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什么是病毒載量?其意義是什么? 人類免疫缺陷病毒(HIV)感染機體后,主要侵害CD4 T淋巴細胞,并且以CD4 T淋巴細胞為宿主細胞,大量復制繁殖新的HIV,而后, 新的HIV又去感染未被感染的CD4 T細胞,進入病毒復制的又一循環(huán)。這樣反復循環(huán),體內(nèi)就產(chǎn)生了大量的HIV,產(chǎn)生的病毒大部分都是以游離的形式存在于血液中,一部分則藏匿于靜止細胞或淋巴結(jié)中,而停止復制增生,但它們也隨時會再次“出擊”,去感染新的細胞。我們在了解HIV/AIDS的相關知識中,經(jīng)常會看到或聽到“病毒載量”這個詞,所謂病毒載量即是定量機體內(nèi)游離病毒的含量。它是一個計數(shù)單位, 表示每毫升血漿中含多少拷貝數(shù)的HIV-RNA??梢酝ㄟ^此項檢測了解機體內(nèi)血漿中游離病毒的水平。 有三種方法檢測病毒載量HIV RNA:1, 分支DNA檢測(bDNA拜耳公司)2, 逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR, 羅氏公司)3, 核酸序列擴增檢測(NASBA, 阿克蘇公司)。它們之間的基本原理是不同的,對于核酸水平的檢測,PCR的技術是基于探針的放大而bDNA的方法是采用信號放大。由于它們的方法學不同,顯示血漿病毒載量的計數(shù)單位,也就有所不同,因此在對同一患者進行疾病進展觀察及療效隨訪監(jiān)測時,應該采用同樣的檢測方法,便于對患者檢測結(jié)果的比較,和分析具有統(tǒng)一的標準。 自90年代初,直接檢測血漿病毒RNA 以更敏感,更快速和更方便的途徑在血漿中可以定量病毒濃度, 利用病毒載量檢測: a. 急性HIV-1感染,病人急性HIV感染期間,處于空窗期時即可檢測出高水平的病毒RNA含量。急性期病毒復制高峰期RNA量每毫升可達到910 7拷貝。隨著抗體的產(chǎn)生,RNA逐步下降與p24抗原的降低相一致。但直到一年或一年之后,仍可發(fā)現(xiàn)每毫升血漿中可含有2-410 4拷貝的水平,而p24抗原則在1-3個月后即不能測得。提示bDNA方法遠較p24抗原檢測法敏感。b. 判定病人疾病的進程和進展,血漿中HIV RNA的定量分析,可表現(xiàn)出病毒復制動力學,也反應血漿中游離病毒的濃度,是病毒增殖和免疫清除機制共同作用的結(jié)果,CD4+T細胞越少的病人顯示RNA含量越高。在同一病人的系列標本檢測中可以看到bDNA值與CD4+T細胞數(shù)呈明顯的負相關。因而在判定疾病進程和判定臨床治療效果上具有極大的價值。有些HIV-1感染者用常規(guī)方法檢測除了抗HIV-1抗體陽性已有12-16年之久,但一直沒有臨床癥狀,CD4+T細胞數(shù)亦屬正常,稱之為長期生存病例。人們欲求發(fā)現(xiàn)有什麼因素使這些HIV-1感染者免于致病,bDNA檢測發(fā)現(xiàn)這些病人體內(nèi)的病毒含量非常低(1500CP/ml), 研究為何這些人群的病毒復制如此低下,對于進一步闡明AIDS的發(fā)病機理將會提供新的因素。c.可在接受抗病毒治療過程中起監(jiān)測與指導作用,是藥物療效隨訪和判斷的良好指標。在抗病毒治療早期,可以觀察到HIV患者的HIV RNA水平快速下降;隨著抗病毒治療的延續(xù),HIV RNA水平緩慢下降并在相當長的一段時間內(nèi)維持在一個比較平緩的水平,大部分HIV患者可以下降到檢測不出的水平,這說明藥物對病毒起到了有效的抑制作用。 d. 病毒載量檢測還是觀察耐藥性問題的重要手段,在治療過程中,通過病毒載量的監(jiān)測數(shù)據(jù)提示并分析是否出現(xiàn)耐藥性,再根據(jù)耐藥性檢測確定結(jié)果。此外bDNA方法還可以檢測淋巴細胞或其他組織和肝臟,淋巴結(jié)中的HIV-1 RNA定量。綜上所述,檢測血漿RNA的水平是判斷HI
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