實(shí)驗(yàn)四線粒體和液泡系的超活染色與觀察.ppt

實(shí)驗(yàn)三：線粒體和液泡系的超活染色與觀察,【課前預(yù)習(xí)】 1什么是液泡系？ 2為什么不能用一種活體染料同時觀察多種細(xì)胞器？,【目的要求】 1. 觀察動植物活細(xì)胞內(nèi)線粒體、液泡系的形態(tài)、發(fā)育和分布 2. 了解細(xì)胞和細(xì)胞器的超活染色技術(shù),【基本原理】 線粒體是細(xì)胞內(nèi)一種重要細(xì)胞器，細(xì)胞的各項(xiàng)活動所需要的能量，主要是通過線粒體呼吸作用來提供的?；铙w染色是應(yīng)用無毒或毒性較小的染色劑真實(shí)地顯示活細(xì)胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)而又很少影響細(xì)胞生命活動的一種染色方法。詹納斯綠 B（Janus green B）是線垃體的專一性活細(xì)胞染色劑，毒性很小，屬于堿性染料，解離后帶正電，由電性吸引堆積在線粒體膜上。線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)呈藍(lán)綠色，從而使線粒體顯色，而在周圍的細(xì)胞質(zhì)中染料被還原，成為無色狀態(tài)。細(xì)胞中的線粒體呈藍(lán)綠色的顆粒。 中性紅對液泡系的染色具有專一性，將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色。,【實(shí)驗(yàn)用品】 1. 器材：顯微鏡、恒溫水浴鍋、剪刀、鑷子、解剖刀、載玻片、蓋玻片、吸管、牙簽、吸水紙 2. 試劑：Ringer液、1/5000詹納斯綠B、1/3000中性紅 3. 材料：人口腔上皮細(xì)胞、洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞、小麥（或綠豆）幼根根尖,【方法步驟】 1線粒體的超活染色與觀察 1）口腔上皮細(xì)胞線粒體的超活染色：1/5000詹納斯綠B1-2滴，口腔上皮細(xì)胞（牙簽刮?。?，載玻片于37恒溫染色10-15min，顯微鏡下觀察。 2）洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞線粒體的超活染色與觀察：1/5000詹納斯綠B溶液1-2滴，洋蔥鱗莖內(nèi)表皮，載玻片于37恒溫水浴染色10-15min，顯微鏡下觀察。 2小麥（或綠豆）幼根根尖液泡系的中性紅染色觀察 小麥（或綠豆）幼苗根尖（1-2cm）縱切面切片，1/3000中性紅溶液1滴染色5-10min，載玻片于37恒溫水浴，蓋上蓋玻片壓扁根尖，顯微鏡下觀察。,【方法步驟】 1線粒體的超活染色與觀察 1）口腔上皮細(xì)胞線粒體的超活染色：1/5000詹納斯綠B1-2滴，口腔上皮細(xì)胞（牙簽刮?。?，載玻片于37恒溫染色10-15min，顯微鏡下觀察。 2）洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞線粒體的超活染色與觀察：1/5000詹納斯綠B溶液1-2滴，洋蔥鱗莖內(nèi)表皮，載玻片于37恒溫水浴染色10-15min，顯微鏡下觀察。 2小麥（或綠豆）幼根根尖液泡系的中性紅染色觀察 小麥（或綠豆）幼苗根尖（1-2cm）縱切面切片，1/3000中性紅溶液1滴染色5-10min，載玻片于37恒溫水浴，蓋上蓋玻片壓扁根尖，顯微鏡下觀察。,【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】,【實(shí)驗(yàn)報