吉林省長(zhǎng)春市朝陽區(qū)名校2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中考試生物學(xué)試題（含答案）

吉林省長(zhǎng)春市朝陽區(qū)名校2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中考試生物學(xué)試題姓名：__________班級(jí)：__________考號(hào)：__________題號(hào)一二總分評(píng)分一、選擇題（1-20單選，21-25不定項(xiàng)選擇每小題2分共50分。）1．下圖表示利用葡萄汁進(jìn)行發(fā)酵時(shí)可能發(fā)生的物質(zhì)變化。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．過程③④⑤都需要O2參與B．當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌可以直接發(fā)生過程⑤C．過程②④所需要的最適溫度相同D．酵母菌發(fā)生過程①②的場(chǎng)所相同2．下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯(cuò)誤的是（）A．①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B．步驟①中，待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)Ⅲ的Ⅲ蓋C．步驟③中，每次劃線前后都需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理D．劃線接種結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3．分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對(duì)培養(yǎng)基的要求是

①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂

⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦4．甜瓣子是豆瓣醬的重要成分，風(fēng)味受蠶豆蛋白分解產(chǎn)生的氨基酸影響，也受發(fā)酵過程中不同微生物的多種代謝產(chǎn)物影響。其生產(chǎn)工藝如下圖所示。某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)加鹽水后的發(fā)酵階段的傳統(tǒng)工藝（鹽度15%，溫度37℃，發(fā)酵30天）進(jìn)行了改良，改良后甜瓣子風(fēng)味得以提升。兩種工藝的結(jié)果比較如下圖。下列關(guān)于本研究的描述，錯(cuò)誤的是（）A．蠶豆瓣可提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需的碳源和氮源B．溫度與鹽度都影響微生物的生長(zhǎng)繁殖C．定期取樣，使用平板劃線法統(tǒng)計(jì)活細(xì)菌總數(shù)D．新工藝中甜瓣子風(fēng)味提升，與前、中期活微生物總數(shù)高和氨基酸終產(chǎn)量高均有關(guān)5．2020年初，荷蘭某研究所利用蛇干細(xì)胞培養(yǎng)出可分泌毒液的蛇毒腺微型組織，使獲取毒素的途徑更加安全和簡(jiǎn)單。下列敘述正確的是（）A．培養(yǎng)蛇干細(xì)胞時(shí)，所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與植物細(xì)胞培養(yǎng)相同B．蛇毒腺微型組織中的細(xì)胞基因的表達(dá)與蛇胚胎干細(xì)胞不完全相同C．人工誘導(dǎo)蛇胚胎干細(xì)胞大量增殖即可直接獲得大量分泌毒液的細(xì)胞D．培養(yǎng)蛇毒腺微型組織與培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的條件完全相同6．如圖為植物細(xì)胞A、B融合后再生出新植株的部分過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖分析，以下敘述錯(cuò)誤的是（）A．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的目的是獲得雜種細(xì)胞B．在形成再生植株的過程中與植物組織培養(yǎng)相似的步驟是④⑤C．原生質(zhì)體融合成為一個(gè)新的雜種細(xì)胞的標(biāo)志是出現(xiàn)新的細(xì)胞壁D．親本植物A的細(xì)胞與親本植物B的細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，形成的雜種細(xì)胞中兩兩融合的細(xì)胞類型有3種7．細(xì)胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關(guān)鍵。下列選擇不合理的是（）A．選擇幼齡動(dòng)物的組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，有利于獲得大量細(xì)胞B．選擇胚胎細(xì)胞作為核供體進(jìn)行核移植，可提高克隆動(dòng)物的成功率C．選擇一定大小的植物莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，可獲得脫毒苗D．選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理，一定可獲得優(yōu)質(zhì)的突變體8．為研究治療性克隆技術(shù)能否用于帕金森病的治療，科研人員利用帕金森病模型鼠進(jìn)行如下圖所示實(shí)驗(yàn)，下列相關(guān)敘述不正確的是（）A．過程①中選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù)B．過程②重組細(xì)胞培養(yǎng)依次經(jīng)歷了桑葚胚、原腸胚和囊胚等過程C．過程③的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)D．過程④對(duì)受體小鼠無需注射免疫抑制劑以抑制其細(xì)胞免疫功能9．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是()A．受精過程中防止多精入卵的屏障就是卵細(xì)胞膜反應(yīng)B．卵裂期細(xì)胞數(shù)目增多，體積變小，有機(jī)物含量和種類不斷減少C．囊胚期的細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化，但遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變D．體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞均表現(xiàn)出細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象10．有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是()A．利用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)脫毒苗，獲得具有抗病毒的新品種B．利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的名貴蘭花的種苗，能保持親本的優(yōu)良性狀C．利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得紫草寧，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)D．利用體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“白菜-甘藍(lán)”，克服了生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙11．如圖所示為早期胚胎發(fā)育過程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．從a到e中，適宜于牛的胚胎移植的時(shí)期有d、eB．可從圖e的①中分離出胚胎干細(xì)胞C．圖e的③將來可發(fā)育成胎膜和胎盤D．圖中各階段的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能12．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，圖中a、b、c表示現(xiàn)代工程技術(shù)，①②③分別表示其結(jié)果。下列說法正確的是（）A．若a是體細(xì)胞核移植技術(shù)，則①反映了動(dòng)物體細(xì)胞也具有全能性B．若c是胚胎分割技術(shù)，則③中個(gè)體的基因型和表型一定相同C．若b是體外受精技術(shù)，則②為良種家畜快速大量繁殖提供了可能D．①②③中作為受體的動(dòng)物品種是珍稀的或存量少的雌性動(dòng)物13．下列關(guān)于限制酶和DNA連接酶的敘述，正確的是（）A．兩者都是從原核生物中分離純化出來的B．兩者的催化都會(huì)導(dǎo)致磷酸二酯鍵數(shù)目的改變C．限制酶都能在特定位點(diǎn)切割產(chǎn)生黏性末端D．DNA連接酶與DNA聚合酶作用的底物是相同的14．限制酶a和b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示，下列有關(guān)說法正確的是（）A．一個(gè)DNA分子中，酶a與酶b的識(shí)別序列可能有多個(gè)B．酶a與酶b切出的黏性末端不能相互連接C．酶a與酶b切斷的化學(xué)鍵不完全相同D．用酶a切割有3個(gè)識(shí)別位點(diǎn)的質(zhì)粒，得到4種切割產(chǎn)物15．下列有關(guān)DNA連接酶的敘述，正確的是（）A．T4DNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來B．E.coliDNA連接酶能將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接C．DNA連接酶能恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵D．DNA連接酶可連接DNA雙鏈的氫鍵，使雙鏈延伸16．為使玉米獲得抗除草劑性狀，需進(jìn)行如圖所示的操作。報(bào)告基因的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下列敘述不正確的是（）A．篩選1需要用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的農(nóng)桿菌B．篩選2需要用無色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍(lán)色的組織C．為使除草劑抗性基因G在農(nóng)桿菌中高效表達(dá)，需要把目的基因片段插入到表達(dá)載體的復(fù)制原點(diǎn)和啟動(dòng)子之間D．為從個(gè)體水平上檢測(cè)圖中玉米植株A是否具有抗除草劑性狀，可采用的方法是用相應(yīng)除草劑噴灑待測(cè)玉米植株17．PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過程。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．a(chǎn)過程高溫使DNA變性解旋，該過程不需要解旋酶的作用B．c過程要用到的酶在高溫下失活，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)需要再添加C．如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不標(biāo)記，控制“94℃～55℃～72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占25%D．PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于基因突變18．如圖是科學(xué)家新研發(fā)的制備單克隆抗體的過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．若供體DNA提供了prG基因（無限增殖調(diào)控基因），則該過程中Ⅱ是已免疫B細(xì)胞B．經(jīng)酶A處理后的Ⅰ與質(zhì)粒具有相同的黏性末端C．該過程涉及基因工程和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)D．需對(duì)Ⅱ進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)19．原位PCR技術(shù)是利用原位PCR儀，在組織或細(xì)胞中靶DNA所在的位置上進(jìn)行的PCR循環(huán)擴(kuò)增，通過摻入標(biāo)記基因直接顯色或結(jié)合原位雜交進(jìn)行檢測(cè)的方法。進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，反應(yīng)體系中的反應(yīng)成分需滲透到組織或細(xì)胞的靶DNA處才能進(jìn)行擴(kuò)增。PCR反應(yīng)體系中需要添加一定濃度的Mg2+，而組織細(xì)胞間的物質(zhì)會(huì)吸附Mg2+，使進(jìn)入細(xì)胞的Mg2+減少。下列說法正確的是（）A．PCR技術(shù)中復(fù)性是當(dāng)溫度下降到65℃時(shí)，兩種引物與兩條DNA單鏈結(jié)合的過程B．反應(yīng)體系中擴(kuò)增的原料會(huì)依次連接到子鏈的5端C．反應(yīng)體系中引物的G，C堿基含量越高越好，因?yàn)樵礁咭锝Y(jié)合的特異性越強(qiáng)D．原位PCR反應(yīng)體系中使用的Mg2+濃度要比常規(guī)PCR高20．（不定項(xiàng)）如圖表示果酒和果醋生產(chǎn)過程中的物質(zhì)變化情況，相關(guān)敘述正確的是（）A．果醋發(fā)酵所需的最適溫度高于果酒B．過程①②在酵母菌細(xì)胞中發(fā)生的場(chǎng)所相同C．過程⑤需要氧氣而過程④不需要氧氣D．進(jìn)行果醋發(fā)酵的微生物細(xì)胞不具有線粒體21．（不定項(xiàng)）生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說法正確的是（）A．倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B．倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C．圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙或丙D．生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選22．（不定項(xiàng)）一種雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，抗體由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈構(gòu)成。科學(xué)家通過動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞（A和B）融合形成雙雜交瘤細(xì)胞AB。雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，可以產(chǎn)生雙特異性抗體AB。過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．雜交瘤細(xì)胞A，B混合并誘導(dǎo)融合后，利用選擇培養(yǎng)基可以篩選出雙雜交瘤細(xì)胞ABB．雙雜交瘤細(xì)胞同時(shí)識(shí)別α、β抗原后，才能產(chǎn)生雙特異性抗體C．對(duì)培養(yǎng)到一定密度的雙雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，無需使用胰蛋白酶處理D．將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔，腹水能為細(xì)胞提供所需的營(yíng)養(yǎng)條件23．（不定項(xiàng)）胚胎工程技術(shù)能夠充分挖掘動(dòng)物的繁殖潛力，為優(yōu)良牲畜的大量繁殖提供了有效的解決辦法。下圖是育種工作者采用不同方法培育良種牛的過程（a～h為操作過程），下列敘述正確的是（）A．為獲得大量的卵母細(xì)胞，需用促性腺激素處理良種母牛B．采集的精子必須置于ATP溶液中進(jìn)行獲能處理C．若要生產(chǎn)高產(chǎn)奶牛，可?、偬幖?xì)胞做DNA分析性別鑒定D．轉(zhuǎn)基因牛D的培育可以經(jīng)過b→f→g過程24．（不定項(xiàng)）20世紀(jì)70年代，F(xiàn)redsanger發(fā)明了雙脫氧終止法對(duì)DNA進(jìn)行測(cè)序。其原理如圖，在4個(gè)試管中分別加入4種脫氧核苷三磷酸（dNTP）和1種雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）；ddNTP可以與dNTP競(jìng)爭(zhēng)核苷酸鏈延長(zhǎng)位點(diǎn)，并終止DNA片段的延伸。在4個(gè)試管中DNA鏈將會(huì)分別在A、C、G及T位置中止，并形成不同長(zhǎng)度的DNA片段。這些片段隨后可被電泳分開并顯示出來。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．這種測(cè)序方法需要引物和耐高溫的DNA連接酶B．電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥嘌呤結(jié)尾C．測(cè)得未知DNA的序列為5'-GATTCGAGCTGA-3'D．ddNTP與dNTP競(jìng)爭(zhēng)的延長(zhǎng)位點(diǎn)是核苷酸鏈的5'末端二、非選擇題（本題共4道試題，共50分。）25．GA3是一種由C、H、O三種元素構(gòu)成的與赤霉素作用類似的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，能促進(jìn)莖伸長(zhǎng)和種子萌發(fā)。GA3的廣泛施用會(huì)導(dǎo)致其在土壤中殘留，研究小組從長(zhǎng)期施用GA3農(nóng)田的土壤中篩選出了能降解GA3的菌株。據(jù)圖回答下列問題：（1）過程②是將稀釋的含有降解GA3的菌株接種到甲瓶培養(yǎng)液中，這樣做的目的是。（2）乙培養(yǎng)基中含有的唯一的碳源應(yīng)該是，實(shí)際操作時(shí)，乙培養(yǎng)基上可能還有其他微生物，原因是。（3）振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快，原因是振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高的利用率。（4）為調(diào)查土壤中能降解GA3的菌的數(shù)量，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：下圖中3號(hào)試管中樣品液的稀釋倍數(shù)為倍，5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的活菌數(shù)為個(gè)。26．馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無病毒，莖尖離體培養(yǎng)大致過程如圖1所示，馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)苗的脫毒率和成活率的影響如圖2所示。請(qǐng)回答問題：（1）依圖1分析，馬鈴薯脫毒苗培養(yǎng)依據(jù)的主要原理是。將微莖尖接種在添加有等植物激素的培養(yǎng)基中，經(jīng)過過程完成組織培養(yǎng)，獲得試管苗。對(duì)脫毒苗進(jìn)行病毒檢測(cè)時(shí)，可采用方法檢測(cè)病毒的蛋白質(zhì)。（2）由圖2可知，應(yīng)大小為mm的莖尖外植體適宜馬鈴薯脫毒苗的培養(yǎng)。27．動(dòng)物的某種退行性神經(jīng)疾病由基因t突變?yōu)榛騎導(dǎo)致。隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展和基因編輯（CRISPR/Cas9）技術(shù)的出現(xiàn)，為治療該疾病提供了如下新思路。回答下列問題：（1）利用CRISPR/Cas9編輯基因時(shí)，Cas9蛋白依據(jù)sgRNA片段（不同的sgRNA可以識(shí)別不同的DNA序列），能精準(zhǔn)識(shí)別并切割動(dòng)物纖維細(xì)胞中的致病基因T，并在DNA連接酶的作用下將正?；騮連接到染色體DNA的相應(yīng)位置上，獲得不含致病基因T的動(dòng)物成纖維細(xì)胞?？梢?，sgRNA片段能夠精準(zhǔn)識(shí)別致病基因T的核苷酸序列的原因是，CRISPR/Cas9還具有的作用。（2）過程①所利用的生物技術(shù)是，過程②的培養(yǎng)條件十分苛刻，需要無菌、無毒環(huán)境，充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、適宜的溫度和pH；培養(yǎng)時(shí)，對(duì)氣體環(huán)境的要求是。過程④的培養(yǎng)基中需要添加，以促進(jìn)ES細(xì)胞的增殖分化。（3）利用上述思路治療該退行性神經(jīng)疾病，理論上不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，原因在于。28．由于豬的器官在生理形態(tài)上和人的器官非常接近，近年來應(yīng)用豬的體細(xì)胞核移植技術(shù)研制人類基因疾病的動(dòng)物模型，以及生產(chǎn)基因敲除豬用于人異種器官移植成為豬核移植相關(guān)研究的熱點(diǎn)方向。如圖為豬的體細(xì)胞核移植流程示意圖，請(qǐng)回答下列問題：（1）研究人員在用合成培養(yǎng)基對(duì)豬耳部成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，通常需加入等一些天然成分。（2）從卵巢中采集的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)至期才能用于體細(xì)胞核移植。除該方法外，采集卵母細(xì)胞還可采用超數(shù)排卵法，其具體做法是。（3）重構(gòu)胚通常需培養(yǎng)至期，然后通過技術(shù)送入代孕母豬體內(nèi)。為提高胚胎的利用率，還可采用技術(shù)對(duì)胚胎進(jìn)行處理。（4）就豬的體細(xì)胞移植技術(shù)本身來講，雖然已經(jīng)有多例體細(xì)胞克隆豬誕生，但總體的效率還是較低的，克隆豬的存活率只有1%或更低。研究表明，用組蛋白去乙?；敢种苿┍焖幔╒PA）處理重構(gòu)胚能顯著提高其發(fā)育能力。從而大大提高巿隆效率。若想探究VPA處理重構(gòu)胚的最適濃度，其實(shí)驗(yàn)思路是。

答案解析部分1．【答案】C【解析】【解答】A、有氧呼吸的第三節(jié)階段需要氧氣的參與，有氧呼吸第第一、二階段和無氧呼吸均不需要氧氣參與，醋酸發(fā)酵過程需要氧氣的參與，③為有氧呼吸第三階段需要O2參與，過程④⑤為醋酸發(fā)酵需要O2參與，A正確；

B、當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌直接以葡萄糖為原料進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)生過程⑤，B正確；

C、過程②為無氧呼吸第二階段，④為醋酸發(fā)酵，二者所需要的微生物不同，最適溫度也不同，C錯(cuò)誤；

D、酵母菌為兼性厭氧型生物，可以進(jìn)行有氧呼吸也可以進(jìn)行無氧呼吸，過程①②為無氧呼吸的兩個(gè)階段，場(chǎng)所均為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，D正確。

故答案為：C。

【分析】果酒、果醋制作原理與發(fā)酵條件：果酒制作果醋制作菌種酵母菌醋酸菌發(fā)酵過程有氧條件下，酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6+6O2→酶6CO2+6H2O；

無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精：C6H12O6→酶2C2H5氧氣、糖源充足時(shí)：

C6H12O6+2O2→酶2CH3COOH+2CO2+2H2O；

缺少糖源、氧氣充足時(shí)：

C2H5OH+O2→酶CH3COOH+H溫度一般酒精發(fā)酵18～25℃，繁殖最適為20℃左右最適為30～35℃氣體前期：需氧；后期：無氧需要充足的氧氣時(shí)間10～12天7～8天2．【答案】B【解析】【解答】A、①②③步驟需要注意無菌環(huán)境，操作時(shí)在酒精燈火焰旁進(jìn)行，A正確；

B、步驟①中，待倒入的培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，冷卻之后倒置，B錯(cuò)誤；

C、平板劃線法每次劃線前后都需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌處理，C正確；

D、劃線結(jié)束之后，需要將平板進(jìn)行倒置放置，并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，D正確。

故答案為：B

【分析】1、平板劃線法操作步驟：①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅；②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞；③將試管口通過火焰；④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液；⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞；⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)皿；⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連；⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2、稀釋涂布平板操作的步驟：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中；②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面；③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8~10s；④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。3．【答案】C【解析】【分析】分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中要有尿素、瓊脂糖、葡萄糖，尿素給分解尿素的細(xì)菌提供氮源，不加硝酸鹽。4．【答案】C【解析】【解答】A、蠶豆瓣中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)，如糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等，因而可提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需的碳源和氮源，A正確；B、溫度通過影響酶的活性影響細(xì)胞代謝，而鹽度過高可導(dǎo)致微生物失水，進(jìn)而影響微生物的細(xì)胞代謝，即溫度與鹽度都影響微生物的生長(zhǎng)繁殖，進(jìn)而影響發(fā)酵產(chǎn)物的種類和含量，B正確；C、平板劃線法不能用于統(tǒng)計(jì)活細(xì)菌總數(shù)，可用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活細(xì)菌的數(shù)目，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知新工藝發(fā)酵過程中霉菌和細(xì)菌在前期和中期的含量均高于傳統(tǒng)工藝，因而導(dǎo)致發(fā)酵產(chǎn)品中氨基酸態(tài)氮含量高于傳統(tǒng)工藝，因此甜瓣子風(fēng)味提升，D正確。故答案為：C。

【分析】1、酶的特性：①高效性：酶的催化效率大約是無機(jī)催化劑的107-1013倍。②專一性：每一種酶只能催化一種或者一類化學(xué)反應(yīng)。③酶的作用條件較溫和：在最適宜的溫度和pH條件下，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會(huì)明顯降低。

2、微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。5．【答案】B【解析】【解答】A、培養(yǎng)蛇干細(xì)胞時(shí)，所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與植物細(xì)胞培養(yǎng)不完全相同，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需加入葡萄糖、血清等，植物細(xì)胞培養(yǎng)需加入蔗糖、植物激素等，A錯(cuò)誤；B、不同細(xì)胞中基因的表達(dá)情況不同，因此蛇毒腺微型組織基因的表達(dá)與蛇胚胎干細(xì)胞不完全相同，B正確；C、分泌毒液的蛇毒腺微型組織細(xì)胞是蛇胚胎干細(xì)胞分裂分化形成的，蛇胚胎干細(xì)胞不能分泌毒液，C錯(cuò)誤；D、由于不同細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能不同，因此培養(yǎng)蛇毒腺微型組織與哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件不完全相同，D錯(cuò)誤。故答案為：B。

【分析】1、動(dòng)物培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和pH。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動(dòng)物組織塊→用機(jī)械方法或胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。6．【答案】A【解析】【解答】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的目的是獲得雜種植株，A錯(cuò)誤；在形成再生植株的過程中與植物組織培養(yǎng)相似的步驟是④⑤，B正確；原生質(zhì)體融合成為一個(gè)新的雜種細(xì)胞的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁，C正確；親本植物A的細(xì)胞與親本植物B的細(xì)胞兩兩融合后的細(xì)胞類型有AA、BB、AB3種，D正確。故答案為：A?！痉治觥恐参矬w細(xì)胞雜交技術(shù)：

1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。

2、過程：

（1）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。

（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。

（3）植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。

（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。

3、意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

4、分析題圖：圖示為種間植物細(xì)胞融合再生植物示意圖，其中①表示去除細(xì)胞壁獲取原生質(zhì)體的過程；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程；③表示再生出新的細(xì)胞壁的過程；④表示脫分化，⑤表示再分化形成雜種植株。7．【答案】D【解析】【解答】幼齡動(dòng)物的組織細(xì)胞的分裂能力強(qiáng)，因此選擇幼齡動(dòng)物的組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，有利于獲得大量細(xì)胞；因?yàn)榕咛ゼ?xì)胞的全能性較高，故答案為：胚胎細(xì)胞作為核供體進(jìn)行核移植，可提高克隆動(dòng)物的成功率；選擇一定大小的植物莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，可獲得脫毒苗，原因是莖尖等分生組織中幾乎不含病毒；由于基因突變具有多害少利性，因此選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理，不一定可獲得優(yōu)質(zhì)的突變體。故答案為：D?！痉治觥?、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2、植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。8．【答案】B【解析】【解答】A、MⅡ期的卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)，故過程①中選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù)，A正確；

B、早期胚胎發(fā)育順序?yàn)樯］嘏?、囊胚和原腸胚等過程，B錯(cuò)誤；

C、過程③誘導(dǎo)分化的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)，C正確；

D、胚胎移植時(shí)受體需要進(jìn)行同期發(fā)情處理，但不需要免疫抑制劑處理，子宮對(duì)同物種胚胎不發(fā)生免疫反應(yīng)，D正確。

故答案為：B。

【分析】1、動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程：（1）受精場(chǎng)所是母體的輸卵管上段；（2）卵裂期；（3）桑葚胚；（4）囊胚；（5）原腸胚。

2、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：①動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)。③受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。9．【答案】C【解析】【解答】A、受精過程中防止多精入卵的屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，A錯(cuò)誤；

B、卵裂期細(xì)胞數(shù)目增多，體積變小，有機(jī)物含量減少，種類增多，B錯(cuò)誤；

C、囊胚期的細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化，細(xì)胞分化不改變遺傳物質(zhì)，C正確；

D、體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般會(huì)表現(xiàn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象，但有的細(xì)胞不會(huì)，D錯(cuò)誤。

故答案為：C。

【分析】1、動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程：

（1）受精場(chǎng)所是母體的輸卵管上段。

（2）卵裂期：細(xì)胞有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體體積并不增加，或略有減小。

（3）桑葚胚：胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí)，胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑椹，是全能細(xì)胞。

（4）囊胚：細(xì)胞開始出現(xiàn)分化（該時(shí)期細(xì)胞的全能性仍比較高）。聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胎兒的各種組織，中間的空腔稱為囊胚腔。

（5）原腸胚：有了三胚層的分化，具有囊胚腔和原腸腔。

2、受精作用過程：

（1）頂體反應(yīng)：精子釋放頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)，穿越放射冠；

（2）透明帶反應(yīng)：頂體酶可將透明帶溶出孔道，精子穿入，在精子觸及卵黃膜的瞬間阻止后來精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障；

（3）卵黃膜的封閉作用：精子外膜和卵黃膜融合，精子入卵后，卵黃膜會(huì)拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過程[它是防止多精子入卵受精的第二道屏障；

（4）精子尾部脫落，原有核膜破裂形成雄原核，同時(shí)卵子完成減二分裂，形成雌原核；

（5）雌、雄原核融合形成合子。

3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動(dòng)物組織塊→用機(jī)械方法或胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。10．【答案】A【解析】【解答】A、利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的脫毒苗病毒含量少，但是沒有抗病毒的能力，A錯(cuò)誤；

B、植物組織培養(yǎng)是無性繁殖方式，利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的名貴蘭花的種苗，能保持親本的優(yōu)良性狀，B正確；

C、植物組織培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用于細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，如從培養(yǎng)的紅豆杉細(xì)胞中提取抗腫瘤藥物紫杉醇，C正確；

D、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，實(shí)現(xiàn)種間雜交獲得“白菜-甘藍(lán)”，D正確。

故答案為：A。

【分析】植物組織培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，包括：植物繁殖的新途徑（如微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（如單倍體育種、突變體的應(yīng)用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)（如從培養(yǎng)的紅豆杉細(xì)胞中提取抗腫瘤藥物紫杉醇）。11．【答案】D【解析】【解答】從a到e中，適宜于牛的胚胎移植的時(shí)期有d桑葚胚、e囊胚，A正確；可從圖e的①內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離出胚胎干細(xì)胞，B正確；圖e的③是滋養(yǎng)層，將來可發(fā)育成胎膜和胎盤，C正確；圖中b、c、d階段的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，e階段的①內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞也具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，但e階段的③滋養(yǎng)層細(xì)胞已分化，不具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，D錯(cuò)誤。故答案為：D?！痉治觥颗咛グl(fā)育過程：

（1）卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，數(shù)量增加，胚胎總體積不增加。

（2）桑葚胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎。

（3）囊胚：細(xì)胞開始分化，其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔。

（4）原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層，下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔[細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度。12．【答案】C【解析】【解答】若a是體細(xì)胞核移植技術(shù)，則①反映了動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；通過胚胎分割技術(shù)所獲得個(gè)體的基因型完全相同，但表型不一定完全相同，因?yàn)楸硇瓦€受環(huán)境的影響；若b是體外受精技術(shù)，則②為試管動(dòng)物，這為良種家畜快速大量繁殖提供了可能；①②③中作為供體的動(dòng)物品種是珍稀的或存量少的雌、雄性動(dòng)物，而受體是健康和具有良好的繁殖能力的雌性動(dòng)物即可。【分析】1、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)：（1）基本原理：動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。（2）核移植分類：胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植（3）選用MI期去核卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞比較大，容易操作；卵（母）細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。

2、體外受精是指哺乳動(dòng)物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程的技術(shù)。

3、胚胎分割：（1）材料：發(fā)育良好，形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。（2）實(shí)質(zhì)：胚胎分割可增加動(dòng)物后代數(shù)目，其實(shí)質(zhì)是動(dòng)物的無性繁殖或克隆。（3）注意：對(duì)囊胚分割時(shí)，注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。13．【答案】B【解析】【解答】A、限制酶是從原核生物中分里純化出來的，DNA連接酶是從原核生物和病毒中分離純化的，A錯(cuò)誤；

B、限制酶催化磷酸二酯鍵的斷裂，DNA連接酶催化磷酸二酯鍵的形成，B正確；

C、限制酶切割之后能在特定的位點(diǎn)產(chǎn)生黏性末端或者平末端，C錯(cuò)誤；

D、DNA連接酶的底物是DNA片段，DNA聚合酶的底物是脫氧核苷酸，D錯(cuò)誤。

故答案為：B。

【分析】幾種相關(guān)酶的比較：名稱作用部位作用結(jié)果限制酶磷酸二酯鍵將DNA切成兩個(gè)片段DNA連接酶磷酸二酯鍵將兩個(gè)DNA片段連接為一個(gè)DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯鍵將兩個(gè)脫氧核苷酸依次連接到單鏈末端DNA（水解）酶磷酸二酯鍵將DNA片段水解為單個(gè)脫氧核苷酸解旋酶堿基對(duì)之間的氫鍵將雙鏈DNA分子局部解旋為單鏈，形成兩條長(zhǎng)鏈14．【答案】A【解析】【解答】A、一個(gè)DNA分子中，可能存在一個(gè)至多個(gè)酶a與酶b的識(shí)別序列，A正確；

B、由圖可知，酶a與酶b識(shí)別的序列雖然不同，但切出的粘性末端相同，相同的粘性末端能相互連接，B錯(cuò)誤；

C、酶a與酶b切斷的化學(xué)鍵均為相鄰脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，C錯(cuò)誤；

D、質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子，用酶a切割有3個(gè)識(shí)別位點(diǎn)的質(zhì)粒，可得到3種切割產(chǎn)物，D錯(cuò)誤。

故答案為：A。

【分析】“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）

（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。

（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。

（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。15．【答案】C【解析】【解答】A、T4DNA連接酶既能連接粘性末端，又能連接平末端，A錯(cuò)誤；

B、E.coliDNA連接酶能將雙鏈DNA片段黏性末端之間進(jìn)行連接，B錯(cuò)誤；

C、DNA連接酶能恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，C正確；

D、DNA連接酶可連接DNA雙鏈的磷酸二酯鍵，且不能使雙鏈延伸，D錯(cuò)誤。

故答案為：C。

【分析】“分子縫合針”——DNA連接酶。兩種DNA連接酶（E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E.coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。16．【答案】C【解析】【解答】A、由圖可知，標(biāo)記基因?yàn)榘逼S青霉素抗性基因，因此篩選1需要用氨芐青霉素培養(yǎng)基篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的農(nóng)桿菌，A正確；

B、根據(jù)題干信息“報(bào)告基因的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色”可知，篩選2需要用無色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍(lán)色的組織，B正確；

C、為使除草劑抗性基因G在農(nóng)桿菌中高效表達(dá)，需要把目的基因片段插入到表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間，C錯(cuò)誤；

D、為從個(gè)體水平上檢測(cè)圖中玉米植株A是否具有抗除草劑性狀，可采用的方法是用相應(yīng)除草劑噴灑待測(cè)玉米植株，D正確。

故答案為：C。

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟︰（1）目的基因的獲取︰方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建︰是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。啟動(dòng)子的本質(zhì)是DNA片段，其為RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞∶根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定∶分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定︰抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。17．【答案】B【解析】【解答】A、a過程是變性，高溫使DNA變性解旋，該過程不需要解旋酶的作用，A正確；

B、c過程是延伸，要用到的TagDNA聚合酶耐高溫，在高溫下不會(huì)失活，B錯(cuò)誤；

C、DNA復(fù)制為半保留復(fù)制，如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不標(biāo)記，控制“94℃~55℃~72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的8個(gè)子代DNA中含有標(biāo)記的DNA有2個(gè)，占25%，C正確；

D、PCR中由堿基錯(cuò)配會(huì)導(dǎo)致基因中堿基對(duì)替換，引起的變異屬于基因突變，D正確。

故答案為：B。

【分析】PCR技術(shù)

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

（2）原理：DNA復(fù)制。

（3）前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對(duì)引物。

（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚臺(tái)酶(Taq酶)。

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)増中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。18．【答案】C【解析】【解答】A、若供體DNA提供prG基因，則II是已免疫的B細(xì)胞，即能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞，形成的重組細(xì)胞才能制備單克隆抗體，A正確；

B、酶具有專一性，同種限制酶能識(shí)別相同的核苷酸序列，切割形成相同的黏性末端，B正確；

C、該過程涉及基因工程和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，沒有動(dòng)物細(xì)胞融合的過程，C錯(cuò)誤；

D、需對(duì)II進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，才可以得到能無限增殖并能產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。

故答案為：C。

【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。19．【答案】D【解析】【解答】A、PCR技術(shù)中復(fù)性是當(dāng)溫度下降到55℃時(shí)，兩種引物分別與兩條DNA模板鏈結(jié)合的過程，A錯(cuò)誤；

B、dNTP作為擴(kuò)增的原料會(huì)依次連接到3'端，B錯(cuò)誤；

C、在一定范圍內(nèi)，反應(yīng)體系中引物的G、C堿基含量越高，其結(jié)合的特異性越強(qiáng)，但G、C過高，不利于退火，而且與相近序列配對(duì)的可能性比正常引物高，更容易產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增，C錯(cuò)誤；

D因?yàn)榻M織細(xì)胞間的物質(zhì)會(huì)吸附Mg2+，故原位PCR反應(yīng)體系中使用的Mg2+濃度要比常規(guī)PCR高，D正確。

故答案為：D。

【分析】PCR技術(shù)

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

（2）原理：DNA復(fù)制。

（3）前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對(duì)引物。

（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚臺(tái)酶(Taq酶)。

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)増中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。20．【答案】A,B,D【解析】【解答】A、由分析可知，果酒發(fā)酵所需的最適溫度低于果醋，A錯(cuò)誤；

B、過程①②在酵母菌細(xì)胞中發(fā)生的場(chǎng)所相同，都是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，B正確；

C、過程⑤和過程④都需要氧氣，C錯(cuò)誤；

D、參與果酒制作的微生物是酵母菌，為真核生物，含有線粒體，進(jìn)行果醋發(fā)酵的微生物是醋酸菌，為原核生物，不含有線粒體，D正確。

故答案為：ABD。

【分析】1、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過程當(dāng)中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2、醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃。21．【答案】A,D【解析】【解答】A、平板上不含任何生長(zhǎng)因子，若倒成平板后直接培養(yǎng)，出現(xiàn)菊落說明已被雜菊感染，因?yàn)樵撌葻峋荒茉谌狈ιL(zhǎng)因子的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，A正確；

B、制備平板時(shí)，先滅菌再倒平板，B錯(cuò)誤；

C、圖中菌落生活在乙丙區(qū)域之間，說明同時(shí)需要乙和丙，C錯(cuò)誤；

D、不同菌種所需生長(zhǎng)因子不同，可利用生長(zhǎng)圖形法篩選菌種，D正確。

故答案為：AD。

【分析】微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。22．【答案】A,B【解析】【解答】A、單克隆抗體制備過程中，雜交瘤細(xì)胞需要進(jìn)行兩次篩選，第一次利用選擇培養(yǎng)基篩選出能在特定培養(yǎng)基生長(zhǎng)且能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選可用抗原-抗體雜交的方法篩選出產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，雙雜交瘤細(xì)胞本身就是由兩個(gè)雜交瘤細(xì)胞融合而成，利用選擇培養(yǎng)基無法篩選出雙雜交瘤細(xì)胞AB，A正確；

B、雜交瘤細(xì)胞是由已免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，無需接觸抗原就能產(chǎn)生抗體，B錯(cuò)誤；

C、雜交瘤細(xì)胞是懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞，細(xì)胞之間并未接觸，若要傳代培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)液直接離心，去除上清液培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基即可，不用胰蛋白酶處理，C正確；

D、將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹水中培養(yǎng)，腹水作為天然培養(yǎng)基，為細(xì)胞提供各種生長(zhǎng)條件，D正確。

故答案為：AB。

【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。23．【答案】A,D【解析】【解答】A、要獲得大量的卵母細(xì)胞，需用促性腺激素處理良種母牛，促進(jìn)其超數(shù)排卵，雄性個(gè)體本身能獲得大量的精子，不需要激素處理，A錯(cuò)誤；

B、對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。對(duì)干嚙齒動(dòng)物、家兔和豬等動(dòng)物的精子，一般采用培養(yǎng)法，即將取自附睪的精子，放入人工配制的獲能液中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，精子就可獲能；對(duì)于牛、羊等家畜的精子常采用化學(xué)法，即將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液，B錯(cuò)誤；

C、要生產(chǎn)高產(chǎn)奶牛，可?、僮甜B(yǎng)層細(xì)胞處細(xì)胞做DNA分析性別鑒定，取雌性胚胎移植，C錯(cuò)誤；

D、據(jù)題圖可知，轉(zhuǎn)基因牛D的培育可以經(jīng)過b→f→g過程，D正確。

故答案為：AD。

【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑葚或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氨中保存。④對(duì)胚胎進(jìn)行移植。⑤移植后的檢查。對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。24．【答案】A,C,D【解析】【解答】A、PCR測(cè)序需要引物和耐高溫的DNA聚合酶，A錯(cuò)誤；

B、電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥嘌呤結(jié)尾，B正確；

C、由圖可知：測(cè)得未知DNA的序列為5'-TCAGCTCGAATC-3'，C錯(cuò)誤；

D、ddNTP與dNTP競(jìng)爭(zhēng)的延長(zhǎng)位點(diǎn)是核苷酸鏈的3'末端，D錯(cuò)誤。

故答案為：ACD。

【分析】PCR技術(shù)

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

（2）原理：DNA復(fù)制。

（3）前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對(duì)引物。

（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚臺(tái)酶(Taq酶)。

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)増中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。25．【答案】（1）富集培養(yǎng)GA3降解菌（2）GA3；有些微生物可利用空氣中的二氧化碳作為碳源（3）溶解氧；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（4）104；1.7×109【解析】【解答】（1）將稀釋的含有降解GA3的菌株接種到甲瓶培養(yǎng)液中，目的是富集培養(yǎng)GA3降解菌，增大GA3降解菌的數(shù)。

（2）題意可知，GA3是一種由C、H、O三種元素構(gòu)成的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，培養(yǎng)基乙是為了獲得GA3的降解菌，故培養(yǎng)基中應(yīng)以GA3為唯一的碳源，所以乙培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。由于有些微生物可利用空氣中的二氧化碗作為碳源，所以在選擇培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基上可能還有其他微生物。（3）振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的溶解氧的含量，促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng)；同時(shí)還能使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

（4）圖中10g土樣加入無菌水定容至100mL，稀釋了10倍，取1mL加入1號(hào)試管(含有9mL無菌水)又稀釋了10倍，取1mL加入2號(hào)試管(含有9mL無菌水)又稀釋了10倍，取1mL加入3號(hào)試管(含有9mL無菌水)又稀釋了10倍，據(jù)此推測(cè)，丙圖中3號(hào)試管中樣品液的稀釋倍數(shù)為104倍；5號(hào)試管稀釋了106倍，根據(jù)計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)，所以每克土壤中的活菌數(shù)為(168+175+167)÷3÷0.1x106=1.7x109。

【分析】1、培養(yǎng)基為微生物提供生長(zhǎng)、繁殖和積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)歸納為碳源、氨源、生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽和水。培養(yǎng)基按物理性質(zhì)可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基中加入凝固劑可以制成固體培養(yǎng)基；固體培養(yǎng)基一般用于微生物的鑒別、分離和計(jì)數(shù)，液態(tài)培養(yǎng)基常用于擴(kuò)大化生產(chǎn)，觀察細(xì)菌運(yùn)動(dòng)。根據(jù)化學(xué)成分分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基等；根據(jù)用途分為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。

2、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法）①原理∶當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。②操作∶a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性；b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=(c/V)×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。26．【答案】（1）植物細(xì)胞的全能性；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；脫分化和再分化；抗原—抗體雜交（2）0.27【解析】【解答】（1）圖1表示的是無毒苗的培養(yǎng)過程，圖中馬鈴薯脫毒苗培養(yǎng)依據(jù)的主要原理是植物細(xì)胞的全能性。植物組織培養(yǎng)過程中需要在培養(yǎng)基中添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分