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22Technicalcodeofexperimentalminkembryocollectionandtransfer2024-12-31發(fā)布DB22/T3680—2024I本文件主要起草人:刁云飛、李曉霞、許保增DB22/T3680—20241實驗用水貂胚胎采集及移植技術(shù)規(guī)程用于暫時保存采集到的胚胎,提供營養(yǎng)、保護(hù)的4技術(shù)流程沖胚、胚胎收集、胚胎質(zhì)量鑒定、胚胎移植。實驗用水貂胚胎采集及移植技術(shù)流程見圖DB22/T3680—202425水貂的選擇6.1.1藥品包括麻醉藥、蘇醒藥,器材選擇參見表6.1.2水貂手術(shù)前應(yīng)禁食6h~12h。6.1.3將水貂進(jìn)行全身麻醉。麻醉后,應(yīng)將水貂腹部朝上,平放于手術(shù)6.1.4對麻醉后的水貂睪丸下部陰囊縫際處進(jìn)6.2手術(shù)6.2.1在睪丸下部陰囊縫際一側(cè),平行于縫際,切開皮膚、肉膜、總鞘膜,做一個2cm切口,將睪DB22/T3680—202436.2.3將睪丸放回陰囊內(nèi),使用可吸收外科縫合線6.3術(shù)后8.1.1藥品及試劑包括麻醉藥、蘇醒藥,器材的選擇參見表A.1。8.1.2供體水貂第二次交配后第2d進(jìn)行輸卵8.2手術(shù)采集8.2.1在腹中線倒數(shù)第二乳頭處做一個2cm左右切口,將兩側(cè)子宮角、輸卵管、卵巢暴露,觀察左9沖胚、胚胎收集與質(zhì)量鑒定將8.2.1采集到的輸卵管放在平皿里進(jìn)行沖胚。使用無針頭注射器吸入5mL沖胚液(沖胚液配9.3胚胎質(zhì)量鑒定9.3.1胚胎檢查在無菌操作室內(nèi),將存放胚胎的平皿放在37℃恒溫板上,體視顯微鏡下檢查、對胚胎質(zhì)量進(jìn)行分級、鑒定胚胎發(fā)育階段并記錄,記錄表見DB22/T3680—202449.3.2胚胎質(zhì)量分級9.3.2.2胚胎可分為A、B、C、D四個等級,A級、Ba)A級:胚胎發(fā)育階段與胚齡一致,輪廓清晰,卵周隙適中,若2細(xì)胞期則分裂球大小均勻、c)C級:胚胎發(fā)育階段與胚齡不太一致,輪廓尚清晰,細(xì)胞球收縮較大或膨脹過大,卵周隙大d)D級:胚胎發(fā)育階段與胚齡不一致,輪廓不清晰,細(xì)胞膜破10.1.2將與供體水貂同期發(fā)情的受體水貂與結(jié)扎公貂同籠交配刺激排卵,10.2胚胎移植后將胚胎移植針緩慢拔出。按照同樣方法將5枚胚胎移植入另一DB22/T3680—20245實驗器材 - -針口外徑不能大于1.5mm,內(nèi)徑不能小于DB22/T3680—20246B.1沖胚液的推薦配方及配制方法見表B.2胚胎保存液的推薦配方級配制方法見
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