黃酮類成分分析.ppt

第二節(jié)黃酮類成分分析 黃芩苷 黃芩素 木犀草素抗菌消炎銀杏黃酮 葛根素 槲皮素?cái)U(kuò)張冠狀動(dòng)脈蘆丁 橙皮苷 d 兒茶素防治高血壓杜鵑素 芫花素 金絲桃素止咳 祛痰紫檀素 黃柏素 桑色素抗癌 一 概述具有多方面生理活性 含有黃酮類制劑常選此成分為檢測(cè)分析對(duì)象 酮 吡喃 二 結(jié)構(gòu)特征與理化性質(zhì) 2 2 苯基 一 結(jié)構(gòu)特征 色原酮 C6 C3 C6 UV吸收增強(qiáng) 黃酮類 二氫黃酮類 甘草苷 芹菜素 黃酮醇類 二氫黃酮醇類 二氫槲皮素 山萘素 雙黃酮類 銀杏素 異黃酮類 二氫異黃酮類 葛根素 查耳酮類 二氫查耳酮類 紅花苷 橙酮類 花色素類 飛燕草素 黃烷 3 醇類 黃烷 3 4 醇類 兒茶素 無色矢車菊素 黃酮類化合物大多以苷的形式存在 黃芩素 苷元 漢黃芩素 苷元 二 理化性質(zhì) 1 物理性質(zhì)多為結(jié)晶性固體 黃酮苷為無定形粉末 苷元二氫類和黃烷類有旋光苷均有旋光性 多左旋 無交叉共軛 顏色淺 二氫黃酮二氫黃酮醇異黃酮 有交叉共軛 顏色稍深 花色苷及苷元 2 溶解度 3 酸堿性 酚羥基 1 弱酸性 酚羥基 酸性 7 4 OH 7或4 OH 酚羥基 5 OH 楊梅素 槲皮素 木犀草素 黃芩素 芹菜素 1 2 3 4 5 葛根素 淫羊藿苷 O 1 2 2 極弱堿性 可與強(qiáng)酸成鹽而顯特殊顏色 1 O 4 顯色反應(yīng) 1 鹽酸 鎂粉反應(yīng) 異黃酮 查耳酮 橙酮和黃烷類鹽酸 鎂粉反應(yīng)為負(fù)反應(yīng) 注意 紅色 異黃酮 查耳酮 橙酮 黃烷類 2 與金屬鹽的配位反應(yīng) 芹菜素 木犀草素 交叉共軛 5 紫外光譜特征 苯甲?；諑?240 285nm 桂皮?；諑?300 400nm A C B 帶304 350 帶250 270 帶358 385 帶250 270 帶低強(qiáng)峰或帶 的肩峰 帶245 270 三 定性鑒別 一 顯色反應(yīng) 1 鹽酸 鎂粉反應(yīng) 還原反應(yīng) 例牛黃解毒片 鑒別 取本品6片 研細(xì) 加乙醇10mL 溫?zé)?0分鐘 濾過 取濾液5mL 加鹽酸0 5mL與少量鎂粉 加熱 溶液顯紅色 黃芩 中藥的甲醇或乙醇粗提取物常顯醬紅色 在進(jìn)行鹽酸 鎂粉反應(yīng)時(shí) 可觀察加鹽酸后升起的泡沫顏色 如果泡沫是紅色則為正反應(yīng) 例清喉咽合劑ChP 鑒別 1 取本品5mL 加醋酸乙酯5mL 振搖提取 分取醋酸乙酯液 置水浴上蒸干 殘?jiān)蛹状?mL使溶解 加鎂粉少量及鹽酸3 4滴 即顯紅色 黃芩苷 黃芩 連翹 地黃 麥冬 玄參 例大山楂丸中山楂的鑒別ChP 鑒別 2 取本品9g 切碎 加乙醇40mL 置水浴上加熱回流10分鐘 濾過 濾液蒸干 殘?jiān)铀?0mL 加熱使溶解 加正丁醇15mL振搖提取 分取正丁醇提取液 蒸干 殘?jiān)蛹状?mL使溶解 濾過 取濾液1mL 加少量鎂粉與鹽酸2 3滴 加熱4 5分鐘后 即顯橙紅色 黃酮類 槲皮素 金絲桃苷 山楂 六神曲 麥芽 2 與金屬鹽的配位反應(yīng) 常用下列試劑的醇溶液硝酸鋁三氯化鋁二氯氧鋯 C3 OH C4 O C5 OH C4 O 鄰二 OH可與金屬離子絡(luò)合顯色 Al3 Zr4 能與大多數(shù)黃酮類藥物產(chǎn)生黃綠色熒光 例銀黃口服液ChP 鑒別 1 取本品1mL 加5 硝酸鈉溶液和10 硝酸鋁溶液各0 3mL 生成黃色沉淀 再加5 氫氧化鈉溶液使成堿性 沉淀即溶解 溶液顯棕紅色 黃酮類 2 取本品0 1mL 加水10mL 搖勻 取溶液2mL 加5 二氯氧化鋯溶液1 2滴 溶液顯黃色 再加鹽酸1 2滴 黃色不褪 黃酮類 金銀花 黃芩 二 薄層色譜法 常用吸附劑 硅膠弱極性藥物聚酰胺含游離羥基黃酮及其苷纖維素多糖苷類混合物 1 硅膠薄層色譜 在硅膠薄層板上 黃酮類化合物Rf值大小與其極性有關(guān) 在硅膠板上黃酮類Rf值的比較 樣品極性大Rf小展開劑極性要大樣品極性小Rf大展開劑極性要小 樣品極性越大 越易被硅膠吸附 含羥基越多 越容易產(chǎn)生拖尾現(xiàn)象措施 鋪板時(shí)加堿液 展開劑加酸 水 改用聚酰胺TLC法 例二陳丸中橙皮苷的鑒別ChP 100 17 13 3cm 20 10 1 1 8cm 制備 NaOH 2 聚酰胺薄層色譜 黃酮類分子中的酚羥基與聚酰胺分子中的酰胺基形成氫鍵 因酚羥基的數(shù)目 位置的不同使形成氫鍵的能力有差異而得到分離 聚酰胺屬于氫鍵吸附 水 有機(jī) 堿液展開劑極性應(yīng)增強(qiáng) 影響聚酰胺吸附力的因素 1 樣品分子中酚羥基越多 吸附力 2 樣品的共軛雙鍵越多 吸附力 3 樣品能形成分子內(nèi)氫鍵 吸附力 4 溶劑極性大 吸附力 例益心酮片中總黃酮鑒別ChP 山楂葉提取物 四 含量測(cè)定 一 總黃酮含量測(cè)定 例復(fù)方蘆丁片中蘆丁的含量測(cè)定 UV法 蘆丁 維生素C 0 2mg mL 稀釋 用無水蘆丁制備標(biāo)準(zhǔn)曲線 測(cè)定供試品 研細(xì) 至50mL量瓶 計(jì)算 2 比色法 與金屬離子絡(luò)合顯色 二 單體黃酮類成分的含量測(cè)定 1 薄層色譜法 薄層色譜 分光光度法 薄層掃描法 硅膠聚酰胺纖維素 例銀黃注射液中黃芩苷的測(cè)定 薄層色譜 分光光度法 測(cè)定供試品 將測(cè)得供試液吸收度 A樣 A空 代入回歸方程 計(jì)算供試液濃度 2 HPLC法 正相色譜固定相硅膠 鍵合極性基團(tuán) 流動(dòng)相正丁醇 乙酸 水適用于無羥基或乙酰化黃酮類 鍵合相氰基 CN 展開劑乙烷 氯仿適用于含一個(gè)羥基或乙?；S酮類 鍵合相氨基 NH2 展開劑二氧六環(huán) 二氯甲烷適用于含二個(gè)以上羥基黃酮類 反相色譜 鍵合相C18鍵合相展開劑甲醇 水 乙酸 乙腈 水檢測(cè)器紫外或熒光檢測(cè)器 1 能發(fā)生鹽酸 鎂粉反應(yīng)的藥物有A 黃芩B 槐米C 銀杏葉D 山楂E 陳皮 2 黃酮母核上酚羥基的酸性以5 OH為最弱的大原因是A p 共軛效應(yīng)B 吸電子誘導(dǎo)效應(yīng)C 供電子誘導(dǎo)效應(yīng)D 交叉共軛體系E 分子內(nèi)氫鍵形成 3 黃酮類化合物UV光譜的帶 是由下列哪個(gè)結(jié)構(gòu)系統(tǒng)所引起A 苯甲?；到y(tǒng)B 桂皮?；到y(tǒng)C 色原酮結(jié)構(gòu)D 鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)E C4 O C5 OH結(jié)構(gòu) 4 哪種基團(tuán)的極性最弱A R CH3B R HC R O CH3D R O 糖E R OH 5 黃酮類化合物的基本碳架為A C6 C1 C6B C6 C2 C6C C6 C3 C6D C6 C4 C6E C6 C5 C6 6 10 黃酮類藥物特點(diǎn)A 聚酰胺色譜B 桂皮酰基C 黃酮類D 異黃酮類E 苯甲?；? 具有交叉共軛體系7 與酚羥基形成分子內(nèi)氫鍵8 240nm 285nm9 無交叉共軛體系10 300nm 400nm C A E D B 11 黃酮類藥物常采用的鑒別反應(yīng)有A 重氮化 偶合反應(yīng)B 鹽酸 鎂粉反應(yīng)C 二氯氧鋯反應(yīng)D 三氯化鋁反應(yīng)E 硫代乙酰胺反應(yīng) 12 黃酮類藥物具有哪些基團(tuán)則可與金屬離子反應(yīng)生成有色絡(luò)合物A 鄰二 OHB C2 OH C3 OC C3 OH C4 OD C4 OH C5 OE C4 O C5 OH 13 哪些黃酮類藥物具有交叉共軛體系A(chǔ) 二氫黃酮B 二氫黃酮醇C 黃酮D 黃酮醇E 查爾酮 14 下列哪些話是對(duì)的A 黃酮類藥物的酸性強(qiáng)弱與酚羥基的數(shù)目和位置有關(guān)B 黃酮苷元一般難溶于水C 聚酰胺對(duì)黃酮類成份的吸附能力較強(qiáng) 因而展開劑需要有較強(qiáng)的極性D 黃酮苷類應(yīng)采用有機(jī)溶劑為展開劑E 金屬離子能與黃酮類成份絡(luò)合產(chǎn)生熒光 15 哪種基團(tuán)在硅膠板上Rf值最小A R CH3B R HC R O CH3D R O 糖E R OH 16 屬于黃酮類藥物的紫外吸收特征是A 吸收帶 在300 400nmB 桂皮酰基C 吸收帶 在240 280nmD 吸收帶 分別在205 250 300nm附近E 苯甲?；?17 黃酮類化合物可與強(qiáng)無機(jī)酸形成烊鹽是因?yàn)槠浞肿又泻蠥 羥基B 羰基C 雙鍵D 氧原子E 苯環(huán) 18 可用于區(qū)別C3 羥基黃酮和C5 羥基黃酮的顯色反應(yīng)是A 鹽酸 鎂粉反應(yīng)B 醋酸鎂C 二氯氧鋯 枸櫞酸反應(yīng)D 氨性氯化鍶反應(yīng)E 四氫硼鈉反應(yīng) 19 黃酮類化合物加二氯氧鋯甲醇液顯黃色 再加入枸櫞酸甲醇液 黃色顯著消褪 該化合物含有A C3 OHB C4 C7 二OHC C5 OHD C4 C7 二OHE C7 OH 21 25 黃酮類藥物特點(diǎn)A C5 OHB 桂皮酰基C 苯甲?；鵇 C3 OH C4 OE C6 C3 C621 可與金屬離子絡(luò)合顯色22