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15CodeofpeacticeofcallusproductionforCistanchedeserticolaMaDB15/T3689—2024I本文件主要起草人:何江峰、王力偉、趙杰、安江紅、房永雨、趙小慶、孫華、趙夢(mèng)然、劉紅DB15/T3689—20241荒漠肉蓯蓉愈傷組織生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了荒漠肉蓯蓉的外植體采集、預(yù)處理、培養(yǎng)基配制、愈傷組織誘導(dǎo)及繼代培養(yǎng)的方下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和DB15/T3689—20242采集地下部分,外觀要求表皮及鱗片狀葉呈將采集部位埋進(jìn)沙土中或放入保鮮袋,在4℃條件下保存,保持表面干燥,1個(gè)月內(nèi)處理。MurashigeandSkoog(MS)培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,試劑配制按照GB/T603規(guī)定方法配制,所用水執(zhí)行GB精確稱取28.0gKOH粉末,用蒸餾水溶解,冷卻至室溫精確量取43.86mL的市售38%鹽酸,加蒸餾水,定容至500mL,現(xiàn)精確稱取2,4-D粉末0.2g,加1.0mL1MKOH溶液,于90℃水浴加熱助溶,冷卻至室溫后,用蒸餾DB15/T3689—20243精確量取100mL次氯酸鈉溶液(分析純,有效氯10%用蒸餾水定容至1L,現(xiàn)精確稱取4.74gMS培養(yǎng)基粉末,30g蔗糖,7.0g瓊脂粉,2.0gPVP粉末,于800mL蒸餾水中進(jìn)行在超凈工作臺(tái)里將配制好的培養(yǎng)基分裝在150mL的無菌三角瓶分裝后的培養(yǎng)基保存于干燥、潔凈的儲(chǔ)藏室或超凈工作臺(tái)內(nèi),175%乙醇浸沒消毒20s后無菌水沖洗3次,再用1%次氯斜插接種到培養(yǎng)基上,每個(gè)接種瓶接種5~6塊,深外植體培養(yǎng)20d左右開始膨大,35d左右形6塊,深淺適中,分布
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