（特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)專(zhuān)業(yè)論文）蜂花粉中總黃酮的提取研究.pdf

福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文 蜂花粉中總黃酮提取的研究 中文摘要 本實(shí)驗(yàn)研究以茶花粉和油菜花粉為原料，進(jìn)行蜂花粉黃酮類(lèi)物質(zhì)的提取研 究，探討了溶劑濃度、提取溫度、提取時(shí)間、料液比、攪拌速度等因素對(duì)提取率 的影響，應(yīng)用正交試驗(yàn)和d p s 分析法，確定了蜂花粉黃酮類(lèi)物質(zhì)的最佳提取條 件：溫度6 5 * ( 2 、乙醇濃度6 5 、提取時(shí)間3 2h 、料液比6 ：1 、攪拌速度1 5 0 轉(zhuǎn)i n ， 在此最佳條件下，茶花粉的提取率為5 5 5 2 ；油菜花粉的提取率為4 8 6 8 ， 蜂花粉中的黃酮類(lèi)物質(zhì)是植物生長(zhǎng)過(guò)程中形成的一類(lèi)次生代謝產(chǎn)物，是花粉 中重要的生理活性物質(zhì)，通過(guò)對(duì)幾種檢測(cè)方法的比較，確定了比色法為蜂花粉總 黃酮的測(cè)定方法。其檢測(cè)波長(zhǎng)4 2 0n m ，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，在一定濃度范圍內(nèi)， 其濃度與吸光度呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r 為0 9 9 9 9 1 。穩(wěn)定性、精密度和 重現(xiàn)性均理想，該法檢測(cè)出的茶花粉乙醇提取物中平均總黃酮含量為3 0 2 8 ， 油菜蜂花粉乙醇提取物中平均總黃酮含量為3 3 6 2 。 關(guān)鍵詞：蜂花粉；總黃酮；提取工藝 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 s t u d y o nt h ee x t a c t i o no ft h et o t a l f l a v o no i d si nb e ep o l i o e e - r o l i e n a b s t r a c t h e r eu s eb e ep o l l e na n dr a pp o l l e na sm a t e r i a l ，r e s e a r c hi nb e ep o l l e n f l a v o n e c a t e g o r y s u b s t a n c e s e x t r a c t i n g ，a n d d i s c u s st h ei n f l u e n c eo f e l e m e n t ss u c ha ss o l v e n t d e n s i t y ,e x t r a c t i n gt e m p e r a t u r e a n d t i m e ，m e t e r i a la n dl i q u i dr a t e ，s t i rs p e e d ，e t c ，o ne x t r a c t i n gr a t e ，f i n dt h eb e s t c o n d i t i o n so fb e ep o l l e nf l a v o n ec a t e g o r ye x t r a c t i n gt h r o u g ho r t h o g o n a l e x p e r i m e n ta n dd p sa n a l y s i s ：t e m p e r a t u r e 一3 5 c ，e t h a n o ld e n s i t y 一6 5 ， e x t r a c t i n g t i m e 一32 h ，m a t e r i a la n d l i q u i d 一6 ：1 ，s t i rs p e e d - r e v m i n u n d e r t h i s ，t e ep o l l e ne x t r a c t i n gr a t ei s5 5 5 2 ，a sr a p e4 8 8 6 s t b s t a n c e so ff l a v o n ec a t e g o r yo fb e ep o l l e na r ek i n d so fs e c o n d o r y m e t a b o l i t i e si n p l a n t sg r o w t h ，t l l e y a r ei m p o r t a n th y s i o l o g i c a la c t i v e u b s t a n c e so fp o l l e n t h r o u g hc o m p a r i n gw i t ho t h e re x a m i n i n gw a y s ，w e m a k ec o l o rc o m p a r i n ga st h ew a yo fm a e s u r e i n gt h ep o l l e nt o t a lf l a v o n e i nb e ep o l l e n a n dt h ee x a m i n gw a v e l e n g t hi s4 2 0 n m ，i fu s er u t i na s s t a n d a r d ，u n d e rc e r t a i nd e n s i t yr a n g e ，t h ed e n s i t ya n da b s o r b e n c ya p p e a ra g o o d l i n e a r r e l a t i o n ，t h e r e l e t i v ec o e f f i c i e n ti s0 9 9 9 91 ，a n d s t a b i l i t y , p r e c i s i o n ，r e p e a t a b i l i t y a r es a t i s f i t i e d u n d e rt h i sc o n d i t i o n ，t h e a v e r a g e t o t a lf l a v o n ec o n t e n t i ne t h o n a le x t r a c t i n gs u b s t a n c e so fb e e p o l l e ni s3 0 2 8 ，a si nr a p ep o l l e ni s3 3 6 2 k e yw o r d s ：b e e p o l l e n ；t o t a lf l a v o n e ；e x t r a c t i n gt e c n o l o g y 獨(dú)創(chuàng)性聲明 本人聲明，所呈交的學(xué)位( 畢業(yè)) 論文，是本人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下獨(dú)立完 成的研究成果，并且是自己撰寫(xiě)的。盡我所知，除了文中作了標(biāo)注和致謝中已作 了答謝的地方外，論支中不包含其他人發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。與我一同對(duì)本 研究做出貢獻(xiàn)的同志，都在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意，如被查有侵犯 他人知識(shí)產(chǎn)權(quán)的行為，由本人承擔(dān)應(yīng)有的責(zé)任。 學(xué)位( 畢業(yè)) 論文作者親筆簽名：夏廣關(guān) 日期：勿彳哆 論文使用授權(quán)的說(shuō)明 本人完全了解福建農(nóng)林大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位( 畢業(yè)) 論文的規(guī)定，即學(xué) 校有權(quán)送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學(xué)校可以公布論文的全部或 部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。 一躲融嗍礬蚴靴嗶蚴敝儲(chǔ)糕攤：苓鼓醐昏t 習(xí) 指導(dǎo)教師親筆簽名：1 絳柬生 日期：五mp 、影 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 第一章引言 蜂花粉( p o ll e n ) 是蜜蜂采集花粉后用自己的唾液和花蜜粘合形成的顆粒。 我國(guó)早在神農(nóng)本草經(jīng)和本草綱目中就有花粉的相關(guān)記載和應(yīng)用。實(shí)踐證 明，蜂花粉能為人體提供各種營(yíng)養(yǎng)成分，為機(jī)體組織細(xì)胞的生長(zhǎng)和修復(fù)提供豐富 的原料。同時(shí)蜂花粉的生物活性物質(zhì)對(duì)機(jī)體的生理功能具有調(diào)節(jié)作用，幾乎對(duì)機(jī) 體各個(gè)器官都有保健作用【l l 。蜂花粉既是一種極好的天然營(yíng)養(yǎng)食品，同時(shí)也是 一種理想的滋補(bǔ)品【2 】，并具有一定的醫(yī)療保健功能【3 4 ，5 ，6 ?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究表 明，花粉具有降血脂【8 1 、抗輻射【9 j 、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能【1 0 l 、保護(hù)肝臟、治療前 列腺增生以及抗衰老等作用i n , 1 2 1 。 蜂花粉的化學(xué)成分復(fù)雜，其中含有黃酮類(lèi)、維生素激素、核酸、酶類(lèi)和微量 元素【1 3 1 ，蜂花粉含有豐富的黃酮類(lèi)化合物【1 5 l ，這類(lèi)化合物具有抗動(dòng)脈硬化、降 低膽固醇、防輻射等作用。所以在蜂花粉的諸多成分中，黃酮類(lèi)物質(zhì)和他們的生 物活性已經(jīng)成為研究的熱點(diǎn)。 黃酮類(lèi)化合物是一類(lèi)在自然界廣泛分布的多酚類(lèi)抗氧化劑。大量研究表明黃 酮類(lèi)化合物具有清除自由基、抗氧化、抗突變、抗腫瘤、抗菌、抗病毒和調(diào)節(jié)免 疫等功能 1 5 , 1 6 , 1 刀，其中最重要的是它的抗氧化活性。黃酮類(lèi)化合物在自然界中 多數(shù)以黃酮苷的形式存在，只有極少量的以游離黃酮苷元的形式存在【1 3 】。雖然 天然存在的游離黃酮苷元含量極少，但其表現(xiàn)出來(lái)的活性要比結(jié)合型的糖苷高很 多。黃酮苷元可以直接被吸收進(jìn)入動(dòng)物血液，大部分糖苷型的黃酮化合物在人體 內(nèi)不能通過(guò)小腸壁進(jìn)入到血液中，而是被腸腔內(nèi)微生物通過(guò)雜環(huán)裂解方式降解和 代謝，其中僅有小部分黃酮在結(jié)腸內(nèi)益生菌( 乳酸菌和雙歧桿菌) 分泌的水解酶的 作用下，產(chǎn)生苷元再重新吸收進(jìn)入血液。因此，黃酮苷在動(dòng)物體內(nèi)的生物利用率 遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于苷元型黃酮。研究表明，黃酮苷元清除人體氧自由基的生物活性明顯優(yōu) 于黃酮糖苷，黃酮苷元的效價(jià)是黃酮糖苷效價(jià)的7 倍【1 9 1 。 花粉中黃酮類(lèi)化合物是其重要的營(yíng)養(yǎng)成分之，而且含量豐富。目前從花粉 中發(fā)現(xiàn)的黃酮類(lèi)黃酮類(lèi)化合物有：黃酮醇、槲皮酮、山奈酚、楊梅黃酮，異鼠李 素、原花青素等。l e w i s 最早報(bào)道從花粉中提取出類(lèi)黃酮，以后日本的久道周次 和德國(guó)的威爾曼等都先后報(bào)道對(duì)多種花粉含黃酮類(lèi)檢測(cè)的結(jié)果。 本課題研究以茶花粉和油菜花粉為實(shí)驗(yàn)材料，主要探討蜂花粉黃酮類(lèi)物質(zhì)的 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 提取和總黃酮含量的測(cè)定。 第二章文獻(xiàn)綜述 2 1 蜂花粉的研究現(xiàn)狀 花粉是指被子植物和裸子植物的雄性配子，是雄性生殖細(xì)胞，是遺傳基因源， 擔(dān)負(fù)著植物遺傳的任務(wù)，擁有植物發(fā)育所需的全部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是植物生命之源， 蜜蜂采集回的花粉稱(chēng)之為“蜂花粉 。蜂花粉中除含有一般花粉的成分外，還含 有蜜蜂在采集時(shí)加入的少量的分泌物和花蜜，故此蜂花粉與一般的花粉的成分略 有不同。其外表也與粉末狀的花粉有所不同，。而是經(jīng)蜜蜂加工過(guò)的多為扁圓形、 上面帶有蜜蜂后肢嵌攜痕跡的花粉團(tuán)，富含包括黃酮等在內(nèi)的各種營(yíng)養(yǎng)成分，是 當(dāng)今世界最具營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的天然產(chǎn)物之一，在營(yíng)養(yǎng)、保健、化妝品、醫(yī)療等領(lǐng)域得 到廣泛的應(yīng)用。蜂花粉因植物種類(lèi)不同顆粒大小、色澤、成分也有所不同，對(duì)人 體的作用也有所不同。 近年來(lái)，蜂花粉的研究開(kāi)發(fā)利用在國(guó)內(nèi)外已廣泛地開(kāi)展，蜂花粉的藥食作用 也引起人們的廣泛關(guān)注重視。許多植物學(xué)家、營(yíng)養(yǎng)學(xué)家和醫(yī)藥工作者均很關(guān)注蜂 花粉的開(kāi)發(fā)利用研究。各自在自己的領(lǐng)域內(nèi)進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)工作，取得了滿(mǎn)意 的效果和寶貴的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)蜂花粉做出了高度的評(píng)價(jià)。在歐美一些國(guó)家中將蜂 花粉加工制成各種制劑，用于食用和藥用，歐洲稱(chēng)之為“完全營(yíng)養(yǎng)食品”；日本 的花粉研究者則認(rèn)為：任何植物性的食物營(yíng)養(yǎng)價(jià)值均難與蜂花粉抗衡，并稱(chēng)之為 “健康美容之源 。我國(guó)早在神農(nóng)本草經(jīng)中就有花粉的相關(guān)記載和應(yīng)用，并 將“蒲黃”列為上品，“無(wú)毒，久服輕身，益氣力延年”。在本草綱目中 記載松花即松花粉，“久服令輕身，令人收黃( 松花粉) 和白砂糖印為 餅膏，充果餅食之 ，具有“潤(rùn)心肺，益氣，除風(fēng)止血 之功效，在古今 秘苑中，記有李商隱的詩(shī)句“借問(wèn)健身何物好，無(wú)心搖落玉花黃”，玉花黃即 玉米的花粉，可見(jiàn)我國(guó)用花粉保健治療之早。世界上許多國(guó)家的人們?cè)谑秤没ǚ郏?并贊美花粉是永葆青春和健康的源泉。原蘇聯(lián)科學(xué)家調(diào)查蘇聯(lián)百歲以上的老人發(fā) 現(xiàn)，有1 5 0 位老人是以養(yǎng)蜂為業(yè)，常食蜂蜜殘?jiān)?，這些沉渣幾乎是純花粉，使之 長(zhǎng)壽。由于花粉的神奇功效，蜂花粉的開(kāi)發(fā)利用研究風(fēng)行于世界。歐美一些國(guó)家 興起花粉熱，利用花粉食品提高食品業(yè)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。我國(guó)也利用花粉作食品添加劑 和醫(yī)藥保健品，提高食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和防病治病。 2 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 蜂花粉幾乎含有人類(lèi)迄今發(fā)現(xiàn)的所以氨基酸，而且含量較高，部分以游離 態(tài)存在，可以被人體直接吸收利用。一個(gè)活動(dòng)量較強(qiáng)的成年人，每天食用大約 2 0 - - 一2 5 9 的蜂花粉便能滿(mǎn)足一天的氨基酸需要量。蜂花粉中所含有的碳水化合物 主要是：葡萄糖、果糖、蔗糖、半纖維素、纖維素等，這些都是人體的主要能源， 是人心臟、大腦等器官活動(dòng)不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。蜂花粉中類(lèi)脂含量較高，平均 含量為9 2 ；蜂花粉中所含脂類(lèi)中不飽和脂肪酸占6 0 , - - , 9 1 ，遠(yuǎn)比一些植物油 中的含量高，不飽和脂肪酸是人體不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有降低血中膽固醇和 甘油三酯，增強(qiáng)毛細(xì)血管通透性及促使動(dòng)物精子形成等特殊作用。蜂花粉是天然 的多種維生素濃縮庫(kù)，含量高、種類(lèi)全【2 i 】。浙江省醫(yī)學(xué)院胡欣等對(duì)我國(guó)1 1 個(gè) 地區(qū)1 4 個(gè)品種2 3 個(gè)樣品蜂花粉( 1 0 0 9 ) 的抗壞血酸含量進(jìn)行分析，結(jié)果抗壞血 酸含量在1 8 5 2 - - - , 9 2 8 0m g 之間。另?yè)?jù)報(bào)道，蜂花粉中還含有膽堿和肌醇，并且 含量較高。蜂花粉中還含有大量的生長(zhǎng)素和微量元素，它們對(duì)人體的生長(zhǎng)發(fā)育起 著極為重要的作用，生長(zhǎng)素是花粉重要的營(yíng)養(yǎng)成分之一【2 6 】，其中人生長(zhǎng)素是1 9 1 個(gè)氨基酸殘基組成的一條多肽鏈。此外，蜂花粉中還含有多種活性酶，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn) 的各種植物花粉中已有8 0 余種酶存在，其中主要是水解酶及轉(zhuǎn)化酶，如淀粉酶、 脂肪酶、蛋白酶、果膠酶、過(guò)氧化氫酶、細(xì)胞色素、氧化酶等，它們可以改善細(xì) 胞的氧化還原能力，激活酶的活性中心，防止細(xì)胞中酶自身的破壞，從而控制衰 老及某些疾病的發(fā)生。 蜂花粉中生物活性物質(zhì)的存在，對(duì)人體的代謝與物質(zhì)的合成，對(duì)中樞神經(jīng)系 統(tǒng)興奮性，對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)維持多種生理器官功能，都有著極為重要的調(diào)節(jié)作用 和廣泛的醫(yī)療效果。蜂花粉具有延緩衰老的作用，主要是作用在中樞神經(jīng)系統(tǒng)， 促使下丘腦和垂體增強(qiáng)活動(dòng)的能力，延長(zhǎng)活力時(shí)間。老年人服用蜂花粉可以刺激 下丘腦的神經(jīng)元，有利于本已疲勞或功能出現(xiàn)衰退的神經(jīng)組織得到恢復(fù)，從而減 緩了衰老進(jìn)度。國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家通過(guò)大量研究證實(shí)，蜂花粉有改善精神狀態(tài)和提高精 力、體力的作用。蜂花粉對(duì)腦的作用，主要是對(duì)腦細(xì)胞的發(fā)育提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)， 增強(qiáng)了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能和平衡調(diào)節(jié)，使得大腦和機(jī)體保持了旺盛的活力。蜂 花粉是前列腺疾病的克星，瑞典醫(yī)生首次采用蜂花粉治療前列腺炎，如今，日本、 德國(guó)等好多國(guó)家采用蜂花粉治療前列腺疾病，我國(guó)流行最廣泛的治療前列腺疾病 的特效藥“前列康 ，其主要成分就是蜂花粉。蜂花粉具有提高免疫能力和抗癌 3 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 作用，食用蜂花粉能刺激胸腺分泌，提高t 淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞數(shù)量和能力，從 而提高機(jī)體免疫能力，預(yù)防了各種疾病特別是腫瘤的發(fā)生。蜂花粉對(duì)治療貧血有 奇特的作用，蜂花粉有加速造血組織的修復(fù)和血細(xì)胞的新生，對(duì)保證造血組織的 功能的正常運(yùn)轉(zhuǎn)發(fā)揮著良好的功效。食用蜂花粉不但能增加食欲，而且能促進(jìn)消 化系統(tǒng)的消化吸收能力，增強(qiáng)消化系統(tǒng)功能。蜂花粉富含維生素p 和黃酮類(lèi)化合 物等，對(duì)增強(qiáng)毛細(xì)血管強(qiáng)度，防止毛細(xì)血管通透性障礙、腦溢血、視網(wǎng)膜出血、 高血壓等有良好的效果。蜂花粉的有效成分可以被皮膚直接吸收利用，改善皮膚 的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，促進(jìn)皮膚的新陳代謝能力，防止皮膚干燥，增加皮膚彈性，消除皺 紋，延緩衰老，具有美容的作用。此外，蜂花粉對(duì)女性更年期綜合癥等有一定的 作用，也是妊娠婦女的最佳營(yíng)養(yǎng)品，并可有效防止感冒【1 5 】。 2 1 1 蜂花粉的成分 蜂花粉之所以有很多神奇的功效，是因?yàn)槠涑煞窒喈?dāng)全面、復(fù)雜。各種蜂花 粉因植物來(lái)源不同，所含成分種類(lèi)及含量也不同。不同季節(jié)生產(chǎn)的蜂花粉其成分 及含量也有差異，但差異不大【2 7 】。一般蜂花粉所含營(yíng)養(yǎng)成分大致是：蛋白質(zhì)2 0 - - - , 2 5 ，碳水化合物4 0 - - - 5 0 ，脂肪5 1 0 ，礦物質(zhì)2 - - 一3 ，木質(zhì)素1 0 1 5 ， 未知物質(zhì)1 0 , - - - - 1 5 2 羽。 2 1 1 1 蛋白質(zhì)和氨基酸 人體的細(xì)胞及組織都由蛋白質(zhì)組成，約占人體干重的4 5 。促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育， 維持組織器官的正常功能和細(xì)胞的新陳代謝，主要是蛋白質(zhì)的作用。氨基酸是蛋 白質(zhì)的分解產(chǎn)物，也就是蛋白質(zhì)的基本構(gòu)成單位。人體與自然界中存在的蛋白質(zhì) 大約由2 0 多種氨基酸組成，其中亮氨酸等8 種人體自身不能合成，必須從食物 中攝取，故為必須氨基酸，人體缺乏任何一種都會(huì)帶來(lái)不良后果。 蜂花粉中幾乎含有人類(lèi)迄今發(fā)現(xiàn)的所有的氨基酸，油菜、芝麻、黨參花粉中 必須氨基酸總量在1 0 4 9 5 0 7m g g ，與動(dòng)物性食品牛肉、對(duì)蝦等含有9 2 5 3 5 m g g 相比無(wú)多大大差異，且部分以游離形式存在，能直接被人體所吸收。一 個(gè)活動(dòng)量較強(qiáng)的成年人，每日食用2 0 , - - - 2 5g 蜂花粉即可滿(mǎn)足全天的氨基酸消耗 量。蜂花粉中的氨基酸含量不但種類(lèi)多，很少有食物能與其相比，而且含量高， 比富含氨基酸的牛肉、雞蛋干酪高出5 - 7 倍。蜂花粉顯然比肉類(lèi)、蛋類(lèi)、奶類(lèi)、 小麥胚芽等良質(zhì)蛋白食品的含量高。同時(shí)，蜂花粉除含有含量較高的必需氨基酸 4 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 外，還含有酪氨酸與胱氨酸兩種“半必需氨基酸”。 2 1 1 2 碳水化合物 碳水化合物也稱(chēng)糖類(lèi)，由碳、氫、氧三種元素組成。蜂花粉中所含碳水化合 物，主要是葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、糊精、半纖維素、纖維素等。這些都是 人體的主要能源，是心臟、大腦等器官活動(dòng)不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，所以神經(jīng)組織 和細(xì)胞核中都少不了碳水化合物，作為生物遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的核酸也含有戊糖。 安爾莫西蘭1 9 7 7 年報(bào)道，蘇格蘭東南地區(qū)七種主要蜂花粉的平均總含糖量 約為蜂花粉干物質(zhì)的三分之一。來(lái)源不同的蜂花粉中碳水化合物的含量有所不 同，花粉中總糖量以杜鵑花科最高( 4 2 4 ) ，十字花科最低( 2 2 4 ) 。 2 1 1 3 脂類(lèi) 脂類(lèi)是脂肪和類(lèi)脂的總稱(chēng)。脂肪即甘油脂，作為能源存在皮下，當(dāng)機(jī)體過(guò)分 需要時(shí)會(huì)被動(dòng)用，故稱(chēng)為能源庫(kù)。類(lèi)脂主要包括磷脂、糖脂、固醇脂等。是人體 所有細(xì)胞膜的組成成分，對(duì)大腦的發(fā)育及整個(gè)神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育具有極為重要的作 用。蜂花粉中類(lèi)脂含量較高，平均含量9 2 ，其中皂化類(lèi)脂含量0 7 1 0 2 ， 非皂化類(lèi)脂含量0 8 - - 1 1 9 。蜂花粉中所含脂類(lèi)中不飽和脂肪酸占6 0 一 - 9 1 ， 遠(yuǎn)比其他動(dòng)植物油脂中的含量高。不飽和脂肪酸是人體不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有 使膽固醇酯化，降低血中膽固醇和甘油三酯，增強(qiáng)毛細(xì)血管通透性及促使動(dòng)物精 子形成等特殊作用。蜂花粉的可貴之處就在于，它含有豐富的類(lèi)脂。勒恩斯 坦第凡1 9 6 6 年報(bào)道，他在北美研究了蜜蜂采集的豆科、菊科、百合等十六種花 粉的類(lèi)脂成分。花粉經(jīng)乙醇?xì)溲趸浽砘?，用重量法測(cè)定可皂化和非皂化的類(lèi)脂 含量，結(jié)果表明，花粉中類(lèi)脂類(lèi)含量很高。 2 1 1 4 維生素【2 7 】 維生素是維持人體正常生理功能必需的一類(lèi)物質(zhì)，這類(lèi)化合物有十幾種，都 存在于天然食物中，極少數(shù)量就可以滿(mǎn)足機(jī)體維持正常的生理功能的需要，但絕 對(duì)不可以缺少任一種。當(dāng)膳食中維生素長(zhǎng)期缺乏或不足時(shí)，即可引起代謝紊亂出 現(xiàn)病理狀態(tài)，形成維生素缺乏癥。 蜂花粉是天然的多種維生素濃縮物，含量不十分高，但種類(lèi)十分全。浙江省 醫(yī)學(xué)院胡欣等人對(duì)我國(guó)1 1 個(gè)地區(qū)1 4 個(gè)品種2 3 個(gè)樣品蜂花粉( 1 0 0 9 ) 的抗壞血 酸含量進(jìn)行了分析，結(jié)果抗壞血酸含量在1 8 5 2 - - 9 2 8 0m g 范圍之間，平均值為。 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 5 7 4 1m g 。另?yè)?jù)報(bào)道，蜂花粉中還含有維生素b 族的另外兩個(gè)成員，膽堿和肌醇， 并且含量較高。據(jù)報(bào)道，每1 0 0g 玉米蜂花粉中含有膽堿6 9 0 7 3m g ，含有肌醇 3 0m g ，有的蜂花粉每1 0 0g 中肌醇含量高達(dá)9 0 0m g 。 維生素是維持人體正常生理功能必需的一類(lèi)物質(zhì)，這類(lèi)化合物有十幾種， 都存在于天然食物中，極少數(shù)量就可以滿(mǎn)足機(jī)體維持正常的生理功能的需要， 但絕對(duì)不可以缺少任一種。當(dāng)膳食中維生素長(zhǎng)期缺乏或不足時(shí)j 即可引起代謝 紊亂出現(xiàn)病理狀態(tài)，形成維生素缺乏癥。 2 1 1 5 生長(zhǎng)素【1 3 】 花粉含有豐富營(yíng)養(yǎng)成分，已有不少文獻(xiàn)報(bào)道，但花粉中含有生長(zhǎng)素的報(bào)道不 多，近期研究證明，花粉所含生長(zhǎng)素是其重要的營(yíng)養(yǎng)成分之一。人生長(zhǎng)素是1 9 1 個(gè)氨基酸殘基組成的一條多肽鏈。生長(zhǎng)素促進(jìn)生長(zhǎng)作用最顯著的是對(duì)骨、軟骨及 結(jié)締組織的影響，對(duì)代謝作用是增強(qiáng)肌肉對(duì)氨基酸的攝取，促進(jìn)蛋白質(zhì)、r n a 、 和d n a 的合成，并可以促進(jìn)脂肪轉(zhuǎn)化，增加血中游離脂肪酸量。王開(kāi)發(fā)1 9 9 1 年 利用激素放射免疫測(cè)定盒測(cè)定花粉中人生長(zhǎng)素的含量，不同種類(lèi)花粉的人生長(zhǎng)素 含量相差很大。 2 1 1 6 黃酮類(lèi) 蜂花粉含有豐富的黃酮類(lèi)化合物，這類(lèi)化合物具有抗動(dòng)脈硬化、降低膽固醇、 防輻射等作用。蜂花粉是由蜜蜂采集的植物花粉，而植物花粉含有種類(lèi)繁多的黃 酮類(lèi)物質(zhì)，所以蜂花粉中含有豐富的黃酮類(lèi)物質(zhì)【3 0 1 。在蜂花粉的諸多成分中， 黃酮類(lèi)物質(zhì)和他們的生物活性已經(jīng)成為研究的熱點(diǎn)，目的是為了以建立蜂花粉的 質(zhì)量參數(shù)【2 7 1 并評(píng)估他們的生物學(xué)的特性 3 2 , 3 3 1 。為進(jìn)一步對(duì)蜂花粉的研究提供依 據(jù)。任玉翠 3 0 l 等人對(duì)1 2 種花粉( 1 0 0g ) 進(jìn)行分析，得出油菜蜂花粉黃酮苷含 量高達(dá)2 2 7 6 4m g ，西瓜最低3 5 2 4m g ，總甾醇含量蕎麥最高6 2 2 2 0m g ，烏桕 最低5 1 4 4m g ，b 一谷甾醇，黨參最高3 6 4 7 4m g ，烏桕最低2 3 3 0m g 。不同的 花粉總黃酮含量差異很大，其中含總黃酮豐富的花粉為：板栗、茶花、蠶豆、飛 龍掌血、紫云英、蕓芥、胡桃等。 花粉中黃酮類(lèi)化合物是其重要的營(yíng)養(yǎng)成分之一，而且含量豐富。目前從花粉 中發(fā)現(xiàn)的黃酮類(lèi)黃酮類(lèi)化合物有：黃酮醇、槲皮酮、山奈酚、楊梅黃酮，異鼠李 素、原花青素等。l e w i s 最早報(bào)道從花粉中提取出類(lèi)黃酮，以后日本的久道周次。 6 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 和德國(guó)的威爾曼等都先后報(bào)道對(duì)多種花粉含黃酮類(lèi)檢測(cè)的結(jié)果。 2 1 1 7 其他物質(zhì) 蜂花粉中除含有鈣、磷、鉀、鈉、鎂、硫等外，還含有多種微量元素，對(duì)人 體保健和生長(zhǎng)發(fā)育有著重要的意義。蜂花粉中眾多生物活性物質(zhì)的存在，對(duì)加強(qiáng) 人體的代謝與物質(zhì)的合成，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性，對(duì)生長(zhǎng)與發(fā)育，對(duì)維持多種 生理器官功能，有著重要的調(diào)節(jié)作用和廣泛的醫(yī)療效能。 2 1 2 蜂花粉的性質(zhì) 由于植物種類(lèi)或采集季節(jié)的不同，各種蜂花粉的顏色也不同。蜂花粉是蜜蜂 從被子植物雄蕊花藥或裸子植物小孢子葉上小孢子囊內(nèi)采集的花粉粒，經(jīng)過(guò)蜜蜂 粘合制作成一個(gè)個(gè)的花粉團(tuán)，其團(tuán)粒大小基本一致，直徑為2 5 - 3 5 m m ，每個(gè) 干重l o - - 1 7 m g ，含水量在8 以下，比較好的蜂花粉團(tuán)粒齊整，品種純正，顏色 一致，無(wú)雜質(zhì)，無(wú)異味，無(wú)霉變，無(wú)蟲(chóng)跡，比較堅(jiān)硬。蜂花粉外壁是層堅(jiān)硬的殼， 具有抗酸、耐堿、抗微生物分解的特性，不經(jīng)破壁的蜂花粉只能從萌發(fā)孔中緩慢 釋放內(nèi)容物。新鮮蜂花粉具有特殊的辛香味，但味道也各有不同，有的味稍甜， 有的略苦澀。 2 。1 3 蜂花粉的作用 早在2 0 0 0 多年前我們的祖先就將花粉應(yīng)用于保健和醫(yī)療3 1 1 ，只因?yàn)樯a(chǎn)方 法落后等多種原因，直到1 9 7 9 年以后蜂花粉的加工利用及研究在我國(guó)才出現(xiàn)高 潮，在食品、醫(yī)藥保健、化妝品等方面取得了很大進(jìn)展【3 2 1 。 2 1 3 1 蜂花粉的延緩衰老作用【1 5 1 蜂花粉的抗衰老功效，主要是作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，促使下丘腦和各種垂體 增強(qiáng)活動(dòng)能力，延長(zhǎng)活力時(shí)間。老年人服用蜂花粉，可以刺激下丘腦的神經(jīng)元， 有利于本已疲勞或功能出現(xiàn)衰退的神經(jīng)組織得到恢復(fù)，從而減緩了衰老進(jìn)度。從 免疫學(xué)上講，隨著年齡的增長(zhǎng)，免疫系統(tǒng)也就隨之發(fā)生衰退，導(dǎo)致功能下降，機(jī) 體衰老，疾病纏身。而蜂花粉可以使胸腺增大，t 淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞增加，使 機(jī)體免疫功能增強(qiáng)，從而也就延緩了機(jī)體的衰老過(guò)程。蜂花粉中發(fā)揮如此作用的 主要成分是微量元素中的硒，硒能提高血液和組織中谷胱甘肽氧化酶的活性。催 化氧化脂質(zhì)分解，減少了氧化脂質(zhì)的形成和積累，這是延緩機(jī)體衰老的重要條件。 7 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文 蜂花粉中總黃酮提取的研究 2 1 3 2 蜂花粉的健腦強(qiáng)體作用 國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家通過(guò)大量研究證實(shí)，蜂花粉有改善精神狀態(tài)和提高精力、體力的 作用。蜂花粉對(duì)腦的作用主要是為腦細(xì)胞的發(fā)育提供了豐富的特有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，增 強(qiáng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能和平衡調(diào)節(jié)，使大腦和機(jī)體保持旺盛的活力。蜂花粉中的 維生素和氨基酸，有助于神經(jīng)衰弱和神經(jīng)抑郁及精神失?；颊弑M快恢復(fù)。 2 1 3 3 蜂花粉提高免疫能力和抗癌作用 人體內(nèi)有一個(gè)系統(tǒng)的免疫組織，由免疫器官和免疫細(xì)胞組成，發(fā)揮著防御機(jī) 體免遭細(xì)菌、病毒、腫瘤細(xì)胞侵害的作用。食用蜂花粉，能刺激胸腺分泌增加， 提高t 淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞數(shù)量和功能，也就大大提高了機(jī)體的免疫能力，從而 預(yù)防各種疾病特別是腫瘤的發(fā)生。蜂花粉還能提高人體血清免疫球蛋白i g g 水 平，起到促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，增強(qiáng)了抵御細(xì)菌、病毒的能力，還具有中和 毒素的功能。 蜂花粉還具有抑制腫瘤的作用，大量臨床與實(shí)踐早已做出證明。為了進(jìn)一步 證明這一點(diǎn)，杭州大學(xué)王維一教授對(duì)此作了進(jìn)一步的對(duì)比試驗(yàn)：選用一批健康的 小白鼠，全部接種上s 。艾氏腹水癌腫瘤細(xì)胞，其中l(wèi) o 只飼喂常規(guī)飼料作對(duì)照。 2 0 d 后處死全部小鼠，對(duì)其進(jìn)行分解，發(fā)現(xiàn)飼喂花粉組小鼠腫瘤重量平均為 5 4 4 9 ，而對(duì)照組則重達(dá)2 6 9 ，腫瘤塊之大為實(shí)驗(yàn)組的5 倍；喂食花粉的小鼠每 毫升腹水里有3 5 3 1 0 8 個(gè)腫瘤細(xì)胞，對(duì)照組則為1 3 3 9 x1 0 8 個(gè)腫瘤細(xì)胞，差異 非常明顯，證明花粉對(duì)腫瘤有較強(qiáng)的抑制作用。 2 1 3 4 蜂花粉對(duì)前列腺疾病的作用 前列腺疾病這種慢性病發(fā)病率比較高，治療也比較困難，治愈率偏低。然而， 蜂花粉的開(kāi)發(fā)應(yīng)用，為治療該病開(kāi)辟了一條新途徑，且療效顯著。瑞典醫(yī)生首次 采用蜂花粉治療前列腺炎，收到出乎預(yù)料的效果，接受治療的病人中，絕大部分 有顯效。如今，日本、德國(guó)等好多國(guó)家均采用蜂花粉治療前列腺疾病，我國(guó)流行 最廣泛的治療前列腺病特效藥“前列康，其主要成分就是蜂花粉。目前，醫(yī)療 界公認(rèn)蜂花粉是前列腺疾病的克星。 2 1 3 5 蜂花粉對(duì)造血功能的作用 蜂花粉對(duì)治療貧血有特效，早在2 0 世紀(jì)6 0 年代國(guó)外就有大量這方面的報(bào)道， 主要被用作治療缺鐵、缺維生素性貧血和障礙性貧血。研究報(bào)告證明，蜂花粉有。 8 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文 蜂花粉中總黃酮提取的研究 利于促使受創(chuàng)的骨髓盡快恢復(fù)功能，能加快造血組織的修復(fù)和血細(xì)胞的新生，對(duì) 保證造血功能的正常運(yùn)轉(zhuǎn)發(fā)揮著積極的良好作用。 2 1 3 6 蜂花粉對(duì)肝臟的作用【1 7 1 肝臟是人體的重要器官之一，發(fā)揮著排毒及合成某些營(yíng)養(yǎng)素的關(guān)鍵作用。蜂 花粉對(duì)肝臟細(xì)胞有良好的保護(hù)作用，對(duì)慢性肝炎造成的損傷有很好的治療效果。 醫(yī)學(xué)工作者在這方面進(jìn)行了大量的研究和實(shí)踐，收到了很好的效果?；ǚ壑械膯?糖有助于肝糖元的生成，而激素則對(duì)腎上腺皮質(zhì)起到刺激作用，從而對(duì)蛋白質(zhì)的 合成代謝產(chǎn)生積極的影響?；ǚ壑械腷 族維生素及銅、鎂、鋅等微量元素參與肝 臟多種酶的組成，并能激活酶的活性。酶是生物體新陳代謝的催化劑，酶的活性 低或失活，肝細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的過(guò)程則受到障礙。故此說(shuō)，花粉保護(hù)肝臟的作用 與花粉中含有的激素、維生素及多種微量元素有密切關(guān)系。 2 1 3 7 蜂花粉對(duì)心血管和消化系統(tǒng)的作用【1 5 】 蜂花粉富含維生素p 和黃酮類(lèi)化合物等，對(duì)增強(qiáng)毛細(xì)血管強(qiáng)度，防治毛細(xì)血 管通透性障礙、腦溢血、視網(wǎng)膜出血、高血壓、靜脈曲張等均有良好的效果。醫(yī) 生對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化患者給予蜂花粉治療，發(fā)現(xiàn)患者血清總膽固醇、游離脂肪酸、 甘油三酯、b 一脂蛋白和白蛋白等均有明顯下降，頭疼、心絞痛等癥狀普遍好轉(zhuǎn)。 食用蜂花粉不但能增加食欲，而且能促進(jìn)消化系統(tǒng)對(duì)食物的消化吸收，還起到增 強(qiáng)消化系統(tǒng)功能的作用。 2 1 3 8 蜂花粉的美容作用 蜂花粉被譽(yù)為可以食用的“美容劑”，服用蜂花粉一段時(shí)間，人的容面會(huì)煥 發(fā)出光彩和暈澤。這一事實(shí)有力地證實(shí)了蜂花粉的美容作用是非常的理想。這是 因?yàn)?，蜂花粉的有效成分可以被皮膚直接吸收，它能改善皮膚的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，促進(jìn) 皮膚的新陳代謝，防止皮膚干燥脫屑，增加了皮膚的彈性，從而有力消除皺紋， 延緩衰老和皺裂。 2 1 3 9 蜂花粉免疫增強(qiáng)作用 大量實(shí)驗(yàn)研究表明，花粉能促進(jìn)脾臟、骨髓、淋巴結(jié)和胸腺免疫器官的發(fā)育， 增強(qiáng)免疫細(xì)胞的活性，提高機(jī)體的免疫功能，并有抗輻射、抗癌作用。同濟(jì)大學(xué) 花粉應(yīng)用研究中心王開(kāi)發(fā)教授等花粉對(duì)機(jī)體免疫功能影響的研究項(xiàng)目通過(guò)六 種花粉對(duì)二百多只大小鼠的免疫功能試驗(yàn)，測(cè)定了體重、胸腺、脾重、n k 細(xì)胞 9 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文 蜂花粉中總黃酮提取的研究 活性，巨噬細(xì)胞功能，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，脾臟空斑溶血試驗(yàn)，外周血免疫球蛋白， 外周血補(bǔ)體活性，白細(xì)胞，胸腺形態(tài)以及腹腔細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶、花粉對(duì)放療癌 癥患者免疫力功能效果臨床觀(guān)察，運(yùn)動(dòng)員服用花粉對(duì)血清免疫球蛋白變化等研 究，其結(jié)果表明花粉具有促進(jìn) 2 1 3 1 0 蜂花粉的其他保健作用 除以上作用外，蜂花粉對(duì)婦女更年期綜合癥和月經(jīng)不調(diào)有奇效，也是妊娠婦 女的最佳天然營(yíng)養(yǎng)品，并可有效地預(yù)防感冒，尤其對(duì)流感預(yù)防效果更佳。 2 1 4 蜂花粉的應(yīng)用 早在兩千多年前我們的祖先就開(kāi)始將花粉應(yīng)用于保健和醫(yī)療領(lǐng)域，但由于生 產(chǎn)方法落后等諸多因素，知道最近幾十年，蜂花粉的加工利用研究在我國(guó)才出現(xiàn) 高潮，在食品、藥品和化妝品等方面取得了較大的應(yīng)用進(jìn)展。 2 1 4 1 蜂花粉在食品工業(yè)上的應(yīng)用 蜂花粉是一種能食用的美容食品，其服用方式很多，最簡(jiǎn)單的方法是將蜂花 粉、蜂蜜等混合后食用，或者將蜂花粉干燥后直接食用，近年來(lái)我國(guó)的蜂花粉食 品種類(lèi)繁多，如花粉口服液、巧克力花粉果、花粉晶以及花粉飲料等。 蜂花粉發(fā)酵后，可以提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的利用效果，同時(shí)起到脫敏的作用，故 此食用經(jīng)發(fā)酵處理后的蜂花粉制品比未經(jīng)處理的更為有益。 2 1 4 2 蜂花粉在醫(yī)藥行業(yè)的應(yīng)用 近年來(lái)，蜂花粉制品在臨床上被廣泛運(yùn)用，蜂花粉氣味甘平無(wú)毒，主治心腹 寒熱，利尿、消淤血，久服輕身益氣，延年益壽。 蜂花粉可以治療慢性前列腺炎，以蜂花粉為主要原料的“前列康 被醫(yī)學(xué)界 稱(chēng)為前列腺炎的“克星 。蜂花粉對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)也有明顯的作用，它能促進(jìn)腦細(xì)胞 的發(fā)育，增強(qiáng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能因此蜂花粉可促進(jìn)兒童的智力發(fā)育，用蜂花粉 治療智力低下的兒童取得良好效果。 2 1 4 3 蜂花粉在化妝品行業(yè)的運(yùn)用 蜂花粉被譽(yù)為可以食用的美容劑，是極佳的營(yíng)養(yǎng)型天然美容食品，對(duì)皮膚無(wú) 毒副作用。蜂花粉中含有豐富的能被皮膚直接吸收的氨基酸和皮膚所需的維生 素、活性酶和激素，對(duì)改善皮膚狀態(tài)，延長(zhǎng)青春期有明顯的作用效果。目前以蜂 花粉為主要成分的化妝品有花粉雪花膏、花粉香粉、花粉生發(fā)水、花粉美容霜等。 1 0 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 2 1 4 4 蜂花粉在畜牧業(yè)上的運(yùn)用【1 8 】 蘇聯(lián)愛(ài)沙尼亞農(nóng)學(xué)院畜牧系a 維博等研究了蜂花粉對(duì)初生牛犢和仔豬病原 體微生物的殺傷效果，結(jié)果表明：葡萄球菌，大腸桿菌對(duì)蜂花粉敏感，鏈球菌和 腸道球菌對(duì)蜂花粉的敏感率分別是6 6 6 和5 8 3 ，用蜂花粉補(bǔ)充飼喂籠養(yǎng)的毛 皮獸，能促進(jìn)它們的生長(zhǎng)發(fā)育，加強(qiáng)再生能力，能提高家禽的產(chǎn)蛋量和種蛋的受 精率，提高斷奶牛犢血液中的血紅素和蛋白質(zhì)含量。同時(shí)還表明補(bǔ)充飼喂蜂花粉 能有效防止斷奶奶牛牛犢的某些疾病。因此用蜂花粉飼喂畜禽是一種理想的強(qiáng)壯 劑和抗菌劑。同時(shí)，蜂花粉富含多種游離氨基酸和豐富的維生素、礦物質(zhì)、酶等 生物活性物質(zhì)，將它作為家禽的飼料添加劑可以促進(jìn)家禽的生長(zhǎng)發(fā)育。 2 2 黃酮類(lèi)化合物的概述 2 2 1 黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)及結(jié)構(gòu) 黃酮類(lèi)化合物是具有兩個(gè)苯環(huán)( a 環(huán)和b 環(huán)) 通過(guò)三碳鏈相互連接，具有 c 。一c 。飛基本骨架的一大類(lèi)化合物( 見(jiàn)圖1 ) ，廣泛分布于植物界。其結(jié)構(gòu)類(lèi)型根 據(jù)三碳鏈氧化程度，b 環(huán)( 苯基) 連接位置( 2 位或3 位) 以及三碳鏈?zhǔn)欠癯森h(huán)狀等 特點(diǎn)，分為黃酮類(lèi)、黃酮醇類(lèi)、二氫黃酮類(lèi)、二氫黃酮醇類(lèi)、黃烷- 3 - 醇類(lèi)、異 黃酮類(lèi)、二氫異黃酮類(lèi)、查爾酮類(lèi)、花色素類(lèi)、黃烷- 3 ，4 - - - 醇類(lèi)、雙苯吡酮類(lèi)、 二氫查爾酮類(lèi)、橙酮類(lèi)。一些黃酮類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)上的- o h 與糖苷元結(jié)合生成黃酮 苷。d 然存在的黃酮類(lèi)化合物多以糖苷形式存在，組成黃酮苷類(lèi)的單糖類(lèi)有d 一 葡萄糖、d 一半乳糖、d 一木糖、l - 鼠李糖、l 一阿拉伯糖以及d 一葡萄糖醛酸等，雙 糖和三糖類(lèi)有蕓香糖、龍膽二糖、龍膽三糖、槐三糖等，并在a 環(huán)和b 環(huán)有不同 程度的羥基化及甲氧基化。 2 2 2 蜂花粉黃酮 7 6 54 4 圖1 黃酮類(lèi)化合物的基本結(jié)構(gòu)( c 。- c 。- c 。) f i g 1b a s i cs t r u c t u r eo ff l a v o n o i d s 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文 蜂花粉中總黃酮提取的研究 蜂花粉中的黃酮類(lèi)物質(zhì)是植物生長(zhǎng)過(guò)程中形成的一類(lèi)次生代謝產(chǎn)物，是花粉 中重要的生理活性物質(zhì)，包括十幾種糖苷及配糖體，具有良好的保健、藥用功效， 但是蜂花粉黃酮的研究還處于相當(dāng)滯后的狀態(tài)，對(duì)于花粉黃酮的檢測(cè)有為數(shù)不多 的報(bào)道，但蜂花粉總黃酮的檢測(cè)方法并無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。此外，對(duì)于蜂花粉黃酮的提 取、精制工藝的研究更是少之又少，在國(guó)內(nèi)外基本上為空白。聚酞胺柱層析對(duì)各 種黃酮類(lèi)化合物有較好的分離效果，可用于分離各種類(lèi)型的黃酮類(lèi)化合物，廣泛 應(yīng)用于石油化工、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域，資料顯示。聚酞胺柱層析對(duì)各種 黃酮類(lèi)化合物有較好的分離效果，可用于分離各種類(lèi)型的黃酮類(lèi)化合物，包括昔 及曹元、查耳酮與二氫黃酮等。鄒淑仙1 3 。7 】采用聚酞胺柱色譜從膿瘡草提取物中 分離出六種黃酮類(lèi)化合物。李勇軍等【3 8 】采用硅膠和聚酞胺柱層析進(jìn)行分離，從 頭花寥中分離出了棚皮素、棚皮昔、陸地棉營(yíng)、棚皮素一3 一鼠李糖普。王怡【3 9 】采 用改性聚酞胺層析柱分離了銀杏黃酮，但未見(jiàn)將聚酞胺柱層析法用于分離純化蜂 花粉黃酮的報(bào)道。 蜂花粉一直被作為人類(lèi)保健品使用，其效果也被廣泛認(rèn)可。在復(fù)雜的生物化 學(xué)反應(yīng)過(guò)程中，黃酮類(lèi)化合物的自身氧化而使其據(jù)有較強(qiáng)的抗氧化性，黃酮類(lèi)化 合物對(duì)于羥基自由基有較好的消除作用而能延緩人體衰老。黃酮類(lèi)化合物的生理 作用具有多樣性及其保健作用，使花粉越來(lái)越受到人們的青睞。早在2 0 世紀(jì)9 0 年代，德國(guó)聯(lián)邦衛(wèi)生局已將花粉列為藥品。蜂花粉的治療特性使它被廣泛應(yīng)用， 因此蜂花粉提取物被用于慢性前列腺炎，因?yàn)槠渚哂锌寡缀涂剐奂に刈饔?。蘆丁 是花粉黃酮中最豐富的成分，因?yàn)樘J丁可以減少毛細(xì)血管的脆性，所以蜂花粉也 具有該特性。 2 2 2 1 抗氧化、清除自由基 d u d o v ，ia 【4 0 】給小鼠攝入蜂花粉之后降低了紅血球中脂肪的氧化產(chǎn)物的水 平，這表明蜂花粉具有抗氧化的作用。m a r i ag ( 2 0 0 3 ) 研究了蜂花粉中的黃酮 類(lèi)成分在自由基清除中所起到的作用，在花粉或蜂花粉的清除自由基能力中酚或 類(lèi)黃酮組分從中起到了非常重要的作用，表現(xiàn)出最高活力的花粉往往就是那些含 有高水平的類(lèi)黃酮和酚酸衍生物的種類(lèi)【4 。 用比色法和化學(xué)發(fā)光法研究了玉米黃酮的抗氧化作用。結(jié)果表明，玉米花粉 黃酮類(lèi)物質(zhì)濃度在0 0 0 5m g m l 開(kāi)始對(duì)經(jīng)自由基( o h - ) 一有清除作用，并隨濃度 1 2 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 的增加而加強(qiáng)，濃度從0 0 0 1m g i i l l 起，對(duì)超氧陰離子自由基( o h ) 有清除作 用，其作用也隨濃度增加而加強(qiáng)。研究表明玉米花粉黃酮類(lèi)物質(zhì)有良好的抗氧化 作用。曹煒【4 2 】以1 ，6 一二苯基一1 ，3 ，5 一已三烯( ( 講砌為熒光探針，超氧陰離子自由 基和輕基自由基致鼠紅細(xì)胞膜氧化損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，分別研究了油菜花粉黃酮、茶 葉花粉黃酮對(duì)鼠紅細(xì)胞膜氧化損傷的影響。實(shí)驗(yàn)證明超氧陰離子自由基和輕基自 由基均能引起鼠紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛( m d a ) 含量顯 著升高，膜脂流動(dòng)性下降。將鼠紅細(xì)胞膜預(yù)先用油菜花粉黃酮處理后，膜脂的 m d a 含量明顯下降，呈現(xiàn)劑量與效應(yīng)關(guān)系，膜脂流動(dòng)性顯著提高，結(jié)果表明油菜 花粉黃酮、茶葉花粉黃酮對(duì)超氧陰離子自由基和t l 基自由基引起的鼠紅細(xì)胞膜 的氧化損傷有保護(hù)作用。研究表明，黃酮類(lèi)化合物清除自由基和抗氧化的作用機(jī) 理在于它阻止了自由基在體內(nèi)產(chǎn)生的3 個(gè)階段：即與o 。反應(yīng)阻止自由基引發(fā)：與 金屬離子鰲合阻止o h - 生成：與脂質(zhì)過(guò)氧自由基( r 0 0 ) 反應(yīng)阻止脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程。 黃酮類(lèi)化合物的抗氧化性質(zhì)主要與黃酮了物質(zhì)的機(jī)構(gòu)、酚羥基取代基的位置和數(shù) 目、羥基成苷等有關(guān)： 研究表明，黃酮為酚酸類(lèi)化合物，在某些金屬離子存在的條件下，其結(jié)構(gòu)極 易被氧化，所以具有很強(qiáng)的抗氧化活性，能保護(hù)細(xì)胞膜上的非飽和脂肪酸 ( u n s a t u r a t e df a t t ya c i d s ，u f a s ) 免于氧化【4 3 】。生物體內(nèi)的含氧自由基包括超 氧陰離子自由基( 0 。) 、羥基自由基( o h ) 和脂質(zhì)過(guò)氧化自由基( r 0 0 ) m 】。此 類(lèi)自由基可與體內(nèi)大量生命所必需的分子( 如核酸、蛋白質(zhì)) 相互作用從而對(duì)后者 產(chǎn)生毒害作用【4 5 】。類(lèi)黃酮作為非常強(qiáng)的自由基消除劑以及單線(xiàn)態(tài)氧消除劑，可 抑制脂質(zhì)的過(guò)氧化作用。而且，類(lèi)黃酮與過(guò)氧化自由基相反應(yīng)，還終止了自由基 反應(yīng)的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。b o m b a r d e l l i 和m o r a z z o n i 4 6 1 觀(guān)察到，當(dāng)一種多不飽和脂肪酸 產(chǎn)生自動(dòng)氧化時(shí)，類(lèi)黃酮主要通過(guò)金屬鰲合活性等顯出它們的抗氧化作用。 黃酮類(lèi)化合物的抗氧化機(jī)理有兩大類(lèi)：一類(lèi)是絡(luò)合具有促氧化作用的金屬離 子，另一類(lèi)是清除自由基【4 7 l 。其機(jī)理又和結(jié)構(gòu)( 酚羥基位置、數(shù)目、取代模式等) 密切相關(guān)，特別是羥基的結(jié)構(gòu)【耜1 。 黃酮類(lèi)化合物是具有多羥基的化合物，研究表明；分子中的酚羥基數(shù)目越多， 則與活性自由基結(jié)合的氫原子數(shù)目也就越多，其抗氧化能力也越強(qiáng)，如楊梅素羥 基自由基清除率為5 0 ，而山柰酚僅為2 0 ，但當(dāng)b 環(huán)酚羥基數(shù)目增加到一定的量 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文蜂花粉中總黃酮提取的研究 時(shí)，抗氧化活性不再隨酚羥基數(shù)目的增加而增大【4 9 】。張英等用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定 出b 環(huán)上的3 ，4 一鄰苯二酚結(jié)構(gòu)是清除羥自由基的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，其中4 羥基尤為 重要。當(dāng)b 環(huán)無(wú)取代基存在時(shí)，a 環(huán)上的鄰二羥基同樣具有抗氧化活性。同時(shí)，a 環(huán)上的5 、7 位羥基有利于抗氧化活性，可與金屬離子絡(luò)合，7 位羥基在4 羥基存 在時(shí)可以提高抗氧活性。 研究發(fā)現(xiàn)羥基成苷后，影響了自由基中間體的穩(wěn)定性，從而使抗氧化活性有 了顯著差異。如蘆丁和槲皮素，由于蘆丁3 一o h 被蕓香糖苷化，其抗氧化活性比 其苷元槲皮素低得多；大豆異黃酮苷只有微弱的抗氧化活性，而當(dāng)用酶解的方法 使大豆苷元游離出來(lái)時(shí)，其抗氧化能力可與丁基羥基茴香醚( b h a ) 相匹敵【拍j 。 r i c e 指出黃酮化合物c 環(huán)的3 - o h 是很重要的結(jié)構(gòu)，與相應(yīng)的苷元相比，黃 酮3 - o h 的糖基化將減小它的抗氧化活性【5 1 】。龍春比較了槲皮素、木犀草素、蘆 丁和紫杉葉素的t e a c 值( 抗氧化性值) ，得出結(jié)論：槲皮素 蘆丁 木犀草素 紫杉 葉素，證明c 環(huán)中3 一o h 和相鄰雙鍵的結(jié)合具有較高的抗氧化活性。少了3 位羥 基相連的雙鍵或是少了雙鍵的3 - o h 都將在很大程度上失去其抗氧化活性【5 2 1 。胡 春比較了蘆丁、槲皮素、桑色素、橙皮苷在不同體系中的抗氧化作用。這幾種黃 酮抑制豬油過(guò)氧化的能力為：槲皮素 桑色素 蘆丁橙皮苷。提出酚羥基苷化 后尤其7 一o h 糖苷化不利于其清除自由基活性，并且推測(cè)在阻止油脂自動(dòng)氧化中， 3 一o h 和4 一羰基可能起著更重要的作用，同時(shí)提出黃酮體中的有效酚羥基為3 一o h 、 5 一o h 、4 一羰基和b 環(huán)鄰- - - o h ( 即3 ，4 一二羥基) 【5 3 1 。沈建福等研究了竹葉黃 酮糖苷的水解及其苷元的抗氧化性，結(jié)果表明，竹葉黃酮糖苷經(jīng)水解脫糖基成為 黃酮苷元后，其抗氧化性增強(qiáng)。竹葉黃酮苷元在菜籽油中顯示了良好的抗氧化性 能，相同純度的抗氧化能力與2 ，6 _ 二叔丁基對(duì)甲酚( b h t ) 相近。在豬油中的抗氧 化能力與槲皮素、茶多酚相似。已知槲皮素是自然界中存在的抗自由基和抗氧化 活性最強(qiáng)的黃酮醇苷元，竹葉黃酮苷元的清o h 活性接近槲皮素【5 4 1 。賓麗英用 b 一葡萄糖苷酶來(lái)水解大豆和葛根提取物、槐米提取物、黃芩苷、蘆丁、橙皮苷、 4 2 4 大豆苷等黃酮苷，由酶解前后的現(xiàn)象和紫外光譜分析，酶解作用使黃酮苷 變成苷元。進(jìn)一步比較酶解前后各樣品在豬油中的抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)酶解后黃酮 苷元的抗氧化能力都有了不同程度的提高，其中蘆丁、大豆苷、黃芩苷的提高更 是顯著，酶解后蘆丁、大豆苷的抗氧化活性提高了3 倍多，與b h t 相當(dāng)，而黃 1 4 福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文 蜂花粉中總黃酮提取的研究 芩苷酶解后的抗氧化活性甚至比b h t 還高?！? 3 】 2 2 2 2 促進(jìn)免疫 d u d o v ，ia 酬用含蜂花粉的日糧飼喂兔子一個(gè)月，能免疫激活兔體內(nèi)i g m 和i g e ( i g m 和i g e 是人體免疫球蛋白中的兩種) 的初級(jí)和次級(jí)水平。發(fā)揮這一活 性的關(guān)鍵成分可能是蜂花粉中的抗氧化劑一黃酮類(lèi)和其他酚類(lèi)成分，這些成分已 被廣泛研究。 2 2 2 3 降血脂 王開(kāi)發(fā)教授【5 3 】通過(guò)給患高血脂癥的動(dòng)物連續(xù)2 0 d 灌胃玉米黃酮類(lèi)物質(zhì)后， 其血清膽固醇和甘油二酷含量與模型對(duì)照組比，均有