zhǔn)。嚴(yán)格按本程序操作

測(cè)定新鮮血液標(biāo)本的結(jié)果可作為血球計(jì)數(shù)分析儀校準(zhǔn)的靶值。

10.3HGB增高基本與RBC增多一致。

10.4HGB減少基本與RBC減少一致，通常稱為貧血。公認(rèn)貧血的診斷標(biāo)準(zhǔn)為成年男

性HGBV110g/L,HCT<41%；成年女性HGBVI10g/L,HCT<37%

10.5HGB濃度作為貧血分級(jí)的依據(jù)：輕度貧血：HGB91-120g/L；中度貧血：HGB

61?90g/L；重度貧血：HGB31-60g/L；極重度貧血：HGB<30g/L

11有關(guān)引用程序與文件

11.1標(biāo)本送檢和接收程序。

12參考文獻(xiàn)

12.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州：浙江大學(xué)出版社，

2004.

12.2葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第三版）.東南大學(xué)

出版社，2006.

寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件

分析項(xiàng)目SOP文件編號(hào)：LJ-FXXMS0P-01/04版本：2010-A/0生效日期：20101001

四、紅細(xì)胞形態(tài)檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)共3頁(yè)

1檢驗(yàn)申請(qǐng)

單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：紅細(xì)胞形態(tài)檢查；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血液常規(guī)測(cè)定。臨床醫(yī)

生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。

2標(biāo)本采集與處理

2.1采血前受檢者保持安靜、放松狀態(tài)，環(huán)境溫暖，防止靜脈攣縮。一般采用坐姿

采血。

2.2以皮膚采血法從耳垂、指端、（嬰幼兒）足跟等處采集末稍血?；蛴靡淮涡詿o(wú)菌

注射器采靜脈血2.0ml,置于含EDTA-K2的真空管中，顛倒混勻抗凝，及時(shí)送檢。

2.3采集未梢血時(shí)，先拭去自然流出（或適當(dāng)力度擠出）的第一滴血，再按PLT、RBC、

HGB、WBC的標(biāo)本采集順序采集標(biāo)本。

2.4將末稍血一滴滴在玻片上，立即以規(guī)范的操作推成血液涂片

2.5檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本涂片或血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。在檢驗(yàn)申請(qǐng)

單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。

2.6采血后在4h內(nèi)完成檢測(cè)。

2.7檢測(cè)后的標(biāo)本處理：一般的染色血片室溫保存24h,有診斷和鑒別診斷價(jià)值的

陽(yáng)性血片按編號(hào)順序妥善保存一段時(shí)間，以備復(fù)查。

3方法原理

將細(xì)胞分布均勻的血涂片，作瑞氏復(fù)合染料染色后，由于不同的細(xì)胞及其不同

成分對(duì)酸性及堿性染料的結(jié)合的多少不同，從而使各種細(xì)胞呈現(xiàn)出各自的染色特點(diǎn),

于顯微鏡下識(shí)別。各種貧血患者的紅細(xì)胞在體積、形態(tài)、結(jié)構(gòu)、著色方面有不同程

度的改變。

4試劑及其他用品

4.1試劑：快速瑞一姬氏復(fù)合染色液，Baso試劑。

5適用儀器

顯微鏡。

6檢測(cè)步驟

6.1按規(guī)定制備血液涂片。推制厚薄適宜的血膜片，血膜應(yīng)呈舌狀，頭、體、尾清

晰可分。

6.2推好的血膜在空氣中晃動(dòng)，以促使快干。天氣寒冷或潮濕時(shí)，應(yīng)于37℃溫箱

中保溫促干，以免細(xì)胞變形縮小。

6.3用蠟筆在血膜兩頭劃線，以防染色液溢出，將血片平放在染色架上。滴加染色

液A液2?4滴，蓋住血膜，染色30秒，再滴加B液，量為A液的兩倍，染色1分

鐘。

6.4流水沖去染液，待干備用。

6.5鏡檢，選擇涂片的體尾交界處染色良好區(qū)域，先以低倍鏡快速掃描，估計(jì)細(xì)胞

的分布和染色情況，注意血片的邊緣和尾部是否有巨大異常細(xì)胞和微絲蝌等，選擇

最佳的細(xì)胞在高倍鏡和油鏡下觀察BRC形態(tài)。

7結(jié)果計(jì)算

可以計(jì)算異常RBC占RBC總數(shù)百分比。

8檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告

8.1結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。

8.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者

簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。

8.3檢查結(jié)果以“異常RBC占RBC總數(shù)百分比”報(bào)告，也可用“極個(gè)別、個(gè)別、

少數(shù)、部分、大部分”等文字描述報(bào)告。

9參考范圍與醫(yī)學(xué)決定水平

參考范圍：瑞氏染色血涂片正常成熟RBC形態(tài)：雙凹圓盤形，細(xì)胞大小相似，直

徑6?9um,淡粉紅色，中央為生理性淡染區(qū)，細(xì)胞內(nèi)無(wú)異常結(jié)構(gòu)。正常人血液中一

般不可見異常形態(tài)紅細(xì)胞。

10臨床意義

10.1RBC大小不一：正常紅細(xì)胞大小較為一致，直徑為6?9um。凡直徑大于10

um者為大紅細(xì)胞，＞15um為巨紅細(xì)胞，常見于巨幼細(xì)胞性貧血、骨髓增生異常綜

合征、肝臟疾病等；直徑V6um為小紅細(xì)胞，多見于缺鐵性貧血。在分析貧血原因

時(shí)，RBC大小是指細(xì)胞體積的大小而不只是直徑大小。染色過淺的小RBC提示HGB合

成障礙，體積較大的RBC常為未完全成熟的RBC,因殘留DNA而呈嗜多色性或有嗜堿

性點(diǎn)彩，分別主要見于缺鐵性貧血和巨幼細(xì)胞性貧血與惡性貧血等。

10.2RBC內(nèi)HGB含量改變（染色異常）：表現(xiàn)為正常色素性、低色素性、高色素性和

多色性。

10.3RBC形狀改變：

10.3.1球形RBC：紅細(xì)胞直徑變小，厚度增加，細(xì)胞中心染色較正常RBC深，細(xì)胞

呈小圓球形。常見于遺傳性球形細(xì)胞增多癥、自身免疫性溶血性貧血、異常血紅蛋

白病（HbS和HbC病等）。

10.3.2橢圓形RBC：紅細(xì)胞呈橢圓形，橫徑縮短，長(zhǎng)徑增大，有時(shí)可呈畸形。正常

人也可見到，但最多不15超過虬多見于遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥，大細(xì)胞性貧

血等。

10.3.3靶形RBC：比正常紅細(xì)胞扁薄，中心有少許血紅蛋白，部分可與周圍的血紅

蛋白連接，邊緣部染色較中央深，故呈靶狀。主要見于：珠蛋白生成障礙性貧血，

嚴(yán)重缺鐵性貧血，一些血紅蛋白病，肝病、脾切除術(shù)后及阻塞性黃疸等。

10.3.4口形RBC：紅細(xì)胞淡染區(qū)呈口狀狹孔，主要見于口形紅細(xì)胞增多癥，與急性

酒精中毒。

10.3.5鐮形RBC：細(xì)胞狹長(zhǎng)似鐮刀，也可呈麥粒狀或冬青葉樣，主要見于遺傳性鐮

形紅細(xì)胞增多癥。

10.3.6棘形RBC：棘形紅細(xì)胞是一種帶刺狀的紅細(xì)胞，刺呈針刺狀或尖刺狀，見于

棘形紅細(xì)胞增多癥，嚴(yán)重肝病或制片不當(dāng)時(shí)。

10.3.7其他如淚滴形RBC、鋸齒細(xì)胞、裂紅細(xì)胞、緡錢狀形成、有核RBC等。

10.4RBC內(nèi)出現(xiàn)異常結(jié)構(gòu)：包括嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞，卡玻環(huán)、染色質(zhì)小體和有核紅

細(xì)胞等。

10.5RBC內(nèi)發(fā)現(xiàn)寄生蟲如瘧原蟲、微絲蝌、杜利什曼原蟲等。

11有關(guān)引用程序與文件

11.1標(biāo)本送檢和接收程序。

12參考文獻(xiàn)

12.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州：浙江大學(xué)出版社，

2004.

12.2葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第三版）.東南大學(xué)

出版社,2006.

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分析項(xiàng)目S0P文件編號(hào)：LJ-FXXMS0P-01/05版本：2010-A/0生效日期：20101001

五、紅細(xì)胞比積測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)共2頁(yè)

1檢驗(yàn)申請(qǐng)

單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：紅細(xì)胞比積測(cè)定（縮寫HCT）；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血液常規(guī)測(cè)

定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。

2標(biāo)本采集與處理

2.1采血前受檢者保持安靜、放松狀態(tài)，環(huán)境溫暖，防止靜脈攣縮。一般采用坐姿

采血。

2.2用一次性無(wú)菌注射器采靜脈血2.0ml,置于含EDTA-4的真空管中，顛倒混勻

抗凝，及時(shí)送檢。也可用雙草酸鹽或肝素作抗凝劑，視同時(shí)作其他檢查的項(xiàng)目而定。

2.3采血時(shí)壓脈帶綁扎時(shí)間不能超過Imin,順利采血，血液與抗凝劑混勻要充分，

不能產(chǎn)生氣泡，避免溶血，否則均影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本

采集時(shí)間。

2.5采血后在4h內(nèi)完成檢測(cè)。檢測(cè)前標(biāo)本置室溫即可一，不能放置4?8℃環(huán)境（否

則血小板易被激活發(fā)生聚集）。

2.6檢測(cè)后的標(biāo)本處理：EDTA-K2抗凝血標(biāo)本保持完整的編號(hào)，加蓋后于室溫中保

存2天，以備復(fù)查。

3方法原理

離心法。將一定量抗凝血標(biāo)本置于孔徑統(tǒng)一的溫氏管，以規(guī)定轉(zhuǎn)速和規(guī)定的時(shí)

間離心，讀取RBC細(xì)胞層占全血的體積比。

4試劑及其他用品

4.1試劑：抗凝劑。

5適用儀器

水平離心機(jī)，溫氏管。

6檢測(cè)步驟

6.1用長(zhǎng)毛細(xì)吸管吸取混勻的。抗凝血，插入溫氏管底部，將血液緩慢注入至刻度

“100”處。注意不能有氣泡。用小橡皮塞塞緊管口。

6.2將灌好血的溫氏管置水平離心機(jī)中，以相對(duì)離心力2264Xg水平離心30min。

6.3記錄RBC層高度，再離lOmin,至RBC層不再下降，RBC細(xì)胞層高度比全血高

度(100)即為HCTo

6.4以微量法操作時(shí)，以毛細(xì)管替代溫氏管實(shí)驗(yàn)。

7結(jié)果計(jì)算

7.1直接讀取結(jié)果：離心后血液分為五層，從上至下依次為血漿、PLT、WBC、紫黑

紅色氧合HGB被WBC代謝還原的RBC層、和最下層的含氧RBC層，讀RBC柱高度以

紫黑紅色RBC層表面為準(zhǔn)，其高度即為每100ml血液中的RBC比積(ml%)。

8檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告

8.1結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。

8.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者

簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。

8.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。

9參考范圍與醫(yī)學(xué)決定水平

溫氏法：男性：40%?50%(0.40~0.50)；

女性：37%?47%(0.37~0.47)

10臨床意義

10.1HCT是用于計(jì)算RBC三個(gè)平均指數(shù)的要素之一，有助于貧血的診斷和分類。可

以評(píng)估血漿容量有無(wú)增減或稀釋濃縮程度，有助于某些疾病治療中補(bǔ)液量的控制。

10.2本法另一個(gè)重要的用途是用于對(duì)凝血檢測(cè)項(xiàng)目中抗凝劑用量的校正，以保證

某些凝血檢測(cè)項(xiàng)RI結(jié)果的準(zhǔn)確性。

11有關(guān)引用程序與文件

11.1標(biāo)本送檢和接收程序。

12參考文獻(xiàn)

12.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州：浙江大學(xué)出版社，

2004.

12.2葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第三版).東南大學(xué)

出版社，2006.

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六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)共3頁(yè)

1檢驗(yàn)申請(qǐng)

單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（縮寫RET）（手工顯微鏡計(jì)數(shù)法）。臨床

醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。

2標(biāo)本采集與處理

2.1標(biāo)本采集

2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml,EDTA-K2抗凝，置普通試管中?；虿捎煤婵湛鼓?/p>

血管。也可用末稍血采集法，末稍血采集后直接進(jìn)入檢測(cè)操作程序。

2.1.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。

2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。

2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記

錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。

2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本

2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本。

2.1.5.2對(duì)分析有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。

2.1.5.3無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。

2.1.5.4其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。

2.2標(biāo)本保存

2.2.1接收標(biāo)本后避免溶血。

2.2.2標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（15?25℃）下可穩(wěn)定8h,普通冰箱中（2~8℃）穩(wěn)定

24ho

2.2.3已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置4?8℃冰箱內(nèi)保存3d。

3方法原理

煌焦油藍(lán)染色顯微計(jì)數(shù)法。

4試劑及其他用品

4.1染色液：煌焦油藍(lán)染料，Baso試劑。

4.2顯微鏡，香柏油，拭鏡紙。

4.3玻片、推片或蓋玻片，試管。

5標(biāo)本檢測(cè)操作

5.1于一小試管中加1%煌焦油藍(lán)染液2滴，在已加入染液的試管內(nèi)注入等比例受

檢全血，立即混勻，室溫下放置15?20min。

5.2取上述混合血液1滴于玻片上，推成薄片，干燥后，油鏡觀察。

5.3或取混合血液1滴與玻片上，加蓋玻片，濕片下油鏡觀察。

5.4油鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞，以百分率報(bào)告。

6結(jié)果判定

網(wǎng)織紅細(xì)胞的形態(tài)：紅細(xì)胞內(nèi)含有由藍(lán)色細(xì)小點(diǎn)狀、線狀連簇成網(wǎng)織結(jié)構(gòu)的物

質(zhì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。結(jié)果報(bào)告單位以紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率表示。

7參考值

成年人：0.5%?1.5%

新生兒：2%?6%

8臨床意義

8.1網(wǎng)織紅細(xì)胞是尚未完全成熟的RBC,較成熟RBC稍大，由于其胞漿中存在嗜堿

性的RNA物質(zhì)，用煌焦油藍(lán)、新亞甲藍(lán)等染料進(jìn)行活體染色后，胞漿中可見藍(lán)綠色

的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故名RET。RET進(jìn)入血循環(huán)后，經(jīng)24?48h,變?yōu)槌墒斓腞BC。

8.2RET計(jì)數(shù)是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo)。對(duì)貧血的診斷與鑒別診斷有重要參

考價(jià)值。

8.3網(wǎng)織紅細(xì)胞增加：表示骨髓造血功能旺盛，各型貧血均可增多，溶血性貧血均

可增多，溶血性貧血增加尤為顯著；惡性貧血或缺鐵性貧血應(yīng)用維生素瓦或供鐵質(zhì)

后顯著增多，表示有療效。

8.4網(wǎng)織紅細(xì)胞減少：再生障礙性貧血。

9結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系

9.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。

9.2審核者認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單

的審核者處簽名。

9.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度等的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚

至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。

10有關(guān)引用程序與文件

10.1檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。

10.2標(biāo)本送檢和接收程序。

12參考文獻(xiàn)

12.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州：浙江大學(xué)出版社，

2004.

12.2葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第三版）.東南大學(xué)

出版社，2006.

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分析項(xiàng)目SOP文件編號(hào):LJ-FXXMS0P-01/07版本：2010-A/0生效日期:20101001

七、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)共2頁(yè)

1檢驗(yàn)申請(qǐng)

單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。

2標(biāo)本采集與處理

2.1標(biāo)本采集

2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml,EDTA-K2抗凝，置普通試管中?；虿捎煤婵湛鼓?/p>

血管。也可用末稍血采集法，末稍血采集后直接進(jìn)入檢測(cè)操作程序。

2.1.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯?的標(biāo)識(shí)符。

2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。

2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記

錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。

2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本

2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本。

2.1.5.2對(duì)分析有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。

2.1.5.3無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。

2.1.5.4其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。

2.2標(biāo)本保存

2.2.1接收標(biāo)本后避免溶血。

2.2.2標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（15?25℃）下可穩(wěn)定8h,普通冰箱中（2—8℃）穩(wěn)定

24ho

2.2.3已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置4?8c冰箱內(nèi)保存3d。

3方法原理

點(diǎn)彩RBC胞漿中含有殘存嗜堿性的已變性的RNA,用堿性亞甲基藍(lán)染色顯深藍(lán)色

顆粒，RBC淡藍(lán)綠色；用瑞氏染色顆粒呈藍(lán)黑色。

4試劑及其他用品

4.1染色液：堿性亞甲基藍(lán)染液（Baso）。

4.2顯微鏡

5標(biāo)本檢測(cè)操作

5.1按常規(guī)方法制備薄血片，自然干燥后，用甲醇固定3min。

5.2用堿性亞甲基藍(lán)染色1?2min。水洗待干后備用。

5.3先用低倍鏡選擇紅細(xì)胞散在分布均勻的部位，然后用油鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞

中的嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞，以百分率報(bào)告。

6適用儀器

奧林巴斯顯微鏡

7結(jié)果判定

紅細(xì)胞胞漿中有大小、形狀不一的藍(lán)色顆粒為點(diǎn)彩紅細(xì)胞。結(jié)果以百分比報(bào)告。

8參考值

<0.03%

9臨床意義

9.1中毒患者：如鉛、汞、銀、錫等金屬中毒及硝基苯、苯胺等中毒時(shí)，點(diǎn)彩RBC

顯著增高。

9.2各類貧血：如HIA、MegA、惡性貧血、惡性腫瘤等，點(diǎn)彩RBC也可明顯增高。

10結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系

10.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。

10.2審核者認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告

單的審核者處簽名。

10.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度等的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚

至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。

11有關(guān)引用程序與文件

11.1檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。

11.2標(biāo)本送檢和接收程序。

12參考文獻(xiàn)

12.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州：浙江大學(xué)出版社，

2004.

12.2葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第三版）.東南大學(xué)

出版社，2006.

寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件

分析項(xiàng)目SOP文件編號(hào)：LJ-FXXMS0P-01/08版本：2010-A/0生效日期:20101001

八、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（目視計(jì)數(shù)法）標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)共3頁(yè)

1檢驗(yàn)申請(qǐng)

單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：白細(xì)胞計(jì)數(shù)（目視計(jì)數(shù)法）；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血液常規(guī)測(cè)定。

臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。

2標(biāo)本采集與處理

2.1采血前受檢者保持安靜、放松狀態(tài)，環(huán)境溫暖，防止靜脈攣縮。一般采用坐姿

采血。

2.2用一次性無(wú)菌注射器采靜脈血2.0ml,置于含EDTA-4的真空管中，顛倒混勻

抗凝，及時(shí)送檢。

2.3采血時(shí)壓脈帶綁扎時(shí)間不能超過Imin,順利采血，血液與抗凝劑混勻要充分，

不能產(chǎn)生氣泡，避免溶血，否則均影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4采集末梢血時(shí)，先拭去自然流出（或適當(dāng)力度擠出）的第一滴血，再按PLT、RBC、

HGB、WBC的標(biāo)本米集順序米集標(biāo)本。

2.5檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本

采集時(shí)間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識(shí)。

2.6采血后在4h內(nèi)完成檢測(cè)，末梢血稀釋標(biāo)本應(yīng)在30min內(nèi)完成檢測(cè)。檢測(cè)前標(biāo)

本置室溫即可，不能放置4?8c環(huán)境（否則血小板易被激活發(fā)生聚集）。已檢測(cè)的標(biāo)

本保持完整的編號(hào)，加蓋后在普通冰箱保存3d。

2.7WBC有20h內(nèi)有較大波動(dòng)，可達(dá)50%,原則上住院病人應(yīng)在每天同一時(shí)刻空腹

采血。不宜在食后或劇烈運(yùn)動(dòng)后采血。

3方法原理

采用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定的倍數(shù)，同時(shí)破壞溶解紅細(xì)胞，將稀釋的血

液注入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)量，經(jīng)換算即可求出

每升血液中的白細(xì)胞數(shù)量。

4試劑及其他用品

4.1試劑：白細(xì)胞稀釋液：2%醋酸溶液，自配試劑。10g/L亞甲藍(lán)溶液。

4.2血液細(xì)胞計(jì)數(shù)板，蓋玻片，微量吸管，0.5ml吸管，試管，試管架。

5適用儀器

適用顯微鏡。

6檢測(cè)步驟

6.1小試管1支，加白細(xì)胞稀釋液0.38mlo

6.2用微量吸管準(zhǔn)確吸取抗凝全血（或末梢血）20微升，擦去管尖外部余血，將吸管

插入小試管中稀釋液的底部，輕輕將血放出，并吸取上層清液，漱洗吸管二次，最

后用手搖動(dòng)試管混和。

6.3將血細(xì)胞混和液小心地滴入血液細(xì)胞計(jì)數(shù)板，充滿計(jì)數(shù)池，靜置2?3分鐘，

待白細(xì)胞下沉。

6.4用低倍鏡計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。

6.5操作注意事項(xiàng)

6.5.1大小方格內(nèi)壓線細(xì)胞應(yīng)按數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則進(jìn)行計(jì)數(shù)。

6.5.2稀釋液應(yīng)過濾，小試管和計(jì)數(shù)板須清潔，以免雜質(zhì)、微粒等被誤認(rèn)為細(xì)胞。

6.5.3計(jì)數(shù)時(shí)，兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過10隊(duì)若相差太大應(yīng)重新重池。

6.5.4白細(xì)胞數(shù)量過少時(shí)可采用擴(kuò)大計(jì)數(shù)域的方法，計(jì)數(shù)8個(gè)或9個(gè)大方格，也可

采用減少稀釋倍數(shù)的方法。

6.5.5白細(xì)胞稀釋液不能破壞有核紅細(xì)胞，它可使白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果偏高，此時(shí)應(yīng)計(jì)

算白細(xì)胞校正值。

7結(jié)果計(jì)算

計(jì)算公式：白細(xì)胞數(shù)/L=4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)/4X10X20XIO'

=4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)X50X10"

白細(xì)胞校正值=100/（100+有核紅細(xì)胞）X校正前白細(xì)胞數(shù)

（公式中的有核紅細(xì)胞是指分類100個(gè)白細(xì)胞時(shí)所遇見的有核紅細(xì)胞）

8檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告

8.1結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。

8.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者

簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。

8.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。

9參考范圍

成人:（4~10）X107L；

兒童：（5?12）X107L；

新生兒：（15?20）X107L

10臨床意義

10.1由于中性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的50%-70%,其增高和減低直接影響白細(xì)胞總

數(shù)的變化，因此大多數(shù)病例白細(xì)胞總數(shù)的變化實(shí)際反映中性粒細(xì)胞的變化。

10.2生理性增高：初生兒白細(xì)胞較高，以后逐漸降至成人水平。早晨較低，下午

較高，運(yùn)動(dòng)后升高，妊娠和分娩時(shí)也升高。極度恐懼與疼痛可致白細(xì)胞增高。

10.3病理性增高：在急性感染，嚴(yán)重組織損傷，急性大出血，急性中毒，某些白

血病時(shí)白細(xì)胞呈不同程度升高。大部分細(xì)菌性感染、尿毒癥、燒傷、手術(shù)后、傳染

性單核細(xì)胞增多癥、白血病等白細(xì)胞增高。

10.4減少：病毒性感染、傷寒、副傷害、瘧疾、再生障礙性貧血、放療、化療、

非白血性白血病等。再障，脾亢，電離輻射，自身免疫性疾病時(shí)白細(xì)胞減少。

10.5顯微鏡WBC計(jì)數(shù)一般用于對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀分析結(jié)果有疑問結(jié)果的復(fù)查，和某

些特殊標(biāo)本的檢查。

10.6本法另一個(gè)重要的用途是用于對(duì)血球計(jì)數(shù)分析儀的校準(zhǔn)。嚴(yán)格按本程序操作

重復(fù)計(jì)數(shù)10-20次新鮮血液標(biāo)本的結(jié)果可作為血球計(jì)數(shù)分析儀校準(zhǔn)的靶值。

11有關(guān)引用程序與文件

11.1標(biāo)本送檢和接收程序。

12參考文獻(xiàn)

12.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州：浙江大學(xué)出版社，

2004.

12.2葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第三版）.東南大學(xué)

出版社,2006.

寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件

分析項(xiàng)目SOP文件編號(hào)：LJ-FXXMS0P-01/09版本：2010-A/0生效日期:20101001

九、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)（目視計(jì)數(shù)法）標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1頁(yè)