TBPMA 29-2024 火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ICS67.220CCSX04BPMA北 京 預(yù) 防 醫(yī) 學(xué) 會 團 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/BPMA29—2024火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法Determinationofhigenamineandtretoquinolinhotpotseasoning—Liquidchromatography-tandemmassspectrometrymethod2024-07-30發(fā)布 2024-07-30實施北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會??發(fā)布T/BPMA29T/BPMA29—2024前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由北京市科學(xué)技術(shù)研究院分析測試研究所（北京市理化分析測試中心）提出。本文件由北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會歸口。本文件起草單位：北京市科學(xué)技術(shù)研究院分析測試研究所（北京市理化分析測試中心）、北京市疾病預(yù)防控制中心、北京市延慶區(qū)疾病預(yù)防控制中心。本文件主要起草人：王建鳳、馮月超、劉艷、郭巧珍、姚凱、張晶、林強。IT/BPMA29T/BPMA29—2024PAGEPAGE3火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本文件描述了火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的測定方法。本文件適用于火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的定性定量測定。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。方法原理火鍋底料中的去甲烏藥堿和曲托喹酚，用含5%甲酸的乙醇溶液提取，經(jīng)十八烷基鍵合硅（C18）、石墨化碳黑（GCB）以及加強基質(zhì)脂類去除劑（EMR）組合填料凈化后，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，同位素內(nèi)標(biāo)法定量。試劑和材料試劑除另有說明外，所用試劑均為色譜純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。甲醇（HOH。乙醇（H5OH。甲酸（HOOH88。（HOONH4。乙腈（HCN。5.16（CH1NOAS號：584-65299。5.17D（1H3DNOAS號：2298183-199%。（CH2NO，AS號：185959-699%。D（1H1DNO，AS號：185963-299。51.10含5%125L甲酸（5.1.，用乙醇5.1.）定容至250m51.1110mmoL含0.1甲酸：稱取0.315g（5.140.5mL甲酸5.1.，定容至500L，混勻。51.12（5.1.和10mmoL含0.1甲酸（51.1各50.0mL，混勻。5.1.-D（5.17（5.18D5.1.10mL1000μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，-183個月。100μL10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成10μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，有效期1個月?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)中間溶液：準(zhǔn)確移取混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液（5.1.14）100μL10mL容量瓶中，用甲醇定100ng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。-D4和曲托喹酚-D9100μL10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到10μg/mL混合內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，有效期1個月。10μg/mL混合內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（5.1.16）1.0mL10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到1μg/mL混合內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。（5..15（51.1溶液（5.1.12）0.1ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工5ng/mL，現(xiàn)用現(xiàn)配。材料（GB120μ~400μm。（140μ~60μm。（MR。微孔濾膜：有機系，尼龍，0.22μm。6儀器和設(shè)備-SI。8000r/min。氮氣吹干儀。振蕩器。渦旋混合器。超聲波清洗器。6.7分析天平：感量0.00001g和0.01g。試樣制備和保存試樣制備取代表性樣品500g，用攪碎機充分?jǐn)囁榛靹颍▔K狀樣品需先在60℃水浴中融化后再用攪碎機充分?jǐn)囁榛靹颍┚殖蓛煞葑鳛樵嚇?，并?biāo)明標(biāo)記。試樣保存將試樣于-18℃及以下保存。8測定步驟樣品的處理稱取試樣2（精確到0.1g于50L5.1.7）100μL20mL含5%5.11030mn8000rmn離心5mn，取上清液，待凈化。移取2.0mL81.110mL65mgG（5.2.65mg85.2.）和65gMR（5.2.8000rmn離心5mn，移取1.0L上清液，40℃氮氣吹至近干，（5.1.12）1.030（5.2.4）-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定?？瞻自囼灣患釉嚇油猓渌襟E均按8.1進行。儀器分析條件液相色譜參考條件液相色譜參考條件如下：色譜柱：高強度硅膠顆粒色譜柱（2.1mm×100mm,1.8μm）或性能相當(dāng)者；b)柱溫：30℃；進樣量：5μL；流速：0.3mL/min；流動相：A相為乙腈（5..5，B相為10mo/L甲酸銨水溶液（含0.1%甲酸（.1.，梯1；2。表1梯度洗脫條件時間（min）A（%）B（%）0.03971.53975.59555.63977.5397質(zhì)譜參考條件質(zhì)譜參考條件如下：離子源：電噴霧離子源；掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多重反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；毛細管電壓：3.0kV；離子源溫度：150℃；脫溶劑溫度：500℃；脫溶劑氣流量：800L/h；錐孔氣流量：50L/h；碰撞氣體：氬氣；2。表2去甲烏藥堿和曲托喹酚及其內(nèi)標(biāo)的保留時間及質(zhì)譜條件參考值化合物保留時間（min）母離子（m/z）子離子（m/z）錐孔電壓（V）碰撞能量（eV）去甲烏藥堿3.97272.4107.2*4020161.218去甲烏藥堿-D43.97276.5108.3*4020164.318曲托喹酚4.44346.5164.2*614149.15曲托喹酚-D94.43355.6164.1*1216137.146注：加*的離子用于定量。定性判定3表3定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度/%>5020~50（含）10~20（含）≤10允許的相對偏差/%±20±25±30±50定量測定A。結(jié)果計算和表述結(jié)果按式（1）計算：式中:

X=c×V×n×000

（1）Xμ/g；mg；c（nmL；V（L；1000——換算系數(shù)。測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留一位小數(shù)。方法準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度方法檢出限和定量限去甲烏藥堿和曲托喹酚的檢出限均為0.3μg/kg，定量限均為1.0μg/kg。準(zhǔn)確度和精密度本方法被測物在1.0μg/kg，2.0μg/kg和10.0μg/kg添加濃度水平上的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差見附錄B。附錄A（資料性）去甲烏藥堿和曲托喹酚以及內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品的特征離子質(zhì)量色譜圖-D-D4A.1A.4。圖A.1曲托喹酚的特征離子質(zhì)量色譜圖（10ng/mL）圖A.2曲托喹酚-D9的特征離子質(zhì)量色譜圖（5ng/mL）圖A.3去甲烏藥堿的特征離子質(zhì)量色譜圖（10ng/mL）圖A.4去甲烏藥堿-D4的特征離子質(zhì)量色譜圖（5ng/mL）附錄B（資料性）火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差清湯、清油、牛油三種基質(zhì)添加不同濃度水平時的加標(biāo)平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果(RSD)見表B.1。B.1火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果（n=6）樣品基質(zhì)曲托喹酚去甲烏藥堿添加水平（μg/kg）平均回收率（%）RSD(%)添加水平（μg/kg）平均回收率（%）RSD(%)清湯1.01162.0