實驗四五六球菌ppt課件

1、1,.,實驗四 球菌,引起人類化膿性感染的主要細(xì)菌，又稱化膿性球菌 常見有： 葡萄球菌屬 鏈球菌屬 腸球菌屬 奈瑟菌屬,2,.,菌種,葡萄球菌屬：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球 菌、腐生葡萄球菌 鏈球菌屬：甲型溶血型鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌 奈瑟氏菌屬：微黃奈瑟氏菌 腸球菌屬,3,.,葡萄球菌屬,菌種： 金黃色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌,4,.,實驗?zāi)康?掌握葡萄球菌屬的分離培養(yǎng)方法與鑒定方法 掌握葡萄球菌屬的菌落特點 菌體形態(tài)及染色性,5,.,實驗內(nèi)容,細(xì)菌菌落形態(tài)及色素的觀察 做GS染色，鏡下形態(tài)的觀察 接種血平板，觀察細(xì)菌的生長表現(xiàn)、色素及 溶血 生化反應(yīng)： 1.觸酶試

2、驗 2.血漿凝固酶試驗 3.甘露醇試驗,6,.,實驗器材,菌種、血平板、血漿、3%H2O2、甘露醇培養(yǎng)基、濾紙片、玻片、擦鏡紙、吸水紙、污物缸等,7,.,細(xì)菌菌落形態(tài)及色素的觀察: 單個菌落為中等大小,圓形,表面光滑,邊緣整齊,不透明,產(chǎn)脂溶性色素.,金黃色葡萄球菌呈金黃色菌落,有-溶血環(huán),8,.,葡萄球菌鏡下形態(tài)的觀察,革蘭陽性,無芽胞無鞭毛,葡萄堆狀排列,9,.,生化反應(yīng),觸酶試驗： 原理：某些細(xì)菌能產(chǎn)生過氧化氫酶，將對細(xì)菌有害的H2O2 分解成H2O、O2 方法：在潔凈載玻片上，滴加3% H2O2溶液12d,用接種環(huán) 挑取普通瓊脂上的菌落，觀察結(jié)果。 結(jié)果：產(chǎn)生大量氣泡者（+），不產(chǎn)生氣

3、泡者（） 鑒別：葡萄球菌（+）、鏈球菌（）,10,.,血漿凝固酶試驗： 原理：金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生血漿凝固酶，可使血漿中可溶性的纖維蛋白原變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白，結(jié)合型血漿凝固酶附著于細(xì)菌表面，在玻片上形成凝塊；游離型的血漿凝固酶則可使試管中的血漿發(fā)生凝固。試管法37 孵育0.5h. 方法（玻片法）： 對照區(qū) 試驗區(qū),生理鹽水 血漿 細(xì)菌 細(xì)菌,結(jié)果：出現(xiàn)凝集現(xiàn)象者為陽性。 鑒別: (金+表-腐-),11,.,甘露醇發(fā)酵試驗： 原理：致病性葡萄球菌多能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基 由紫色變?yōu)辄S色 方法: 將3種細(xì)菌分別接種于甘露醇發(fā)酵管，35孵育 1824h,觀察結(jié)果。 結(jié)果判斷：培養(yǎng)基渾濁，由紫色

4、變?yōu)辄S色（+） 仍為紫色（-） 鑒別： 金黃色葡萄球菌（+） 表皮葡萄球菌（-） 腐生葡萄球菌（-）,12,.,思考題： 為什么甘露醇試驗陽性是黃色？,13,.,鏈球菌屬,菌種： 甲型溶血型鏈球菌 乙型溶血型鏈球菌 肺炎鏈球菌,14,.,實驗?zāi)康?掌握鏈球菌屬的分離培養(yǎng)與鑒定方法 掌握鏈球菌的菌落特點、菌體形態(tài)及染色性,15,.,實驗器材,菌種、GS染液、血平板、菊糖發(fā)酵管、10%去氧膽酸鈉溶液、optochin藥敏紙片、桿菌肽藥敏紙片、小鼠、1ml注射器、剪刀鑷子、濾紙片、玻片、吸水紙、擦鏡紙、牛皮紙、棉簽等,16,.,實驗內(nèi)容,細(xì)菌菌落形態(tài)及溶血的觀察 做GS染色，鏡下形態(tài)的觀察 生化反應(yīng)

5、試驗： 1. 桿菌肽敏感試驗 2. CAMP試驗 3. Optochin試驗 4. 膽汁溶菌試驗 5. 菊糖發(fā)酵試驗 6. 小白鼠毒力試驗,17,.,細(xì)菌菌落形態(tài)及溶血的觀察 1.灰白色、圓形凸起、表面光滑、邊緣整齊的針 尖樣大小菌落，菌落周圍出現(xiàn)不同的溶血 2.根據(jù)血平板上的溶血情況分：,甲型():草綠色溶血環(huán),18,.,丙型():無溶血環(huán),乙型():透明溶血環(huán),19,.,細(xì)菌鏡下形態(tài)觀察,革蘭陽性球菌、圓形或卵圓形、成雙或呈鏈狀排列,肺炎鏈球菌成雙排列，細(xì)菌形似矛頭，周圍有空暈，此為莢膜。,20,.,生化反應(yīng),1.桿菌肽敏感試驗： 原理：A群化膿性鏈球菌對桿菌肽幾乎 100%敏感， 而其他

6、 鏈球菌對桿菌肽通常耐藥。故此試驗可對A群化膿性 鏈球菌進(jìn)行鑒別。 方法：挑取被檢的鏈球菌菌落，密集涂布于血瓊脂平板上， 將桿菌肽紙片貼于血瓊脂平板上，35孵育1824h 觀察結(jié)果(培養(yǎng)不需要放CO2)。 結(jié)果：在桿菌肽紙片周圍出現(xiàn)抑菌環(huán)為敏感， A群（+），其他群鏈球菌（-）,21,.,2.CAMP試驗： 原理：B群溶血性鏈球菌能產(chǎn)生“CAMP”因子，該物質(zhì)可促進(jìn) 金黃色葡萄球菌溶血素的活性，故在血瓊脂平板上兩 種細(xì)菌交界處溶血能力增強(qiáng)，形成箭頭狀透明那個溶血 區(qū)。,方法：在血平板上，用金 葡菌劃種一條橫 線， 再將被檢菌距金葡菌 接種線3mm處呈直角 接種一短線，35培 1824h觀察結(jié)果

7、。 結(jié)果：如圖,22,.,3.Optochin 敏感試驗： 原理：Optochin （乙基氫化羥基奎寧），能干擾肺炎鏈 球菌葉酸合成，抑制該菌的生長，故肺炎鏈球菌對 Optochin 敏感，而其它鏈球菌對其耐藥。 方法：挑取待檢菌密集劃線接種于血瓊脂平板上，貼放 Optochin紙片，35孵育1824h ，觀察 抑菌環(huán)。 結(jié)果：抑菌圈直徑14mm為敏感，肺炎鏈球菌（+） 抑菌圈直徑14mm時，參照膽汁溶菌試驗判斷是 肺炎鏈球菌還是甲型溶血性鏈球菌,23,.,4.膽汁溶菌試驗 原理：膽汁或膽鹽能活化肺炎鏈球菌的自溶酶，促進(jìn)細(xì)菌 細(xì)胞膜破損或菌體裂解而自溶。 方法（平板法）：在血瓊脂平板上選擇出待

8、檢的呈草綠色 溶血的菌落，觀察記錄菌落特點，然后于菌落上滴1 滴100g/L去氧膽酸鈉溶液，35孵育1530min 觀察 結(jié)果。 結(jié)果：菌落消失為陽性，菌落不消失為陰性。 肺炎鏈球菌（+）、甲型鏈球菌（-）,24,.,5.菊糖發(fā)酵試驗： 原理：各種細(xì)菌含有分解不同糖（醇、苷）類的酶，因 而對各種糖（醇、苷）類的代謝能力也各不相同， 即使能分解某種糖（醇、苷）類，其代謝產(chǎn)物可因 菌種而異。檢查細(xì)菌對培養(yǎng)基中所含糖（醇、苷） 降解后產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣的能力，可用以鑒定細(xì)菌種 類。方法：將待檢的細(xì)菌分別接種到菊糖培養(yǎng)基中，置35， 5%CO2條件下，孵育1824h觀察結(jié)果。 結(jié)果：能分解糖（醇、苷）產(chǎn)酸

9、的細(xì)菌，培養(yǎng)基中的指示 劑呈酸性反應(yīng)（如酚紅變?yōu)辄S色），不分解糖則無 變化。 肺炎鏈球菌（+）、甲型鏈球菌（-）,25,.,6.小白鼠毒力試驗： 原理：小白鼠對肺炎鏈球菌十分敏感，少量有莢膜的肺炎 鏈球菌可使小白鼠感染致死。 方法:將平板上的肺炎鏈球菌用無菌生理鹽水洗下，取0.1ml 注射于小白鼠腹腔，飼養(yǎng)12d，觀察小白鼠情況。 結(jié)果：若小白鼠在12d內(nèi)死亡為陽性，解剖腹膜印片、革 蘭染色法鏡檢可見革蘭陽性、有莢膜的雙球菌。,26,.,奈瑟氏菌屬,菌種：微黃奈瑟菌（代替腦膜炎奈瑟菌） 實驗?zāi)康模赫莆漳X膜炎奈瑟菌的形態(tài)和培養(yǎng)特性。 實驗內(nèi)容：1.培養(yǎng)特性和菌落觀察：營養(yǎng)要求高，接種血平 板或巧

10、克力平板，置35 ，5%CO2條件下， 孵育1824h觀察結(jié)果，可見圓形突起、光滑濕 潤、無色透明、邊緣整齊、似露滴狀 ，直徑 為23mm。 2. GS染色，形態(tài)觀察： G-雙球菌、腎形、成雙排列、凹面相對。 3.生化反應(yīng)： 氧化酶試驗。 4.淋病奈瑟菌示教片。 實驗器材：菌種、氧化酶試劑、濾紙片等,27,.,氧化酶試驗: 原理：某些細(xì)菌具有氧化酶，能將鹽酸二甲基對苯二胺 或（鹽酸四甲基對苯二胺）氧化成紫紅色（藍(lán)色）的醌類化合物。 方法：用濾紙條蘸取被檢菌落少許，用滴管吸取氧化酶試 劑，滴加于濾紙條菌落上，觀察顏色變化。 結(jié)果：陽性者立刻出現(xiàn)紅色(藍(lán)色)，繼而逐漸加深，陰性不變色。 腦膜炎奈瑟菌（+）,28,.,淋病奈瑟菌示教,革蘭染色陰性、腎形雙球菌，無芽胞無鞭毛。,29,.,總結(jié),球菌的鑒定程序,30,.,后面內(nèi)容直接刪除就行 資料可以編輯修改使用 資料可以編輯修改使用,31,.,主要經(jīng)營：網(wǎng)絡(luò)軟件設(shè)計、圖文設(shè)計制作、發(fā)布廣告等 公司秉著以優(yōu)質(zhì)的服務(wù)對待每一位客戶，做到讓客戶滿意！,32,.,致力于數(shù)據(jù)挖掘，合同簡歷、論文寫作、PPT設(shè)計、計劃書、策劃案、學(xué)習(xí)課件