淋巴細(xì)胞亞群與臨床ppt課件

1、.,1,淋巴細(xì)胞亞群免疫表型與臨床,2,.,主要內(nèi)容,概念 各類淋巴細(xì)胞的基礎(chǔ)知識(shí) 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)的臨床意義,3,.,一、概念,淋巴細(xì)胞 屬白細(xì)胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。 淋巴細(xì)胞的免疫表型 淋巴細(xì)胞的膜表面分子（分化群抗原 CD）可用于鑒定和區(qū)分其亞群和亞類，是研究淋巴細(xì)胞的重要工具。 淋巴細(xì)胞亞群 按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T細(xì)胞、B細(xì)胞和自然殺傷(NK)細(xì)胞。淋巴細(xì)胞的免疫表型 淋巴細(xì)胞的膜表面分子（分化群抗原 CD）可用于鑒定和區(qū)分其亞群和亞類，是研究淋巴細(xì)胞的重要工具。,4,.,淋巴亞群在外周血中的比例（%淋巴細(xì)胞）,T淋巴細(xì)胞 5

2、0-84% NK細(xì)胞 7-40% B淋巴細(xì)胞 5-18%,.,5,各類淋巴細(xì)胞的基礎(chǔ)知識(shí),.,6,T淋巴細(xì)胞,7,.,概念 來(lái)源于骨髓的淋巴樣干細(xì)胞，在胸腺中成熟的淋巴細(xì)胞，故稱胸腺依賴性淋巴細(xì)胞（thymus-dependentlymphocyte），簡(jiǎn)稱T細(xì)胞。 功能 負(fù)責(zé)細(xì)胞免疫功能，參與抗腫瘤、抗細(xì)胞內(nèi)感染微生物、移植排斥、遲發(fā)型超敏反應(yīng)；對(duì)部分體液免疫發(fā)揮輔助功能。 免疫表型：CD3，與TCR形成復(fù)合體，是T細(xì)胞識(shí)別抗原和轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)的主要單位。 CD3+/CD4+：輔助性T細(xì)胞 CD3+/CD8+：殺傷性T細(xì)胞,8,.,T淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育,T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育 T細(xì)胞在外周淋巴器官中

3、的分化發(fā)育,9,.,T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育,三個(gè)階段 雙陰性階段 (DN) 雙陽(yáng)性階段 (DP) 單陽(yáng)性階段 (SP) 三個(gè)重要事件 TCR基因重排 陽(yáng)性選擇 陰性選擇 三個(gè)重要結(jié)果 獲得功能性TCR 獲得MHC限制性 獲得自身耐受,10,.,11,.,T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育,初始T細(xì)胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依賴區(qū) T細(xì)胞在外周淋巴器官與抗原接觸后，最終分化為具有不同效應(yīng)功能的T細(xì)胞亞群，效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞。,12,.,T淋巴細(xì)胞亞群,按T細(xì)胞所處的活化階段 初始T細(xì)胞（naive T cell） 效應(yīng)T細(xì)胞（effector T cell） 記憶性T細(xì)胞（memory T

4、cell） 按TCR的表型分類 TCR + T細(xì)胞 TCR + T細(xì)胞,按T細(xì)胞的CD4和CD8分子表型 CD4+ T細(xì)胞 輔助T細(xì)胞 CD8+ T細(xì)胞 殺傷T細(xì)胞 按T細(xì)胞的功能分類 Th（help T cell） Tc/C TL（cytotoxic T cell） Tr（regulatory T cell）,13,.,初始T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞,初始T細(xì)胞 表型：CD45RA+、 CD62L+、CD25-（IL-2R） 特點(diǎn)：未接觸抗原的成熟T細(xì)胞，有分化潛能 效應(yīng)T細(xì)胞 表型： CD4+、CD8+ 遷往炎癥部位，執(zhí)行細(xì)胞免疫效應(yīng) 記憶性T細(xì)胞 表型：CD45RO+、CD25+（I

5、L-2R） 特點(diǎn)：存活期長(zhǎng)，再次接受抗原刺激后可迅速活化,14,.,TCRT細(xì)胞和TCRT細(xì)胞,TCRT細(xì)胞 數(shù)量少，占5 多為CD4CD8（DN細(xì)胞）；少數(shù)為CD8+ 分布于皮膚、粘膜參與固有免疫，是抗感染的第一線細(xì)胞 TCRT細(xì)胞 數(shù)量多，CD4+或CD8+（SP細(xì)胞） TCR識(shí)別譜廣，是參與免疫應(yīng)答的主要細(xì)胞群,15,.,16,.,Th、CTL、Ts和Treg細(xì)胞,輔助性T細(xì)胞（Th） 主要表面標(biāo)記：CD4CD8- 主要種類：TH1，TH2 功能：具有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答（促進(jìn)和抑制）的作用 細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL） 主要表面標(biāo)記：CD4-CD8+CD28+ 功能：特異性直

6、接殺傷靶細(xì)胞 殺傷機(jī)制： 釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細(xì)胞 通過(guò)Fasl介導(dǎo)靶細(xì)胞的凋亡,17,.,抑制性T細(xì)胞（Ts） 主要表面標(biāo)志：CD4-CD8+CD28- 功能：對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能，抑制性T細(xì)胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應(yīng)等疾病發(fā)生有關(guān)。 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg） 主要表面標(biāo)記：CD4+CD25+ 功能：抑制免疫應(yīng)答,.,18,小結(jié),.,19,NK淋巴細(xì)胞,20,.,NK細(xì)胞：一種大顆粒淋巴細(xì)胞。英文全稱為“natural killer cell”，也稱作“自然殺傷細(xì)胞”。 它是一種能直接殺傷靶細(xì)胞效應(yīng)的特殊的淋巴細(xì)胞系，具有抗腫瘤抗感染免疫調(diào)節(jié)的功能，且表現(xiàn)

7、為速發(fā)效應(yīng)。在醫(yī)學(xué)上被稱作是“人體抵抗癌細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的第一道防線”。,21,.,NK細(xì)胞的表型,NK細(xì)胞表面標(biāo)志物：CD3-/CD16+CD56+ 與T細(xì)胞、B細(xì)胞相比，NK細(xì)胞表面標(biāo)志的特異性是相對(duì)的。人NK細(xì)胞mIg-，部分NK細(xì)胞CD2、CD3和CD8陽(yáng)性，表達(dá)IL-2受體鏈（P75，CD122），CD11b/CD18陽(yáng)性。,22,.,細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞（CIK）,CIK（cytokine-induced Killer）細(xì)胞是由r-IFN、CD3-Ab、IL-1、IL-2等細(xì)胞因子在體外誘導(dǎo)并大量擴(kuò)增的具有殺傷腫瘤活性的細(xì)胞，是一種新型、高效、廣譜的免疫細(xì)胞，是目前最新的腫瘤免疫

8、治療手段。 CIK細(xì)胞：CD3+T細(xì)胞為主的異質(zhì)性細(xì)胞群體，同時(shí)表達(dá)CD3、CD56，兼CTL強(qiáng)大的抗瘤活性，和NK細(xì)胞非MHC限制性殺瘤特點(diǎn)，目前所知?dú)钚宰顝?qiáng)的免疫效應(yīng)細(xì)胞。,23,.,CIK的表型及起源： 表型： CD3+CD56+和CD3CD56兩個(gè)亞群，主要效應(yīng)細(xì)胞CD3+CD56+。 分布：優(yōu)先分布肝臟，CD3+CD56+占肝臟CD3細(xì)胞的1/3，其次外周血，占-5%。 來(lái)源：主要是CD3+CD56的T細(xì)胞，多數(shù)是CD4-CD8 + 及CD4-CD8-。,.,24,B淋巴細(xì)胞,25,.,B淋巴細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中的抗體產(chǎn)生細(xì)胞。 產(chǎn)生的抗體可與抗原起特異性的結(jié)合，如中和細(xì)菌的外毒素使

9、其失去毒性作用； 抗體與抗原結(jié)合后形成的復(fù)合物易被吞噬細(xì)胞清除； 抗體與抗原結(jié)合后再結(jié)合補(bǔ)體清除病原體。 B細(xì)胞特異性標(biāo)志物：CD19、CD20等 B淋巴細(xì)胞檢測(cè)時(shí)，多用CD3-CD19+來(lái)作為檢測(cè)標(biāo)志。,.,26,B細(xì)胞的亞群,周圍淋巴器官中的B細(xì)胞具有異質(zhì)性 可依據(jù)CD5是否表達(dá)分為B1和B2兩亞群,.,27,淋 巴 細(xì) 胞 亞 群 與 臨 床,.,28,淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)內(nèi)容,29,.,目前常做以下項(xiàng)目的檢測(cè),淋巴細(xì)胞亞群分析 T細(xì)胞亞群分析 T淋巴細(xì)胞（CD3+） 輔助T細(xì)胞(CD3+CD4+) 殺傷/抑制T細(xì)胞（CD3+CD8+) CD4+/CD8+的比值 B細(xì)胞(CD3+CD19+

10、) NK細(xì)胞(CD3-CD16+56+) 活化淋巴細(xì)胞的檢測(cè),30,.,TBNK檢測(cè)的適用人群,腫瘤病人化療過(guò)程中，抗癌藥物對(duì)同樣處于增殖狀態(tài)的、對(duì)腫瘤敏感的活化淋巴細(xì)胞也有殺傷作用，甚至免疫功能嚴(yán)重?fù)p毀。 活動(dòng)期的自身免疫病患者，必然表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值和活化淋巴細(xì)胞百分比的明顯異常。 懷疑有免疫缺陷的病人 器官移植患者術(shù)后監(jiān)測(cè)中更具有不可或缺的作用,.,31,淋巴細(xì)胞亞群的正常參考值（%淋巴細(xì)胞群）,32,.,33,.,NK細(xì)胞,CIK細(xì)胞,B細(xì)胞,.,34,淋巴細(xì)胞亞群的臨床意義,35,.,淋巴細(xì)胞亞群分析是檢測(cè)細(xì)胞免疫和體液免疫功能的重要指標(biāo)，它總體反映機(jī)體當(dāng)前的免疫功能、狀態(tài)和平

11、衡水平，并可以輔助診斷某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態(tài)反應(yīng)性疾病等），分析發(fā)病機(jī)制，觀察療效及檢測(cè)預(yù)后有重要意義 。 當(dāng)某種細(xì)胞亞群所占百分比過(guò)高或過(guò)低，都提示存在免疫功能紊亂，但一般情況下對(duì)疾病的診斷和鑒別無(wú)特異性。,36,.,淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定的結(jié)果解釋,T細(xì)胞異常 CD4細(xì)胞異常 CD8細(xì)胞異常 CD4/CD8比值異常 B細(xì)胞異常 NK細(xì)胞異常,37,.,總T、總B、NK細(xì)胞可以用來(lái)判斷某些免疫缺陷和自身免疫性疾病，也可以用于監(jiān)測(cè)移植后得免疫重建。,38,.,T細(xì)胞減少,見(jiàn)于先天性免疫缺陷?。ɡ鏒iGeorge綜合癥，胸腺發(fā)不發(fā)育） 以及腎臟和心臟移植后接受預(yù)防

12、排斥的免疫調(diào)節(jié)藥物OKT-3的患者 也常見(jiàn)于惡性腫瘤、自身免疫性疾?。⊿LE和RA等）、先天性免疫缺陷病、艾滋病、接受放療、化療或者使用腎上腺皮質(zhì)激素等免疫抑制劑資料的患者。,39,.,T細(xì)胞增多,見(jiàn)于慢性活動(dòng)性肝炎、重癥肌無(wú)力等自身免疫病活動(dòng)期,40,.,CD4淋巴細(xì)胞減少：見(jiàn)于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑患者。 CD4淋巴細(xì)胞增加：可能有過(guò)強(qiáng)的細(xì)胞免疫反應(yīng)；或某些免疫增強(qiáng)藥物的有效結(jié)果。 CD8淋巴細(xì)胞增多：見(jiàn)于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活動(dòng)性肝炎、腫瘤及病毒感染等。 CD8淋巴細(xì)胞減少：見(jiàn)于機(jī)體對(duì)各種病毒感染的免疫反應(yīng)；腫瘤患者具有抗腫瘤免疫反應(yīng)時(shí)

13、。 CD8細(xì)胞與CD4細(xì)胞同時(shí)減少：見(jiàn)于各種嚴(yán)重的免疫缺陷以及腫瘤患者晚期或免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p傷后。,41,.,CD4/CD8比值異常,CD4/CD82.5表明細(xì)胞免疫功能處于“過(guò)度活躍”狀態(tài)，容易出現(xiàn)自體免疫反應(yīng)，見(jiàn)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、I型糖尿病等。 CD4CD810稱為“免疫抑制”狀態(tài)，常見(jiàn)于（1）免疫缺陷病，如艾滋病時(shí)的比值常顯著小于0.5；（2）惡性腫瘤，當(dāng)發(fā)生癌轉(zhuǎn)移時(shí),CD3 、CD4 細(xì)胞數(shù)明顯減少的同時(shí)CD8 細(xì)胞數(shù)明顯增多,CD4/ CD8 比值明顯降低,提示惡性腫瘤患者晚期細(xì)胞免疫功能更低,預(yù)后更差 ；（3）再生障礙性貧血、白血??；（4）某些病毒感染；CD4/CD8降到1.0以下為

14、“倒置”,是較為明顯的異常；（5）用于器官移植后監(jiān)測(cè)機(jī)體的免疫狀態(tài)、用藥劑量的調(diào)整、抑制排斥反應(yīng)的發(fā)生。若移植后CD4/CD8較移植前明顯增加，則可能發(fā)生排斥反應(yīng)。比值持續(xù)減低表明移植后感染，若比值0.2時(shí)應(yīng)停用免疫抑制劑，以免繼發(fā)嚴(yán)重感染而導(dǎo)致移植失敗。 注意分清主要是CD8細(xì)胞增多還是CD4減少,42,.,B細(xì)胞的異常,B細(xì)胞明顯增加：見(jiàn)于淋巴組織增生失調(diào)（例如慢性淋巴細(xì)胞白血?。?，也見(jiàn)于病毒感染早期。 B細(xì)胞缺如：見(jiàn)于原發(fā)性B細(xì)胞缺陷?。ㄈ缧月?lián)無(wú)丙種球蛋白血癥）和重癥聯(lián)合免疫缺陷（T細(xì)胞同時(shí)缺如）；體液免疫功能不良者則減少；在生命垂危時(shí)可呈現(xiàn)極度減少,43,.,NK細(xì)胞異常,NK細(xì)胞增多：見(jiàn)于病毒感染，腫瘤早期患者（尚有抗腫瘤免疫反應(yīng)時(shí)） NK細(xì)胞減少：免疫功能低下，免疫抑制藥物使用后，腫瘤晚期,44,