TNAIA 0338-2024 葡萄酒中苯甲酸、山梨酸和脫氫乙酸的測定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ICSCCSC151

T/NAIA團 體 標 準T/NAIA0338—2024葡萄酒中苯甲酸、山梨酸和脫氫乙酸的測定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法Determinationofbenzoicacid,sorbicacidanddehydroaceticacidinwinebyHPLC-MS/MS2024-11-25發(fā)布 2024-12-01實施寧夏化學分析測試協(xié)會 發(fā)布T/NAIA0338—2024T/NAIA0338—2024II前 言GB/T1.1-20201編寫。本文件由寧夏化學分析測試協(xié)會提出并歸口。本文件起草單位：寧夏回族自治區(qū)食品檢測研究院（國家市場監(jiān)督管理總局重點實驗室（枸杞及葡萄酒質(zhì)量安全））、吐魯番市質(zhì)量與計量檢測所、寧夏化學分析測試協(xié)會。郭陽、劉繼輝、呂毅、吳明、張小飛。PAGEPAGE1葡萄酒中苯甲酸、山梨酸和脫氫乙酸的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本文件規(guī)定了葡萄酒中苯甲酸、ft梨酸、脫氫乙酸的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。本文件適用葡萄酒中苯甲酸、ft梨酸和脫氫乙酸的測定和確證。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理試樣經(jīng)甲醇-（10+90，體積比聯(lián)質(zhì)譜儀檢測，外標法定量。試劑和材料本方法所用的試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。試劑和材料甲醇：色譜純。乙酸銨：色譜純。十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）：40μm～60μm。乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）：40μm~60μm。乙酸銨水溶液（5mmol/L）：0.385g1000mL，搖勻。甲醇-水溶液（20+80，體積比）：200mL800mL水中，混勻。微孔濾膜（水相）：13mm×0.22μm，或相當者。標準品苯甲酸（、ft梨酸（乙酸（純度：≥95%，CAS：520-45-6）。標準溶液配制標準儲備溶液（1.0mg/mL）10mgft梨酸和脫氫乙酸標準品，用水溶T/NAIA0338—2024T/NAIA0338—2024PAGEPAGE2解并分別定容至10mL，0～4℃避光貯存，有效期6個月?；旌蠘藴蕛淙芤海?0.0μg/mL）：吸取一定量的苯甲酸、ft梨酸和脫氫乙酸標準儲備溶液（5.3.1）于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，0～4℃避光貯存，有效期1個月?；|(zhì)混合標準工作溶液：分別準確吸取混合標準儲備溶液（5.3.2）適量，用空白樣品基質(zhì)溶10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、500.0、1000.0、2000.0ng/mL，臨用現(xiàn)配。儀器和設備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配備電噴霧離子源。0.1mg0.01g。渦旋混合器。8000r/min。超聲波震蕩器。C18，2.1mm×100mm1.7μm或性能相當。分析步驟前處理過程5g（25mL容量瓶中，加入甲醇-水溶液5mL50mgPSA100mgC182min，6000r/min3min，吸取上清液過微孔濾膜（5.1.7）后供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定。儀器參考條件液相色譜參考條件30℃。流動相：A5mmol/L乙酸銨水溶液（5.1.5），B相為甲醇（5.1.1）；1c）流速：0.3mL/min。d）進樣量：5μL。表1 流動相及梯度洗脫條件時間/min流速/（mL/min）流動相A/%流動相B/%0.000.390102.000.390103.000.320805.000.320805.010.390108.000.39010質(zhì)譜參考條件a）離子源：電噴霧離子源（ESI）b）掃描方式：負離子掃描。c）檢測方式：多反應監(jiān)測（MRM）d）鞘氣溫度：350℃。e）鞘氣流速：11.0L/min。f）霧化器壓力：40psi。g）噴嘴電壓：500V。h）毛細管電壓：4500V。i）干燥氣溫度：300℃。g）干燥氣流速：7.0L/min。k）定性離子對、定量離子對、碎裂電壓、碰撞能量等參數(shù)參見附錄A。定量測定7.2.17.2.2間有峰出現(xiàn)，則對其進行確證。苯甲酸、ft梨酸和脫氫乙酸標準品的多反應監(jiān)測（MRM）色譜圖B，采用基質(zhì)溶液校準曲線外標法定量。定性測定許偏差之內(nèi)（2），則可判定樣品中存在對應的被測物。表2 定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%允許的相對偏差±20%±25%±30%±50%空白試驗除不加試樣外，均按上述步驟進行。分析結(jié)果的表述試樣中苯甲酸、ft梨酸和脫氫乙酸的含量按式（1）進行計算：X cV 1000式中：

m 1000

(1)X ──試樣中各種化合物含量，單位為微克每千克（μg/kg）；c ──由標準曲線計算出的試樣溶液濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；V ──試樣的最后定容體積，單位為毫升（mL）；m ──試樣質(zhì)量，單位為克（g）。注：測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字。精密度在重復性測定條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。其他5g25mL時，苯甲酸、ft0.5mg/kg；檢0.2mg/kg。附錄A(資料性)苯甲酸、ft梨酸和脫氫乙酸的質(zhì)譜參數(shù)表A.1 苯甲酸、ft梨酸和脫氫乙酸的質(zhì)譜參數(shù)被測物名稱母離子(m/z)子離子(m/z)碎裂電壓(v)碰撞能量(ev)苯甲酸12177.1*,121.050