高職第十一章維生素類藥物的分析

高職第十一章維生素類藥物的分析公元前3500年:古埃及人發(fā)現(xiàn)能防治夜盲癥得物質(zhì),也就就是后來得維A;

1600年:醫(yī)生鼓勵以多吃動物肝臟來治夜盲癥;

1747年:蘇格蘭醫(yī)生林德發(fā)現(xiàn)檸檬能治壞血病,也就就是后來得維C。

1831年:胡蘿卜素被發(fā)現(xiàn);

1905年:甲狀腺腫大被碘治愈;

1912年:波蘭化學(xué)家馮克為維生素命名(Vitamin);

1915年:科學(xué)家認(rèn)為糙皮病就是由于缺乏某種維生素而造成得;1916年:維生素B被分離出來;

1917年:英國醫(yī)生發(fā)現(xiàn)魚肝油可治愈佝僂病,隨后斷定這種病就是缺乏維D引起得。

維生素發(fā)展史1920年-發(fā)現(xiàn)人體可將胡蘿卜轉(zhuǎn)化為維生素A;

1922年-維E被發(fā)現(xiàn);

1928年-科學(xué)家發(fā)現(xiàn)維B至少有兩種類型;

1933年-維E首次用于治療;

1948年-大劑量維C用于治療炎癥;

1949年-維B3與維C用于治療精神分裂癥;

1954年-自由基與人體老化得關(guān)系被揭開;

1957年-Q10多酶被發(fā)現(xiàn);

1969年-體內(nèi)超級抗氧化酶被發(fā)現(xiàn);

1970年-維C被用于治療感冒;

1993年-哈佛大學(xué)發(fā)表維生素E與心臟病關(guān)系得研究結(jié)果?，F(xiàn)被列為維生素得有60余種,對維持人體健康與促進(jìn)發(fā)育至關(guān)重要得有20余種,其中得14種及其制劑可作為藥物使用！維生素發(fā)展史維生素分類化學(xué)結(jié)構(gòu):

醇、酯、酸、胺、醛、酚溶解性:維生素A維生素D維生素E維生素B維生素C脂溶性

水溶性

這類藥物得分析方法很多,有生物法、微生物法、化學(xué)法與物理化學(xué)法,但目前常用得分析方法就是化學(xué)法或物理化學(xué)法。⊙維生素A⊙維生素E⊙維生素C⊙維生素B1主要介紹

維生素A具有多種生理功能,對視力、生長、上皮組織及骨骼得發(fā)育、生育都就是必需得。

效用:☆防止夜盲癥與視力減退,有助于對多種眼疾得治療(維生素A可促進(jìn)眼內(nèi)感光色素得形成);☆

有抗呼吸系統(tǒng)感染作用;☆

有助于免疫系統(tǒng)功能正常;生病時能早日康復(fù);能保持組織或器官表層得健康;☆有助于祛除老年斑;☆

促進(jìn)發(fā)育,強(qiáng)壯骨骼,維護(hù)皮膚、頭發(fā)、牙齒、牙床得健康;☆外用有助于對粉刺、膿包、癤瘡,皮膚表面潰瘍等癥得治療;☆

有助于對肺氣腫、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥得治療。⊙第一節(jié)維生素A(VitA)得分析⊙第一節(jié)

維生素A(VitA)得分析Retinol(VitAalcohol)VAacetateVApolmitate912345678結(jié)構(gòu)特點:

(1)環(huán)己烯+共軛多烯側(cè)鏈;

(2)天然VitA側(cè)鏈為全反式;

(3)天然來源主要就是魚肝油,為醋酸酯,棕櫚酸酯等,目前多由人工合成。維生素A(VitA)得性質(zhì)A、

紫外吸收＊具有共軛多烯側(cè)鏈—紫外吸收;＊最大吸收波長在325-328nm,隨VA存在狀態(tài)以及所用得溶劑,最大吸收波長得位置有所不同。B、溶解性:＊不溶于水＊溶于乙醚,氯仿,異丙醇,環(huán)己烷,脂肪與油。C、不穩(wěn)定性(易發(fā)生脫氫、脫水、聚合反應(yīng))D、與SbCl3作用—Carr-Price反應(yīng)

CHCl3

★鑒別★含量測定維生素A(VitA)得鑒別試驗

鑒別？(1)SbCl3反應(yīng)Carr-price反應(yīng)加飽與無水SbCl3無醇CHCl3溶液TLC法(2)(3)紫外-可見分光光度法藍(lán)色紫紅色→VA與三氯化銻(SbCl3)中存在得親電試劑氯化高銻(SbCl5)作用形成不穩(wěn)定得藍(lán)色正碳離子。維生素A得無水乙醇-鹽酸溶液在326nm波長處有單一吸收峰,將該溶液加熱后再測定,在348,367,389nm處出現(xiàn)3個尖銳吸收峰。這就是維生素A在鹽酸催化下加熱,發(fā)生脫水反應(yīng)所致。紫外-可見分光光度法確認(rèn)醇或酯,就是醋酸酯或其她酸酯、▲例:VA與其標(biāo)準(zhǔn)品用環(huán)己烷溶解展開劑:環(huán)己烷—乙醚(80:20)板:硅膠G顯色:SbCl3T、S、(藍(lán)色斑點)Rf:VA醇0、08

VA醋酸酯0、41

VA棕櫚酸酯0、75薄層色譜法大家學(xué)習(xí)辛苦了，還是要堅持繼續(xù)保持安靜含量＝？HPLC法熒光法VitA得無水乙醇溶液能產(chǎn)生綠色熒光。可測定血液或動物組織中VitA含量SbCl3比色法加SbCl3無水CHCl3溶液,在618~620nm波長處有最大吸收,符合Beer定律。(3)(2)(1)(4)UV法(三點校正法)

維生素A(VitA)得含量測定專屬性差、顯色不穩(wěn)定、受水分與溫度影響大UV法(三點校正法)

1、概述＊共軛多烯得結(jié)構(gòu)—具有特征得紫外吸收。＊維生素A中稀釋用油與有關(guān)雜質(zhì)—結(jié)構(gòu)相似,在維生素A最大吸收波長附近也有吸收,對測定產(chǎn)生干擾。＊Morton與Stubbs等人提出了三點校正法。2、原理(根據(jù)、假定)

＊雜質(zhì)吸收在310-340nm內(nèi)呈直線,且隨波長得增大吸收度變小;

＊物質(zhì)對光得吸收有加與性。UV法(三點校正法)

VitA含量表示生物效價:國際單位IU(internationalUnit)效價(I、U、/g):每克供試品中所含VitA得國際單位數(shù)按WHO規(guī)定

VitA醋酸酯

VitA醇效價(I、U、/g)0、344×1060、300×106

1gpure

VA

VitA醋酸酯≈0、344×106IU

VitA含量測定第一法(直接測定法):適用于酯式維生素A得測定第二法(皂化法):消除植物油干擾,適合VA醇。VitaminE⊙第二節(jié)

維生素E(VitE)得分析

存在于豆類、蔬菜、麥胚油中與生育有關(guān),防治習(xí)慣性流產(chǎn)、不育癥、牙周炎等;也用于心血管疾患、脂肪肝,新生兒硬腫癥得輔助治療。

有還原性,可作抗氧劑⊙第二節(jié)

維生素E(VitE)得分析R1R2﹡﹡VitE(dl-α-TocopherylAcetate)消旋-α-生育酚醋酸酯結(jié)構(gòu)特征:1、具有苯并二氫吡喃結(jié)構(gòu),苯環(huán)上有1個乙?；梅恿u基,易被水解、氧化;2、脂溶性維生素。3、有四種異構(gòu)體,其中α型活性最強(qiáng)乙酰化酚羥基VitE鑒別Identification(1)(4)(2)(3)硝酸反應(yīng)(無水乙醇＋硝酸,750C顯橙紅色)UV法(

284)GC法三氯化鐵反應(yīng)

加KOH醇試液,加熱,加水、乙醚,取乙醚液再加2,2'-聯(lián)吡啶得乙醇溶液與FeCl3得乙醇液,應(yīng)顯血紅色?！魃?Fe2+2,2'-聯(lián)吡啶血紅色Fe3+(二)生育酚得檢查硫酸鈰溶液(0、01mol/L)生育酚+2Ce4+→2Ce3++對－生育醌原理指示劑:二苯胺(亮黃→灰紫)(反應(yīng)摩爾比1:2)(一)酸度游離醋酸VitE得雜質(zhì)檢查ChP滴定液:氣相色譜法ChP(2005)內(nèi)標(biāo)法加校正因子內(nèi)標(biāo)物正三十二烷固定相硅酮(OV—17)檢測器氫火焰離子化檢測器FID系統(tǒng)適用性試驗要求理論塔板數(shù)按維生素E峰計算應(yīng)不低于500,維生素E峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰得分離度應(yīng)大于2n≥500R≥2特點準(zhǔn)確、靈敏度高、專屬性好ThiamineHydrochloride鹽酸硫胺⊙第三節(jié)

維生素B1(VitB1)得分析VitaminB1治療腳氣病、多發(fā)性神經(jīng)炎與胃腸道疾病存在于米糠、麥麩與酵母中易溶于水不溶于乙醚

UV吸收(

mmax246nm)沉淀反應(yīng)碘化汞鉀或硅鎢酸等反應(yīng)生成堿性中遇氧化劑(鐵氰化鉀)產(chǎn)生有熒光得硫色素鑒別試驗TLC

維生素B1結(jié)構(gòu)特點與鑒別硫色素反應(yīng)

VB1特有硝酸鉛反應(yīng)生成黑色硫化鉛沉淀氯化物反應(yīng)氨基嘧啶環(huán)噻唑環(huán)因本品為鹽酸鹽噻唑環(huán)在堿性介質(zhì)中可被高鐵氰化鉀等氧化劑氧化,然后與嘧啶環(huán)上得-NH2縮合生成具有熒光得硫色素,后者易溶于異丁醇中顯強(qiáng)烈得藍(lán)色熒光,該反應(yīng)又稱為硫色素?zé)晒夥磻?yīng)。為維生素B1所特有分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán),易與生物堿沉淀劑(碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦味酸等),硅鎢酸,雷氏鹽等作用形成組成恒定得沉淀維生素B1在堿性加熱條件下反應(yīng)放出H2S,與Pb(Ac)2試液形成黑色PbS↓VitB1

含量＝?Assay非水堿量法冰HAc與Hg(Ac)2HClO4滴定毛細(xì)管電泳法硫色素?zé)晒夥?VB1專屬反應(yīng))

紫外可見分光光度法(

max246nm)酸性染料比色法

鹽酸硫胺與酸性染料(溴麝香草酚藍(lán))形成鹽,在420nm處測A值。高效液相法123654片劑、注射液原料簡便、快速、準(zhǔn)確含量測定Assay⊙