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文檔簡介
高考生物實驗知識點總結(jié)實驗一:使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞(必修一P7)1、是低倍鏡還是高倍鏡的視野大,視野明亮?為什么?低倍鏡的視野大,通過的光多,放大的倍數(shù)小;高倍鏡視野小,通過的光少,但放大的倍數(shù)高。2、為什么要先用低倍鏡觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察?如果直接用高倍鏡觀察,往往由于觀察的對象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此,需要先用低倍鏡觀察清楚,并把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察。3、用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍鏡后,轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋行不行?不行。用高倍鏡觀察,只需轉(zhuǎn)動細準焦螺旋即可。轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,容易壓壞玻片。4、使用高倍鏡觀察的步驟和要點是什么?答:(1)首先用低倍鏡觀察,找到要觀察的物像,移到視野的中央。(2)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,用高倍鏡觀察,并輕輕轉(zhuǎn)動細準焦螺旋,直到看清楚材料為止。5、總結(jié):四個比例關(guān)系a.鏡頭長度與放大倍數(shù):物鏡鏡頭越長,放大倍數(shù)越大,而目鏡正好與之相反。b.物鏡頭放大倍數(shù)與玻片距離:倍數(shù)越大(鏡頭長)距離越近。c.放大倍數(shù)與視野亮度:放大倍數(shù)越大,視野越暗。d.放大倍數(shù)與視野范圍:放大倍數(shù)越大,視野范圍越小。
實驗一
觀察DNA和RNA在細胞中的分布
實驗原理:DNA
綠色(甲基綠試劑),RNA
紅色(吡羅紅試劑)
分布:真核生物DNA主要分布在細胞核中,線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細胞質(zhì)中。
實驗結(jié)果:
細胞核呈綠色,細胞質(zhì)呈紅色.
實驗二
物質(zhì)鑒定
還原糖
+
斐林試劑~磚紅色沉淀
脂
肪
+
蘇丹III
~橘黃色
脂
肪
+
蘇丹IV~
紅色
蛋白質(zhì)
+
雙縮脲試劑
~紫色反應(yīng)
1、還原糖的檢測
(1)材料的選?。哼€原糖含量高,白色或近于白色,如蘋果,梨,白蘿卜。
(2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現(xiàn)配現(xiàn)用。
(3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍色→磚紅色)
2、脂肪的檢測
(1)材料的選?。汉玖吭礁叩慕M織越好,如花生的子葉。
(2)步驟:
制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央
↓
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分數(shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作裝片(滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片)
↓
鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)
3、蛋白質(zhì)的檢測
(1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步驟:試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色)
考點提示:
(1)常見還原性糖與非還原性糖有哪些?
葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。
(2
)還原性糖植物組織取材條件?
含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。
(3)研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響?
加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時溶液顏色變化不明顯。
(4)斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現(xiàn)混現(xiàn)用?
混合后使用;產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。
(5)還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序為:
淺藍色
棕色
磚紅色
(6)花生種子切片為何要???
只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。
(7)轉(zhuǎn)動細準焦螺旋時,若花生切片的細胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?
切片的厚薄不均勻。
(8)脂肪鑒定中乙醇作用?
洗去浮色。
(9)雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的。怎樣通過對比看顏色變化?
不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對比。
實驗三
觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動
1、材料:新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉,口腔上皮細胞臨時裝片
2、原理:葉綠體在顯微鏡下觀察,綠色,球形或橢球形。
用健那綠染液染色后的口腔上皮細胞中線粒體成藍綠色,細胞質(zhì)接近無色。
知識概要:
取材
制片
低倍觀察
高倍觀察
考點提示:
(1)為什么可直接取用蘚類的小葉,而不能直接取用菠菜葉?
因為蘚類的小葉很薄,只有一層細胞組成,而菠菜葉由很多層細胞構(gòu)成。
(2)取用菠菜葉的下表皮時,為何要稍帶些葉肉?
表皮細胞除保衛(wèi)細胞外,一般不含葉綠體,而葉肉細胞含較多的葉綠體。
(3)怎樣加快黑藻細胞質(zhì)的流動速度?最適溫度是多少?
進行光照、提高水溫、切傷部分葉片;25℃左右。
(4)對黑藻什么部位的細胞觀察,所觀察到的細胞質(zhì)流動的現(xiàn)象最明顯?
葉脈附近的細胞。
(5)若視野中某細胞中細胞質(zhì)的流動方向為順時針,則在裝片中該細胞的細胞質(zhì)的實際流動方向是怎樣的?
仍為順時針。
(6)是否一般細胞的細胞質(zhì)不流動,只有黑藻等少數(shù)植物的細胞質(zhì)才流動?
否,活細胞的細胞質(zhì)都是流動的。
(7)若觀察植物根毛細胞細胞質(zhì)的流動,則對顯微鏡的視野亮度應(yīng)如何調(diào)節(jié)?
視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗一些,可用反光鏡的平面鏡來采光或縮小光圈。
(8)在強光照射下,葉綠體的向光面有何變化?葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。
實驗四
觀察有絲分裂材料:洋蔥根尖(蔥,蒜)
2、步驟:(一)洋蔥根尖的培養(yǎng)
(二)裝片的制作
制作流程:解離→漂洗→染色→制片
1.
解離:
藥液:
質(zhì)量分數(shù)為15%的鹽酸,體積分數(shù)為95%的酒精(1
:
1混合液).
時間:
3~5min
.目的:
使組織中的細胞相互分離開來.
2.
漂洗:
用清水漂洗約10min.
目的:
洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色.
3.
染色:
用質(zhì)量濃度為0.01g
/
mL或0.02g
/
mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~
5min
目的:
使染色體著色,利于觀察.
4.
制片:
將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片.
然后用拇指輕輕地按壓載玻片.
目的:
使細胞分散開來,有利于觀察.
(三)觀察
1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細胞:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正在分裂。
2、換高倍鏡下觀察:分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時期細胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點)。其中,處于分裂間期的細胞數(shù)目最多。
考點提示:
(1)培養(yǎng)根尖時,為何要經(jīng)常換水?
增加水中的氧氣,防止根進行無氧呼吸造成根的腐爛。
(2)培養(yǎng)根尖時,應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么?
應(yīng)選用舊洋蔥,因為新洋蔥尚在休眠,不易生根。
(3)為何每條根只能用根尖?取根尖的最佳時間是何時?為何?
因為根尖分生區(qū)的細胞能進行有絲分裂;上午10時到下午2時;因為此時細胞分裂活躍。
(4)解離和壓片的目的分別是什么?壓片時為何要再加一塊載玻片?
解離是為了使細胞相互分離開來,壓片是為了使細胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻,防止蓋玻片被壓破。
(5)若所觀察的組織細胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么?
壓片時用力過大。
(6)解離過程中鹽酸的作用是什么?丙酮可代替嗎?
分解和溶解細胞間質(zhì);不能,而硝酸可代替。
(7)為何要漂洗?
洗去鹽酸便于染色。
(8)細胞中染色最深的結(jié)構(gòu)是什么?
染色最深的結(jié)構(gòu)是染色質(zhì)或染色體。
(9)若所觀察的細胞各部分全是紫色,其原因是什么?
染液濃度過大或染色時間過長。
(10)為何要找分生區(qū)?分生區(qū)的特點是什么?能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎?為什么?
因為在根尖只有分生區(qū)的細胞能夠進行細胞分裂;分生區(qū)的特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞處于分裂狀態(tài);不能用高倍鏡找分生區(qū),因為高倍鏡所觀察的實際范圍很小,難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。
(11)分生區(qū)細胞中,什么時期的細胞最多?為什么?
間期;因為在細胞周期中,間期時間最長。
(12)所觀察的細胞能從中期變化到后期嗎?為什么?
不能,因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。
(13)觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體?為什么?
不能,因為洋蔥表皮細胞一般不分裂。
(14)若觀察時不能看到染色體,其原因是什么?
沒有找到分生區(qū)細胞;沒有找到處于分裂期的細胞;染液過??;染色時間過短。
實驗五
比較酶和Fe3+的催化效率
考點提示:
(1)為何要選新鮮的肝臟?
因為在不新鮮的肝臟中,過氧化氫酶的活性會由于細菌的破壞而降低。
(2)該實驗中所用試管應(yīng)選較粗的還是較細的?為什么?
應(yīng)選用較粗的,因為在較細的試管中容易形成大量的氣泡,而影響衛(wèi)生香的復(fù)燃。
(3)為何要選動物的肝臟組織來做實驗,其他動植物的組織的研磨液能替代嗎?
因為肝臟組織中過氧化氫酶含量較豐富;其它動植物組織也含有少量的過氧化氫酶,所以能夠替代。
(4)相同質(zhì)量的塊狀肝臟和肝臟研磨液,哪一個催化效果好?為什么?
研磨液效果好;因為它增加過氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。
(5)滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時,可否共用下個吸管?為什么?
不可共用,防止過氧化氫酶與氯化鐵混合,而影響實驗效果。
實驗六
色素的提取和分離
1、原理:葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素
各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素
2、步驟:
(1)提取色素
研磨
(2)制備濾紙條
(3)畫濾液細線:均勻,直,細,重復(fù)若干次
(干了之后)
(4)分離色素:不能讓濾液細線觸及層析液
(5)觀察和記錄:
結(jié)果濾紙條上從上到下依次為:橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b).
考點提示:
(1)對葉片的要求?為何要去掉葉柄和粗的時脈?
綠色、最好是深綠色。因為葉柄和葉脈中所含色素很少。
(2)二氧化硅的作用?不加二氧化硅對實驗有何影響?
為了使研磨充分。不加二氧化硅,會使濾液和色素帶的顏色變淺。
(3)丙酮的作用?它可用什么來替代?用水能替代嗎?
溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替,但不能用水來代替,因為色素不溶于水。
(4)碳酸鈣的作用?不加碳酸鈣對實驗有何影響?
保護色素,防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣,濾液會變成黃綠色或褐色。
(5)研磨為何要迅速?要充分?過濾時為何用布不用濾紙?
研磨迅速,是為了防止丙酮大量揮發(fā);只有充分研磨,才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙,但能通過尼龍布。
(6)濾紙條為何要剪去兩角?
防止兩側(cè)層析液擴散過快。
(7)為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線?
因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素,會影響色素的分離結(jié)果。
(8)
濾液細線為何要直?為何要重畫幾次?
防止色素帶的重疊;增加色素量,使色素帶的顏色更深一些。
(9)
濾液細線為何不能觸到層析液?
防止色素溶解到層析液中。
(10)濾紙條上色素為何會分離?
由于不同的色素在層析液中的溶解度不同,因而它們隨層析液在濾紙條上的擴散速度就不同。
(11)色素帶最寬的是什么色素?它在層析液中的溶解度比什么色素大一些?
最寬的色素帶是葉綠素a,它的溶解度比葉綠素b大一些。
(12)濾紙條上相互間距最大的是哪兩種色素?
胡蘿卜素和葉黃素。
(13)色素帶最窄的是第幾條色素帶?為何?
第一條色素帶,因為胡蘿卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。
實驗七
觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原
1、條件:細胞內(nèi)外溶液濃度差,活細胞,大液泡
2、材料:紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞(具紫色大液泡),質(zhì)量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
3、步驟:制作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片→觀察→蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細胞壁分離)→蓋玻片一側(cè)滴清水,
另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(質(zhì)壁分離復(fù)原)
4、結(jié)論:
細胞外溶液濃度
>
細胞內(nèi)溶液濃度,細胞失水
質(zhì)壁分離
細胞外溶液濃度
<
細胞內(nèi)溶液濃度,細胞吸水
質(zhì)壁分離復(fù)原
知識概要:制片
觀察
加液
觀察
加水
觀察
考點提示:
(1)洋蔥為何要選紫色的?若紫色過淡怎么辦?
紫色的洋蔥有紫色的大液泡,便于觀察液泡的大小變化;縮小光圈,使視野變暗些。
(2)洋蔥表皮應(yīng)撕還是削?為何?
表皮應(yīng)撕不能削,因為削的表實驗二檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(必修一P18)一實驗原理:某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。1、可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉淀。葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸+Cu2O↓(磚紅色)+H2O,即Cu(OH)2被還原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2、脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍色。3、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。(蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。)二實驗材料1、做可溶性還原性糖鑒定實驗,應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺,易于觀察。)2、做脂肪的鑒定實驗。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡3~4小時(也可用蓖麻種子)。3、做蛋白質(zhì)的鑒定實驗,可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。三、實驗注意事項1、可溶性糖的鑒定a.應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;b.切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應(yīng),無Cu(OH)2生成。2、蛋白質(zhì)的鑒定a.A液和B液也要分開配制,儲存。鑒定時先加A液后加B液;先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入,會導(dǎo)致Cu2+變成Cu(OH)2沉淀,而失效。b、CuSO4溶液不能多加;否則CuSO4的藍色會遮蓋反應(yīng)的真實顏色。c.蛋清要先稀釋;如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。3、斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別:斐林試劑雙縮脲試劑
試劑成分0.1g/mlNaOH溶液0.1g/mlNaOH溶液(雙縮脲試劑A)0.05g/mlCuSO4溶液0.01g/mlCuSO4溶液(雙縮脲試劑B)是否混合混合后再滴加先加雙縮脲試劑A后加雙縮脲試劑B是否加熱水浴加熱不加熱實驗三:觀察DNA、RNA在細胞中的分布(必修一P26)實驗原理:1.甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色,可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布。2.鹽酸能夠改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色體中的DNA和蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合。
實驗四:體驗制備細胞膜的方法(必修一P40)實驗材料:人和其他哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核和眾多的細胞器,用這樣的紅細胞做實驗材料就只有細胞膜一種膜結(jié)構(gòu)。
實驗五:用高倍顯微鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一P47)一實驗原理:1.葉綠體的辨認依據(jù):葉綠體是綠色的,呈扁平的橢圓球形或球形。2.線粒體辨認依據(jù):線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。3.健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料,可以使活細胞中線粒體呈現(xiàn)藍綠色二實驗材料:觀察葉綠體時選用:蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體清楚,可取整個小葉直接制片,所以作為實驗的首選材料。若用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細胞不含葉綠體。三討論1、細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體,是不是靜止不動的?為什么?答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動,這種運動能隨時改變橢球體的方向,使葉綠體既能接受較多光照,又不至于被強光灼傷。2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉綠體的功能有什么關(guān)系?答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細胞中的葉綠體比下面的多,這可以接受更多的光照。
實驗六觀察植物細胞的吸水和失水(必修一P61“探究”)一實驗原理:1.質(zhì)壁分離的原理:當(dāng)細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而失水,細胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到溶液中,使細胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大,當(dāng)細胞不斷失水時,原生質(zhì)層就會與細胞壁分離。2.質(zhì)壁分離復(fù)原的原理:當(dāng)細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入到細胞液中,整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),緊貼細胞壁,使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。二實驗材料和方法:紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色,易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對細胞無毒害作用。質(zhì)壁分離的方法(引流法):制作洋蔥鱗片葉外表皮的臨時裝片。然后,從蓋玻片的一側(cè)滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在蓋玻片的另一側(cè)用吸水紙吸引。這樣重復(fù)幾次即可。質(zhì)壁分離復(fù)原的方法:改用清水實驗。三討論1.如果將上述表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?答:表皮細胞維持原狀,因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。2.當(dāng)紅細胞細胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離?為什么?答:不會。因為紅細胞不具細胞壁。
實驗七
觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原
1、條件:細胞內(nèi)外溶液濃度差,活細胞,大液泡
2、材料:紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞(具紫色大液泡),質(zhì)量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
3、步驟:制作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片→觀察→蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細胞壁分離)→蓋玻片一側(cè)滴清水,
另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(質(zhì)壁分離復(fù)原)
4、結(jié)論:
細胞外溶液濃度
>
細胞內(nèi)溶液濃度,細胞失水
質(zhì)壁分離
細胞外溶液濃度
<
細胞內(nèi)溶液濃度,細胞吸水
質(zhì)壁分離復(fù)原
知識概要:制片
觀察
加液
觀察
加水
觀察
考點提示:
(1)洋蔥為何要選紫色的?若紫色過淡怎么辦?
紫色的洋蔥有紫色的大液泡,便于觀察液泡的大小變化;縮小光圈,使視野變暗些。
(2)洋蔥表皮應(yīng)撕還是削?為何?
表皮應(yīng)撕不能削,因為削的表皮往往太厚。
(3)植物細胞為何會出現(xiàn)質(zhì)壁分離?
動物細胞會嗎?
當(dāng)細胞失去水分時,其原生質(zhì)層的伸縮性大于細胞壁的伸縮性;動物細胞不會發(fā)生質(zhì)壁分離,因為動物細胞沒有細胞壁。
(4)質(zhì)壁分離時,液泡大小和顏色的變化?復(fù)原時呢?
細胞發(fā)生質(zhì)壁分離時,液泡變小,紫色加深;當(dāng)細胞質(zhì)壁分離復(fù)原時,液泡變大,紫色變淺。
(5)若發(fā)生質(zhì)壁分離后的細胞,不能發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原,其原因是什么?
細胞已經(jīng)死亡(可能是外界溶液濃度過大,細胞失水過多或質(zhì)壁分離時間過長)
(6)高倍鏡使用前,裝片如何移動?
若要把視野中上方的物像移到視野的正中心,則要將裝片繼續(xù)向上移動。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心,則要將裝片繼續(xù)向左方移動,因為顯微鏡視野
中看到的是倒像。
(7)換高倍物鏡后,怎樣使物像清晰?視野明暗度會怎樣變化?如何調(diào)亮?
換高倍物鏡后,應(yīng)調(diào)節(jié)細準焦螺旋使物像變得清晰;視野會變暗,可調(diào)大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。
(8)所用目鏡、物鏡的長度與放大倍數(shù)的關(guān)系?
目鏡越長,放大倍數(shù)越小;物鏡越長,放大倍數(shù)越大。
(9)物像清晰后,物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數(shù)的關(guān)系?
物鏡與載玻片之間的距離越小,放大倍數(shù)越大。
(10)總放大倍數(shù)的計算方法?放大倍數(shù)具體指面積的放大倍數(shù)還是長度的放大倍數(shù)?
總放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積;放大倍數(shù)是指細小物體長度或?qū)挾鹊姆糯蟊稊?shù)。
(11)放大倍數(shù)與視野中細胞大小、多少、視野明暗的關(guān)系?
放大倍數(shù)越大,視野中細胞越大、數(shù)目越少、視野越暗。
(12)
更換目鏡,若異物消失,則異物在目鏡上;更換物鏡,若異物消失,則異物在物鏡上、移動載玻片,若異物移動,則異物在載玻片上。
(13)怎樣利用質(zhì)壁分離現(xiàn)象來測定植物細胞液的濃度?
①配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液
②分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細胞的臨時裝片
③用顯微鏡觀察某植物細胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離。某植物細胞液的濃度就介于不能引起質(zhì)壁分離的濃度和能引起質(zhì)壁分離的濃度之間。
實驗七比較過氧化氫在不同條件下的分解(必修一P78)一實驗原理鮮肝提取液中含有過氧化氫酶,過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經(jīng)計算,質(zhì)量分數(shù)為3.5%的FeCl3溶液和質(zhì)量分數(shù)為20%的肝臟研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。二實驗注意事項1.不讓H2O2接觸皮膚,H2O2有一定的腐蝕性2.不可用同一支滴管,由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶,會影響實驗準確性3.肝臟研磨液必須是新鮮的,因為過氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過久,可受細菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低4.肝臟研磨要充分,研磨可破壞肝細胞結(jié)構(gòu),使細胞內(nèi)的酶釋放出來,增加酶與底物的接觸面積。
實驗八影響酶活性的條件(必修一P83)實驗原理:1.淀粉遇碘后,形成紫藍色的復(fù)合物。2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖,麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。注:市售a-淀粉酶的最適溫度約600C
實驗九探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91)實驗原理:1.酵母菌是一種單細胞真菌,在有氧和無氧的條件下都能生存,屬于兼性厭氧菌,因此便于用來研究細胞呼吸的不同方式。方程式(略)2.CO2可使澄清石灰水變混濁,也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變成黃色的時間長短,可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。3.橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),在酸性條件下,變成灰綠色。注意事項:增加水中氧氣的方法:用橡皮球或氣泵通入空氣,并用NaOH溶液除去空氣中的CO2
實驗十葉綠體色素的提取和分離(必修一P97)一實驗原理與方法1.色素的提取原理:葉綠體中的色素是有機物,不溶于水,易溶于丙酮等有機溶劑中。提取方法:用丙酮、乙醇等能提取色素。2.色素分離的原理:層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。分離方法:紙層析法。用毛細吸管在濾紙條的下端沿鉛筆線劃一條濾液細線,待濾液干后再劃一兩次,然后將濾紙條插入層析液中(濾液細線不能接觸層析液)。分離結(jié)果:濾紙條上從上到下出現(xiàn)四條色素帶:橙黃色(最窄,胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(最寬,葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b)。胡蘿卜素與葉黃素之間距離最大,葉綠素a與葉綠素b之間距離最小。二實驗注意事項1.加SiO2為了研磨得更充分。2.加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。因為葉綠素含鎂,可被細胞液中的有機酸產(chǎn)生的氫代替,形成去鎂葉綠素,CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機酸,防止葉綠體被破壞。3.加無水乙醇是因為葉綠體色素易溶于無水乙醇等有機溶劑。三實驗討論:1.濾紙條上的濾液細線,為什么不能觸及層析液?答:濾紙條上的濾液細線如觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中,實驗就會失敗。2.提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵是什么?答:提取葉綠體色素的關(guān)鍵是:①葉片要新鮮、濃綠;②研磨要迅速、充分;③濾液收集后,要及時用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關(guān)鍵是:一是濾液細線要細且直,而且要重復(fù)劃幾次;二是層析液不能沒及濾液線。
實驗十一環(huán)境因素對光合作用強度的影響(必修一P104)實驗原理:1.影響光合作用強度的因素有光照強度,二氧化碳濃度,溫度,水分,礦質(zhì)元素等等,測光合作用強度可以通過測氧氣生成速率來進行間接的測量.2.利用真空滲入法排出葉片細胞間隙中的空氣.并使其沉入水中,在光合作用過程中,植物吸收二氧化碳并放出氧氣,產(chǎn)生氧氣的多少與光合作用強度密切相關(guān),由于氧氣在水中溶解度很小,因此氧氣會在細胞間隙中積累,從而使下沉的葉片上浮.依據(jù)葉片上浮的情況可推知葉片光合作用強度,可以用葉片上浮所需的平均時間或者一定時間內(nèi)上浮的葉片數(shù)表示光合作用強度的大小.
實驗十二細胞大小與物質(zhì)運輸?shù)年P(guān)系(必修一P110)一.實驗原理:用瓊脂塊模擬細胞。瓊脂塊中含有酚酞,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物質(zhì)(NaOH)在瓊脂塊中的擴散速度。方法:用含酚酞的瓊脂塊模擬細胞。2、現(xiàn)象:NaOH和酚酞相遇呈紫紅色。二結(jié)論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小;NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小實驗方法總結(jié)1、模型方法。模型是人們?yōu)榱四撤N特定目的而對認識對象所作的一種簡化的概括性的描述,模型包括物理模型、數(shù)學(xué)模型、概念模型等。⑴以事物或圖畫形式直觀地表達認識對象的特征,這種模型就是物理模型,沃森和克里克制作的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型,就是物理模型。⑵數(shù)學(xué)模型是用來描述一個系統(tǒng)或它的性質(zhì)的數(shù)學(xué)形式。如“J”型增長的數(shù)學(xué)模型:t年后種群數(shù)量為Nt=N0t。建立數(shù)學(xué)模型的步驟:①觀察研究對象,提出問題。②提出合理的假設(shè)。③根據(jù)實驗數(shù)據(jù),用適當(dāng)?shù)臄?shù)學(xué)形式對事物的性質(zhì)進行表達。④通過進一步實驗或觀察等,對模型進行檢驗或修正。2、調(diào)查種群密度的方法。⑴樣方法,適用于植物。①取樣的原則:隨機取樣。②取樣的方法:五點取樣法和等距取樣法。樣方的大小一般以1m2的正方形為宜。③計算方法:以所有樣方種群密度的平均值作為該種群的種群密度估計值。⑵標(biāo)志重捕法,適用于活動范圍大的動物。另外,活動范圍小的動物(如作物植株上的蚜蟲、跳蝻)可用樣方法;土壤小動物可用捕捉器取樣法;趨光性昆蟲可用燈光誘捕法。⑶抽樣檢測法,適用于微生物(如酵母菌)。3、同位素標(biāo)記法。放射性同位素可用于追蹤物質(zhì)的運行和變化規(guī)律。通過追蹤放射性同位素標(biāo)記的化合物,可以弄清化學(xué)反應(yīng)的詳細過程。這種方法叫做同位素標(biāo)記法。此方法用于:⑴探究分泌蛋白的合成和運輸途徑:核糖體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體細胞外。⑵證明光合作用釋放的氧氣來自水。⑶噬菌體侵染細菌的實驗。⑷DNA半保留復(fù)制實驗。4、孟德爾的實驗方法(成功原因):⑴正確地選用實驗材料;⑵先研究一對相對性狀的的遺傳,再研究兩對或多對性狀的遺傳;⑶應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)方法對實驗結(jié)果進行分析;⑷假說—演繹法:先提出問題,然后提出解釋問題的假說,根據(jù)假說進行演繹推理,再通過實驗檢驗演繹推理的結(jié)論。如果實驗結(jié)果與預(yù)期結(jié)論相符,就證明假說是正確的。5、類比推理法。薩頓根據(jù)類比推理提出了基因位于染色體上的假說。6、排除法。達爾文運用排除法研究植物表現(xiàn)向光性的原因。7、人工異花傳粉的方法:①去雄,套袋。②傳粉,套袋
實驗十三觀察細胞的有絲分裂(必修一P115)一實驗原理:1.在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細胞。由于各個細胞的分裂是獨立進行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細胞。2.染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài),就可判斷這些細胞處于有絲分裂的哪個時期,進而認識有絲分裂的完整過程。二觀察細胞有絲分裂的實驗過程
步驟
注意問題
分析一、根尖的培養(yǎng)置于溫暖處,常換水。因為細胞分裂和生長需要水分、適宜的溫度和氧氣。二、裝片的制作(解離→漂洗→染色→制片)1.解離:解離液:質(zhì)量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精的混合液(1:1)解離時間要保證,細胞才能分散開來。解離時間也不宜過長。目的:溶解細胞間質(zhì),使組織中的細胞相互分離開來。此時,細胞已被鹽酸殺死。否則,根尖過于酥軟,無法取出。2.漂洗:清水的玻璃皿中漂洗約10min。漂洗要充分,可換水1~2次。目的:洗去解離液,便于染色。3.染色:質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。染色時間不宜過長,否則顯微鏡下一片紫色,無法觀察。龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色4.制片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細胞分散開來。要弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動蓋玻片,目的:使細胞分散,避免細胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標(biāo)本被壓成云霧狀。三、觀察1.低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū)細胞。2.高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細準焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰,仔細觀察,找出處于細胞分裂期中期的細胞,再找出前期、后期、末期的細胞。一定要找到分生區(qū)。在一個視野里,往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細胞??梢月匾苿友b片,從鄰近的分生區(qū)細胞中尋找。分生區(qū)細胞特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正處于分裂期。三討論制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?答:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點:(1)剪取洋蔥根尖材料時,應(yīng)該在洋蔥根尖細胞一天之中分裂最活躍的時間;(2)解離時,要將根尖細胞殺死,細胞間質(zhì)被溶解,使細胞容易分離;(3)壓片時,用力的大小要適當(dāng),要使根尖被壓平,細胞分散開實驗十五低溫誘導(dǎo)染色體加倍(必修二P88)一實驗原理與步驟:原理:用低溫處理植物分生組織細胞,能抑制紡錘體的形成,以致影響染色體被拉向兩極,細胞也不能分裂成兩個子細胞,于是,植物細胞的染色體數(shù)發(fā)生變化。步驟:⑴低溫誘導(dǎo)。⑵卡諾氏液中浸泡以固定細胞的形態(tài),再用95%的酒精沖洗2次。⑶制作裝片(解離、漂洗、染色、制片)。⑷顯微鏡觀察。二課后討論題答案:低溫誘導(dǎo)和秋水仙素處理都是通過抑制分裂細胞內(nèi)紡錘體的形成,使染色體不能移向細胞兩極,而引起細胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍。卡諾氏固定液(Carnoy'sFluid)適用于一般植物組織和細胞的固定,常用于根尖,花藥壓片及子房石蠟切片等.有極快的滲透力,根尖材料固定15—20min即可,花藥則需1h左右,此液固定最多不超過24h,固定后用95%酒精沖洗至不含冰醋酸為止;如果材料不馬上用,需轉(zhuǎn)入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透細胞,將其固定并
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