大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲病鑒定技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20

CCSB05

14

山西省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB14/T1613—2023

代替DB14/T1613-2018

大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲病鑒定技術(shù)規(guī)程

2023-11-13發(fā)布2024-02-13實(shí)施

山西省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB14/T1613—2023

大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲病鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲鑒定技術(shù)的病圃建設(shè)、鑒定試驗準(zhǔn)備、鑒定方法、鑒定圃管

理和抗性評價標(biāo)準(zhǔn)。

本文件適用于大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲抗性鑒定和抗性評價。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

胞囊線蟲病

指大豆胞囊線蟲病，是由病原物大豆胞囊線蟲（HeteroderaGlycinesIchinode）感染引起的土傳

病害，其主要癥狀為葉片變黃，發(fā)育不良，植株矮小，開花少，結(jié)莢少甚至不結(jié)莢。大豆根系根瘤數(shù)明

顯減少，且不發(fā)達(dá)。在感病初期，根系附著白色、黃褐色小顆粒，后期根系開始腐爛，導(dǎo)致地上部分枯

死。

生理小種

簡稱為“小種”，在形態(tài)上相似而在培養(yǎng)性狀、生理、生化、病理（致病力）或其他特性上有差異

的生物型或生物群型。

鑒別寄主

用于鑒別病原物生理小種（菌系、毒系）的抗病性不同的一套寄主植物品種。

4病圃建設(shè)

立地條件

病圃所在地塊應(yīng)地勢平整，形狀規(guī)正，肥力均勻，排灌方便，不受陰庇，具有人工灌溉措施。

面積

根據(jù)鑒定規(guī)模確定病圃面積，但不應(yīng)小于100m2。

5鑒定前準(zhǔn)備

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DB14/T1613—2023

塑缽制備

將厚度0.1mm的透氣性塑料膜裁為寬26cm，高22.5cm的小塊，用訂書機(jī)將其制成寬11cm，高22

cm的袋狀塑料缽。

接種病土制備

根據(jù)試驗需要在病圃取適量的病土（大豆胞囊線蟲密度≥30個胞囊/100g風(fēng)干土），將病土與無菌

20目細(xì)沙以2:1的比例充分混勻后制備成試驗病土。

6鑒定方法

田間病圃法

6.1.1選擇大豆胞囊線蟲密度≥30個胞囊/100g風(fēng)干土的病圃，當(dāng)氣溫大于20℃時播種。

6.1.2穴播，行距50cm，株距13cm。每份材料播種10穴。

6.1.3每穴留苗1株。

6.1.4每30個材料設(shè)1個感病對照。

6.1.5同時種植1套生理小種鑒別材料。

病土塑缽法

6.2.1將試驗病土裝入塑缽至距缽口1cm處。

6.2.2將裝好土的塑缽依次裝入塑料箱中，放于溫室。

6.2.3將塑料缽中土壤澆透，待缽內(nèi)土壤干濕程度適宜后開始播種。每缽留苗3粒種子，表面覆蓋病

土1cm。

6.2.4出苗后每缽留苗2株，每個品種3個重復(fù)。

6.2.5每30個材料設(shè)1個感病對照。

6.2.6同時種植1套生理小種鑒別材料，隨機(jī)擺放。

6.2.7溫室溫度保持在25℃～30℃，含水量控制在50%～60%。

人工接種鑒定法

6.3.1試驗在溫室中進(jìn)行。將待鑒定的種質(zhì)在育苗盤中育苗，同時播種小種鑒別材料。

6.3.2將出苗后子葉展開、根系發(fā)達(dá)、健壯一致的植株移栽到裝有滅菌沙土的塑缽中，每缽2株，三

次重復(fù)。

6.3.3每30個材料設(shè)1個感病對照。

6.3.4提前在病土中種植感病品種，在胞囊顯盛期，將根系上的胞囊沖洗下來，制備成濃度為1000

個/ml的卵懸浮液。

6.3.5待鑒定材料在移栽后3天接種卵懸浮液2mL。

6.3.6溫室溫度保持在25℃～30℃，含水量控制在50%～60%。

7鑒定圃管理

播種后，應(yīng)及時補(bǔ)充水分，保持土壤濕潤。及時中耕除草，鑒定期間不使用殺菌劑和除草劑。

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DB14/T1613—2023

8調(diào)查

待感病對照白色胞囊突破根系表皮時即可調(diào)查。將待調(diào)查植株根系上的土輕輕抖掉或用水沖洗干

凈、晾干，統(tǒng)計其根上的胞囊數(shù)。鑒定調(diào)查表格見附錄A。

9抗性評價

生理小種鑒別

大豆胞囊線蟲生理小種劃分具體見附錄B。

鑒定有效性評價

感病對照品種Lee根系上的胞囊數(shù)應(yīng)在30.0個以上，抗性級別達(dá)高感，視為該次鑒定有效。

抗性級別劃分

根據(jù)根系平均胞囊數(shù)進(jìn)行抗性級別劃分，劃分依據(jù)見表1。

表1大豆對胞囊線蟲的抗性級別劃分依據(jù)

抗性級別抗性類別胞囊數(shù)與癥狀

0免疫（I）（根系胞囊數(shù)為0，植株生長正常）

1高抗（HR）（0＜根系胞囊數(shù)≤3.0，植株正常生長）

3抗（R）（3.0＜根系胞囊數(shù)≤10.0，植株生長基本正常或部分矮黃）

7感（S）（10.0＜根系胞囊數(shù)≤30.0，植株矮小，葉片發(fā)黃、結(jié)實(shí)少）

9高感（HS）（根系胞囊數(shù)＞30.0，植株不結(jié)實(shí)，干枯死亡）

重復(fù)鑒定

當(dāng)鑒定結(jié)果為抗或高抗時（抗性級別劃分依據(jù)見表1），應(yīng)進(jìn)行重復(fù)鑒定確定其抗性。若重復(fù)鑒定

結(jié)果有差異，以抗性級別低的結(jié)果為準(zhǔn)。確定抗性后，將抗性品種移栽。

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附錄A

（資料性）

調(diào)查用表

A.1大豆抗胞囊線蟲鑒定調(diào)查表

大豆抗胞囊線蟲鑒定調(diào)查表見表A.1。

表A.1年大豆抗胞囊線蟲鑒定調(diào)查匯總表

播種日期：

鑒定胞囊數(shù)平均胞病情抗性

品種名稱出苗日期調(diào)查日期

編號12345678910囊數(shù)指數(shù)評價

1

2

3

4

5

……

調(diào)查人：記載人：

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附錄B

（資料性）

生理小種鑒別

B.1大豆胞囊線蟲生理小種的鑒別

B.1.1一種為傳統(tǒng)的Riggs鑒別模式（大豆胞囊線蟲生理小種Riggs鑒別模式見表B.1），共4份材料，分

別為Pickett、Peking、PI88788、PI90763，根據(jù)寄主根系平均胞囊指數(shù)來確定大豆胞囊線蟲小種。

B.1.2一種為HG分類系統(tǒng)（大豆胞囊線蟲生理小種HG鑒別模式見表B.2），輔助鑒別線蟲是否變異，共

7份材料，分別為PI548402、PI88788、PI90763、PI437654、PI209332、PI89772、PI548316。根據(jù)寄主

根系平均胞囊數(shù)計算胞囊指數(shù)（FI），按照表B.1和表B.2劃分標(biāo)準(zhǔn)確定生理小種。

FI=（供試品種胞囊數(shù)/感病對照品種胞囊數(shù)）×100%·······························(B.1)

表B.1大豆胞囊線蟲生理小種Riggs鑒別模式

小種類型

鑒別寄主

12345678910111213141516

Pickett-+-+++--++---++-

Peking-+-+----+-++++-+

PI88788++-+-+---+---++

PI90763----+--++-+-+-+++

注：“+”表示FI大于等于10%；“-”表示FI小于10%。

表B.2大豆胞囊線蟲生理小種HG鑒別模式

HG分型

鑒別寄主

01234567

Pickett

Peking+