不同滲透脅迫條件下脯氨酸含量的測(cè)定.ppt

1、實(shí)驗(yàn)9不同滲透脅迫條件下氨基酸含量的測(cè)定、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?、學(xué)會(huì)常用實(shí)驗(yàn)材料的培養(yǎng)和處理2 .掌握植物脯氨酸含量的測(cè)定方法3 .掌握常用實(shí)驗(yàn)儀器的使用操作，提高實(shí)驗(yàn)手的能力4 .了解學(xué)會(huì)文獻(xiàn)的查閱和整理、實(shí)驗(yàn)設(shè)施修訂的一般原則和方法步驟，熟悉自己的實(shí)驗(yàn)設(shè)施修訂能力實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和條件：實(shí)驗(yàn)內(nèi)容： 1、實(shí)驗(yàn)植物種子的處理和幼苗的培養(yǎng)2、不同滲透脅迫條件下的脅迫處理3、脯氨酸含量的測(cè)定。 條件： (使用儀器) 1、恒溫孵化機(jī)2、分光光度校正3、恒溫水族箱4、恒溫恒濕孵化機(jī)、方法步驟1、根據(jù)情況進(jìn)行實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組人數(shù)控制為34人，選定組長(zhǎng)2 .實(shí)驗(yàn)課題的選定、實(shí)驗(yàn)組分工、實(shí)驗(yàn)用品的領(lǐng)取、實(shí)驗(yàn)要求的記述3，

2、 各組實(shí)驗(yàn)的安排4 .實(shí)驗(yàn)工作(1)材料的選擇、培養(yǎng)和處理(2)脯氨酸含量的測(cè)定(3)實(shí)驗(yàn)課題的總結(jié)和實(shí)驗(yàn)報(bào)告。 實(shí)驗(yàn)提案課題(1)實(shí)驗(yàn)材料的選擇可以選擇不同的實(shí)驗(yàn)材料，但要求培養(yǎng)容易、容易獲得。 (2)滲透脅迫處理不同的滲透脅迫條件、脅迫時(shí)間對(duì)植物的脅迫處理；(3)不同的滲透脅迫條件對(duì)植物氨基甲酸積累的影響采用張志良的方法進(jìn)行。 脯氨酸含量的測(cè)定，實(shí)驗(yàn)原理植物受到滲透脅迫，引起性生理水資源短缺，植物體內(nèi)脯氨酸含量在一定程度上反映了植物內(nèi)的水分情況。 因此，其含量可作為植物水資源短缺的參考指標(biāo)。 酸性條件下茚三酮和氨基甲酸反應(yīng)生成紅色化合物。 其含量與色度成正比，因此可以用分光光度校正來(lái)測(cè)定。

3、 實(shí)驗(yàn)器材和試劑，1 .實(shí)驗(yàn)器材： 722型分光光度修訂，水浴釜，燒酒，移液器。 2 .實(shí)驗(yàn)試劑：冰冰乙酸、3%磺水楊酸類(lèi)、標(biāo)準(zhǔn)脯氨酸溶液、酸性茚三酮試劑。 實(shí)驗(yàn)步驟，1 .定標(biāo)曲線的曲線(1)在分析天平上準(zhǔn)確稱(chēng)取25mg脯氨酸，放入小的燒杯，用少量的蒸餾水溶解后，放入250ml的瓶子，加入蒸餾水定容至刻度，該參比溶液中每ml含有100g脯氨酸。 (2)系列脯氨酸濃度的調(diào)制，取6瓶50ml的容量瓶，分別加入脯氨酸原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0及6.0ml，用蒸餾水定容至刻度，橫搖，各瓶的脯氨酸濃度分別為2、4、6、8 (5)用注射器將各管上層的前置甲苯(紅色甲苯相)溶液輕輕地吸在比色杯中，以甲苯溶液為空白對(duì)照進(jìn)行對(duì)照，在520nm的波長(zhǎng)下進(jìn)行比色。 (6)定標(biāo)曲線圖：求出吸光率值(y )根據(jù)脯氨酸濃度(x )變化的回歸式后，利用回歸式繪制定標(biāo)曲線。實(shí)驗(yàn)步驟、1 .采集地上構(gòu)件0.5g后，加入3%磺水楊酸類(lèi)5ml進(jìn)行研磨，均化為離心管，在沸水中提取10分鐘，蒸發(fā)制冷至室溫后，以3000r/min離心10分鐘，采集上清液2ml，分別加入蒸餾水2ml，蒸發(fā)制冷后520nm 從定標(biāo)曲線中檢測(cè)出脯氨酸含量。 注意事項(xiàng)，1 .選擇實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，不要選擇生長(zhǎng)良好的葉子，不要選擇枯死的葉子。 此外，為了不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請(qǐng)勿選擇變黃、變紅的葉片。 2 .茚三酮是無(wú)色的，但與脯氨酸發(fā)生顯色