DB13T 5988-2024土壤中多種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測(cè)定

土壤中多種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測(cè)定2024-09-12實(shí)施2024-09-12實(shí)施河北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由河北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本文件起草單位：河北蘊(yùn)鴻檢測(cè)科技有限公司、河北省農(nóng)藥檢定監(jiān)測(cè)總站、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院。本文件主要起草人：武麗芬、楊殿賢、李瑞軍、劉云肖、王繼英、周靜、謝歡、牛海林、白鳳虎、劉明、許昊、孫新鎖、張立君、吳志勇、王雪娟、趙國存、唐甜綺、宋紅英、李春艷。1土壤中多種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測(cè)定1范圍本文件規(guī)定了土壤中多種農(nóng)藥及代謝物殘留量測(cè)定的原理、試劑與材料、儀器和設(shè)備、試樣采集和制備、測(cè)定步驟、結(jié)果計(jì)算、精密度、定量限等技術(shù)要求。本文件適用于利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定土壤中37種農(nóng)藥及代謝物的殘留量。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6379.1測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精密度)第1部分：總則與定義GB/T6379.2測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精密度)第2部分：確定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量方法重復(fù)性與再現(xiàn)性的基本方法GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法NY/T395農(nóng)田土壤環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。試樣用乙腈提取，經(jīng)分散固相萃取凈化，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定，外標(biāo)法定量。5試劑與材料除另有說明外，所用試劑均為色譜純?cè)噭?，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。5.1.1乙腈(CH?CN,CAS號(hào)：75-05-8)。5.1.2甲酸(HCOOH,CAS號(hào)：64-18-6)。5.1.3甲醇(CH?OH,CAS號(hào)：67-56-1)。5.1.4甲酸銨(HCOONH4,CAS號(hào)：540-69-2)。5.1.5無水硫酸鎂(MgSO?,CAS號(hào)：7487-88-9),分析純。5.1.6氯化鈉(NaCl,CAS號(hào)：7647-14-5),分析純。5.1.7檸檬酸鈉二水合物(C?H?Na?O?·2H?O,CAS號(hào)：6132-04-3),分析純。5.1.8檸檬酸二鈉鹽倍半水合物(C?H?Na?0?·1.5H?0,CAS號(hào)：6132-05-4),分析純。5.2溶液配制5.2.1甲酸銨-甲酸水溶液(2mmol/L):稱取0.1261g甲酸銨，用0.01%甲酸水溶液溶解并稀釋至1000mL,搖勻。5.2.2甲酸銨-甲酸甲醇溶液(2mmol/L):稱取0.1261g甲酸銨，用0.01%甲酸甲醇溶液溶解并稀釋至1000mL,搖勻。25.3標(biāo)準(zhǔn)品37種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)品名稱，見附錄A。5.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配置5.4.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(100mg/L):將標(biāo)準(zhǔn)品用乙腈(5.1.1)分別配制成100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，搖勻。于-18℃條件下避光保存，有效期6個(gè)月。5.4.2混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(5mg/L):吸取一定量的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于容量瓶中用乙腈(5.1.1)定容至刻度，配制成5mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用不同儀器進(jìn)行測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)行配制，于0℃~4℃條件下避光保存，有效期1個(gè)月。5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠(PSA):粒徑40μm~60μm。5.5.2微孔濾膜(有機(jī)相):0.22μm。5.5.3陶瓷均質(zhì)子：2cm(長(zhǎng))×1cm(外徑)。6儀器和設(shè)備6.1液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀：配電噴霧離子源(ESI)。6.2氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀：配電子轟擊源(EI)。6.3分析天平：感量0.01g和感量0.0001g。6.4氮吹儀：可控溫至80℃。6.5離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。6.6漩渦混合器。6.7標(biāo)準(zhǔn)篩：孔徑2mm。7試樣采集和制備土壤樣品的采集和保存按NY/T395的要求執(zhí)行。風(fēng)干后揀出雜質(zhì)，研磨后過2mm標(biāo)準(zhǔn)篩，取250g~500g裝入潔凈的容器內(nèi)待測(cè)。8測(cè)定步驟8.1前處理稱取5g試樣(精確至0.01g)于50mL離心管中，加5mL水，放置半小時(shí)，加10mL乙腈，渦旋提取4min,加入4g無水硫酸鎂、1g氯化鈉、1g檸檬酸鈉二水合物、0.5g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物以及2顆陶瓷均質(zhì)子，渦旋4min后，以4000r/min離心5min。8.1.2凈化吸取6mL上清液加到內(nèi)含0.9g硫酸鎂、0.15gPSA的15mL離心管中，渦旋4min,以4000r/min離心5min,準(zhǔn)確吸取4mL上清液于10mL試管中，氮吹儀80℃吹至近干，加入乙腈定容至2mL,漩渦混合器混勻，過微孔濾膜，待上機(jī)測(cè)定。8.2儀器參考條件8.2.1液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀參考條件色譜柱：C18(2.1mmI.D.×100mm,3μm),或能達(dá)到同樣分離效果的色譜柱；流動(dòng)相：A相為甲酸銨-甲酸水溶液(5.2.1),B相為甲酸銨-甲酸甲醇溶液(5.2.2);梯度洗脫程序見表1;流速：0.4mL/min;3柱溫：40℃;表1流動(dòng)相洗脫程序時(shí)間055離子源類型：電噴霧離子源；掃描方式：正離子；離子源溫度：300℃;檢測(cè)器電壓：1.94kv;霧化氣：3.0L/min;加熱氣：15.0L/min;多反應(yīng)監(jiān)測(cè)：每種農(nóng)藥分別選擇至少2個(gè)子離子。所有需要檢測(cè)的子離子按照出峰順序，分時(shí)段分別檢測(cè)。每種農(nóng)藥的保留時(shí)間、母離子、子離子及離子對(duì)質(zhì)譜參數(shù)，見附錄B.1。8.2.2氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀參考條件色譜柱：鍵合交聯(lián)5%二苯基/95%二甲基聚硅氧烷；30m×0.25mm×0.25μm,或能達(dá)到同樣分離效果的色譜柱；色譜柱溫度(℃):100℃保持1min,以20℃/min升到280℃,保持11min;載氣：氦氣；流速：1.39mL/min;進(jìn)樣口溫度：240℃;進(jìn)樣量：1μL;進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；檢測(cè)器電壓：1.17kv;離子源類型：電子轟擊源；離子源溫度：200℃;傳輸線溫度：250℃;溶劑延遲：3min;多反應(yīng)監(jiān)測(cè)：每種農(nóng)藥分別選擇至少2個(gè)子離子。所有需要檢測(cè)的子離子按照出峰順序，分時(shí)段分別檢測(cè)。每種農(nóng)藥的保留時(shí)間、母離子、子離子及離子對(duì)質(zhì)譜參數(shù)，見附錄B.2。8.3標(biāo)準(zhǔn)曲線選擇與被測(cè)樣品性質(zhì)相同的空白土壤樣品按照8.1進(jìn)行前處理，得到空白基質(zhì)溶液。精確吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，逐級(jí)用空白基質(zhì)溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L和0.5mg/L的基質(zhì)匹配工作溶液，根據(jù)儀器性能和檢測(cè)需要選擇不少于5個(gè)濃度點(diǎn)，供儀器測(cè)定。以37種農(nóng)藥及代謝物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以定量離子的色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。48.4定性測(cè)定在相同實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，如果檢出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選離子均出現(xiàn)，樣品中目標(biāo)農(nóng)藥的定性離子和定量離子的相對(duì)豐度比與濃度相當(dāng)?shù)幕|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液相比，其允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判定樣品中存在目標(biāo)農(nóng)藥。定性測(cè)定時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差詳見表2。表2定性測(cè)定時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差>20%至50%(含)>10%至20%(含)允許相對(duì)偏差8.5定量測(cè)定本文件采用外標(biāo)法定量。待測(cè)樣品溶液中的農(nóng)藥的響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測(cè)的定量測(cè)定線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍應(yīng)根據(jù)測(cè)定濃度與基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液同步稀釋后再進(jìn)行分析。37種農(nóng)藥及代謝物多反應(yīng)監(jiān)(MRM)質(zhì)量色譜圖見附錄C。8.6平行試驗(yàn)按以上步驟對(duì)同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)。8.7空白試驗(yàn)空白樣品除不加試樣外，采用與試樣測(cè)定完全相同的試劑、設(shè)備和測(cè)定步驟進(jìn)行操作。9結(jié)果計(jì)算試樣中各農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)@計(jì)，單位以毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)計(jì)算。Q——土壤試樣中被測(cè)農(nóng)藥的殘留量，單位為毫克每千克(mg/kg);V?——提取溶劑總體積，單位為毫升(mL);A-試樣溶液中被測(cè)農(nóng)藥的色譜峰面積；V試樣溶液定容體積，單位為毫升(mL);p——標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);V?——分取用于檢測(cè)的提取溶液的體積，單位為毫升(mL);A——標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測(cè)農(nóng)藥的色譜峰面積；m——試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空白樣品，以重復(fù)性條件下獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算數(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。10精密度本文件精密度數(shù)據(jù)是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的規(guī)定確定的，獲得重復(fù)性限和再現(xiàn)性限的值以95%的可信度來計(jì)算的。本文件方法的精密度數(shù)據(jù)見附錄D。本方法的定量限為0.01mg/kg~0.02mg/kg,見附錄A。5(資料性)37種農(nóng)藥及代謝物中英文名、CAS號(hào)、分子式和方法定量限37種農(nóng)藥及代謝物中英文名、CAS號(hào)、分子式和方法定量限，見表A.1～A.2。表A.117種農(nóng)藥及代謝物中英文名、CAS號(hào)、分子式和方法定量限(液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀)序號(hào)定量限12甲霜靈3嘧菌酯4甲萘威56多菌靈78噻蟲胺9啶蟲脒甲拌磷亞砜甲氨基阿維菌素嘧霉胺吡唑醚菌酯咪鮮胺6表A.220種農(nóng)藥及代謝物中英文名、CAS號(hào)、分子式和方法定量限(氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀)序號(hào)定量限12甲拌磷3甲拌磷砜456789啶酰菌胺7(資料性)37種農(nóng)藥及代謝物保留時(shí)間、母離子、子離子及離子對(duì)質(zhì)譜參數(shù)37種農(nóng)藥及代謝物保留時(shí)間、母離子、子離子及中文名稱保留時(shí)間VV1辛硫磷2甲霜靈3嘧菌酯4甲萘威5噻蟲嗪6多菌靈7吡蟲啉8噻蟲胺9啶蟲脒克百威甲拌磷亞砜甲氨基阿維菌素嘧霉胺吡唑醚菌酯咪鮮胺8表B.220種農(nóng)藥及代謝物保留時(shí)間、母離子、子離子及離子對(duì)質(zhì)譜參數(shù)(氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀)中文名稱保留時(shí)間VV162甲拌磷83甲拌磷砜64567二甲戊靈889腐霉利咯菌腈8氯氟氰菊酯-18氯氟氰菊酯-28氯氰菊酯-16氯氰菊酯-26氯氰菊酯-366啶酰菌胺氰戊菊酯-1苯醚甲環(huán)唑-1苯醚甲環(huán)唑-2溴氰菊酯-1溴氰菊酯-2937種農(nóng)藥及代謝物多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)質(zhì)量色譜圖o味哇圖C.137種農(nóng)藥及代謝物多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)質(zhì)量色譜圖(續(xù))mmm00……T0 S 0圖C.137種農(nóng)藥及代謝物多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)質(zhì)量色譜圖(續(xù))(資料性)精密度