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PAGE6-試驗操作及試驗結果[基礎對點]學問點一制備牛肉膏蛋白胨固體培育基1.在培育基的配制過程中,詳細有如下步驟,其正確依次為()①溶化②調pH③加棉塞④包扎⑤分裝⑥稱量A.①②⑥⑤③④B.⑥①②⑤③④C.⑥①②⑤④③D.①②⑤④⑥③答案B解析上述步驟中,培育基的配制依次為稱量→溶化→調pH→分裝→加棉塞→包扎,B正確。2.下列有關倒平板操作的敘述,錯誤的是()A.將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上B.使打開的錐形瓶瓶口快速通過火焰C.將培育皿打開,培育皿蓋倒放在桌面上D.等待平板冷卻凝固后須要倒過來放置答案C解析整個倒平板過程要防止外來雜菌的入侵,因此滅過菌的培育皿應放在火焰旁,A正確;打開的錐形瓶瓶口應快速通過火焰,B正確;培育皿應打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不能將培育皿蓋完全打開,C錯誤;平板冷卻凝固后須要倒過來放置,D正確。3.下列關于制備牛肉膏蛋白胨培育基的敘述,錯誤的是()A.培育基應先調pH再進行滅菌B.培育基應先滅菌再分裝到培育皿C.熔化瓊脂時要不斷用玻璃棒攪拌D.運用高壓蒸汽滅菌鍋時干脆將滅菌鍋密封加熱答案D解析把滅菌鍋內(nèi)的水加熱煮沸,將其中原有的冷空氣徹底排出后,將鍋密閉,接著加熱使鍋內(nèi)氣壓逐步上升。學問點二純化大腸桿菌4.下列有關平板劃線接種法的操作錯誤的是()A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒B.將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液C.沾取菌液和劃線要在火焰旁進行D.接種環(huán)劃線要將最終一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連答案D解析為了避開雜菌污染,沾取菌液和劃線要在火焰旁進行,C正確;每次劃線之前都需灼燒滅菌,劃線操作結束仍需灼燒接種環(huán),A正確;灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高,殺死菌種,B正確;在平板劃線時不要將最終一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連,D錯誤。5.如圖為純化大腸桿菌的一個操作環(huán)節(jié),下列相關敘述中,錯誤的是()A.該操作步驟是接種,方法是平板劃線法B.除第一次劃線外,以后的每一次劃線的起點是上一次劃線的末端C.圖中細菌密度最小的是5處D.每次劃線前要用酒精燈灼燒接種環(huán),接著進行下次劃線答案D解析每次劃線前都要灼燒接種環(huán)滅菌,然后等其冷卻后進行下次劃線,D錯誤。6.稀釋涂布平板法是微生物培育中的一種常用的接種方法。下列相關敘述錯誤的是()A.操作中須要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋B.需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培育基表面C.不同濃度的菌液均可在培育基表面形成單個菌落D.操作過程中對培育基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理答案C解析若菌液濃度過大,形成的菌落連在一起,得不到單個的菌落,C錯誤。7.下圖是采納純化微生物培育的兩種接種方法接種后培育的效果圖,據(jù)圖分析不正確的是()A.獲得圖A效果的接種方法是稀釋涂布平板法B.獲得圖B效果的接種方法是平板劃線法C.若在純化土壤細菌時菌液濃度過高,培育基上的菌落可能會連成一片D.在接種前要對培育基進行消毒處理答案D解析在接種前要對培育基進行高壓蒸汽滅菌處理,D錯誤。8.將接種后的培育基和一個未接種的培育基都放入37℃恒溫箱的目的是()A.對比視察培育基有沒有被微生物利用B.對比分析培育基是否被雜菌污染C.沒必要放入未接種的培育基D.為了下次接種時再運用答案B解析對未接種的培育基進行培育,起到比照作用,可確定培育基是否被雜菌污染,B正確。9.利用稀釋涂布平板法純化的大腸桿菌,經(jīng)培育后發(fā)覺培育基上出現(xiàn)了多種菌落,不行能的緣由是()A.培育基制備過程中被雜菌污染B.接種過程中,無菌操作不符合要求C.系列稀釋時,無菌操作不符合要求D.大腸桿菌的種類不同答案D解析大腸桿菌培育基中出現(xiàn)了多種菌落,說明污染了雜菌,雜菌可能來自培育基,也可能是因為操作過程中無菌操作不符合要求,A、B、C正確;大腸桿菌就是一種類型的細菌,因此不會導致培育基上出現(xiàn)多種菌落,D錯誤。學問點三菌種保藏10.為了保持菌種的純凈須要進行菌種的保藏,下列有關敘述不正確的是()A.對于頻繁運用的菌種,可以采納臨時保藏的方法B.臨時保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培育基上C.臨時保藏菌種簡單被污染或產(chǎn)生變異D.對于須要長期保存的菌種,可以采納低溫4℃保藏的方法答案D解析低溫4℃保藏屬于臨時保藏的方法,而對于須要長期保存的菌種,需放在-20℃的冷凍箱中保存,D錯誤。[實力提升]11.做“微生物的分別與培育”試驗時,下列敘述正確的是()A.高壓滅菌加熱結束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B.倒平板時,應將打開的皿蓋放到一邊,以免培育基濺到皿蓋上C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰后應趁熱快速挑取菌落D.用記號筆標記培育皿中菌落時,應標記在皿底上答案D解析高壓滅菌加熱結束,等待壓力表指針回到零后,才能開啟鍋蓋,不能打開放氣閥使壓力表指針回到零,A錯誤;倒平板過程中培育皿的皿蓋打開一個稍大于瓶口的縫隙即可,B錯誤;接種環(huán)火焰上灼燒后,待冷卻后才可以快速挑取菌落,C錯誤;用記號筆標記培育皿中菌落時,應標記在皿底上,D正確。12.下圖是試驗室運用某種接種方法在培育基上培育某種微生物的結果,相關說法錯誤的是()A.該圖最可能是用稀釋涂布平板法進行接種的B.在操作時,為防止雜菌污染,需進行嚴格的消毒和滅菌C.恒溫培育箱中培育時須要將平板倒置D.該接種方法常用于微生物的分別純化答案A解析培育基上微生物的分布有疏有密,應為平板劃線法接種,該接種方法常用于微生物的分別純化,A錯誤,D正確;在操作時,為防止雜菌污染,應對培育基和接種針等進行滅菌,對操作空間、衣著和手進行消毒,B正確;恒溫培育箱中培育時須要將平板倒置,防止冷凝水滴在培育基上,C正確。13.科學家發(fā)覺家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白,這種蛋白質具有極強的抗菌實力,受到探討者重視。(1)可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白質的抗菌特性??咕囼炛兴门嘤械呐H飧嗪偷鞍纂酥饕獮榧毦L供應________和________。(2)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培育基中接種等量菌液。培育肯定時間后,比較兩種培育基中菌落的________,確定該蛋白質的抗菌效果。(3)細菌培育常用的接種方法有________和________________。試驗結束后,對運用過的培育基應進行________處理。答案(1)碳源氮源(2)數(shù)量和大小(3)平板劃線法稀釋涂布平板法滅菌解析(1)牛肉膏和蛋白胨都是自然培育基成分,含有豐富的蛋白質、糖類等養(yǎng)分成分,可以為微生物的生長供應碳源和氮源以及生長因子。(2)通過對比加入和未加入該抗菌蛋白的培育基中細菌菌落的數(shù)量和大小,確定該蛋白質的抗菌效果。(3)在培育細菌時,往往采納平板劃線法和稀釋涂布平板法進行接種;操作過程中用完的培育基都要進行滅菌處理,以防止污染環(huán)境和對人造成感染。14.下表是培育某微生物的培育基的配方,請回答下列問題:試劑牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂加水定容至用量5g10g5g20g1000mL(1)培育基的類型許多,但培育基中一般都含有水、碳源、________和無機鹽。上述培育基配方中能充當碳源的成分是____________________。培育基配制完成以后,一般還要調整pH并對培育基進行________處理。(2)微生物在生長過程中對各種成分的須要量不同,配制培育基時各成分要有合適的________。在燒杯中加入瓊脂加熱時要不停地________,防止______________________。(3)將配制好的培育基分裝到試管中,加棉塞后,若干個試管一捆,包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入________________中滅菌,壓力為________kPa,溫度為________,時間為________。滅菌完畢拔掉電源,待鍋內(nèi)壓力自然降到0時,將試管取出。假如棉塞上沾有培育基,此試管應________。(4)運用高壓蒸汽滅菌鍋時應留意,先向鍋內(nèi)倒入________。把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后,將鍋密閉。(5)從一支試管向另一支試管接種時應留意,接種環(huán)要在酒精燈________(填“內(nèi)”或“外”)焰滅菌,并且待接種環(huán)________后沾取菌種,試管口不能離開酒精燈火焰旁邊。將接種的試管在適溫下培育,長成菌落后放入________℃冰箱中保藏。答案(1)氮源蛋白胨和牛肉膏滅菌(2)比例攪拌瓊脂糊底引起燒杯裂開(3)高壓蒸汽滅菌鍋100121℃15~30min廢棄(4)適量水(5)外冷卻4解析(1)培育基中一般都含有水、無機鹽、碳源、氮源。培育基配制完成后要調pH和滅菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素,可作為有機碳源。(2)在配制培育基時養(yǎng)分要協(xié)調,按所培育微生物對各種成分的需求確定其成分及比例;在加入瓊脂后,要不斷攪拌,防止瓊脂糊底而導致燒杯裂開。(3)培育基的滅菌應用高壓蒸汽滅菌鍋,在壓力為100kPa、溫度為121℃條件下,滅菌15~30min。若棉塞上沾有培育基,易被雜菌污染,應廢棄。(4)高壓蒸汽滅菌鍋操作步驟為先向鍋內(nèi)倒入水,加熱煮沸,將冷空氣排出,將鍋密閉,接著加熱使鍋內(nèi)氣壓和溫度上升到須要的程度。(5)酒精燈外焰溫度高,滅菌效果好。灼燒后待冷卻再沾取菌種,否則會燙死菌種造成試驗失敗。15.下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法,請回答相關問題:(1)圖甲是利用________法進行微生物接種,圖乙是利用________________法進行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是________和________;對這兩種接種工具進行滅菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。(2)平板劃線時,為保證微生物的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐步削減,每次劃線都要從__________________起先,平板劃線結束后,最終一次劃的線不能與第一次劃的線________。(3)接種操作為什么肯定要在火焰旁邊進行?________________。(4)下圖是接種后培育的效果圖解,其接種方法是________(填“圖甲”或“圖乙”)。(5)假設用圖乙所示方法接種培育結束后,發(fā)覺培育基上菌落連成一片,可能的緣由是什么?____________________________________________。答案(1)平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒滅菌(2)上一次劃線的末端相連(或相接、相交、交叉等)(3)火焰旁邊存在著無菌區(qū)域(4
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