動物養(yǎng)殖場消毒效果評價規(guī)范

2動物養(yǎng)殖場消毒效果評價規(guī)范本文件規(guī)定了動物養(yǎng)殖場物體表面、舍內(nèi)空氣消毒效果的檢測及評價方法。本文件適用于遼寧動物養(yǎng)殖場現(xiàn)場消毒效果評價。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB15981消毒與滅菌效果的評價方法與標準GB/T18204.3公共場所衛(wèi)生檢驗方法第3部分：空氣微生物GB4789.2食品安全國家標準食品微生物學檢驗菌落總數(shù)測定NY/T3075畜禽養(yǎng)殖場消毒技術(shù)3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。用物理、化學或生物學方法清除和殺滅環(huán)境和各種物品中的病原微生物及其他有害微生物的處理過程。3.2中和劑neutralizer在微生物殺滅試驗中，用以中和微生物與消毒劑混懸液中殘留的消毒劑，使其失去對微生物抑制和殺滅作用的試劑。3.3中和試驗neutralizationtest為了準確評價消毒劑對微生物的殺滅作用，在進行消毒效果評價前，應(yīng)選擇能及時終止消毒劑的殺滅微生物作用，而本身及其與消毒劑的反應(yīng)產(chǎn)物對微生物無抑制或殺滅作用，且對培養(yǎng)基無不良影響的中和劑進行中和效果試驗。3.4菌落形成單位colonyformingunits,CFU單位體積中的細菌、霉菌、酵母等微生物的群落總數(shù)。3.5殺滅對數(shù)值logarithmicvalueofdisinfection當微生物數(shù)量以對數(shù)表示時，指消毒前后微生物減少的對數(shù)值。4中和劑選擇3DB!FORMTEXT21丄!FORMTEXTXXXXX丄—!FORMTEXTXXXX丄按照GB15981附錄A中和劑中和效果試驗操作，選擇合適的中和劑。5消毒方法按照NY/T3075操作。6采樣6.1采樣時間分別于消毒前和消毒后(根據(jù)消毒劑作用效果產(chǎn)生時間確定）在同一采樣點進行采樣。6.2物體表面樣品采集6.2.1采樣點采樣區(qū)域包括地面、墻壁、下水道、設(shè)施設(shè)備和器械工具表面（飲水器、水線、料槽、料線、圍欄、門窗、工具等）、場區(qū)道路、車輛。地面、墻壁和下水道按照“對角線”位置，設(shè)定5個采樣點；設(shè)施設(shè)備和器械工具表面隨機均勻設(shè)定3個～5個采樣點；場區(qū)道路采樣區(qū)域為養(yǎng)殖場主干道，選擇道路中央平整處，隨機均勻設(shè)定3～5個采樣點；車輛采樣區(qū)域為車頭、駕駛室（方向盤、腳踏處、中控臺等）、車底盤、車輪、車廂廂體、廂底、車廂夾縫和隨車物品（篷布等）等部位，隨機均勻設(shè)定3個～5個采樣點。6.2.2采樣方法采樣點有規(guī)則平面的，將5cm×5cm的正方形標準滅菌規(guī)格板，放置于采樣點表面，用浸有相應(yīng)中和劑的棉拭子，反復(fù)均勻涂滿整個方格；采樣點無規(guī)則平面的，如飲水器、水線、料槽、料線、圍欄、門窗、工具、車輛方向盤、車廂夾縫等處，用浸有相應(yīng)中和劑的棉拭子直接涂擦采樣。采樣后棄去手接觸部分的棉拭子，將棉拭子放入含10mL中和劑的采樣管中?，F(xiàn)場樣品送實驗室檢測，如無法及時檢測，室溫存放不超過2h，4℃冰箱存放不超過4h。6.3舍內(nèi)空氣樣品采集6.3.1采樣點按照GB/T18204.3中附錄A現(xiàn)場采樣檢測布點要求操作。6.3.2采樣方法采用空氣沉降法采樣，按照GB/T18204.3操作。6.4采樣注意事項采樣前，采樣人員應(yīng)穿上防護服、鞋套，戴上口罩和護目鏡，手部用75%酒精消毒處理，并戴上一次性橡膠手套采樣；每采集一個樣品，更換一次手套。棉拭子涂抹采樣時，需盡量使棉拭子大小、涂抹的力度一致?？諝馍醿?nèi)采樣前1h需要將待檢房舍門窗與通風口關(guān)閉好。7檢測及結(jié)果計算4DB!FORMTEXT21丄!FORMTEXTXXXXX丄—!FORMTEXTXXXX丄7.1物體表面樣品將放有棉拭子的采樣管充分震蕩，隨后將樣品10倍倍比稀釋，取1mL以瓊脂傾注法接種平皿，每個樣品接種2個平皿，置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h后，進行菌落計數(shù)（CFU/mL），每個采樣區(qū)域采樣點取平均值并換算為對數(shù)值。細菌菌落計數(shù)按照GB4789.2操作。殺滅對數(shù)值=消毒前活菌濃度的對數(shù)值-消毒后活菌濃度的對數(shù)值。7.2舍內(nèi)空氣樣品將采樣平皿置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h，進行舍內(nèi)空氣菌落數(shù)計數(shù)（CFU/皿），舍內(nèi)多個采樣點取平均值并計算出殺菌率。細菌菌落計數(shù)按照GB4789.2操作。殺菌率=(消毒前樣品平均菌落數(shù)–消毒后樣品平均菌落數(shù))/消毒前樣品平均菌落數(shù)×100%7.3對照試驗7.3.1陰性對照將試驗未用完的中和劑溶液和培養(yǎng)基分別作為陰性對照，按照7.1操作。7.3.2陽性對照使用標準菌（金黃色葡萄球菌或大腸桿菌）作為陽性對照，按照7.1操作。8消毒效果評價8.1物體表面樣品消毒效果評價陰性對照應(yīng)無菌生長，陽性對照細菌生長良好，殺滅對數(shù)值均≥1，判為消毒合格。其余為不合格。8.2舍內(nèi)空氣樣品消毒效果評價陰性對照應(yīng)無菌生長，陽性對照細菌生長良好，殺菌率≥90%，判為消毒合格。其余為不合格。5DB!FORMTEXT21丄!FORMTEXTXXXXX丄—!FORMTEXTXXXX丄（規(guī)范性）培