高考生物真題按知識(shí)點(diǎn)分類匯編 基因工程的原理及技術(shù)

基囚工程的原理及技術(shù)

山東35、（8分）【生物一現(xiàn)代生物科技專題】

毛角蛋白II型中間絲（KIFII）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFII基因的高絨質(zhì)絨山

羊的簡(jiǎn)單流程如圖。

」轉(zhuǎn)基因

"JVS-代孕

母羊

（1）過程①中最常用的運(yùn)轂工具是_,所需要的酶是限制酶和。

（2）在過程②中，用處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中，將成纖維

細(xì)抱置于5%C02的氣體環(huán)境中，CO,的作用是_________________o

（3）在過程③中，用處理以獲得更多的卵（母）細(xì)胞。成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需

要進(jìn)行處理。

（4）從重組細(xì)胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是o在胚胎移植前，

通過____________技術(shù)可獲得較多胚胎。

【答案】（1）質(zhì)粒；DNA連接酶

（2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）；維持培養(yǎng)基（液）的PH穩(wěn)定

（3）促性腺激素（或促濾泡素，孕馬血清）；去核

（4）（早期）胚胎培養(yǎng)胚胎分割

【解析】熟練掌握基因工程和胚胎工程的基本知識(shí)就能解答本題.

（1）運(yùn)載工具（體）包括質(zhì)粒、噬菌體衍生物及動(dòng)植物病毒，具中質(zhì)粒是主要運(yùn)載體;所需工具酶是限

制酶和DNA連接酶。

（2）分散皮膚組織塊成單個(gè)細(xì)胞使用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，C02的作

用是維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定。

（3）要得到更多的卵（母）細(xì)胞需用促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理；成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需

要進(jìn)行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要了來自供體核。

(4)把重組細(xì)胞培養(yǎng)到早期胚胎叫早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)，在胚胎移值前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多

胚抬。

【試題評(píng)價(jià)】本題考查了基因工程的操作工具、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和條件、超數(shù)排卵的方法、核移

植技術(shù)、胚胎工程中早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等知識(shí)，基礎(chǔ)性強(qiáng)，難度不大。

天津7.(13分)生物分子間特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實(shí)例為體外處理“蛋白

質(zhì)-DNA復(fù)合體"獲得DNA片段信息的過程圖。

②③—ATGCTTC—

蛋白酶加歿K5d一TACGAAG_

據(jù)圖回答:

(1)過程①酶作用的部位是鍵，此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA,過程②酶作用的部

位是_________________鍵。

(2)①、②兩過程利用了酶的特性。

(3)若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要過程③的測(cè)序結(jié)果與酶的識(shí)別序列進(jìn)

行對(duì)比，以確定選用何種酶。

(4)如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA酶聚合，則其識(shí)別、結(jié)合DNA序列區(qū)為基因的一

(5)以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有(多選)

A.分離得到核糖體，用蛋白酶酶解后提取rRNA

B.用無水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素

C.通過分子雜交手段，用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進(jìn)行染色體定位

D.將抑制成熟基因?qū)敕?，其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補(bǔ)結(jié)合，終止后者翻譯，延遲果

實(shí)成熟。

【答案】(1)磷酸二酯，肽

(2)專一性

(3)限制性核酸內(nèi)切酶

(4)啟動(dòng)子(或轉(zhuǎn)錄起始區(qū))

⑸A、C、D

【解析】(1)DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯鍵，蛋白酶作用的部位是肽鍵。

(2)①②過程利用了各種酶催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的特性，即專一性。

(3)DNA要構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割,再與質(zhì)粒重組.

(4)RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合在基因的啟動(dòng)子上，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。

(5)蛋白酶能特異性的酶解蛋白質(zhì)，分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異性，抑制成熟基

因轉(zhuǎn)錄出的mRVA與催化成熟酶基因的mRNA堿基互補(bǔ)結(jié)合，也具有特異性，光和色素易溶于有機(jī)溶劑，與

酒精并不是特異性的溶解，所以選ACD。

【試題點(diǎn)評(píng)】本題考查了基因工程的想過知識(shí)，主要考查學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解和應(yīng)用能力，難度較小。

天津8.(20分)黃曲霉毒素氏(AFB.)存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈進(jìn)入動(dòng)

物體內(nèi)并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達(dá)AFB解毒酶.將該酶添加在飼料中可以降解AFEi,清除其毒

性，

回答下列問題：

(1)AFBi屬于類致癌因子。

(2)AFBi能結(jié)合在DNA的G上，使該位點(diǎn)受損傷變?yōu)镚',在DNA復(fù)制中，G'會(huì)與A配對(duì)。現(xiàn)有受損

—AGT-

傷部位的序列為一TCA-,經(jīng)兩次復(fù)制后，該序列突變?yōu)閛

(3)下圖為采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)AFB解毒酶的流程圖

據(jù)圖回答問題：

①在甲、乙條件下培養(yǎng)含AFB解毒酶基因的菌株，經(jīng)測(cè)定，甲菌液細(xì)胞密度小、細(xì)胞含解毒酶：乙菌

液細(xì)胞密度大、細(xì)胞不含解毒酶.過程1應(yīng)選擇________菌液的細(xì)胞提取總RNA,理由是______________

②過程II中，與引物結(jié)合的模版是______________________

③檢測(cè)酵母菌工程菌是否合成了AFBi解毒酶，應(yīng)采用方法。

(4)選取不含AFB：的飼料和某種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為材料，探究該AFB解毒酶在飼料中的解毒效果。實(shí)驗(yàn)設(shè)

計(jì)及測(cè)定結(jié)果見下表：

忝加

組別-肝臟AFB1殘留量（口鯉）

AFBi（pg/kg飼料）AFBI解毒酶（gykg飼料）

A006.4

B100020.9

C100116.8

D100311.7

E10057.3

F10077.3

據(jù)表回答問題：

①本實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)自變量，分別為______________________0

②本實(shí)驗(yàn)中，反映AFBi解毒酶的解毒效果的對(duì)照組是一O

③經(jīng)測(cè)定，某污染飼料中AFBi含量為lOO^g/kg,則每千克飼料應(yīng)添加克AFB1解毒酶.解毒

效果最好.同時(shí)節(jié)的了成本。

（5）采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造該酶的基本途徑是：從提高每的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),

推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的序列。

-ATT-

【答案】（1）化學(xué)i2）-TAA-

（3）①甲甲菌液細(xì)胞的AFBi解毒酶基因已轉(zhuǎn)錄生成了mRNA,而在乙菌液細(xì)胞中該基因未轉(zhuǎn)錄

②AFBi解毒酶基因的cDNA.③抗原-抗體雜交

（4）①AFB1的有無和AFB1解毒酶的含量。

②B組（或B組+A組）③5

（5）脫氧核昔酸序列。

【解析】黃曲霉毒素Bl（AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈法入動(dòng)物體內(nèi)

并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達(dá)AFB1解毒酶.將該酶添加在飼料中可以降解AFB1,清除其毒性。

（1）黃曲霉毒素Bl（AFB1）是化學(xué)物質(zhì)，AFB1屬于化學(xué)類致癌因子。

（2）AFB1能結(jié)合在DNA的G上.使該位點(diǎn)受損傷變?yōu)镚',在DNA復(fù)制中，G'會(huì)與A配對(duì)。現(xiàn)

-A,G'T--ATT-

有受損傷部位的序列為一丁。A-,經(jīng)兩次復(fù)制后，該序列突變?yōu)橐籘A、一。

（3）①在甲、乙條件下培養(yǎng)含AFB1解毒酶基因的菌株.經(jīng)測(cè)定.甲菌液細(xì)胞密度小、細(xì)胞含解毒

酶：乙菌液細(xì)胞密度大、細(xì)胞不含解毒酶.過程1應(yīng)選擇甲菌液的細(xì)胞提取總RNA,理由是因?yàn)榧拙?/p>

細(xì)抱含解毒酶，意味著完成了基因的表達(dá)，所以應(yīng)選擇甲菌液的細(xì)胞提取總RNA

②過程II中，根據(jù)圖示，可以看出與引物結(jié)合的模版是cDNA.

③檢測(cè)酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，檢測(cè)對(duì)象為蛋白質(zhì)，應(yīng)采用抗原-抗體雜交方法。

(4)①本實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)自變量，分別為AFB1的有無和AFB1解毒酶的含量。

②本實(shí)驗(yàn)中.反映AFB1解毒酶的解毒效果的對(duì)照組是B組。

③經(jīng)測(cè)定，某污染飼料中AFB1含量為100Mg/kg,則每千克飼料應(yīng)添加5克AFB1解毒酶.AFB1的

殘留量最少，解毒效果最好.繼續(xù)添加AFB1解毒酶解解毒效果不變，因此節(jié)約了成本。

(5)采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造該酶的基本途徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),

推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核甘酸序列。

【試題點(diǎn)評(píng)】本題以“黃曲霉毒素B1”為材料背景，考查了致癌因子，DNA復(fù)制，基因工程，蛋白質(zhì)

工程和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，是一道很好的綜合題，考查學(xué)生的知識(shí)的理解和運(yùn)用能力，以及對(duì)實(shí)驗(yàn)分析能力和分析

探究能力。難度適中。

浙江6.天然的玫瑰沒有藍(lán)色花，這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B,而開藍(lán)色花的矮牽牛中存

在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰，下列操作正確的是()

A.提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA,再擴(kuò)增基因B

B.利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因B

C.利用DNA聚合酶將基因B巧質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞

D.將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞

【解析】提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA,逆轉(zhuǎn)錄得到DMA,然后擴(kuò)增，可獲得大量的基因B,A正確；從

基因文庫中獲取目的基因，只要根據(jù)目的基因的相關(guān)信息和基因文庫中的信息進(jìn)行篩選對(duì)比即可，不需要

用限制酶進(jìn)行切割，B錯(cuò)誤；目的基因與質(zhì)粒的連接需要用DNA連接酶，而不是DNA聚合酶，C錯(cuò)誤；目

的基因需要和運(yùn)載體連接后形成重組質(zhì)粒再導(dǎo)入，而且應(yīng)該用農(nóng)桿菌進(jìn)行感染，而不是大腸桿菌，D錯(cuò)誤。

【答案】A

【試題點(diǎn)評(píng)】本題主要考查基因工程，在這部分，工具酶的選擇和操作過程是?？純?nèi)容，難度適中。

新課標(biāo)40、根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問題：

(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有和°

(2)質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRI切割后產(chǎn)生的片段如下：

AATTC……G

G??…CTTAA

為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRi切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶

切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是O

(3)按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即DNA連接酶和

DNA連接酶。

(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是.產(chǎn)物是o若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用技

術(shù)，

(5)基因工程中除質(zhì)粒外，和也可作為運(yùn)載體。

(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因

是O

【答案】

(1)黏性末端平末端

(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同

(3)E*coliT4

(4)mRNA(或RM)cDNA(或DNA)PCR

(5)噬菌體動(dòng)植物病毒

(6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱

【解析】

(1)當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端，而當(dāng)

限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線處切開時(shí)，產(chǎn)生的則是平末端。

(2)為使運(yùn)載體與目的基因相連，不同的限制酶應(yīng)切割出相同的黏性末端，它們必須要能識(shí)別相同

的核音酸序列，并且使每條鏈中相同的兩個(gè)核昔酸之間的磷酸二酯鍵斷開。

(3)DNA連接酶，根據(jù)酶的來源不同，可以將這些酶分為兩類：一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱

為E?coliDNA連接酶；另一類是從T4噬菌體中分離出來的，稱為T4DNA連接酶。

(4)反轉(zhuǎn)錄是以RNA為模版來合成DNA的過程?？梢栽隗w外短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增DNA的技術(shù)叫PCR(多

聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))

(5)基因工程中除質(zhì)粒外，還有X噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。

(6)大腸桿菌細(xì)胞外有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，能阻止其他物質(zhì)的進(jìn)入，只能通過Cl處理細(xì)胞，使細(xì)胞處

于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。

【試題評(píng)價(jià)】通過基因工程的操作過程及基因工程的工具及工具酶的作用，考查學(xué)生識(shí)記能力與理解

分析能力。難度較小。

上海55.如圖18所示，若用兩種識(shí)別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基

因并將之取代質(zhì)粒MH〃(3.7kb,1kh=10()0對(duì)堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域(0.2kh),那么所形成的重組質(zhì)

粒pZHZ2o

A.既能被E也能被F切開B.能被E但不能被F切開

C.既不能被E也不能被F切開D.能被F但不能被E切開

B18

【答案】

55.A【解析】?用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質(zhì)粒pZHZl(3.7kb,lkb=l()0()對(duì)堿基)

上相應(yīng)的E—F區(qū)域(0.2kb),用DNA連接酶連接后形成重組質(zhì)粒，則在重組質(zhì)粒中仍然含有限制酶E和

限制酶F的切割位點(diǎn)，形成的重組質(zhì)粒PZHZ2既能被E也能被F切開，故本題選A。

上海56.已知在質(zhì)粒pZHZl中，限制酶G切割位點(diǎn)距限制酶E切割位點(diǎn)0.8kb,限制酶H切割位點(diǎn)

距限制酶F切割位點(diǎn)。.5kbo若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒PZHZ2樣品，據(jù)表4所列酶切結(jié)

果判斷目的基因的大小為kb；并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點(diǎn)標(biāo)注在圖19中。

￥???????]11

-質(zhì)粒區(qū)域目的基因GH

1.6kb1.2kb

(每小格代表0」kb)

3.1kb3.5kb

H

成N區(qū)域目的基

《標(biāo)小格代表0」kb）

56.1.2見右圖

【解析】56.根據(jù)題中信息，原來質(zhì)粒長度為3.7kb切去EF之間的還有3.5kb,插入目的基因后構(gòu)成

重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒長度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb,可推導(dǎo)出目的基因長度為1.2kb。重組質(zhì)粒中G的

切割位點(diǎn)距E的切割位點(diǎn)0.8kb,單獨(dú)用限制酶G切割后產(chǎn)生1.6kb和3.Ikb的兩種片段，說明在重組質(zhì)

粒中除了圖中標(biāo)示出來的G酶識(shí)別位點(diǎn)外，還有一個(gè)G酶識(shí)別位點(diǎn)；H的酶切位點(diǎn)距F0.5kb,用H單獨(dú)酶

切產(chǎn)生1.2kb和3.5kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中含有另外一個(gè)H的酶切位點(diǎn)，根據(jù)題中信息提示“將

目的基因內(nèi)部的限制酶G和H的識(shí)別位點(diǎn)標(biāo)注在圖19中”，可確定在EF之間分別含有G和H的一個(gè)識(shí)別

位點(diǎn)?？蓴喽℅的識(shí)別位點(diǎn)，在舉例E點(diǎn)右側(cè)（）.8kb處，H的識(shí)別位點(diǎn)在距F左側(cè)0.7kb處。

上海57.若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達(dá)產(chǎn)物，則需將重組質(zhì)粒PZ11Z2導(dǎo)入至山羊的

細(xì)胞中。若PZHZ2進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA±,那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子山羊的方式是

57.受精卵轉(zhuǎn)基因山羊間相互交配

【解析】57.將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞中，通常以受精卵作為受體細(xì)胞，當(dāng)受精卵發(fā)育成山羊后，在

雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。重組質(zhì)粒插入在一條染色體DNA上，可通過雌雄轉(zhuǎn)基

因11羊雜交的方法來獲取轉(zhuǎn)基因純合子山羊。

廣東28.（16分）子葉黃色（Y,野生型）和綠色（y,突變型）是孟德爾研究的豌豆相對(duì)性狀之一。

野生型豌豆成熟后，子葉由綠色變?yōu)辄S色。

（1）在黑暗條件下，野生型和突變型豌豆的葉片總?cè)~綠素含量的變化見圖10。其中，反映突變型就

豆葉片總?cè)~綠素含量變化的曲線是____________O

2.0轉(zhuǎn)運(yùn)肽

（引導(dǎo)該安白進(jìn)入葉綠體）

1238187188189190

SGRY蛋白一TT------------?-N--------------SK?IR---------

1238187188189190

SGRy蛋白—S”…—■……—-K--------——SKIL1R---------

（注:序列中的字母是氮基酸舉寫.序列上方的數(shù)字表示該象

人陵在序列中的優(yōu)愛，①、②、③表示發(fā)生突變的位點(diǎn).）

國11

時(shí)間（夭）

圖10

（2）Y基因和y基因的翻譯產(chǎn)物分別是SGR'蛋白和SGR'蛋白，其部分氨基酸序列見圖11。據(jù)圖11

推測(cè)，Y基因突變?yōu)閥基因的原因是發(fā)生了堿基對(duì)的和o進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，SGR’蛋白和SGR'

蛋白都能進(jìn)入葉綠體?？赏茰y(cè)，位點(diǎn)______的突變導(dǎo)致了該蛋白的功能異常，從而使該蛋白調(diào)控葉綠素

降解的能力減弱，最終使突變型豌豆子葉和葉片維持“常綠”。

（3）水稻Y基因發(fā)生突變，也出現(xiàn)了類似的“常綠”突變植株y2,其葉片衰老后仍為綠色。為驗(yàn)證

水稻Y基因的功能，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完善。

（-）培育轉(zhuǎn)基因植株：

1.植株甲：用含有空載體的農(nóng)桿菌感染________的細(xì)胞，培育并獲得純合植株。

n.植株乙：_________培育并獲得含有目的基因的純合植株。

（-）預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)基因植株的表現(xiàn)型：

植株甲：維持“常綠”；植株乙：O

（三）推測(cè)結(jié)論：0

【答案】⑴A（2）替換增加③

（3）（一）突變植株y2用含有Y基因的農(nóng)桿菌感染純合突變植株y2（二）能不能維持“常

綠”（三）Y基因能使子葉由綠色變?yōu)辄S色

【解析】（1）根據(jù)題干所紿信息“野生型豌豆成熟后，子葉由綠色變?yōu)辄S色”，可推測(cè)出野生型豌

豆或熟后，子葉發(fā)育成的葉片中葉綠素含量降低。分析圖10,B從第六天開始總?cè)~綠素含量明顯下降，因

此B代表野生型豌豆，A為突變型豌豆。

（2）根據(jù)圖11可以看出，突變型的SGR'蛋白和野生型的SGR'有3處變異，①處氨基酸由T變成S,

②處氨基酸由N變成K,可以確定是基因相應(yīng)的堿基對(duì)發(fā)生了替換，③處多了一個(gè)氨基酸，所以可以確定

是發(fā)生了堿基對(duì)的增添，從圖11中可以看出SGR,蛋白的笫12和38個(gè)氨基酸所在的區(qū)域的功能是引導(dǎo)該

蛋白進(jìn)入葉綠體，根據(jù)題意，SGR'和SGR'都能進(jìn)入葉綠體，說明①、②處的變異沒有改變其功能；所以突

變型的SGR'蛋白功能的改變就是由③處變異引起的。

（3）本實(shí)驗(yàn)通過具體情境考查對(duì)照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力。欲通過轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證Y基因”能使子葉由綠色

變?yōu)辄S色”的功能，首先應(yīng)培育純合的常綠突變植株y2,然后用含有Y基因的農(nóng)桿菌感染純合的常綠突變

植株y2,培育出含有目的基因的純合植株觀察其葉片顏色變化c為了排除農(nóng)桿菌感染對(duì)植株的影響，應(yīng)用

含有空載體的農(nóng)桿菌感染常綠突變植株y2作為對(duì)照。

【試題點(diǎn)評(píng)】本題考查生物體的變異、遺傳定律的綜合應(yīng)月、遺傳學(xué)的探究實(shí)驗(yàn)等內(nèi)容和學(xué)生提取信

息的能力.難度中等。

江蘇32.（9分）圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列，圖2表

示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、Sma14種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識(shí)

l

別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C'CGG、G'GATCC、tATC、CCCGGGo請(qǐng)回答下列問題

（D圖1的一條脫氧核甘酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由—連接。

（2）若用限制酶Smal完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是—末端，其產(chǎn)物長度為一。

（3）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出

圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，產(chǎn)物中共有一種不同長度的DNA片段。

（4）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行連接，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限

制酶是—o在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加的培養(yǎng)基

進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因I）不能正確表達(dá)，其最可能的原因

是0

【答案】（1）脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖

(2)平537bp、790bp、661bp⑶4

(4)BamHI抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向鏈接

【解析】(1)DNA單鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間通過“脫氧核糖一磷酸一脫氧核糖”連接。

(2)SmaI識(shí)別的序列為GGGCCC,切割后會(huì)產(chǎn)生平末端；圖1所示的DNA分子中含有詼個(gè)SmaI的

識(shí)別位點(diǎn)，第一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在左端534bp序列向右三個(gè)堿基對(duì)的位置；第二個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在右端658bp序列

向左三個(gè)堿基對(duì)的位置，從這兩個(gè)位點(diǎn)切割后產(chǎn)生的DNA片段長度分別為534+3,796-3-3,658+3,即得

到的DNA片段長度分別為537bp、790bp和661bpo

(3)在雜合子體內(nèi)含有基因D和基因d,基因D的序列中含有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，經(jīng)過Smal完全切割會(huì)

產(chǎn)生537bp、79()bp和661bp三種不同長度的片段，基因d的序列中含有一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，經(jīng)過切割后會(huì)產(chǎn)

生1327bp和661bp兩種長度的片段，綜上，雜合子中分離到該基因的DNA片段經(jīng)過切割后會(huì)產(chǎn)生4種不

同長度的片段。

(4)能夠獲取目的基因并切開質(zhì)粒的限制酶有識(shí)別序列為GGATCC的BamHI和識(shí)別序列為GATC的Mbo

I,若使用北。I會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因、所以要用BamEI來切割目

的基因和質(zhì)粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。因?yàn)槟康?/p>

基因和運(yùn)載體是用同種限制酶切割的，目的基因兩端的末端和質(zhì)粒切割后的兩個(gè)末端都能進(jìn)行互補(bǔ)，可能

出現(xiàn)目的基因反向連接在運(yùn)載體上的情況，導(dǎo)致基因D不能正確表達(dá)。

【試題點(diǎn)評(píng)】本題主要考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，主要基因工程的基本操作過程限制酶的作用、目的基因

的檢測(cè)和篩選等。尤其本題中所涉及的限制酶的內(nèi)容，難度大，要求能準(zhǔn)確分析其產(chǎn)物的長度。學(xué)生必須

具備很好的識(shí)圖、分析推理能力才能成功作答。福建32.【生物一現(xiàn)代生物科技專題】必答題(1()分)

肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)或弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將

let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。

請(qǐng)回答：

(1)進(jìn)行過程①時(shí)，需用酶切開載體以插入let-7基因。載體應(yīng)用RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合

的部位，以驅(qū)動(dòng)let-7基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為o

(2)進(jìn)行過程②時(shí)，需用酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于傳代培養(yǎng)。

(3)研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響癌基因RAS的表達(dá)，其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析，可從細(xì)胞提

取進(jìn)行分子雜交，以直接檢測(cè)lei-7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制，可能是由于細(xì)胞中

(RASmRNA/RAS蛋白)含量減少引起的。

【答案】(10分)

(1)限制性核酸內(nèi)切酶(或限制)啟動(dòng)子

(2)胰蛋白

(3)RNARAS蛋白

【解析】

(1)過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，在該過程中需要用限制酶對(duì)載體進(jìn)行切割以便于目的基因的

插入(限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制酶，寫其他的不得分)；啟動(dòng)子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合

酶結(jié)合和識(shí)別的位點(diǎn)，RNA聚合函結(jié)合到該位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程。

(2)過程②表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理，使之分散成單個(gè)

的細(xì)胞，之后分裝到其他培養(yǎng)瓶里面進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

(3)判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)來進(jìn)行，從細(xì)胞中提取mRNA和用放射

性司位素或者熒光標(biāo)記的目的基因單鏈DNA片段進(jìn)行雜交。根據(jù)題中信息“肺組織細(xì)胞中的let-7基因表

達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)就增強(qiáng)弓I發(fā)肺癌”導(dǎo)入let7基因后，肺癌細(xì)胞受到抑制，說明RAS基因表達(dá)

減弱，導(dǎo)致細(xì)胞中的RAS蛋白質(zhì)含量減少進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞受抑制。

【試題點(diǎn)評(píng)】本題主要考查選修3中有關(guān)基因工程和細(xì)胞二程中的知識(shí)，涉及的知識(shí)點(diǎn)主要有表達(dá)載

體的構(gòu)建.目的基因的檢測(cè).動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等。試題難度不大。

安徽31.（24分）

甲型血友病是由X染色體上的隱性基因?qū)е碌倪z傳病(H對(duì)h為顯性)o圖1中兩個(gè)家系都有血友病發(fā)

病史，III2和III3婚后生下一個(gè)性染色體組成是XXY的非血友病兒子(IV2),家系中的其他成員性染色

體組成均正常。

1

l-lC)正常男女

血友病患者

非血友病XXY患者

圖1

⑴根據(jù)圖1(填“能”或“不能”)確定IV2兩條X染色體的來源；II14

與正常女子結(jié)婚，推斷其女兒患血友病的概率是______________________O

(2)兩個(gè)家系的甲型血友病均由凝血因子VIII(簡(jiǎn)稱F8,即抗血友病球蛋白)基因堿基對(duì)缺失所致。

為探明IV2的病因，對(duì)家系的第III、IV代成員F8基因的特異片段進(jìn)行了PCR擴(kuò)增，其產(chǎn)物電泳結(jié)果如

圖2所示，結(jié)合圖I,推斷III3的基因型是____________。請(qǐng)用圖解和必要的文字說明IV2豐血友病XXY

的形成原因。

(7)現(xiàn)III3再次懷孕，產(chǎn)前診斷顯示胎兒(IY3)細(xì)胞的染色體為46,XY；F8基因的PCR檢測(cè)結(jié)果

如圖2所示。由此建議III3o

ni,111ssinsm4ivtiv2ivs圖2

點(diǎn)樣孔

卜條帶

(4)補(bǔ)給F8可治療甲型血友病。采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時(shí)，在凝膠裝填色譜柱后，

需要用緩沖液處理較長時(shí)間，其目的是______________________；若尸8比某些雜蛋白先收集到，說明F8

的相對(duì)分子質(zhì)量較這些雜蛋白0

(5)利用轉(zhuǎn)基因豬乳腺生物反應(yīng)器可生產(chǎn)FRo要使乳腺細(xì)胞合成F8,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)必須將F8

基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的等調(diào)控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆

篩選獲得，該cDNA比染色體上的F8基因短，原因是該cDNA沒有

(6)為獲得更多的轉(zhuǎn)基因母豬，可以采用體細(xì)胞克隆技術(shù)，將純合轉(zhuǎn)基因母豬的體細(xì)胞核注

入構(gòu)成重組胚胎進(jìn)行繁殖。

【答案】(1)不能0

(2)XHXh,遺傳圖解如下:

說明：1后產(chǎn)生異常的XhY

精子和川3產(chǎn)生正常的卵細(xì)

Y

在1113形成卵細(xì)胞過程中的減數(shù)第二次分裂后期，帶有基因II的姐妹染色單體移向細(xì)胞的同一極.

形成xHxH卵細(xì)胞，xHxH卵細(xì)胞與正常精子結(jié)合形成xW受精卵,

(3)終止妊娠。

(4)洗滌平衡凝膠，并使凝膠裝填緊密大

(5)啟動(dòng)子內(nèi)含子

(6)去核的卵母細(xì)胞

【解析】

(1)因?yàn)镹2的染色體組成可能是XHX",也可能是￡父丫，所以不能確定，川4的基因型為X”Y,所以

后代女性中沒有患病個(gè)體。

(2)由圖可知第一條帶是顯性，第二條帶是隱性，所以川3基因型為XV,圖解如下：

h

精(卵)依細(xì)胞XHXXY

受精犯

在1113形成卵細(xì)胞過程中的減數(shù)第二次分裂后期，帶有基因H的姐妹染色單體移向細(xì)胞的同一極,

形成XHXH卵細(xì)胞，X,,X,i卵細(xì)胞與正常精子結(jié)合形成XHXHY受精卵c

(3)由題可知，IV3是血友病患者，所以建議IH3終止妊娠。

(4)采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時(shí)，在凝膠裝填色譜柱后，需要用緩沖液處理較長時(shí)間，

其目的是洗滌平衡凝膠，并使凝膠裝填緊密；若F8比某些雜蛋白先收集到，說明F8的相對(duì)分子質(zhì)量較這

些雜蛋白較大。

(5)要使乳腺細(xì)胞合成F8,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子和終

止子等調(diào)控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆篩選獲得，該cDNA比染色體上的F8基因短，原因

是該cDNA沒有內(nèi)含子。

(6)為獲得更多的轉(zhuǎn)基因母豬，可以采用體細(xì)胞克隆技術(shù)，將純合轉(zhuǎn)基因母豬的體細(xì)胞核注入去核

卵細(xì)胞，構(gòu)成重組胚胎進(jìn)行繁殖。

【試題點(diǎn)評(píng)】本題考查了遺傳規(guī)律，減數(shù)分裂，血紅蛋白的提取，基因工程，胚胎工程；遺傳規(guī)律是

近幾年的考查熱點(diǎn)，但每年考查的都有區(qū)別，在解遺傳題時(shí)，要記住一些常用解題方法，減數(shù)分裂的圖示

是高中生物的基本技能，會(huì)畫，能理解，能夠?qū)z傳規(guī)律有個(gè)很高的認(rèn)識(shí)，遺傳實(shí)質(zhì)都體現(xiàn)在其中。至于

選修部分，基因工程、胚胎工程是近幾年的考查熱點(diǎn)，而血紅蛋白的提取，是今年生物考試說明中有，意

味著我們要認(rèn)真閱讀考試說明?？傮w來說，該題是本試卷中的難題，原因是，遺傳本身對(duì)于學(xué)生來說就難,

加之選修部分題目較偏僻，從該題可以看出，安徽高考對(duì)于選修的考查，與必修部分建立了聯(lián)系，進(jìn)行了

學(xué)科內(nèi)的綜合，希望學(xué)生在備考的過程中多加注意。

北京5.(6分)高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是

A.將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中

B.將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上

C.將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上

D.將土壤浸出液涂布在無筐的選擇培養(yǎng)基上

【答案】C

【解析】植物組織培養(yǎng)中的外植體必須在嚴(yán)格的無菌環(huán)境口進(jìn)行培養(yǎng)，而且操作的各環(huán)節(jié)都要注意嚴(yán)

格滅菌，必須無菌操作，C對(duì)，葡萄酒的制作原理是利用酵母菌無氧發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生酒精，在無氧條件下，大

部分微生物都不能生存，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，酒精度增大，也有殺菌的作用；而制作腐乳時(shí)，主要是將毛霉

等微生物接種在豆腐上，此過程的加鹽、加鹵湯等操作均有一定的殺菌作用；選擇培養(yǎng)基只能允許目的菌

生長，會(huì)抑制其他雜菌生長，因此不是嚴(yán)格無菌操作時(shí)A、B、D選項(xiàng)的情況下比C選項(xiàng)的受影響要小。

【試題點(diǎn)評(píng)】本題考查對(duì)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、微生物的培養(yǎng)和植物培養(yǎng)技術(shù)中無菌操作的掌握。重

點(diǎn)要求考生熟悉相應(yīng)操作過程中的注意事項(xiàng)，這種類型的題目考查的內(nèi)容相對(duì)固定，重點(diǎn)放在細(xì)節(jié)，難度

中等。

海南31.【生物一一選修3：現(xiàn)代生物科技專題】(15分).

已知甲種農(nóng)作物因受到乙種昆蟲危害而減產(chǎn)，乙種昆蟲食用某種原核生物分泌的丙種蛋白質(zhì)后死亡。

因比，可將丙種蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)入到甲種農(nóng)作物體內(nèi)，使甲種農(nóng)作物獲得抗乙種昆蟲危害的能力。

回答下列問題：

(1)為了獲得丙中蛋白質(zhì)的基因，在已知丙種蛋白質(zhì)氨基酸序列的基礎(chǔ)上，推測(cè)出丙中蛋白質(zhì)的

序列，據(jù)此可利用方法合成目的基因。獲得丙中蛋白質(zhì)的基因還可用、方法。

(2)在利用上述丙中蛋白質(zhì)基因和質(zhì)粒載體構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，常需使用

酶和O

(3)將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與甲種農(nóng)作物的愈傷組織共培養(yǎng)，篩選出含有丙種蛋白質(zhì)的愈傷組織,

由該愈傷組織培養(yǎng)成的再生植株可抵抗的危害。

(4)若用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌直接感染甲種農(nóng)作物植株葉片傷口，則該植株的種子

(填“含有”或“不含”)丙種蛋白質(zhì)基因。

【答案】(15分)

(1)基因化學(xué)基因文庫PCR(每空2分，共8分，其他合理答案也給分)

(2)限制DMA連接(每空1分，共2分)

(3)乙種昆蟲(2分)

(4)不含(3分)。

【解析】(1)在已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列的情況下，可根據(jù)氨基酸和堿基的對(duì)應(yīng)關(guān)系，推出合成該蛋

白質(zhì)的基因序列，然后用DNA合成儀通過化學(xué)方法來合成目的基因。此外也可以從基因文庫中獲取目的基

因也可通過PCR方法獲取目的基因。

(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，需要用限制酶將運(yùn)載體切開，并用DNA連接酶將目的基因連接到運(yùn)載體上,

從而構(gòu)建基因表達(dá)載體。

(3)愈傷組織中含有丙蛋白，說明丙蛋白的基因得到了表達(dá)，在培養(yǎng)成的植株體內(nèi)也含有丙蛋白，

乙昆蟲食用丙蛋白后會(huì)死亡，則該植株可抵抗乙昆蟲的危害。

(4)直接用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌直接感染甲種農(nóng)作物植株葉片傷口，僅僅在該葉片內(nèi)部分細(xì)胞中

能合成丙蛋白，該植株的種子和其他的營養(yǎng)器官均不含有重組質(zhì)粒，也就不含有丙中蛋白質(zhì)的基因。

【試題點(diǎn)評(píng)】本題以農(nóng)作物蟲害防治為背景考查基因工程的操作流程、基因工程所用的工具、獲取目

的基因的方法、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因的篩選等內(nèi)容，難度不大。

重慶31.(16分)擬南芥是遺傳學(xué)研究的模式植物，某突變體可用于驗(yàn)證相關(guān)的基因的功能。野生

型擬南芥的種皮為深褐色(TT)某突變體的種皮為黃色(ttj,下圖是利用該突變體驗(yàn)證油菜種皮顏色

基因(TJ功能的流程示意圖。

緇切后的基因川發(fā)粒衣桿苗依南芥突變體③氣莖因也南芥

(1)與擬南芥t基因的mRNA相比，若油菜L基因的mRNA中UGA變?yōu)锳GA,其末端序列成為“一

AGCGCGACCAGACUCUAA"，則，比t多編碼個(gè)氨基酸(起始密碼子位置相同,

UGA、UAA為終止密碼子)。

(2)圖中①應(yīng)為o若②不能在含抗生素Kan的培養(yǎng)基上生長，則原因是__________.

若③的種皮顏色為則說明油菜基因與擬南芥T基因的功能相同。

(3)假設(shè)該油菜%基因連接到擬南芥染色體并替換其中一個(gè)t基因，則③中進(jìn)行減數(shù)分裂的細(xì)胞在

聯(lián)會(huì)時(shí)的基因型為；同時(shí)，③的葉片卷曲(葉片正常對(duì)葉片卷曲為顯性，且與種皮性狀獨(dú)立遺傳)，

用它與種皮深褐色、葉片正常的雙雜合體擬南芥雜交，其后代中所占比例最小的個(gè)體表現(xiàn)型為；

取③的莖尖培養(yǎng)成16顆植株，其性狀通常(填“不變”或“改變”)。

(4)所得的轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥(填是或者不是)同一個(gè)物種。

【答案】(16分)

(1)2

(2)重組質(zhì)粒(重組DNA分子)；重組質(zhì)粒未導(dǎo)入；深褐色

(3)LLtt；黃色正常；黃色卷曲；不變

(4)是

【解析】本題以一個(gè)陌生的基因工程材料考查相關(guān)知識(shí)，包括基因的功能、遺傳規(guī)律、基因工程操作

步驟以及生物進(jìn)化的物種鑒定。對(duì)題干信息的獲取、理解以及對(duì)陌生材料的快速適應(yīng)將是考生的最大障礙。

(1)Ta基因的mRNA末端序列為“-AGCGCGACCAGACUCUAA”，它是t基因的mRNA的UGA變成了AGA,所以

t基因的mRNA的末端序列應(yīng)為“-AGCGCGACCUGA"。所以Ta基因比t基因編碼的蛋白質(zhì)中就多AGA和CUC

對(duì)立的2個(gè)氨基酸。(2)目的基因與運(yùn)載體(質(zhì)粒)結(jié)合形成重組質(zhì)粒；質(zhì)粒上有抗生素kan抗性基因，

導(dǎo)入了質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒的農(nóng)桿菌都能在含抗生素kan的培養(yǎng)基二生長；擬南芥T基因控制其種皮深褐色。

(3)轉(zhuǎn)基因擬南芥體細(xì)胞基因型為Tat,減數(shù)分裂細(xì)胞聯(lián)會(huì)是已完成DNA復(fù)制，所以此時(shí)細(xì)胞中相應(yīng)基因

組成為TaTatt；假設(shè)控制擬南芥葉片形狀的基因?yàn)锽、b,則TatbbXTtBb->3/8深褐色正常、3/8深褐色

卷曲、1/8黃色正常、1/8黃色卷曲；植物組織培養(yǎng)屬于無性繁殖技術(shù)，其特點(diǎn)是保持親本的一切性狀。

(4)轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥之間沒有生殖隔離，屬于同一物種。

江蘇14.(2分)關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是()

A.蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)

B.體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體

C.植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒

D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育

【答案】C

江蘇33.(8分)請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問題：

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈DNA

片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。

①從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有

退火

引物A的DNA片段所占的比例為第i輪循環(huán)《

IIIIIIII1

引物B

②在第一輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫IIIIIIIIIII

延伸

氧核甘酸鏈等長的DNA片段。IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII

變性

（2）設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。

某司學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物（只標(biāo)注了部分堿基序列）

都不合理（如下圖），請(qǐng)分別說明理由。

［引物IIIIIII

第1組引物CAGGCT

a物n

IIIIII

?［組：____________________________AGCCTG

引物I,-??I?I?I?II

第2紈引物AACTGCAGTT

②②第2組：________________________

引物H'-IIIIIIIIII

CGACTGATTA

（3）PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DMA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因

（4）用限制酶EcoRV\Mbol單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長度如下圖（1kb即1000個(gè)

堿基對(duì)），請(qǐng)?jiān)诖痤}卡的指定位置畫出質(zhì)粒上ECORV、Mbol的切割位點(diǎn)。

【答案】33.（8分）

⑴①15/16②三

（2）①引物I和引物II局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效

②引物I'自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效

（3）DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核甘酸連續(xù)結(jié)

合到雙鏈DNA片段的引物鏈上

（4）見右圖

福建32.［生物一一現(xiàn)代生物科技專題］必答題（1（）分）

一對(duì)表現(xiàn)型正常的夫婦，生了一個(gè)鐮刀型細(xì)胞貧血癥（常染

色體隱性遺傳?。┗純骸Ｔ谒麄冇诙r(shí)，發(fā)現(xiàn)妻子的雙

側(cè)輸卵管完全堵塞，不能完成體內(nèi)受精。醫(yī)生為該夫婦實(shí)施了體

外受精和產(chǎn)前基因診斷，過程如右圖。請(qǐng)回答:

(1)過程①是指在體外進(jìn)行的處理，從而使精子與卵子結(jié)

合形成受精卵；過程②稱為0

(2