生物制藥工藝與技術(shù)知識(shí)難點(diǎn)梳理

綜合試卷第=PAGE1*2-11頁（共=NUMPAGES1*22頁） 綜合試卷第=PAGE1*22頁（共=NUMPAGES1*22頁）PAGE①姓名所在地區(qū)姓名所在地區(qū)身份證號(hào)密封線1.請(qǐng)首先在試卷的標(biāo)封處填寫您的姓名，身份證號(hào)和所在地區(qū)名稱。2.請(qǐng)仔細(xì)閱讀各種題目的回答要求，在規(guī)定的位置填寫您的答案。3.不要在試卷上亂涂亂畫，不要在標(biāo)封區(qū)內(nèi)填寫無關(guān)內(nèi)容。一、選擇題1.生物制藥工藝中，以下哪種技術(shù)用于細(xì)胞培養(yǎng)？

A.微波加熱

B.紫外線照射

C.氣相傳遞

D.生物反應(yīng)器

2.以下哪種方法是用于蛋白質(zhì)純化的常用技術(shù)？

A.超濾

B.水解

C.聚丙烯酰胺凝膠電泳

D.水浴加熱

3.生物制藥工藝中，以下哪種設(shè)備用于細(xì)胞裂解？

A.離心機(jī)

B.高壓蒸汽滅菌器

C.超聲波細(xì)胞破碎儀

D.紫外線消毒器

4.以下哪種技術(shù)用于DNA的提?。?/p>

A.沉淀法

B.分子蒸餾

C.離心法

D.電泳法

5.生物制藥工藝中，以下哪種技術(shù)用于蛋白質(zhì)結(jié)晶？

A.晶體生長

B.超濾

C.蛋白質(zhì)沉淀

D.離心法

6.以下哪種技術(shù)用于生物制藥工藝中的發(fā)酵過程？

A.生物反應(yīng)器

B.離心機(jī)

C.超聲波細(xì)胞破碎儀

D.高壓蒸汽滅菌器

7.以下哪種方法是用于生物制藥工藝中的無菌操作？

A.沉淀法

B.分子蒸餾

C.離心法

D.紫外線消毒

8.以下哪種技術(shù)用于生物制藥工藝中的病毒滅活？

A.紫外線照射

B.高壓蒸汽滅菌

C.離心法

D.超聲波細(xì)胞破碎

答案及解題思路：

1.答案：D.生物反應(yīng)器

解題思路：生物反應(yīng)器是細(xì)胞培養(yǎng)的主要設(shè)備，可以提供適宜的溫度、pH、氧氣濃度等環(huán)境，保證細(xì)胞在最佳條件下生長繁殖。

2.答案：A.超濾

解題思路：超濾是一種常用的蛋白質(zhì)純化技術(shù)，可以通過半透膜將大分子蛋白質(zhì)與較小分子物質(zhì)分離。

3.答案：C.超聲波細(xì)胞破碎儀

解題思路：超聲波細(xì)胞破碎儀是生物制藥工藝中常用的細(xì)胞裂解設(shè)備，能夠有效地破碎細(xì)胞壁，釋放細(xì)胞內(nèi)容物。

4.答案：A.沉淀法

解題思路：沉淀法是一種簡單的DNA提取技術(shù)，通過鹽析或有機(jī)溶劑沉淀DNA，然后通過離心分離。

5.答案：A.晶體生長

解題思路：蛋白質(zhì)結(jié)晶是蛋白質(zhì)純化的重要步驟，通過合適的條件使蛋白質(zhì)從溶液中析出形成晶體。

6.答案：A.生物反應(yīng)器

解題思路：生物反應(yīng)器是發(fā)酵過程的核心設(shè)備，用于提供適宜的環(huán)境使微生物進(jìn)行發(fā)酵反應(yīng)。

7.答案：D.紫外線消毒

解題思路：紫外線消毒是一種常用的無菌操作方法，可以有效殺滅細(xì)菌、病毒等微生物。

8.答案：B.高壓蒸汽滅菌

解題思路：高壓蒸汽滅菌是一種高效滅活病毒的技術(shù)，通過高溫高壓環(huán)境使病毒蛋白變性失活。二、填空題1.生物制藥工藝中，細(xì)胞培養(yǎng)是利用細(xì)胞在生物反應(yīng)器中進(jìn)行生長和繁殖的過程。

2.蛋白質(zhì)純化過程中，常用的分離技術(shù)有凝膠過濾色譜、離子交換色譜、親和色譜等。

3.生物制藥工藝中，用于DNA提取的方法有酚氯仿法、鹽析法、CTAB法等。

4.生物制藥工藝中，用于蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法有蒸汽擴(kuò)散法、滴定法、透析法等。

5.生物制藥工藝中，用于發(fā)酵過程的設(shè)備是發(fā)酵罐。

6.生物制藥工藝中，用于無菌操作的方法有無菌空氣處理、消毒和滅菌、無菌操作技術(shù)等。

7.生物制藥工藝中，用于病毒滅活的方法有熱滅活、化學(xué)滅活、輻射滅活等。

答案及解題思路：

1.答案：細(xì)胞、生物反應(yīng)器、生長和繁殖。

解題思路：細(xì)胞培養(yǎng)是生物制藥的基礎(chǔ)過程，細(xì)胞在生物反應(yīng)器中通過吸收營養(yǎng)物質(zhì)和釋放代謝產(chǎn)物來生長和繁殖。

2.答案：凝膠過濾色譜、離子交換色譜、親和色譜。

解題思路：蛋白質(zhì)純化過程中，需要利用不同的色譜技術(shù)將蛋白質(zhì)從復(fù)雜混合物中分離出來，這些技術(shù)根據(jù)蛋白質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分離。

3.答案：酚氯仿法、鹽析法、CTAB法。

解題思路：DNA提取是生物制藥中的關(guān)鍵步驟，不同的方法適用于不同類型的樣本和提取需求。

4.答案：蒸汽擴(kuò)散法、滴定法、透析法。

解題思路：蛋白質(zhì)結(jié)晶是獲得高純度蛋白質(zhì)的重要手段，這些方法可以用來控制蛋白質(zhì)的結(jié)晶過程。

5.答案：發(fā)酵罐。

解題思路：發(fā)酵罐是進(jìn)行微生物發(fā)酵生產(chǎn)生物制藥的關(guān)鍵設(shè)備，提供適宜的環(huán)境進(jìn)行微生物的生長和代謝。

6.答案：無菌空氣處理、消毒和滅菌、無菌操作技術(shù)。

解題思路：生物制藥工藝要求高度的無菌操作，以防止污染，這些方法保證了生產(chǎn)過程的無菌性。

7.答案：熱滅活、化學(xué)滅活、輻射滅活。

解題思路：病毒滅活是生物制藥中處理病毒污染的重要步驟，不同的方法適用于不同的病毒和操作條件。三、判斷題1.生物制藥工藝中，細(xì)胞培養(yǎng)是利用生物體在生物反應(yīng)器中進(jìn)行繁殖的過程。（）

答案：正確

解題思路：細(xì)胞培養(yǎng)是生物制藥工藝中的一個(gè)關(guān)鍵步驟，通常在生物反應(yīng)器中模擬生物體的生長環(huán)境，為細(xì)胞提供必要的營養(yǎng)和生長條件，使其進(jìn)行繁殖。

2.蛋白質(zhì)純化過程中，超濾是一種常用的分離技術(shù)。（）

答案：正確

解題思路：超濾是蛋白質(zhì)純化過程中的一種常用技術(shù)，它利用膜的選擇性透過性，根據(jù)分子量大小分離蛋白質(zhì)和其他分子。

3.生物制藥工藝中，離心法是一種用于DNA提取的方法。（）

答案：錯(cuò)誤

解題思路：離心法在生物制藥工藝中主要用于分離混合物中的不同組分，例如細(xì)胞分離、蛋白質(zhì)沉淀等，但它不是用于DNA提取的方法。DNA提取通常使用化學(xué)試劑如酚氯仿抽提。

4.生物制藥工藝中，蛋白質(zhì)結(jié)晶是一種用于蛋白質(zhì)純化的方法。（）

答案：正確

解題思路：蛋白質(zhì)結(jié)晶是蛋白質(zhì)純化中的一個(gè)重要步驟，通過控制溶液的組成和溫度，使蛋白質(zhì)形成有規(guī)律的晶體結(jié)構(gòu)，從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的純化。

5.生物制藥工藝中，生物反應(yīng)器是一種用于發(fā)酵過程的設(shè)備。（）

答案：正確

解題思路：生物反應(yīng)器是發(fā)酵過程中必不可少的設(shè)備，它為微生物提供適宜的生長環(huán)境，包括溫度、pH值、氧氣供應(yīng)等，以促進(jìn)微生物的生長和代謝。

6.生物制藥工藝中，紫外線消毒是一種用于無菌操作的方法。（）

答案：正確

解題思路：紫外線消毒是一種常用的無菌操作方法，能夠有效殺滅空氣和物體表面的微生物，保證生物制藥工藝的無菌條件。

7.生物制藥工藝中，高壓蒸汽滅菌是一種用于病毒滅活的方法。（）

答案：正確

解題思路：高壓蒸汽滅菌是生物制藥工藝中常用的滅菌方法，通過高溫高壓的條件，能夠有效滅活細(xì)菌、病毒等微生物，保證產(chǎn)品的安全性。四、簡答題1.簡述生物制藥工藝中細(xì)胞培養(yǎng)的原理及過程。

答案：

原理：細(xì)胞培養(yǎng)是利用生物細(xì)胞在體外生長繁殖的特性，通過提供適宜的培養(yǎng)條件（如營養(yǎng)、溫度、pH、氣體等），使細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，從而大量生產(chǎn)生物制品。

過程：細(xì)胞培養(yǎng)過程包括細(xì)胞收集、細(xì)胞分離、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞純化等步驟。具體過程

（1）細(xì)胞收集：從生物體中獲取細(xì)胞。

（2）細(xì)胞分離：將細(xì)胞從組織中分離出來。

（3）細(xì)胞培養(yǎng)：將分離出的細(xì)胞放入培養(yǎng)容器中，加入適宜的培養(yǎng)液，在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。

（4）細(xì)胞純化：通過選擇培養(yǎng)、克隆化等方法，獲得純化的細(xì)胞系。

解題思路：

理解細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理，然后依次描述細(xì)胞培養(yǎng)的各個(gè)環(huán)節(jié)，注意每個(gè)環(huán)節(jié)的關(guān)鍵步驟和要點(diǎn)。

2.簡述生物制藥工藝中蛋白質(zhì)純化的方法及原理。

答案：

方法：生物制藥工藝中蛋白質(zhì)純化的方法主要有以下幾種：離子交換層析、親和層析、凝膠過濾、親和電泳等。

原理：蛋白質(zhì)純化的原理是基于蛋白質(zhì)分子在特定條件下的物理化學(xué)性質(zhì)差異，通過不同方法將蛋白質(zhì)與雜質(zhì)分離。

（1）離子交換層析：根據(jù)蛋白質(zhì)分子表面電荷差異進(jìn)行分離。

（2）親和層析：利用蛋白質(zhì)與特定配體的特異性結(jié)合進(jìn)行分離。

（3）凝膠過濾：根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小差異進(jìn)行分離。

（4）親和電泳：結(jié)合親和層析和電泳技術(shù)，實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離。

解題思路：

了解蛋白質(zhì)純化的各種方法，然后分別闡述每種方法的原理和操作要點(diǎn)。

3.簡述生物制藥工藝中DNA提取的方法及原理。

答案：

方法：生物制藥工藝中DNA提取的方法主要有以下幾種：酚氯仿法、鹽析法、柱分離法等。

原理：DNA提取是利用DNA與蛋白質(zhì)、RNA等成分在物理化學(xué)性質(zhì)上的差異，通過不同方法將DNA從細(xì)胞中提取出來。

（1）酚氯仿法：利用酚氯仿混合溶劑提取DNA，并去除蛋白質(zhì)和RNA。

（2）鹽析法：利用高濃度鹽溶液使DNA沉淀，再通過離心、洗滌等步驟提取DNA。

（3）柱分離法：利用柱分離技術(shù)，通過特定的吸附劑和洗脫劑將DNA從其他成分中分離出來。

解題思路：

了解DNA提取的常用方法，然后分別闡述每種方法的原理和操作要點(diǎn)。

4.簡述生物制藥工藝中蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法及原理。

答案：

方法：生物制藥工藝中蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法主要有以下幾種：滴定結(jié)晶法、蒸發(fā)結(jié)晶法、冷卻結(jié)晶法等。

原理：蛋白質(zhì)結(jié)晶是利用蛋白質(zhì)分子在特定條件下的物理化學(xué)性質(zhì)差異，通過改變?nèi)芤旱臐舛?、溫度、pH等條件，使蛋白質(zhì)分子從溶液中析出形成晶體。

（1）滴定結(jié)晶法：將蛋白質(zhì)溶液滴加到過飽和溶液中，使蛋白質(zhì)分子逐漸析出。

（2）蒸發(fā)結(jié)晶法：通過蒸發(fā)溶劑，使蛋白質(zhì)溶液逐漸過飽和，蛋白質(zhì)分子析出。

（3）冷卻結(jié)晶法：降低溶液溫度，使蛋白質(zhì)分子逐漸過飽和，蛋白質(zhì)分子析出。

解題思路：

了解蛋白質(zhì)結(jié)晶的常用方法，然后分別闡述每種方法的原理和操作要點(diǎn)。

5.簡述生物制藥工藝中發(fā)酵過程的原理及設(shè)備。

答案：

原理：發(fā)酵過程是指微生物在適宜條件下，利用營養(yǎng)物質(zhì)合成代謝產(chǎn)物，并通過控制發(fā)酵條件（如溫度、pH、營養(yǎng)物質(zhì)等）來提高代謝產(chǎn)物產(chǎn)量和質(zhì)量。

設(shè)備：發(fā)酵過程常用的設(shè)備有發(fā)酵罐、發(fā)酵培養(yǎng)基、攪拌裝置、溫度控制裝置、pH控制裝置等。

（1）發(fā)酵罐：用于培養(yǎng)微生物，提供適宜的生長環(huán)境。

（2）發(fā)酵培養(yǎng)基：提供微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)。

（3）攪拌裝置：使發(fā)酵培養(yǎng)基均勻混合，提供氧氣。

（4）溫度控制裝置：控制發(fā)酵過程的溫度。

（5）pH控制裝置：控制發(fā)酵過程的pH。

解題思路：

理解發(fā)酵過程的原理，然后分別描述發(fā)酵過程中所需的設(shè)備和作用。

6.簡述生物制藥工藝中無菌操作的原理及方法。

答案：

原理：無菌操作是指在生物制藥工藝中，采取措施防止微生物污染，保證產(chǎn)品質(zhì)量。

方法：無菌操作的方法主要有以下幾種：

（1）消毒：用化學(xué)消毒劑或物理方法殺滅微生物。

（2）滅菌：用化學(xué)消毒劑或物理方法徹底殺滅所有微生物，包括芽孢和孢子。

（3）無菌操作技術(shù)：在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作，如穿戴無菌服、使用無菌工具等。

解題思路：

了解無菌操作的原理，然后分別描述無菌操作的幾種方法和注意事項(xiàng)。

7.簡述生物制藥工藝中病毒滅活的原理及方法。

答案：

原理：病毒滅活是指通過物理或化學(xué)方法破壞病毒的結(jié)構(gòu)和功能，使其失去感染能力。

方法：病毒滅活的方法主要有以下幾種：

（1）熱滅活：利用高溫殺滅病毒。

（2）化學(xué)滅活：利用化學(xué)消毒劑殺滅病毒。

（3）輻射滅活：利用紫外線、γ射線等輻射殺滅病毒。

（4）過濾滅活：通過過濾膜過濾掉病毒。

解題思路：

了解病毒滅活的原理，然后分別描述病毒滅活的幾種方法和適用范圍。五、論述題1.論述生物制藥工藝中細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵因素及影響因素。

關(guān)鍵因素：

細(xì)胞類型：選擇合適的細(xì)胞類型對(duì)于生產(chǎn)特定的生物制藥。

培養(yǎng)基成分：培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分、pH值、氧氣供應(yīng)等直接影響細(xì)胞的生長和代謝。

培養(yǎng)條件：溫度、濕度、二氧化碳濃度等環(huán)境因素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程有重要影響。

影響因素：

培養(yǎng)基污染：細(xì)菌、真菌等微生物污染會(huì)影響細(xì)胞生長。

培養(yǎng)基成分變化：培養(yǎng)基成分的微小變化也可能導(dǎo)致細(xì)胞生長異常。

培養(yǎng)環(huán)境變化：溫度、濕度等環(huán)境因素的變化可能影響細(xì)胞生長。

2.論述生物制藥工藝中蛋白質(zhì)純化的難點(diǎn)及解決方法。

難點(diǎn)：

蛋白質(zhì)混合物復(fù)雜性：生物制藥中蛋白質(zhì)通常與其他分子混合，純化難度大。

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性：蛋白質(zhì)在純化過程中易發(fā)生變性和降解。

解決方法：

多步純化策略：采用不同的純化方法，如親和層析、離子交換層析等，逐步提高純度。

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定化：通過優(yōu)化條件，如調(diào)整pH值、添加穩(wěn)定劑等，保護(hù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。

3.論述生物制藥工藝中DNA提取的難點(diǎn)及解決方法。

難點(diǎn)：

DNA降解：提取過程中易受到DNA酶的降解。

樣本污染：提取過程中可能引入污染物。

解決方法：

使用酶抑制劑：抑制DNA酶活性，減少DNA降解。

優(yōu)化提取條件：優(yōu)化提取條件，如使用有機(jī)溶劑、鹽等，提高DNA提取效率。

4.論述生物制藥工藝中蛋白質(zhì)結(jié)晶的難點(diǎn)及解決方法。

難點(diǎn)：

結(jié)晶條件控制：結(jié)晶過程中需要精確控制溫度、pH值、濃度等條件。

結(jié)晶速度慢：結(jié)晶速度慢可能導(dǎo)致晶體質(zhì)量下降。

解決方法：

優(yōu)化結(jié)晶條件：通過調(diào)整溫度、pH值、濃度等條件，提高結(jié)晶速度和晶體質(zhì)量。

采用新型結(jié)晶技術(shù)：如微流控技術(shù)等，提高結(jié)晶效率。

5.論述生物制藥工藝中發(fā)酵過程的難點(diǎn)及解決方法。

難點(diǎn)：

發(fā)酵條件控制：發(fā)酵過程中需要精確控制溫度、pH值、溶解氧等條件。

菌株變異：發(fā)酵過程中菌株可能發(fā)生變異，影響產(chǎn)物產(chǎn)量和質(zhì)量。

解決方法：

優(yōu)化發(fā)酵條件：通過優(yōu)化發(fā)酵條件，提高產(chǎn)物產(chǎn)量和質(zhì)量。

菌株選育：通過基因工程等方法，選育具有優(yōu)良性狀的菌株。

6.論述生物制藥工藝中無菌操作的難點(diǎn)及解決方法。

難點(diǎn)：

無菌環(huán)境維護(hù)：保證生產(chǎn)環(huán)境無菌是保證產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵。

人員操作規(guī)范：操作人員需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，防止污染。

解決方法：

建立無菌環(huán)境：采用空氣凈化、消毒等措施，保證生產(chǎn)環(huán)境無菌。

人員培訓(xùn)：對(duì)操作人員進(jìn)行無菌操作培訓(xùn)，提高操作規(guī)范。

7.論述生物制藥工藝中病毒滅活的難點(diǎn)及解決方法。

難點(diǎn)：

滅活效果：滅活過程中需保證病毒被徹底滅活，防止病毒傳播。

滅活方法選擇：選擇合適的滅活方法，如熱滅活、化學(xué)滅活等。

解決方法：

優(yōu)化滅活條件：通過調(diào)整滅活條件，提高滅活效果。

采用多種滅活方法：結(jié)合多種滅活方法，提高滅活效果。

答案及解題思路：

1.答案：細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵因素包括細(xì)胞類型、培養(yǎng)基成