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3有機(jī)肥中大腸桿菌活菌PMA-qPCR快速測(cè)定注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法NY525-2012有機(jī)肥料3.1PMA(疊氮溴化丙錠)Propidium3.2實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)QuantitativeReal每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)歷的4主要包括:裂解液、清洗液、洗脫液、磁珠。于室溫保存(16~30℃),置于陰涼干燥6.3SYBR?PremixExTaqTM配套R(shí)oxReferenceDye或Ro以收集菌體,提取其全基因組DNA。采用微量基因拷貝數(shù)=全基×660×NA…………DNA濃度——copies/μL6.5.2B液(0.2mol/L磷酸氫二鈉水溶液5PMA-LiteTMLEDPhotolysisDevice(E90002)光解儀、恒溫震蕩培養(yǎng)箱、恒溫金溫離心機(jī)、微型孔板離心機(jī)、漩渦震蕩器、核酸提取儀、qPCR儀、超微量分光光度計(jì)等。應(yīng)將樣品放入0℃~4℃冰箱保存,放置時(shí)間也不宜超過24h。9檢測(cè)步驟9.1樣品預(yù)處理為使照射過程中不產(chǎn)生熱量,采用Biotium公司生產(chǎn)的PMA-LiteTMLEDPhotolysis69.5標(biāo)準(zhǔn)曲線7然后利用清洗液去除雜質(zhì),最終由洗脫液將核酸從磁珠上洗A.2耗材A.2.1樣品盤及套管A.2.2樣品盤及梳子A.2.3儲(chǔ)存8A.3儀器及設(shè)備A.4操作步驟A.4.1試劑添加A.4.2加樣A.4.3啟動(dòng)萃取完成后,取出相應(yīng)的萃取樣品盤和套管/梳子。將核酸從心管保存。建議使用新鮮制備的核酸用于后續(xù)操作,若要長(zhǎng)期保存核酸,建

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