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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)一:使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、學(xué)會(huì)如何使用顯微鏡觀察細(xì)胞;2、了解細(xì)胞的結(jié)構(gòu);3、學(xué)會(huì)制作臨時(shí)裝片。二、實(shí)驗(yàn)原理1.人眼、光學(xué)顯微鏡以及電子顯微鏡成像原理、分辨率及其影響因素l 人眼自然界各種物體在光線的照射下,不同顏色可以反射出明暗不同的光線,這些光線透過角膜、晶狀體、玻璃體的折射,眼球中的角膜和晶狀體的共同作用,相當(dāng)于一個(gè)“凸透鏡”,在視網(wǎng)膜上形成倒立、縮小的實(shí)像,構(gòu)成光刺激。視網(wǎng)膜上的感光細(xì)胞(圓錐和桿狀細(xì)胞)受光的刺激后,經(jīng)過一系列的物理化學(xué)變化,轉(zhuǎn)換成神經(jīng)沖動(dòng),由視神經(jīng)傳入大腦層的視覺中樞,然后我們就能看見物體了,經(jīng)過大腦皮層的綜合分析,產(chǎn)生視覺,人就看清了正立
2、的立體像。人的眼睛是個(gè)復(fù)雜的成像系統(tǒng),而人的大腦像CPU處理這些圖像,讓人能在視覺上感知到圖像。人眼成像最主要的是晶狀體和視網(wǎng)膜。晶狀體調(diào)整眼睛的焦距是光束集中到富有視錐細(xì)胞和視柱細(xì)胞的視網(wǎng)膜上,在進(jìn)行光電(生物電)變化,由視覺神經(jīng)把信號(hào)傳至大腦生成圖像。人類的目標(biāo)就是能制造出能過可以和眼睛相媲美的視覺系統(tǒng),這是機(jī)器智能化的關(guān)鍵部分。說及人眼分辨率首先需要知道如下幾個(gè)概念:(1)視角:觀看物體時(shí),人眼對(duì)該物體所張的角度。(2)分辨角:人眼的分辨角:指剛能看出兩黑點(diǎn)時(shí),兩黑點(diǎn)對(duì)人眼的張角。(3)分辨力:人眼分辨圖像細(xì)節(jié)的能力稱為分辨力,可用分辨角來衡量,分辨角的倒數(shù)為分辨力。它也反映了人眼的視力
3、。分辨力還與照度及景物相對(duì)對(duì)比度有關(guān)。人眼分辨率指的是人眼能夠分辨兩個(gè)相鄰的點(diǎn)或者線的能力,通常以剛能被分開的兩點(diǎn)或兩線與眼睛瞳孔中心所成的張角表示。其最小分辨的距離在0.2mm左右。l 光學(xué)顯微鏡近代的光學(xué)顯微鏡通常采用兩級(jí)放大,分別由物鏡和目鏡完成。被觀察物體位于物鏡的前方,被物鏡作第一級(jí)放大后成一倒立的實(shí)象,然后此實(shí)像再被目鏡作第二級(jí)放大,成一虛象,人眼看到的就是虛像。而顯微鏡的總放大倍率就是物鏡放大倍率和目鏡放大倍率的乘積。放大倍率是指直線尺寸的放大比。光學(xué)顯微鏡最大分辨率200nm光學(xué)顯微鏡下觀察的結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)l 電子顯微鏡電子顯微鏡中有一個(gè)電子槍,電子在槍集束射出,正像光學(xué)顯
4、微鏡中利用光學(xué)透鏡的成像作用得到顯微的放大像一樣,在電子顯微鏡中用磁透鏡,使電子束會(huì)聚成像。我們把一片待觀察的物體,例如一片很薄的晶體,放在電子顯微鏡中,電子束就會(huì)射向這片物體上,在一塊熒光幕上就會(huì)得到一個(gè)放大的影像。如果在電子顯微鏡中用感光的底片代替熒幕的話就可以得到一張微觀世界的珍貴圖片。而一些特別好的電子顯微鏡,甚至可以觀察到一些巨分子的結(jié)構(gòu)! 電子顯微鏡分辨率0.2nm電子顯微鏡下觀察到的結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)三、四、材料用具顯微鏡、載玻片,蓋玻片、鑷子、刀片、毛筆、培養(yǎng)皿、碘液、清水、膠頭滴管、洋蔥、綠葉,永久裝片觀察洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片1. 擦片:用潔凈紗布將載玻片和蓋玻片擦拭干
5、凈;2. 滴水:在載玻片中央滴一滴清水(要適量,水滴太小容易產(chǎn)生氣泡或干涸,水滴太大容易溢出載玻片而污染顯微鏡);3. 取材、展平:用鑷子撕取一小塊洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮薄膜(可以用刀片縱橫劃數(shù)刀,形成0.5cm0.5cm大小的正方形),將撕下的薄膜放在載玻片中央的水滴中,并用鑷子展平;4. 蓋片:用鑷子夾起蓋玻片,輕輕蓋在表皮上。蓋時(shí),讓蓋玻片一邊先接觸載玻片上水滴的邊沿,然后慢慢放下,以免產(chǎn)生氣泡;5. 染色:在蓋玻片一側(cè)滴12滴碘液;6. 吸水:在蓋玻片另一側(cè)用吸水紙吸引碘液;(步驟16為裝片制作)7.觀察:參照顯微鏡使用;8.繪圖:先用鉛筆,根據(jù)觀察到的圖像(不能抄書,看到什么畫什么),輕輕
6、畫出輪廓。經(jīng)修改,再正式畫好,務(wù)必使圖形真實(shí)。圖中比較暗的地方,用鉛筆點(diǎn)上細(xì)點(diǎn)表示(越暗的地方細(xì)點(diǎn)越多,不能用陰影、涂黑表示暗處)。字盡量注在圖右側(cè),用尺引出水平指示線,然后注字;在圖下方寫上所畫圖形名稱。擦、滴、撕、展、蓋、染、吸觀察人口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片1.擦片:用潔凈紗布將載玻片和蓋玻片擦拭干凈;2.滴水:在載玻片中央滴一滴生理鹽水;3.取材:用牙簽在口腔內(nèi)側(cè)輕刮幾下(操作前請(qǐng)漱口),并將之涂抹在生理鹽水滴中;48步驟:參照制作洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片擦、滴、刮、涂、蓋、染、吸顯微鏡的使用取鏡、安放:a.打開顯微鏡箱,右手握鏡臂,左手托鏡座,把顯微鏡放在試驗(yàn)臺(tái)的前方偏左;對(duì) 光:b.安
7、裝好目鏡(10或16);c.轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)同光孔;d.轉(zhuǎn)動(dòng)遮光器,使最大光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔,左眼向目鏡內(nèi)注視(右眼也要睜開),同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使其朝向光源,使視野內(nèi)亮度均勻合適;低倍鏡觀察:e.將裝片放在載物臺(tái)上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對(duì)通光孔中心;f.轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒徐徐下降,同時(shí)兩眼從側(cè)面注視物鏡鏡頭,當(dāng)物鏡與玻片相距23mm時(shí)停止;g.用左眼向目鏡內(nèi)注視,并轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒徐徐上升,直到看清物象為止。若不清楚,可調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使物象更加清晰;收 鏡:h.轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,升高鏡筒,取出玻片;再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,把2個(gè)物鏡偏到兩旁(3個(gè)物鏡時(shí)低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔),將鏡筒下降至最
8、低,然后將顯微鏡放回顯微鏡箱。高倍物鏡的使用:使用高倍物鏡之前,必須先用低倍物鏡找到觀察的物象,并調(diào)到視野的正中央,然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器再換高倍鏡。換用高倍鏡后,視野內(nèi)亮度變暗,因此一般選用較大的光圈并使用反光鏡的凹面,然后調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。觀看的物體數(shù)目變少,但是體積變大。反光鏡的使用:反光鏡通常與遮光器(或光圈)配合使用,以調(diào)節(jié)視野內(nèi)的亮度。反光鏡有平面和凹面。對(duì)光時(shí),如果視野光線太強(qiáng),則使用反光鏡的平面,如果光線仍舊太強(qiáng),則同時(shí)使用較小的光圈;反之,如果視野內(nèi)光線較弱,則使用較大的光圈或使用反光鏡的凹面。相關(guān)重要知識(shí)1. 顯微鏡放大倍數(shù)=目鏡物鏡2. 顯微鏡放大的是長度或?qū)挾龋皇敲娣e3. 放
9、大倍數(shù)變大(即低倍鏡換高倍鏡):視野內(nèi)細(xì)胞數(shù)目減少,體積變大,視野變暗4. 目鏡越短,物鏡越長,物鏡與玻片距離越近,放大倍數(shù)越大5. 視野中污點(diǎn)判斷:轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡/物鏡,污點(diǎn)移動(dòng)則污點(diǎn)在目鏡/物鏡上;玻片移動(dòng),則污點(diǎn)移動(dòng)在玻片上;若以上操作污點(diǎn)均不移動(dòng),則污點(diǎn)在目鏡中央。6. 換上高倍鏡后禁止向下轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋僅供參考,繪圖不要照抄7. 氣泡辨別:氣泡往往有粗而黑的邊緣,形狀呈圓形或橢圓形,里面往往一片空白,用鑷子尖輕輕壓一下蓋玻片,氣泡就會(huì)變形和移動(dòng)。一般光學(xué)顯微鏡可能看不到葉綠體,細(xì)胞質(zhì)用稀疏的細(xì)點(diǎn)表示;細(xì)胞核用黑圈表示,其中用密集的細(xì)點(diǎn)填充。植物細(xì)胞人或動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)一:使用高倍顯微鏡觀察幾種
10、細(xì)胞1.制作人口腔上皮細(xì)胞的臨時(shí)裝片時(shí),在載玻片中央滴一滴0.9%的生理鹽水的作用是( ) A為細(xì)胞提供營養(yǎng) B避免細(xì)胞死亡 C保持細(xì)胞形態(tài)2用從洋蔥鱗片葉上撕下的表皮制成的玻片標(biāo)本叫 ( ) A.切片 B.裝片 C.涂片3在顯微鏡下觀察到的人口腔上皮細(xì)胞物像是 ( )A B C4右圖是某同學(xué)做的洋蔥表皮細(xì)胞裝片在顯微鏡視野中的圖解,圖中哪個(gè)結(jié)構(gòu)是氣泡?分析產(chǎn)生產(chǎn)生氣泡的原因是: ( ) Aa;沒有對(duì)光 Bb;沒有用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋Ca;蓋蓋玻片時(shí),沒按規(guī)定操作Db;蓋蓋玻片時(shí),沒按規(guī)定操作5用低倍鏡觀察某一細(xì)胞時(shí),如要換上高倍鏡觀察,首先需要調(diào)節(jié)( )A裝片的位置 B粗準(zhǔn)焦螺旋 C轉(zhuǎn)換器 D細(xì)準(zhǔn)焦
11、螺旋6用低倍鏡觀察根尖細(xì)胞分裂圖像時(shí),發(fā)現(xiàn)某分裂細(xì)胞處在視野的右上方,要把它移到視野中央,裝片移動(dòng)方向是( ) A左上方 B左下方 C右上方 D右下方7用顯微鏡觀察葫蘆蘚葉的裝片時(shí),為使視野內(nèi)看到的細(xì)胞數(shù)目最多,應(yīng)選用( ) A目鏡5 物鏡40 B.目鏡10 物鏡15C目鏡5 物鏡10 D目鏡10物鏡408一架光學(xué)顯微鏡的鏡盒里有4個(gè)鏡頭,甲、乙一端有螺紋,甲較長;丙、丁無螺紋,丙較長。若要在視野中看到較大的細(xì)胞,宜選用 A甲與丙 B甲與丁 C乙與丙 D乙與丁9換用高倍鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞時(shí),錯(cuò)誤的操作是( ) A調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋 B調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 C用凹面鏡 D轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器10用高倍鏡觀察沒有染色
12、的人的口腔上皮細(xì)胞時(shí),正確的操作是( ) 用平面鏡 用凹面鏡 縮小光圈 放大光圈A B. C. D. 11. 某學(xué)生在顯微鏡下觀察落花生子葉的切片,當(dāng)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí),有一部分細(xì)胞看得清晰,另一部分細(xì)胞較模糊,這是由于( ) A反光鏡未調(diào)節(jié)好B標(biāo)本切得厚薄不均C細(xì)準(zhǔn)焦螺旋未調(diào)節(jié)好D顯微鏡物鏡損壞12觀察玻片標(biāo)本時(shí),若發(fā)現(xiàn)視野上方較暗,下方較亮,應(yīng)調(diào)節(jié)( ) A目鏡 B物鏡 C光圈 D反光鏡13在普通光學(xué)顯微鏡下觀察水綿細(xì)胞,不易觀察到的結(jié)構(gòu)是( ) A細(xì)胞膜 B細(xì)胞壁 C葉綠體 D細(xì)胞核14用高倍鏡觀察葉的保衛(wèi)細(xì)胞和洋蔥細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)保衛(wèi)細(xì)胞特有( )A細(xì)胞壁 B細(xì)胞核 C紫色液泡 D葉綠體15用
13、顯微鏡觀察植物葉片細(xì)胞,低倍顯微鏡視野與高倍顯微鏡視野相比,其特點(diǎn)是()A亮,細(xì)胞數(shù)目多,形體小B暗,細(xì)胞數(shù)目多,形體小C亮,細(xì)胞數(shù)目多,形體大D暗,細(xì)胞數(shù)目多,形體大16在低倍鏡下觀察標(biāo)本時(shí)視野明亮,物像清晰,但換用高倍鏡后物像模糊,此時(shí)應(yīng)()A移動(dòng)裝片B調(diào)節(jié)反光鏡C用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)焦距D用粗準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)焦距17用顯微鏡觀察某標(biāo)本時(shí),已知目鏡的放大倍數(shù)為10,物鏡的放大倍數(shù)為40,則此顯微鏡的放大倍數(shù)為()A長度、寬度均放大400倍 B面積放大了400倍C長度或?qū)挾确糯?0倍 D標(biāo)本的體積放大400倍18下列關(guān)于高倍鏡使用的敘述中,正確的是()A因?yàn)樘μ\類的葉片大,在高倍鏡下容易找到,所以可
14、以直接使用高倍物鏡B在低倍鏡下找到葉肉細(xì)胞,即可換高倍物鏡C換高倍物鏡后,必須先用粗準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦,再用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)至物像最清晰D為了使高倍物鏡下的視野亮一些,可使用最大的光圈或凹面反光鏡19實(shí)驗(yàn)中用同一顯微鏡觀察了同一裝片4次,每次僅調(diào)整目鏡或物鏡、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,結(jié)果如圖所示。請(qǐng)問其中視野最暗的是()20下列有關(guān)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A在使用顯微鏡觀察細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中,若在50的視野中均勻分布有大小一致的20個(gè)細(xì)胞,則換用100后,視野中的細(xì)胞數(shù)目是5個(gè)B用顯微鏡觀察細(xì)胞,我們會(huì)發(fā)現(xiàn)原核細(xì)胞比真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡單,但體積差不多C顯微鏡所成的是倒像,“p”在顯微鏡下應(yīng)該是“b”D在顯微鏡下觀察透明材料時(shí),應(yīng)該增強(qiáng)光照,用較大的光圈21用顯微鏡的一個(gè)目鏡分別與4個(gè)不同倍數(shù)的物鏡組合來觀察血細(xì)胞涂片。當(dāng)成像清晰時(shí),每一物鏡與載玻片的距離如下圖所示,如果載玻片的位置不變,用哪一物鏡在一個(gè)視野中看到的細(xì)胞最多()Aa BbCc Dd22如圖所示:甲圖中表示目鏡,表示物鏡,表示物鏡與載玻片之間的距離,乙和丙分別表示不同物鏡下觀察
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