生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)操作指導(dǎo)手冊及習(xí)題集

生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)操作指導(dǎo)手冊及習(xí)題集姓名_________________________地址_______________________________學(xué)號______________________-------------------------------密-------------------------封----------------------------線--------------------------1.請首先在試卷的標(biāo)封處填寫您的姓名，身份證號和地址名稱。2.請仔細(xì)閱讀各種題目，在規(guī)定的位置填寫您的答案。一、選擇題1.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)操作的基本原則包括：

A.安全第一

B.精確操作

C.嚴(yán)謹(jǐn)記錄

D.以上都是

2.培養(yǎng)細(xì)菌常用的培養(yǎng)基成分不包括：

A.蛋白胨

B.瓊脂

C.葡萄糖

D.硫酸銅

3.DNA提取實(shí)驗(yàn)中，用于溶解細(xì)胞膜和細(xì)胞器的緩沖液是：

A.TrisHCl緩沖液

B.NaCl溶液

C.乙醇

D.0.1MEDTA

4.以下哪種酶在PCR反應(yīng)中用于DNA復(fù)制：

A.胞嘧啶脫氨酶

B.DNA聚合酶

C.限制性內(nèi)切酶

D.DNA連接酶

5.轉(zhuǎn)基因植物中，常用的標(biāo)記基因是：

A.綠色熒光蛋白基因

B.β半乳糖苷酶基因

C.抗生素抗性基因

D.以上都是

答案及解題思路：

1.答案：D

解題思路：生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)操作的基本原則應(yīng)涵蓋安全、精確和記錄等方面，因此選項(xiàng)D“以上都是”是正確的。

2.答案：D

解題思路：蛋白胨、瓊脂和葡萄糖是培養(yǎng)細(xì)菌常用的培養(yǎng)基成分，而硫酸銅不是細(xì)菌生長所必需的，因此選項(xiàng)D是正確的。

3.答案：A

解題思路：TrisHCl緩沖液常用于調(diào)節(jié)pH值，并有助于溶解細(xì)胞膜和細(xì)胞器，因此選項(xiàng)A是正確的。

4.答案：B

解題思路：在PCR反應(yīng)中，DNA聚合酶負(fù)責(zé)DNA的復(fù)制，因此選項(xiàng)B是正確的。

5.答案：D

解題思路：綠色熒光蛋白基因、β半乳糖苷酶基因和抗生素抗性基因都是常用的標(biāo)記基因，因此選項(xiàng)D“以上都是”是正確的。二、填空題1.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)操作中，無菌操作的基本原則是防止雜菌污染，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

2.DNA提取實(shí)驗(yàn)中，破碎細(xì)胞常用的方法有研磨法、超聲波破碎法、酶解法等。

3.PCR反應(yīng)的三個(gè)步驟分別是變性、復(fù)性、延伸。

4.轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，常用的載體有質(zhì)粒載體、噬菌體載體、病毒載體等。

5.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的緩沖液有TrisHCl緩沖液、磷酸鹽緩沖液（PBS）、硼酸緩沖液等。

6.限制性內(nèi)切酶的識別序列通常是具有特定核苷酸序列的回文序列。

7.轉(zhuǎn)基因植物中，常用的標(biāo)記基因是熒光素酶基因、抗生素抗性基因等。

8.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的消毒劑有70%乙醇、碘伏、甲醛等。

9.DNA測序的原理是雙鏈DNA分子中核苷酸序列的測定。

10.蛋白質(zhì)工程中，常用的方法有定點(diǎn)突變、同源重組、基因合成等。

11.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的顯微鏡有光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡等。

12.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的電泳技術(shù)有瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。

13.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的質(zhì)粒提取方法有堿裂解法、酚氯仿法等。

14.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的PCR擴(kuò)增方法有常規(guī)PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR等。

15.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法有懸浮培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)、原代培養(yǎng)等。

16.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的分子標(biāo)記技術(shù)有PCRRFLP、SSR、SNP等。

17.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的基因編輯技術(shù)有CRISPR/Cas9、ZFN、TALEN等。

18.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的基因表達(dá)調(diào)控技術(shù)有啟動(dòng)子替換、轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控、RNA干擾等。

19.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的基因克隆技術(shù)有粘性末端連接、同源重組等。

20.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)有農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化、基因槍法、電穿孔法等。

答案及解題思路：

1.答案：防止雜菌污染，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

解題思路：無菌操作是生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)的基本要求，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

2.答案：研磨法、超聲波破碎法、酶解法等。

解題思路：根據(jù)DNA提取實(shí)驗(yàn)的需求，選擇合適的細(xì)胞破碎方法。

3.答案：變性、復(fù)性、延伸。

解題思路：PCR反應(yīng)的基本步驟包括這三個(gè)過程，了解每個(gè)步驟的作用。

4.答案：質(zhì)粒載體、噬菌體載體、病毒載體等。

解題思路：了解轉(zhuǎn)基因技術(shù)中常用的載體類型。

5.答案：TrisHCl緩沖液、磷酸鹽緩沖液（PBS）、硼酸緩沖液等。

解題思路：掌握生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液類型。

6.答案：具有特定核苷酸序列的回文序列。

解題思路：了解限制性內(nèi)切酶識別序列的特點(diǎn)。

7.答案：熒光素酶基因、抗生素抗性基因等。

解題思路：掌握轉(zhuǎn)基因植物中常用的標(biāo)記基因。

8.答案：70%乙醇、碘伏、甲醛等。

解題思路：了解生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的消毒劑。

9.答案：雙鏈DNA分子中核苷酸序列的測定。

解題思路：掌握DNA測序的基本原理。

10.答案：定點(diǎn)突變、同源重組、基因合成等。

解題思路：了解蛋白質(zhì)工程中常用的方法。

11.答案：光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡等。

解題思路：掌握生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的顯微鏡類型。

12.答案：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。

解題思路：了解生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的電泳技術(shù)。

13.答案：堿裂解法、酚氯仿法等。

解題思路：掌握生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的質(zhì)粒提取方法。

14.答案：常規(guī)PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR等。

解題思路：了解生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的PCR擴(kuò)增方法。

15.答案：懸浮培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)、原代培養(yǎng)等。

解題思路：掌握生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法。

16.答案：PCRRFLP、SSR、SNP等。

解題思路：了解生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的分子標(biāo)記技術(shù)。

17.答案：CRISPR/Cas9、ZFN、TALEN等。

解題思路：掌握生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的基因編輯技術(shù)。

18.答案：啟動(dòng)子替換、轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控、