《基因工程》復習題（填空和選擇）

《基因工程》復習題（填空和選擇）（15頁）

基因工程復習題（填空和選擇）

復習題1

二、填空題：將下列各題空缺部分的答案填在后面的方框內(nèi)，兩

者用〃；〃隔開。

1.基因操作（Genemanipulation）的核心部分是基因克隆

（genecloning）,genecloning的基本要點

有，和。

2.是遺傳物質(zhì)的基本單位，也是作為遺傳物質(zhì)的核酸分子上的一段

片段。它可以是連續(xù)

的，也可以是；可以是，也可以是RNA;可以存在于染色體上，

也可以

3.基因操作并不是一個法律概念，除了包括基因克隆外，還包括

基因的、、

和等與基因研究相關(guān)的內(nèi)容。

4.啟動子（Promotor）是指。通常一個Gene是否

表達，是關(guān)鍵的一步，是起決定作用的。在轉(zhuǎn)錄過程中，

Promoter還是的結(jié)合位點。

5.原核生物的RNApolymerase主要由兩部分組成：和，其中o-

因子并

不參與RNA的合成，它的作用主要是。

6.從到的這一段距離稱為一個轉(zhuǎn)錄單位，或者一個轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，其

中可包

括一個或者多個Gene。

7.轉(zhuǎn)錄終止子主要有兩種，一種是，另一種是。

8.重疊基因（Overl叩pinggene）是指，間隔基因

（Interruptedgene）是指

復習題2

二、填空題：

l.Ecok的一般分子組成為R2M2S,在這些亞基中，R亞基具有

的作用，M亞

基具有的作用，S亞基具有的作用。

2.限制性內(nèi)切核酸酶(Restrictionendonuclease)的命名是按屬

名和種名相結(jié)合的原則的,通常第一個大

寫字母取自，第二、三個字母取自，第四個字母則用表示。

3.n型限制酶識別回文對稱序列，在回文序列或切割DNA,產(chǎn)生

帶(3’

-0H)和(5'-P基團)的DNA的產(chǎn)物，需(Mg2+)的存在

才能發(fā)揮活性，相應的修飾酶只需SAM。

4.識別相同序列的限制酶稱

5有些限制酶只切割雙鏈DNA中的一條鏈，產(chǎn)生單鏈缺口，即

6.個體間DNA限制性片段長度的差異叫

7.DNA載體經(jīng)Hindm切割后產(chǎn)生粘性末端，能發(fā)生載體自連，影

響載體與外源DNA的連接效率,

常用的防止載體自連的方法有、。

8.完全的回文序列應具備兩個特點即和。

9.DcmMethylase(Dem甲基化酶)的識別序列為和，該酶的作

用位點

為。

10.大腸桿菌中至少有三種依賴于甲基化的限制系統(tǒng)、、。

它們識別的序列各不相同，但只識別經(jīng)過甲基化的序列，都限制

CpG甲基化酶作用的DNA。11.分別寫出以下限制性內(nèi)切核酸酶

(Restrictionendonuclease)的識別序列EcoRI、Sau3A

I、Hindm。

12.限制性內(nèi)切核酸酶(Restrictionendonuclease)通常保存在

(50%)濃度的甘油溶液中。

13.載體和外源DNA經(jīng)酶切，在進行下一步操作前,需消除限制

性內(nèi)切核酸酶(Restrictionendonuclease)

的影響。常用的方法有、、、。參考答案：EDTA法；加熱法;苯

酚抽提法；試劑盒除酶法

14.反轉(zhuǎn)錄酶來自AMV或M。-MLV,即依賴于RNA的DNA聚

合酶，它有活性，但

無活性。

15.末端轉(zhuǎn)移酶來源于，是存在于前淋巴細胞及分化早期的類淋巴

樣細胞內(nèi)的一種不尋常的

DNA聚合酶,在存在下,末端轉(zhuǎn)移酶催化dNTP加于DNA分子

的31羥基端。

參考答案：小牛胸腺;Mg2+

16.T4DNA連接酶的分子量為68kDa,它可以催化DNA5,磷酸

基與3,羥基之間形成磷酸二酯鍵。

反應底物為粘端、切口、平端的RNA或DNA。低濃度和可以提

高平端連接效率。參考答案：聚乙二醇PEG;單價陽離子

三、選擇題：從備選答案中選出正確的結(jié)果，正確答案是唯一的。

1.限制性內(nèi)切酶一般保存在（）濃度的甘油溶液中。

A.10%

B.20%

C.50%

D.60%

2.限制性圖譜與限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）圖譜的最顯著區(qū)

別在于（）

A.前者是物理圖譜后者是連鎖圖

B.前者是連鎖圖后者是物理圖譜

C.前者是遺傳圖譜后者是物理圖譜

D.前者是物理圖譜后者是遺傳圖譜

3.迄今為止所發(fā)現(xiàn)的限制性內(nèi)切核酸酶可以作用于（）

A.既可以作用于雙鏈DNA,又可以作用于單鏈DNA

B.只能作用于單鏈DNA

C.只能作用于雙鏈DNA

D.只能作用于RNA

4.已知某一內(nèi)切酶在一個環(huán)狀DNA上有4個切點，當用此酶切割

該環(huán)狀DNA,可以得到（）個

片段

A.3

B.4

C.5

D.6

5.甘油會使許多限制性內(nèi)切核酸酶的特異性發(fā)生改變，是導致一

些酶星星活性的主要原因之一，防止的

辦法是在酶切反應體系中，將甘油的濃度控制在（）以下

A.5%

B.10%

C.20%

D.30%

6.在下列進行DNA部分酶切的條件中，控制哪一項最好（）

A..反應體積

B.酶反應溫度

C.反應時間

D.酶量

7.DNA被某種酶切割后，電泳得到的電泳帶有些擴散,下列原因

中，哪一項不太可能（）

A.蛋白質(zhì)（如BSA）同DNA結(jié)合

B.有外切核酸酶污染

C.酶失活

D.酶切條件不適合

8.nick與gap的區(qū)別在于（）

A.前者是斷開了一個磷酸二酯鍵，后者是指DNA的單鏈中有較小

的缺失

B.前者是是指DNA的單鏈中有較小的缺失，后者是指斷開了一個

磷酸二酯鍵

C.二者無本質(zhì)區(qū)別

D.前者無法回復，后者可以回復

9.限制酶的命名遵循一定的原則，涉及來源（宿主），菌株或生

物型。命名時（）

A.屬名第一字母，種名頭兩個字母，菌株號，然后再加上序號

（羅馬字）

B.種名第一字母，屬名頭兩個字母，菌株號，然后再加上序號

（羅馬字）

C.屬名第一字母，亞種名頭兩個字母，菌株號，然后再加上序號

（羅馬字）

D.種名第一字母，亞種名頭兩個字母，菌株號，然后再加上序號

（羅馬字）

10.以下對同裂酶的描述中/那一項是正確的（）

A.識別相同序列的限制酶稱同裂酶

B.可以產(chǎn)生相同的粘性突出末端的限制酶稱同裂酶

C.同裂酶的切割位點一定相同

D.同裂酶的切割位點不相同

11.下列哪一種酶作用時需要弓I物（）

A.末端轉(zhuǎn)移酶

B.反轉(zhuǎn)錄酶

C.DNA連接酶

D.限制酶

12.關(guān)于宿主控制的限制修飾現(xiàn)象的本質(zhì)，下述描述中只有（）不

恰當

A.由作用于同一DNA序列的兩種酶構(gòu)成

B.這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA進行修飾

C.不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制-修飾系統(tǒng)

D.這一系統(tǒng)的核酸酶都是II類限制性內(nèi)切核酸酶

13.限制性內(nèi)切核酸酶可以特異性地識別（）

A.特定的三聯(lián)密碼

B.雙鏈DNA的特定堿基對

C.雙鏈DNA的特定堿基序列

D.單鏈DNA的特定堿基序列

14.在大腸桿菌中,大多數(shù)都有三個位點特異性的DNA甲基化酶,

以下選項中哪一種酶不包括在內(nèi)（）

A.dam

B.dem

C.EcoKI

D.SssI

15.在大腸桿菌中，至少有3種依賴于甲基化的限制系統(tǒng)，以下選

項中不屬于這3種的為（）

A.mcrA

B.mcrBC

C.merD

D.mrr

16.下面有關(guān)限制酶的敘述哪個是錯誤的（）

A..限制酶是外切酶而不是內(nèi)切酶

B.同一種限制酶切割DNA時留下的末端序列總是相同的

C.一些限制酶在識別位點內(nèi)稍有不同的點切割雙鏈DNA,產(chǎn)生

粘末端

D.一些限制酶在識別位點內(nèi)相同的位置切割雙鏈DNA,產(chǎn)生平末

炳

17.DNA連接酶在體內(nèi)的主要作用是在DNA復制、修復中封閉缺

口，下列對DNA連接酶的描述中，

哪項是正確的（）

A.將雙鏈DNA分子中的51磷酸基團同3--0H末端重新形成磷

酸二酯鍵

B.作用時不消耗能量

C.需要Mn2+等二價輔助離子

D.也可以連接RNA分子

復習題3

二、填空題：將下列各題空缺部分的答案填在后面的方框內(nèi)，兩

者用〃「隔開。

1.載體（Vehicle）的類型有，，，等。

2.Genecloning是指，

基因文庫（Genelibrary）是指。

3.Plasmid的定義是，Plasmid能進行自我復制，大多數(shù)為鏈

狀DNA分子,大小一般為kb。

4.即為質(zhì)粒的拷貝數(shù)，按照質(zhì)?？截悢?shù)的多少，質(zhì)?？梢苑譃?/p>

和，質(zhì)粒多數(shù)是一些具有轉(zhuǎn)移能力的大質(zhì)粒；質(zhì)粒多數(shù)是一些不

具有轉(zhuǎn)移能力的小質(zhì)粒。

5.松弛型質(zhì)粒和嚴謹型質(zhì)粒融合以后，雜合質(zhì)粒一般優(yōu)先使用的

復制子。

6.稱之為質(zhì)粒的不相容性。如果兩個質(zhì)粒不能穩(wěn)定地共存于同一

個寄主細胞

中，則它們屬于（填相同或不同）的不相容群。

7.質(zhì)粒具有轉(zhuǎn)移性，它是指，它需要（移動基因mob）,（轉(zhuǎn)移

基因tra）和（轉(zhuǎn)移起

始位點）

8根據(jù)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性可以將質(zhì)粒分為和，一般大質(zhì)粒都是，

一般都是小質(zhì)粒，其上沒有

9.按其用途可將標記基因分為選擇標記和篩選標記，選擇標記一

般用于，篩選標記一般用

于

H.pBR322質(zhì)粒是基因工程最重要的人工質(zhì)粒之一，它的大小約

為kb,用于其組建的三個親

本質(zhì)粒是,，和。此質(zhì)粒具有一個colEl松弛型質(zhì)粒復制子，兩個篩

選標記氨茉青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，其中colEl松弛型質(zhì)

粒復制子來源于，氨莘青霉素抗性基因來源于，四環(huán)素抗性基因來源

12.pUC系列的質(zhì)粒載體是由和兩種質(zhì)粒構(gòu)建而來的，其中氨采青

霉素抗性

基因來自于，多克隆位點MCS來自于。pUC系列的質(zhì)粒載體一

般是成對存在的如pUC18和pUC19,其主要區(qū)別是。

14.A噬菌體Genome的長度約為kb,其DNA分子為(填單或

雙)鏈。它

的DNA分子既可以以狀存在也可以以環(huán)狀存在，而且可以自然成

環(huán)，其原因是在入度菌體的線性分子的兩端各有一個長度為個堿基的

天然粘性末端，這種粘性末端可以自然成環(huán)，成環(huán)后的粘性末端就叫

做。

15.A噬菌體在感染大腸桿菌以后,可以進入Lyticgrowth也可以

進入如果其基因組

Lysogenicstateo

DNA通過專一性重組整合到宿主染色體中，則其進入；它也可以

選擇進入，大量復制并組裝子代噬菌體顆粒。

16.在人噬菌體載體中，常用的選擇標記有，cI基因失活，和等。

17.改造后的人噬菌體才可用作載體，按照改造方式的不同可將其

分為兩種類型，即插入型載體

(insertionvectors)和替代型載體(replacementvectors)°

其中Insertionvectors是指;

Replacementvectors是指

18.AgtlO是一個由入噬菌體衍生而來的insertionvectors,主要

用于。它缺失了含有溶

源整合的；入gtll載體也是一種insertionvectors，該載體的最

大特點是在最左側(cè)可替代區(qū)置換了一段基因，可編碼B-半乳糖苗酶，

在IPTG/X-gal平板上可形成色噬菌斑。參考答案：克隆小的cDNA;

b257;lacZ;藍

19.A噬菌體由于受到包裝的限制，插入外源DNA片段后，其總

的DNA長度應該在噬菌體genome

的范圍內(nèi)。

20.Cosmid實際上是由和構(gòu)成的雜合載體，也可以說是帶有序

列的質(zhì)粒。

22.Cosmid的組成包括三個部分：，和，其中復制子來源

于，cos序列來源于。

23.A噬菌體的最大克隆片段是kb,Cosmid的最大克隆片段可達

到kb。

24利用人噬菌體載體構(gòu)建的genelibrary中，文庫是以的形式存

在的；用質(zhì)粒載體構(gòu)建

的genelibrary是以的形式存在的；粘粒載體構(gòu)建的gene

library是以的形式存在的。

25.M13噬菌體顆粒是狀的,其基因組為（填單或雙）鏈DNA。

它只感染

性大腸桿菌，感染宿主以后，其噬菌體顆粒的釋放不像人噬菌體

那樣要裂解宿主菌，而是。

28.M13K07輔助噬菌體是的衍生株，它帶有一個來自的復制起點,

還帶有一

個來自的卡那霉素抗性基因，用作選擇標記；基因n帶有一個的

突變，導致基因蛋白質(zhì)第40位氨基酸由甲疏氨酸變?yōu)楫惲涟彼帷?/p>

29.YAC載體基本組成元件有，，，

和。

30.表達載體（Expressvector）是在常規(guī)載體的基礎上衍生而來

的，其構(gòu)建的原理主要是增加一

個，以及有利于表達產(chǎn)物的分泌、分離或純化的元件；穿梭載體

（Shuttlevector）是指

三、選擇題：從備選答案中選出正確的結(jié)果，正確答案是唯一的。

1.氨莘青霉素的工作原理為（）

A.可以抑制細胞壁肽聚糖的合成

B.可以抑制核糖體的轉(zhuǎn)位

C.可以與核糖體50S亞基結(jié)合并抑

制蛋白質(zhì)合成D.可以與核糖體30S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成

3.載休所具備的特點中，以下描述不恰當?shù)氖牵ǎ?/p>

A.必須具備復制起點，能夠自主復制

B.必須具備合適的酶切位點，供外源DNA片段插入

C.有一定的篩選標記，用于篩選

D.必須具有較高的拷貝數(shù)，便于制備

4復制子由三部分組成，以下不屬于的為（）

A.復制起點

B.復制區(qū)

C.復制終點

D.啟動子

5.pBluescriptM13載體在多克隆位點的兩側(cè)引入了T7和T3兩

個噬菌體的啟動子，這樣增加了該載

體的功能，以下4種功能哪一種是不正確的（）

A.可以對插入到多克隆位點的外源片段進行轉(zhuǎn)錄分析

B.利用這兩個啟動子的通用引物進行PCR擴增

C.利用通用引物進行序列分析

D.利用這兩個啟動子進行定點突變

6.以粘粒為載體轉(zhuǎn)染受體菌后，平板上生長的菌落會出現(xiàn)大小不

一、牛長速度不一的現(xiàn)象，其原因是（）

A.營養(yǎng)成分不足

B.重組后的質(zhì)粒復制不穩(wěn)定

C.重組后的粘粒整合到宿主染色體上

D.重組體中插入片段的大小不同

7.噬菌粒是由質(zhì)粒和噬菌體DNA共同構(gòu)成的,其中來自質(zhì)粒的主

要結(jié)構(gòu)是（），而來自噬菌體的主要

結(jié)構(gòu)是（）

A.復制區(qū);

B.IG區(qū)IG區(qū)；

C.復制區(qū)多克隆位點；

D.IG區(qū)IG區(qū)；多克隆位點

9.M13單鏈噬菌體的復制分為三個階段，以下哪一項不屬于此（）

A.SS—RF

B.RF-RF

C.RF-SS

D.SS-SS

10.A噬菌體DNA和M13單鏈噬菌體DNA在成熟前的DNA復

制類型為（）

A.滾環(huán)復制模型

B.0復制模型

C.前者為滾環(huán)復制模型，后者為6復制模型

D.前者為0復制模型，后者為滾環(huán)復制模型

12以下對粘粒為載體的重組體的描述正確的是（）

A.各重組體在平板上生長的速度不同，但是轉(zhuǎn)化子中插入片段的

擴增量是相同的

B.各重組體在平板上生長的速度不同，轉(zhuǎn)化子中插入片段的擴增

量也是不同的

C.各重組體在平板上生長的速度相同，而且轉(zhuǎn)化子中插入片段的

擴增量也是相同的

D.各重組體在平板上牛長的速度不同，但是轉(zhuǎn)化子中插入片段的

擴增量是相同的

13.下列哪種克隆載體對外源DNA的裝載量最大（）

A.粘粒

B.酵母人工染色體（YAC）

C.質(zhì)粒

D.A噬菌體

14.同一種質(zhì)粒DNA,以三種不同的形式存在，電泳時，它們的

遷移速率是（）

A.LDNA>OCDNA>SCDNA

B.SCDNA>LDNA>OCDNA

C.SCDNA>OCDNA>LDNA

D.OCDNA>SCDNA>LDNA

15.關(guān)于穿梭質(zhì)粒載體，下面哪一種說法最正確（）

A.在不同的宿主細胞中使用不同的復制起點

B.在不同的宿主中具有不同的復制機制

C.在不同的宿主細胞中使用不同的復制酶

D.在不同的宿主細胞中具有不同的復制速率

16.反向重復序列：（）

A.參與轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座

B.可以是某些蛋白的結(jié)合位點

C.可以回折形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)

D.以上說法都不對

17.A噬菌體線性DNA分子的兩端各有一個（）個堿基組成的天

然黏性末端

A.10

B.12

C.14

D.16

18.下列關(guān)于細菌人工染色體（BAC）的特點描述，除（）以外都

是TF確的

A.BAC載體在細菌中以環(huán)狀超螺旋狀態(tài)存在，使分離操作比YAC

容易

B.BAC載體在大腸桿菌中為高拷貝

C.用電擊法將大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌比酵母的轉(zhuǎn)化率提高了10~

100倍

D.克隆在載體上的外源片段可以直接進行末端測序

19粘粒（cosmid）是一種人工建造的載體，下列對它的描述中

哪一項是不正確的（）

A.它具有cos位點,因而可以進行體外包裝

B.它具有質(zhì)粒DNA的復制特性

C.進入受體細胞后，可引起裂解反應

D.進入受體細胞后，可引起溶源化反應

20.松弛型質(zhì)粒：（）

A.在寄主細胞中拷貝數(shù)較多

B.采用0型復制方式

C.一定具有抗性標記

D.以上均正確

21.關(guān)于質(zhì)粒的不相容性，下列哪一種說法正確（）

A.相同相容群的質(zhì)粒能夠共存于同一個細胞

B.質(zhì)?？梢苑殖扇舾蓚€相容群，但不能分為若干個不相容群

C.如果兩個質(zhì)粒不相容，說明它們的復制機制相同屬

D.于同一個不相容群中的質(zhì)粒，不僅復制機制相同，而且拷貝數(shù)

和分子量也相同

22.一般情況下，質(zhì)粒的存在情況以下描述正確的是（）

A.獨立存在

B.整合在染色體上

C.既可以整合在染色體上，也可以獨立存在

D.不能獨立存在

24.下列哪一項不是質(zhì)粒載體必備的基本特征（）

A.可以獨立復制

B.有選擇標記

C.有多克隆位點

D.含lacZ

28.下面關(guān)于松弛型質(zhì)粒的性質(zhì)描述中，（）是不正確的

A.通常帶有抗性標記

B.可以使用氯霉素作用增加拷貝數(shù)

C.同嚴謹型質(zhì)粒融合后,雜合質(zhì)粒優(yōu)先使用松弛型質(zhì)粒的復制子

D.質(zhì)粒的復制只受本身的遺傳結(jié)構(gòu)的控制，而不受染色體復制機

制的制約，因而有較多的拷貝數(shù)

30.以下不是表達載體所必須的條件是（）

A.必須具備很強的啟動子

B.必須具備很強的終止子

C.啟動子不需要受控制

D.所產(chǎn)生的mRNA必須具有翻譯的起始信號

復習題4

二、填空題：將下列各題空缺部分的答案填在后面的方框內(nèi)，兩

者用〃；〃隔開。

1.抽提含PBR322系列質(zhì)粒的細菌前，需在培養(yǎng)基中加入一定濃

度的氯霉素，此氯霉素的作用

是。

2.在用SDS分離DNA時，要注意SDS的濃度，0.1%和1%SDS

的效果是不同的，前者，

后者

3.在Southernhybridization中，DNA經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后，通

常須經(jīng)NaOH處理,其原因

是。

4.復性是指，雜交是指。

5.DNA或RNA在雜交前，需將其轉(zhuǎn)移到膜上，常用的膜有和。

三、選擇題：從備選答案中選出正確的結(jié)果，正確答案是唯一的。

1.用SDS-酚抽提DNA時，SDS濃度十分重要，0.1%和1%的

SDS的作用分別為（）

A.前者能將DNA和RNA一起分離出來；后者只能將RNA分離

出來

B.前者只能將RNA分離出來；后者能將DNA和RNA一起分離

出來

C.二者均只能將DNA分離出來

D.二者均能將DNA和RNA一起分離出來

2.從細胞或組織中分離DNA時常用蔗糖的作用（）

A.抑制核酸酶的活性

B.加速蛋白質(zhì)的變性

C.保護DNA,防止斷裂

D.有利于細胞破碎

3.以下保存DNA的溫度中，哪一種是最好的（）

A.室溫

B.4-5℃

C.-20℃

D.-70℃

4.在分離DNA過程造成DNA分子斷裂的因素很多，下列說法中

哪一項是不正確的（）

A.核酸酶的降解

B.化學降解

C.保存液中未加一滴氯仿

D.物理剪切

5.關(guān)于cDNA的最正確的說法是（）

A.以mRNA為模板合成的雙鏈DNA

B.同mRNA互補的單鏈DNA

C.同mRNA互補的雙鏈DNA

D.以上都正確

6.一個典型的哺乳動物細胞中,大部分的RNA為（）

A.tRNA

B.mRNA

C.rRNA

D.核內(nèi)小分子RNA

7.Agarose-EB電泳法分離純化cccDNA的原理是（）

A.EB可以較多的插入到cccDNA中，因而遷移速度快

B.EB不容易插入到cccDNA中,因而遷移速度快

C.EB不容易插入到線性DNA中,因而遷移速度快

D.EB不容易插入到線性DNA中，因而遷移速度慢

8.下列哪一項不是Southernblotting的步驟（）

A.用限制酶消化DNA

B.DNA與載體的連接

C.凝膠電泳分離DNA片段

D.DNA片段轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上

9.Southernblotting的DNA探針()雜交

A.只與完全相同的片段

B.可與用某些限制性內(nèi)切酶切成的DNA片段

C.可與任何含有相同序列的DNA片段

D.可與任何含有互補序列的DNA片段

10以下()方法才能說明外源基因進行了表達

A.原位菌落雜交

B.Southernblotting

C.Northernblotting

D.Westernblotting

11.斑點雜交的缺點在于()

A.雜交速度較Southernblotting要快

B.一次比Southernblotting可以分析多個樣品

C.可分析混合的DNA樣品中是否存在能與特定探針雜交的序列

D.假陽性較高

12.菌落雜交篩選重組體時,()

A.需要外源基因的表達

B.不需要外源基因的表達

C.不需要對菌體進行處理

D.以上說法都正確

13.Southernblotting與Northernblotting的區(qū)別在于()

A.印記的對象不同，前者是對DNA,后者是對RNA

B.印記對象不同,前者是對DNA,后者是對蛋白質(zhì)

C.電泳條件不同，前者是變性條件，后者是非變性條件

D.電泳條件相同，均為非變性條件

14.以下不屬于核酸探針的是()

A.RNA探針

B.基因組探針

C.cDNA探針

D.抗體

復習題5

二、填空題：將下列各題空缺部分的答案填在后面的方框內(nèi)，兩

者用〃；"隔開。

1.PCR是的簡稱。PCR反應體系的基本要素

有，，，等。

2.PCR反應過程分為三個步驟，即，和。

3.在PCR反應體系中，Taqpolymerase的合成速率取決于，，

dNTP的

濃度，，等。

4.PCR反應體系中往往要加入適量的礦物油，其作用是。

5.PCR反應過程的最適溫度僅與有關(guān)，其定義是指。

6.一般常規(guī)的PCR僅能擴增kb以下的DNA片段。

的標準緩沖液含

7.PCRmmol/LKCIzmmol/LTirs.HCIz

mmol/L

MgCI2e

8.A/Tcloning是利用。

9.隨機引物（Randomprimer）是指

10在簡并引物的設計中，常常要用到di（次黃瞟嶺），其原因是。

三、選擇題：從備選答案中選出正確的結(jié)果，正確答案是唯一的。

1.聚合酶鏈反應可表示為（）

A.PEC

B.PER

C.PDR

D.PCR

2.催化聚合酶鏈反應的酶是（）

A.DNA連接酶

B.反轉(zhuǎn)錄酶

C.末端轉(zhuǎn)移酶

D.TaqDNA聚合酶

3.以下各項中不是PCR反應所必須的是（）

A.模板和引物

B.dNTP

C.Taq酶和buffer

D.甘油

4.關(guān)于PCR技術(shù)的敘述，下列哪項是錯誤的？（）。

A.以DNA復制為基礎而建立起來的技術(shù)

B.利用PCR技術(shù)可完全無誤地擴增基因

C.反應體系需模板、一對引物、4種dNTP、耐熱DNA聚合酶和

緩沖溶液

D.以變性-退火-延伸為一周期

5.有關(guān)PCR的描述下列哪項不正確：（）

A.是一種酶促反應

B.引物決定了擴增的特異性

C.擴增的對象是氨基酸序列

D.擴增的對象是DNA序列

6.以下關(guān)于簡并引物的描述中，正確的是（）

A.簡并弓I物是根據(jù)已知DNA序列設計的引物群

B.簡并引物是根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列設計的引物群

C.設計簡并引物不需要考慮密碼子的偏爰性

D.簡并引物與普通的PCR引物是相同的

7.PCR擴增有時會出現(xiàn)彌散的條帶，以下原因闡述不正確的是（）

A.退火溫度過低

B,退火溫度過高

C.dNTP濃度過高

D.循環(huán)次數(shù)過多

9.設計聚合酶鏈反應的引物時，應考慮引物與模板的（）

A.5,端特定序列互補

B.5,端任意序列互補

C.31端特定序列互補

D.3,端任意序列互補

復習題6

二、填空題：將下列各題空缺部分的答案填在后面的方框內(nèi)，兩

者用〃；"隔開。

1.年，創(chuàng)立了測定DNA序列雙脫氧終止法;同年，Maxam和

Gilbert發(fā)展了。

3.在開始測序前，必須根據(jù)待測序列區(qū)的長度，所要求的測序精

確度以及現(xiàn)有的設施來制定測序總策略。

根據(jù)測序的目的，通?？蓪y序分為和。

4.常用的雙脫氧終止法測定DNA序列，其長度一般不會超過1Kb,

因此進行大分子DNA測序時，

需，常用的方法有、和。

三、選擇題：從備選答案中選出正確的結(jié)果，正確答案是唯一的。

1.有兩種確定核酸中核昔酸序列的方法：化學序列分析法

(Maxam-GIbert)和酶學序列分析法(Sanger)。

酶學測序法的基本原理/優(yōu)點是()

A.堿基與特殊燃料間不同的相互作用

B.限制性位點與DNA末端標記的相關(guān)性

(：.一個合成引物的延伸和DNA修復合成的可靠終止

D.可同時對DNA雙螺旋的兩條鏈進行測序

2.有關(guān)DNA序列自動化測定的不正確敘述是()

A.用熒光代替了同位素標記

B.激光掃描分析代替人工讀序

C.基本原理與手工測序相同

D.不再需要引物

復習題7

二、填空題：將下列各題空缺部分的答案填在后面的方框內(nèi)，兩

者用〃；〃隔開。

1.基因突變(Genemutation)的類型有，，等。

.利用技術(shù)介導的定點誘變(

3PCRSite-directedmutagenesis)o

較常用的方法一般有三種

即，和。

復習題8

二、填空題：將下列各題空缺部分的答案填在后面的方框內(nèi)，兩

者用〃；〃隔開。

1.構(gòu)建Genelibrary時，應根據(jù)所要分離的外源基因的大小選擇

合適的載體，這些載體通常包含有人噬

菌體、YAC以及、和等。

2構(gòu)建cDNAlibrary時,cDNA的第二鏈合成的方法主要有、

和。

3.構(gòu)建低豐度mRNA的cDNAlibrary,需進行富集處理,常用

的富集方法有、

和。

4.常規(guī)用于構(gòu)建cDNAlibrary的兩種X噬菌體載體是AgtlO和，

AgtlO用于構(gòu)建只

用核酸探針篩選的文庫，而后者用于

6.Genecloning的目的是，常用的方法有、和等。

7.噬菌斑形成選擇法有兩種判斷標準，一是，二是。

8.基因克隆的本質(zhì)是，重點是。

三、選擇題：從備選答案中選出正確的結(jié)果，正確答案是唯一的。

1.構(gòu)建基因組DNA文庫時，首先要分離細胞的（）

A.染色體DNA

B.線粒體DNA

C.總mRNA

D.tRNA

2.基因組代表一個細胞或生物體的（）

A.部分遺傳信息

B.整套遺傳信息

C.可轉(zhuǎn)錄基因

D.非轉(zhuǎn)錄基因

4.關(guān)于DNA接頭在基因工程中的作用，下列說法中哪一項不正確

()

A.給外源DNA添加適當?shù)那悬c

B.人工構(gòu)建載體

C.調(diào)整外源基因的可讀框

D.增加調(diào)控元件

5.根據(jù)構(gòu)建方法的不同，基因文庫分為基因組文庫、cDNA文庫

等。在下列文庫中，()屬于cDNA

文庫

A.YAC文庫

B.MAC文庫

C.扣減文庫

D.BAC文庫

復習題9

二、填空題：將下列各題空缺部分的答案填在后面的方框內(nèi)，兩

者用〃；〃隔開。

1.轉(zhuǎn)化(Transformation)是在1928年由格里菲思在對菌進行研

究時發(fā)現(xiàn)的。轉(zhuǎn)導

(Transduction)是1952年由萊德伯格在研究菌的遺傳重組時

發(fā)現(xiàn)的。

2.重組DNA導入宿主的一般方法有，，，和

等。

稱為感受態(tài)細胞(

3.Competentcell)o

4.有關(guān)感受態(tài)出現(xiàn)的機制，目前主要有兩種假說：和。

5.外源DNA可以通過轉(zhuǎn)化(transformation)的方法導入到宿主

菌中，transformation是指的

過程。常用的transformation的方法有,和。

6.轉(zhuǎn)染(Transfection)是指的過程;感染(Infection)是

指。

7.細菌結(jié)合(Conjugation)是指的過程。

8.轉(zhuǎn)導（Transduction）是指,它可分為兩種:和。

9.局限性轉(zhuǎn)導中,人噬菌體不正確切離，通常以10-6比率產(chǎn)生和。

10.普遍性轉(zhuǎn)導可分為兩類,即和。

11.感染復數(shù)的定義：。

三、選擇題：從備選答案中選出正確的結(jié)果，正確答案是唯一的。

1.在分子生物學領域，重組DNA又稱（）

A.酶工程

B.DNA工程

C.細胞工程

D.基因工程

2.在重組DNA技術(shù)中，不常用到的酶是（）

A.限制性核酸內(nèi)切酶

B.DNA聚合酶

C.DNA連接酶

D.DNA解鏈酶

3.以質(zhì)粒為載體，將外源基因?qū)耸荏w菌的過程稱（）

A.轉(zhuǎn)化

B.轉(zhuǎn)染

C.感染

D.轉(zhuǎn)導

4.用于鑒定轉(zhuǎn)化子細胞是否含重組DNA的最常用方法是（）

A.抗性標記選擇

B.分于雜交選擇

C.RNA反轉(zhuǎn)錄

D.免疫學方法

復習1參考答案

二、填空題

參考答案：克隆基因的類型；受體的選擇；載體的選擇

參考答案：基因；連續(xù)；DNA;存在于染色體之外（如質(zhì)粒，噬

菌體等）

參考答案：表達；調(diào)控；檢測；改造

參考答案：基因轉(zhuǎn)錄過程中控制起始的部位；轉(zhuǎn)錄起始；RNA聚

合酶

參考答案：核心酶；。因子；識別要轉(zhuǎn)錄的起始位點

參考答案：啟動區(qū)；終止區(qū)

參考答案：依賴p因子；不依賴p因子

參考答案：一個基因的序列中，單個DNA序列可編碼一個以上的

蛋白質(zhì)；在編碼序列中間插入的一段無編碼作用的堿基序列

復習2參考答案

二、填空題

參考答案：限制酶;甲基化；識別DNA序列；

參考答案：屬名的第一個字母；種名的前兩個字母；菌株名

參考答案：內(nèi)部；附近；（3'-0H）和（5'-P基團）；Mg2+

參考答案：同裂酶

參考答案：切口酶

參考答案：限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）

參考答案：去磷酸化；部分補平

參考答案：能夠在中間劃一個對稱軸，兩側(cè)的序列兩兩對稱互補

配對；兩條互補鏈的5'?-3'的序列組成相同,即將一條鏈旋轉(zhuǎn)180。，

則兩條鏈重疊

參考答案：CCTGG;CCAGG;第二個胞口密咤C的C5位置

參考答案：mcrA;mcrBC;mrr

參考答案：GAATTC;GATC;AAGCTT

參考答案：50%

參考答案：EDTA法；加熱法；苯酚抽提法；試劑盒除酶法

參考答案：5'-3'合成DNA的;3'-5'的外切

參考答案：小牛胸腺;Mg2+

參考答案：聚乙二醇PEG;單價陽離子

三、選擇題

參考答案：C50%

點評：合適濃度的甘油和二甲基亞颯可以作為冰凍保護劑，保護

生物大分子的活性。

參考答案：A前者是物理圖譜后者是連鎖圖

點評：詳細理解兩者的概念

參考答案：C只能作用于雙鏈DNA

點評：限制性內(nèi)切核酸酶的識別和切割序列有很強的特異性，特

別是第口型的限制性內(nèi)切酶。

參考答案：B4

點評：注意DNA分子的形狀，其它條件相同的時候，線狀比環(huán)狀

產(chǎn)生的片段要多一個。

參考答案：A5%

點評：低溫下保存生物大分子時，甘油可以作為冰凍保護劑，但

反應體系中甘油濃度過高會導致星星活性。參考答案：D酶量

點評：各種酶都有適合自己的反應溫度；同時根據(jù)酶反應動力學,

酶切反應一定時間后酶的活性就會減弱或喪失，所以控制酶量是最合

適的

參考答案：C酶失活

點評：理解限制性內(nèi)切酶酶切本質(zhì)和DNA電泳實驗原理。

參考答案：A前者是斷開了一個磷酸二酯鍵，后者是指DNA的單

鏈中有較小的缺失

點評：注意理解專業(yè)詞匯。

參考答案：A屬名第一字母，種名頭兩個字母，菌株號，然后再

加上序號（羅馬字）

點評：限制酶的命名遵循一定的原則，涉及來源（宿主），菌株

或生物型。命名時，依次取屬名第一字母,種名頭兩個字母，菌株號，

然后再加上序號（羅馬字）

參考答案：A識別相同序列的限制酶稱同裂酶

點評：識別相同序列的限制酶稱同裂酶，但它們的切割位點可能

不同。具體可分為：同裂同切酶、同序異切酶、〃同功多位〃等

參考答案：B反轉(zhuǎn)錄酶

點評：其它三種酶均只需要DNA鏈即可

參考答案：C雙鏈DNA的特定堿基序列

點評：了解限制性內(nèi)切酶的識別序列。

參考答案：DSssI

點評：SssI甲基化酶來自原核生物Spiroplasma

參考答案：CmcrD

點評：無mcrD

參考答案：A限制酶是外切酶而不是內(nèi)切酶

點評：了解限制性內(nèi)切酶的特性。

參考答案：A將雙鏈DNA分子中的5,磷酸基團同3'-0H末端

重新形成磷酸二酯鍵

點評：了解DNA連接酶的特性。

復習題3參考答案

二、填空題

參考答案：質(zhì)粒載體；噬菌體載體；粘粒載體；噬菌粒載體

參考答案：利用重組DNA技術(shù)分離目的基因；由大量的含有基因

DNA（即某一生物的全部DNA順序）的不同DNA片段的克隆所構(gòu)成

的群體

參考答案：染色體外的遺傳因子；雙；閉環(huán)；1~200

參考答案：單個細胞中所含有的質(zhì)粒DNA分子數(shù)目；嚴謹型；松

弛型；嚴謹型；松抽型

參考答案：松弛型

參考答案：兩個質(zhì)粒在同一宿主中不能共存的現(xiàn)象；相同

參考答案：在自然條件下，很多質(zhì)粒可以通過稱為細菌接合的作

用轉(zhuǎn)移到新宿主內(nèi)；移動基因mob;轉(zhuǎn)移基因tra;轉(zhuǎn)移起始位點

參考答案：接合型質(zhì)粒；非接合型質(zhì)粒；接合型質(zhì)粒；非接合型

質(zhì)粒；編碼其DNA轉(zhuǎn)移的基因

參考答案：鑒別目的DNA（載體）的存在；將特殊表型的重組子

挑選出來

參考答案：4.3;pM131;pSClOl;pSF2124;pM131;

pSF2124;pSClOl

參考答案：pBR322;M13mpl8/19;pBR322;M13mpl8/19;

MCS方向不同

參考答案：50;雙；線；12;cos位點

參考答案：Lysogenicstate;Lyticgrowth

參考答案：LacZ;spi篩選

參考答案：通過特定的酶切位點允許外源DNA片斷插入的載體；

允許外源DNA片斷替換載體的非必須DNA片斷的載體

參考答案：克隆小的cDNA;b257;lacZ;藍

參考答案：78%?105%

參考答案：cos位點；質(zhì)粒；cos

參考答案：質(zhì)粒復制起點；cos位點；抗性標記；質(zhì)粒；噬菌體

參考答案：23;45

參考答案：噬菌斑；菌落；菌落

參考答案：絲；單；雄；從感染的細胞中分泌出噬菌體顆粒

參考答案：M13phage;pl5A;Tn903;G-T

參考答案：復制起點；著絲粒；端粒；MCS;篩選標記

三、選擇題

參考答案：A可以抑制細胞壁肽聚糖的合成

點評：B、D為四環(huán)素的工作原理；C為氯霉素的工作原理

參考答案：B二者的多克隆位點方向相反

點評：系列載體的區(qū)別一般不大，主要是克隆方向或讀碼框等方

面的差別。

參考答案：D必須具有較高的拷貝數(shù)，便于制備

點評：對于那些有劑量限制的基因克隆需要使用低拷貝的質(zhì)粒載

體

參考答案：D啟動子

點評：了解質(zhì)粒的生物學性質(zhì)。

參考答案：D利用這兩個啟動子進行定點突變

點評：了解pBluescriptM13載體的工作原理及特性。

參考答案：D重組體中插入片段的大小不同

點評：插入片段本身的復制以及插入片段在宿主菌中的表達產(chǎn)物

都會影響宿主的生長。

參考答案：A,A重組體中插入片段的大小不同

點評：了解噬菌粒的生物學特性。

參考答案：DSS-SS

點評：RFDNA特指M13單鏈噬菌體復制型雙鏈DNA

參考答案：A滾環(huán)復制模型

點評：入噬菌體DNA和M13單鏈噬菌體侵染宿主后，都是先0

復制模型，后轉(zhuǎn)為滾環(huán)復制模型。參考答案：B各重組體在平板上生

長的速度不同，轉(zhuǎn)化子中插入片段的擴增量也是不同的

點評：理解粘粒載體的工作原理。

參考答案：B酵母人工染色體（YAC

點評：人工染色體包括YAC、BAC、PAC等，其特點是可以裝載

大的（lOOkb以上）外源DNA片段。參考答案：BSCDNA>L

DNA>OCDNA

點評：DNA分子結(jié)構(gòu)越緊湊,泳動時受到的阻力越小，遷移速率

越大。

參考答案：A在不同的宿主細胞中使用不同的復制起點

點評：能夠在兩類不同的宿主中復制、增殖和選擇的載體稱為穿

梭載體。

參考答案：C可以回折形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)

點評：理解什么是反向重復序列。

參考答案：B12

點評：入噬菌體線性DNA分子的兩端各有一個12個堿基組成的

天然粘性末端，稱為cos位點。

參考答案：BBAC載體在大腸桿菌中為高拷貝

點評：細菌人工染色體。是基于大腸桿菌的F質(zhì)粒構(gòu)建的高通量

低拷貝質(zhì)粒載體。包括嚴謹型控制的復制區(qū)oriS、啟動DNA復制的

由ATP驅(qū)動的解旋酶（RepE）,以及三個確保低拷貝并使質(zhì)粒精確

分配至子代細胞的基因座（parA,parB和parC）等元件。

參考答案：D進入受體細胞后，可引起溶源化反應

點評：粘粒指帶有將DNA包裝到噬菌體顆粒中所需的cos序列的

質(zhì)粒。包括質(zhì)粒復制起點，可以像質(zhì)粒一樣轉(zhuǎn)化并增殖；包括cos位

點，可以像噬菌體顆粒一樣包裝、侵染。

參考答案：A在寄主細胞中拷貝數(shù)較多

點評：理解松光型質(zhì)粒的概念。

參考答案：C如果兩個質(zhì)粒不相容，說明它們的復制機制相同

點評：利用同一復制系統(tǒng)的兩個質(zhì)粒在同一宿主中不能共存的現(xiàn)

象稱質(zhì)粒的不相容性，它是指在第二個質(zhì)粒導入后，在不涉及DNA限

制系統(tǒng)時出現(xiàn)的現(xiàn)象。

參考答案：A獨立存在

點評：質(zhì)粒指細菌或某些低等生物里面存在的獨立于染色體外的

雙鏈閉合環(huán)狀DNA分子（現(xiàn)在也發(fā)現(xiàn)有線狀的），它經(jīng)常攜帶一些不

必需的遺傳信息。

參考答案：D含lacZ

點評：lacZ是一種篩選標記，能夠使載體使用的更加方便，但不

是載體的必需元件。

參考答案：A通常帶有抗性標記

點評：氯霉素可以增加質(zhì)粒的復制，而不影響染色體的復制。

參考答案：C啟動子不需要受控制

您的答案：

點評：表達載體與克隆載體相比就是多了表達所必須的各種遺傳

元件。

復習題4參考答案

二、填空題

參考答案：提高質(zhì)?？截悢?shù)

參考答案：只將RNA分離出來；可將DNA和RNA一起分離出

參考答案：使DNA變性，形成單鏈

參考答案：互補單鏈重新配對恢復成雙鏈；同源單鏈重新配對恢

復成雙鏈。

參考答案：硝酸纖維素濾膜；尼龍膜

三、選擇題

參考答案：B前者只能將RNA分離出來；后者能將DNA和RNA

一起分離出來

點評：SDS是一種表面活性劑。

參考答案：C保護DNA,防止斷裂

點評：蔗糖增加溶液的粘滯性，減小機械剪切，保護DNA,防止

斷裂。

參考答案：D?70℃

點評：了解DNA及其它一些生物大分子的特性。

參考答案：（：保存液中未加一滴氯仿

點評：保存液中加一滴氯仿的作用是防止真菌污染。

參考答案：A以mRNA為模板合成的雙鏈DNA

點評：正確理解cDNA的概念。

參考答案：CrRNA

點評：一個典型的哺乳動物細胞約含10-5|jgRNA，其中80?

85%為rRNA,15~25%主要由各種類型的低分子量RNA組成（如

tRNA，核內(nèi)小分子RNA等），1?5%為mRNA。

參考答案：BEB不容易插入到cccDNA中，因而遷移速度快

點評：了解cccDNA的性質(zhì)和EB的工作原理。

參考答案：BDNA與載體的連接

點評：Southernblotting的步驟有：酶切、電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交、

檢測。

參考答案：D可與任何含有互補序列的DNA片段

點評：理解Southernblotting的工作原理。

點評：T4多核甘酸激酶的活性催化ATP的丫?磷酸基轉(zhuǎn)移至DNA

或RNA的5,末端。

參考答案：DWesternblotting

點評：檢測到mRNA只能說基因轉(zhuǎn)錄，檢測到蛋白才能證明基因

表達。Westernblotting是通過抗原抗體反應檢測目標蛋白的方法。

參考答案：D假陽性較高

點評：斑點雜交指直接將DNA或RNA分子以斑點的形式固定在

濾膜上，然后進行的分子雜交。雜交信號特別強，容易產(chǎn)生假陽性。

參考答案：B不需要外源基因的表達

點評：因為菌落雜交是一種DNA雜交，所以不需要外源基因的表

達。

參考答案：A印記的對象不同，前者是對DNA,后者是對RNA

點評:Southernblotting是針對DNA的檢測手段。Northern

blotting是針對RNA的檢測手段，Westernblotting是針對蛋白質(zhì)

的檢測手段。

參考答案：D抗體

點評：抗體為蛋白質(zhì)探針，用于Westernblottingo

復習題5參考答案

二、填空題

參考答案：polymerasechainreaction;模板；弓|物；dNTP;

DNA聚合酶

參考答案：變性；復性；延伸

參考答案：溫度；Mg2+濃度；去污劑；模板的二級結(jié)構(gòu)

參考答案：防止反應液揮發(fā)

參考答案：模板Tm值；使DNA雙鏈離解一半時溫度稱為解鏈溫

度（Tm）

參考答案：lkb

參考答案:1.5;10~50;1.5

參考答案：Taq酶擴增的產(chǎn)物一般要在3,末端加一個核甘酸且通

常為A的性質(zhì)

參考答案：即隨機DNA六聚體，該六聚體能夠結(jié)合在單鏈DNA

上，并在合適的酶作用下，作為互補鏈合成的引物。

參考答案：次黃噂吟可以和任］可堿基配對

三、選擇題

參考答案：DPCR

點評：聚合酶鏈反應，英