中藥藥效學(xué)研究概論-修改版ppt課件.ppt

中藥藥理學(xué)專論唐春萍 藥物 drugs 用于治療 預(yù)防和診斷疾病的化學(xué)物質(zhì) 藥理學(xué) pharmacology 研究藥物與機(jī)體相互作用及其規(guī)律的學(xué)科 緒言 任務(wù)藥物效應(yīng)動(dòng)力學(xué) pharmacodynamics 藥效學(xué) 藥物代謝動(dòng)力學(xué) pharmacokinetics 藥動(dòng)學(xué) 藥效學(xué) 研究藥物對(duì)機(jī)體 病原體 的作用及作用機(jī)制的科學(xué) 藥動(dòng)學(xué) 研究機(jī)體對(duì)藥物的作用 包括藥物在體內(nèi)的吸收 分布 生物轉(zhuǎn)化和排泄過(guò)程以及藥物效應(yīng)與血藥濃度隨時(shí)間消長(zhǎng)規(guī)律的科學(xué) 作用 作用機(jī)制 吸收 分布 代謝 排泄 緒言 研究目的充分發(fā)揮藥物的治療效果 提高用藥安全性 為臨床合理用藥提供依據(jù) 為開(kāi)發(fā)研究新藥或新劑型提供實(shí)驗(yàn)資料 闡明藥物作用機(jī)制 進(jìn)一步了解機(jī)體功能的生理生化過(guò)程的本質(zhì) 緒言 研究?jī)?nèi)容 闡明藥物對(duì)機(jī)體 包括病原體 的作用和作用機(jī)制臨床主要適應(yīng)癥不良反應(yīng)禁忌證藥物的體內(nèi)過(guò)程和用法 緒言 新藥的藥理學(xué)研究 臨床前藥理學(xué)研究藥效學(xué)研究一般藥理學(xué)研究藥代動(dòng)力學(xué)研究新藥毒理學(xué)研究臨床藥理學(xué)研究 期臨床試驗(yàn) I期臨床試驗(yàn) 健康志愿者 20 50例 初步的臨床藥理學(xué)人體安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn) 觀察人體對(duì)于新藥的耐受程度和藥物代謝動(dòng)力學(xué) 提供給藥方案 II臨床試驗(yàn) 病例100例 隨機(jī)雙盲對(duì)照臨床試驗(yàn) 對(duì)新藥有效性及安全性作出初步評(píng)價(jià) 確定劑量 臨床藥理試驗(yàn) 中藥藥效學(xué)研究概論 第一節(jié)中藥藥效學(xué)研究的意義 中藥是指在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下 用于預(yù)防 治療疾病的物質(zhì) 包括植物藥 動(dòng)物藥和礦物藥 中藥藥效學(xué)是研究中藥對(duì)機(jī)體的作用 作用機(jī)制以及產(chǎn)生作用的物質(zhì)基礎(chǔ) 化學(xué)成分 闡明中藥防治疾病原理的科學(xué) 第一節(jié)中藥藥效學(xué)研究的意義 1 對(duì)推進(jìn)中藥現(xiàn)代化 促進(jìn)中醫(yī)藥的發(fā)展具有重要意義 中藥功效是幾千年臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的總結(jié) 如果用現(xiàn)代科學(xué)方法研究和闡釋中藥功效 那么既可以溝通中西醫(yī)間的學(xué)術(shù)思想 闡明中醫(yī)藥理論 又可以提高臨床療效 促進(jìn)中醫(yī)藥的發(fā)展 第一節(jié)中藥藥效學(xué)研究的意義 2中藥藥效學(xué)是中藥新藥研究的重要內(nèi)容2 1現(xiàn)代科學(xué)最基本的方法是實(shí)驗(yàn)方法藥效學(xué)試驗(yàn)研究 可嚴(yán)格控制試驗(yàn)條件 排除各種干擾因素 進(jìn)行單因素分析 獲得詳細(xì)準(zhǔn)確的結(jié)果 發(fā)現(xiàn)某些內(nèi)在的規(guī)律 第一節(jié)中藥藥效學(xué)研究的意義 2 2動(dòng)物試驗(yàn)可獲得大量在人體無(wú)法獲得的信息動(dòng)物試驗(yàn)可反復(fù)進(jìn)行在人體無(wú)法進(jìn)行的傷害性試驗(yàn) 獲得大量在人體無(wú)法獲得的信息 2 3為新藥的臨床研究奠定基礎(chǔ)在不了解新藥的安全性 有效性的情況下 進(jìn)行人體試用 臨床研究 有可能對(duì)試用者造成危害 因此在新藥試用于人體之前 對(duì)其有效性及安全性應(yīng)有必要的了解 為臨床研究提供可靠的試驗(yàn)依據(jù) 確保試驗(yàn)者不至延誤病情 產(chǎn)生不良后果 沙立度胺 反應(yīng)停Thalidomide 反應(yīng)停慘案 反應(yīng)停 Thalidomide 是催眠鎮(zhèn)靜藥 尤其適用于妊娠婦女的嘔吐 煩躁和失眠 一般毒性很低 半數(shù)致死量測(cè)不出來(lái) 當(dāng)時(shí)曾有人服大量反應(yīng)停自殺未果 錯(cuò)誤的導(dǎo)向驅(qū)使大量孕婦服用反應(yīng)停止嘔 結(jié)果于1959 1962年間在西德 英 加 澳和日等17國(guó)出現(xiàn)12000余名 海豹 畸形嬰兒 特點(diǎn)是這些嬰兒缺臂少腿 或手足直接與軀體相連 這萬(wàn)余名畸形兒中有一半存活 而且智力正常 這無(wú)疑給這些畸人造成終生痛苦 給家庭和社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān) 反應(yīng)停慘案出現(xiàn) 一是當(dāng)時(shí)沒(méi)有進(jìn)行完善各種動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)的致畸試驗(yàn) 二是藥審也無(wú)此要求 扶正祛邪調(diào)節(jié)平衡 扶正 祛邪 補(bǔ)其偏衰 損其偏盛 第二節(jié)中藥的基本作用 第三節(jié)中藥藥理作用的特點(diǎn)與中藥功效的關(guān)系 1 作用的多效性2 量效關(guān)系的相對(duì)不規(guī)則性3 雙向調(diào)節(jié)性4 作用相對(duì)溫和 緩慢 中藥藥理作用的特點(diǎn) 中藥藥理作用與中藥功效的關(guān)系 具有相關(guān)性存在差異性豐富了對(duì)中藥功效的認(rèn)識(shí) 第四節(jié)中藥藥效學(xué)研究的特點(diǎn) 1以中醫(yī)藥基本理論為指導(dǎo) 注意結(jié)合中藥功效設(shè)計(jì)藥理試驗(yàn)2中藥組成復(fù)雜傳統(tǒng)中藥及其方劑 其成分復(fù)雜 往往是多成分 多環(huán)節(jié) 多靶點(diǎn)的整合作用 中藥方劑有其內(nèi)在規(guī)律和科學(xué)基礎(chǔ) 不單是藥物功效的相加或相減 而更具有減毒增效 優(yōu)化組合的作用 研究中藥藥理作用時(shí)要根據(jù)每個(gè)中藥或方劑的特點(diǎn)開(kāi)展研究 第四節(jié)中藥藥效學(xué)研究的特點(diǎn) 3整體與離體實(shí)驗(yàn)相結(jié)合 注意中藥多種成分和多方面藥理作用中醫(yī)學(xué)以整體思想體系為基礎(chǔ) 重視宏觀調(diào)控 中藥作用起效往往較慢 藥理試驗(yàn)常常要多次給藥或預(yù)防給藥才有效 有些成分是在體內(nèi)經(jīng)過(guò)化學(xué)變化才發(fā)揮作用 4合理處置試驗(yàn)中藥 注意避免中藥藥理研究出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果中藥包括化學(xué)成分復(fù)雜的單味中藥及中藥復(fù)方 影響中藥藥理作用的因素很多 如中藥品種 產(chǎn)地 采收季節(jié) 貯存保管 炮制方法 提取方法和生產(chǎn)工藝不同等 都可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 中藥化學(xué)成分復(fù)雜 大量雜質(zhì)及各種無(wú)機(jī)離子干擾 也可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 第四節(jié)中藥藥效學(xué)研究的特點(diǎn) 第四節(jié)中藥藥效學(xué)研究的特點(diǎn) 5建立 證 動(dòng)物模型以研究中藥藥效辨證論治 就是應(yīng)用中醫(yī)藥理論對(duì)患者表現(xiàn)的癥狀 體征進(jìn)行綜合分析 辨別為何種證候 在此基礎(chǔ)上擬定出治療措施的過(guò)程 故中藥藥理研究要根據(jù)臨床應(yīng)用特點(diǎn) 盡可能建立 證 的動(dòng)物模型 我國(guó)已經(jīng)研制建立了 陰虛 陽(yáng)虛 氣虛 血虛 血瘀 脾虛 旨虛 厥脫癥 等許多 證 的動(dòng)物模型 第五節(jié)中藥藥效學(xué)研究的基本思路 1根據(jù)中藥及其方劑的傳統(tǒng)功效和主治研究其作用及作用機(jī)制 例如附子及四逆湯 附子 干姜 甘草 具有回陽(yáng)救逆功效 主治亡陽(yáng)證 現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)亡陽(yáng)證與心力衰竭 微循環(huán)障礙有關(guān) 因此即針對(duì) 亡陽(yáng)證 的上述病理改變開(kāi)展附子及四逆湯中藥藥效學(xué)研究 藥效學(xué)研究證明它們有強(qiáng)心 改善微循環(huán) 抗休克作用 且復(fù)方的作用效果增強(qiáng) 毒性降低 第五節(jié)中藥藥效學(xué)研究的基本思路 2以特定藥效作用或某種疾病動(dòng)物模型 對(duì)天然藥物進(jìn)行篩選和分離 從而開(kāi)發(fā)出新的藥物 用特定藥效作用或某種疾病動(dòng)物模型 從一系列中藥或天然藥物中篩選出一個(gè)作用明顯的成分 西方國(guó)家大多以這種思路研究中藥 在我國(guó)也有一部分研究者采用這種思路研究中藥 例如有關(guān)喜樹(shù)堿 三尖杉?jí)A的研究 香鱗毛蕨 第六節(jié)中藥藥效學(xué)研究的基本要求與方法 一中藥藥效學(xué)研究的基本目的要求 中藥藥效學(xué)研究的基本目的 中藥新藥的基本要求是安全 有效 可控和穩(wěn)定1通過(guò)藥效學(xué)研究確定有效性通過(guò)藥效學(xué)研究可以初步明確新藥是否有效 作用的強(qiáng)弱 與同類藥比較在藥效上的優(yōu)缺點(diǎn)和特色 確定有無(wú)實(shí)用價(jià)值及開(kāi)發(fā)前景 結(jié)合毒理學(xué)研究結(jié)果 確定可否進(jìn)行人體試驗(yàn)及臨床研究 中藥藥效學(xué)研究的基本目的 2提高臨床療效通過(guò)作用機(jī)制研究及配伍規(guī)律研究 揭示藥物作用的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用原理 使臨床使用充分發(fā)揮藥物特色 提高臨床療效 中藥藥效學(xué)研究的基本目的 中藥新藥的藥效學(xué)研究應(yīng)充分運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)特別是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的理論 方法和手段 制定科學(xué) 嚴(yán)密 具有中醫(yī)藥特點(diǎn)的試驗(yàn)計(jì)劃 根據(jù)新藥的特點(diǎn) 功能主治 臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)及近年研究成果 合理選用試驗(yàn)方法 建立與臨床相符的 病 癥 或 證 相似的動(dòng)物模型與指標(biāo) 對(duì)新藥的有效性作出科學(xué)的評(píng)價(jià) 對(duì)天然藥物及中藥中提出的單一化合物研究不強(qiáng)求用中醫(yī)藥理論來(lái)指導(dǎo) 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 1試驗(yàn)負(fù)責(zé)人應(yīng)具有藥理 毒理專業(yè)高級(jí)職稱和有較高理論水平 工作經(jīng)驗(yàn)與資歷的人員 確保試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理 數(shù)據(jù)可靠 結(jié)論判斷準(zhǔn)確 試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)有試驗(yàn)負(fù)責(zé)人簽名及單位蓋章 2受試藥物處方固定 制備工藝及質(zhì)量基本穩(wěn)定 一般為中試產(chǎn)品 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 3研究單位從事新藥安全性研究和藥理研究的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合國(guó)家 藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范 GoodLaboratoryPractice 的要求 具有較高的科研水平 技術(shù)實(shí)力 組織管理能力 具有較好的實(shí)驗(yàn)條件 其實(shí)驗(yàn)室 儀器設(shè)備 藥品試劑等均應(yīng)符合要求 4實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬 性別 年齡 健康狀況 飼養(yǎng)條件 動(dòng)物等級(jí) 特殊模型動(dòng)物等 均應(yīng)符合國(guó)家規(guī)定的試驗(yàn)要求 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 5試驗(yàn)記錄5 1記錄要求實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)真實(shí) 完整 詳細(xì) 準(zhǔn)確 規(guī)范 每只動(dòng)物的原始記錄 數(shù)據(jù) 圖譜等 防止漏記和隨意涂改 試驗(yàn)中出現(xiàn)的特殊現(xiàn)象 矛盾結(jié)果等 均應(yīng)詳細(xì)記錄 描記和形態(tài)學(xué)檢查應(yīng)有記錄圖和照片 不得偽造 編造數(shù)據(jù) 記錄應(yīng)符合國(guó)家 藥品研究實(shí)驗(yàn)記錄暫行規(guī)定 的要求 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 實(shí)驗(yàn)室的溫度 濕度 必要時(shí)氣壓 實(shí)驗(yàn)的時(shí)間 必要時(shí)注明白日或黑夜 以及可能影響試驗(yàn)的環(huán)境因素 均應(yīng)詳細(xì)記錄 實(shí)驗(yàn)負(fù)責(zé)人 參加者 單位等亦應(yīng)記錄 所有試驗(yàn)記錄 均應(yīng)妥善保存 保管人姓名 單位 隨時(shí)準(zhǔn)備上級(jí)檢查 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 5 2記錄內(nèi)容實(shí)驗(yàn)名稱每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)首先記錄課題名稱及實(shí)驗(yàn)名稱 實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)方案是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的依據(jù) 實(shí)驗(yàn)首頁(yè)應(yīng)有一份詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及方案 實(shí)驗(yàn)日期每次實(shí)驗(yàn)須記下年 月 日及時(shí)間 試驗(yàn)動(dòng)物種屬 性別 年齡 數(shù)量 健康狀況 提供單位 合格證 動(dòng)物等級(jí)或特殊模型動(dòng)物 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)前觀察與處理 隨機(jī)分組的方法 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 試驗(yàn)用藥與儀器品種 學(xué)名 產(chǎn)地 提取工藝 藥物含量 濃度 給藥劑量與容積 給藥途徑 次數(shù) 時(shí)間 陽(yáng)性對(duì)照藥的選擇依據(jù) 處方 功能主治 生產(chǎn)廠家名稱 批準(zhǔn)文號(hào) 生產(chǎn)批號(hào)及出廠日期 實(shí)驗(yàn)前預(yù)處理 有無(wú)特殊溶媒 基質(zhì) 防腐劑 助溶劑 填加劑等 試驗(yàn)用其它藥品試劑的品名 規(guī)格 生產(chǎn)廠家 批號(hào)等 主要儀器及試驗(yàn)用品 型號(hào) 規(guī)格 性能 生產(chǎn)廠家及批號(hào)等 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 試驗(yàn)方法說(shuō)明參考文獻(xiàn)的來(lái)源 主要操作程序 動(dòng)物麻醉 固定 手術(shù) 觀測(cè)等 觀測(cè)指標(biāo) 取樣 測(cè)試 記錄 計(jì)算 統(tǒng)計(jì)等 試驗(yàn)結(jié)果制表 繪圖 分析判斷 獲得準(zhǔn)確可靠的結(jié)論 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 6統(tǒng)計(jì)處理試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)進(jìn)行正確的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)說(shuō)明 數(shù)據(jù)表格應(yīng)規(guī)范 資料整理應(yīng)簡(jiǎn)明扼要 注意科學(xué)性 嚴(yán)密性 邏輯性 真實(shí)可靠地反映出試驗(yàn)所獲得的各種信息與結(jié)果 二中藥藥效學(xué)研究的方法 1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則應(yīng)該符合中藥特點(diǎn) 符合國(guó)家新藥研究申報(bào)的有關(guān)規(guī)定 遵守 隨機(jī) 對(duì)照 重復(fù) 的原則 2動(dòng)物選擇 2 1 種類動(dòng)物選擇敏感動(dòng)物 對(duì)藥物的反應(yīng)與人體近似 以進(jìn)化程度較高 解剖 生理 習(xí)性及反應(yīng)性與人相近的動(dòng)物為佳 常用動(dòng)物 小鼠和大鼠 易繁殖和飼養(yǎng) 價(jià)廉 耗藥量少 豚鼠 易于致敏 對(duì)組胺非常敏感 適于做過(guò)敏試驗(yàn) 家兔 對(duì)體溫變化十分靈敏 常用于熱原檢查和解熱試驗(yàn) 貓 犬 大鼠 血壓穩(wěn)定 常作為血壓試驗(yàn) 大鼠和犬 常用于毒理學(xué)研究 豬 由于解剖和生理上與人相似 近日選用逐漸增多 47 可編輯 2 2品系不同品系動(dòng)物對(duì)藥物的敏感性不一 目前最常用動(dòng)物為昆明種小鼠 NIH小鼠 Wistar大鼠 SD大鼠 新西蘭兔和日本大白兔 豚鼠等 2 3動(dòng)物等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)選用符合等級(jí)要求的健康動(dòng)物 并有供應(yīng)單位合格證 我國(guó)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為4級(jí) 一級(jí)動(dòng)物即普通動(dòng)物 CV 二級(jí)動(dòng)物即清潔動(dòng)物 CL 三級(jí)動(dòng)物即無(wú)特定病原體動(dòng)物 SPF 四級(jí)動(dòng)物即無(wú)菌動(dòng)物 GF 和悉生動(dòng)物 GN 目前我國(guó)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)大多采用普通級(jí)動(dòng)物 CV動(dòng)物 和清潔級(jí)動(dòng)物 SPF動(dòng)物 2 4年齡常用性成熟年齡動(dòng)物 小鼠為6 8周齡 大鼠8 9周齡 豚鼠6 10周齡 兔4 5月 貓6 8月 犬6 8月 常選用成年小鼠體重為18 22g 大鼠200g 150 250g 家兔2kg 1 5 2 5kg 貓2 3kg 犬8一lOkg 猴8 15kg 必要時(shí)選用特定年齡 體重動(dòng)物 2 5性別一般試驗(yàn)選用雌雄各半動(dòng)物 某些試驗(yàn)選一個(gè)性別動(dòng)物 例如熱板法鎮(zhèn)痛試驗(yàn)選用雌性小鼠 而不用雄性小鼠 2 6數(shù)量每組試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求 藥效學(xué)計(jì)量學(xué)統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)每組試驗(yàn)動(dòng)物 一般小鼠不得少于10只 大鼠為8只 貓 犬為4只以上 以便進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用小鼠 大鼠計(jì)數(shù)資料試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)則要求更多 二中藥藥效學(xué)研究的方法 3方法選擇3 1根據(jù)主治 參考功能 選擇試驗(yàn)方法適用于多數(shù)中藥的基本經(jīng)驗(yàn) 個(gè)別情況下也可根據(jù)功能選擇試驗(yàn)方法 但要注意 目的性明確 針對(duì)性強(qiáng) 避免盲目選作大量無(wú)關(guān)或關(guān)系不大的試驗(yàn) 3 2首選具有中藥特點(diǎn)的試驗(yàn)方法及動(dòng)物模型首選符合中醫(yī)理論 具有中藥特點(diǎn)的試驗(yàn)方法及動(dòng)物模型 其次可選用現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)合適的方法及模型 3 3主要藥效為主 配合輔助試驗(yàn)以直接證實(shí)主要藥效的核心試驗(yàn) 或主要試驗(yàn) 為必作項(xiàng)目 可選作不同模型 方法 動(dòng)物及給藥途徑的試驗(yàn)2 3項(xiàng) 以間接證實(shí)主要藥效或次要治療作用的外圍試驗(yàn) 或輔助試驗(yàn) 為選作項(xiàng)目 可根據(jù)新藥的特點(diǎn) 功能主治及已有的臨床經(jīng)驗(yàn) 酌情選作幾個(gè)方面的藥效試驗(yàn) 每個(gè)方面選作1 2項(xiàng)試驗(yàn)即可 3 4試驗(yàn)方法的選擇試驗(yàn)方法的選擇應(yīng)強(qiáng)調(diào)科學(xué)性 先進(jìn)性 重復(fù)性 目的性 必須有針對(duì)性的精選試驗(yàn) 不可盲目的以多取勝 3 5整體和離體方法選擇中藥由于成分復(fù)雜 特別是復(fù)方粗制劑 為多種化學(xué)成分 或有效部位 的混合體 除有效成分外 尚有一些無(wú)關(guān)成分及干擾成分 中藥粗制劑藥效學(xué)試驗(yàn)應(yīng)以體內(nèi)試驗(yàn)為主 體外試驗(yàn)為輔 以消化道給藥為主 其它給藥途徑為輔 二中藥藥效學(xué)研究的方法 4指標(biāo)的選擇選擇符合要求的觀測(cè)指標(biāo) 才能反映出藥物對(duì)機(jī)體的影響 進(jìn)行新藥有效性的評(píng)價(jià) 指標(biāo)符合以下要求 4 1特異性強(qiáng)任何試驗(yàn)都應(yīng)選用針對(duì)性強(qiáng) 專屬性好 能夠反映變化本質(zhì)及主要藥效的指標(biāo) 4 2敏感性高指標(biāo)要敏感 對(duì)于病情及癥候的任何變化 對(duì)于藥物的防治作用 能夠敏感 準(zhǔn)確的反映出來(lái) 二中藥藥效學(xué)研究的方法 4 3重現(xiàn)性好指標(biāo)要穩(wěn)定 重現(xiàn)性好 結(jié)果才可靠 若重現(xiàn)性差 則應(yīng)查找原因 4 4客觀性主觀檢測(cè)的指標(biāo) 誤差較大 不夠準(zhǔn)確 例如肉眼觀測(cè)血壓計(jì)汞柱的變化 誤差較大 而用描記儀直接描記血壓曲線 客觀的 動(dòng)態(tài)的記錄血壓變化 則更為精確 二中藥藥效學(xué)研究的方法 4 5定量指標(biāo)為了準(zhǔn)確判斷藥物的作用及機(jī)體的變化 必須有量的概念 量的比較 選用可測(cè)量的定量指標(biāo) 即計(jì)量指標(biāo) 質(zhì)反應(yīng)指標(biāo)只能反映是與否 死與不死 陰性與陽(yáng)性 只能用計(jì)數(shù)指標(biāo) 有的指標(biāo)目前尚無(wú)計(jì)量方法 可用分級(jí)定度打分的辦法 使之定量化 二中藥藥效學(xué)研究的方法 4 6多指標(biāo)綜合運(yùn)用為了準(zhǔn)確 全面地判斷新藥的有效性 常以生理 生化 形態(tài)等各類指標(biāo)合理搭配 綜合運(yùn)用 則試驗(yàn)結(jié)果更為全面 準(zhǔn)確 可靠 有些指標(biāo)單一使用即可達(dá)到試驗(yàn)?zāi)康?滿足要求 則不必為 多而全 而勉強(qiáng)采用多指標(biāo)觀測(cè) 應(yīng)具體情況具體分析 根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康呐c要求 優(yōu)選指標(biāo) 不是 越多越好 而是 越說(shuō)明問(wèn)題越好 二中藥藥效學(xué)研究的方法 5 藥物的要求供試藥物 應(yīng)處方固定 各味藥材經(jīng)過(guò)品種鑒定 生產(chǎn)工藝基本定型 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性試驗(yàn)基本符合要求 與臨床用藥基本相同的劑型與質(zhì)量 凡是藥材未經(jīng)鑒定 處方 生產(chǎn)工藝 質(zhì)量 劑型等尚未固定 或有變動(dòng)者 不宜用作藥效學(xué)試驗(yàn) 5 1消化道給藥包括灌胃 胃管 十二指腸給藥等 可用制劑或提取物進(jìn)行藥效學(xué)試驗(yàn) 前者與臨床用藥更為相似 更合理 但因制劑含有大量糊精 蔗糖等賦形劑 水溶后呈黏稠狀 灌胃不便 且體積大 含藥量低 無(wú)法濃縮提高含藥量 因而難于提高動(dòng)物用量 在較多情況下 常用中藥提取物進(jìn)行試驗(yàn) 5 2注射給藥及試管內(nèi)給藥應(yīng)是化學(xué)純品或精制的中藥制劑 盡量除去雜質(zhì) 不溶成分及無(wú)關(guān)成分 其溶解性 粒度 滲透壓 酸堿度 無(wú)機(jī)離子 鈉 鉀 鈣 鎂等 含量以及可能干擾試驗(yàn)結(jié)果的各種因素 均應(yīng)控制在生理范圍內(nèi)或符合注射劑基本要求 否則 注射給藥將引起機(jī)體非特異性反應(yīng) 產(chǎn)生一系列假象 誤認(rèn)為藥理作用 試管內(nèi)給藥也會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果 造成錯(cuò)誤判斷 5 3外用藥包括擦劑 洗劑 貼劑 膏藥等 一類是用于治療體表或局部疾患 如皮膚病 跌打損傷或局部腫痛 骨折等 另一類則是局部用藥治療全身性疾患 例如局部或穴位貼藥治療哮喘 冠心病 高血壓等 兩者用藥目的不同 試驗(yàn)方法及給藥方式也不完全相同 兩者均可用制劑 含基質(zhì)的成品 或中藥提取物 不含基質(zhì)的半成品 進(jìn)行試驗(yàn) 以外用給藥的方式為主 可依涂藥面積大小 或含藥濃度高低 或給藥次數(shù)多少等方式 設(shè)立高 中 低給藥劑量組 內(nèi)病外治者 外用藥應(yīng)進(jìn)行透皮吸收試驗(yàn) 了解藥物滲透吸收的速度與數(shù)量 有助于準(zhǔn)確評(píng)價(jià)其藥效 以口服的復(fù)方中藥 改為內(nèi)病外治 應(yīng)與口服進(jìn)行藥效學(xué)對(duì)照比較 外用藥以制劑進(jìn)行試驗(yàn)者 若制劑中含有特殊溶媒或基質(zhì)者 除設(shè)空白對(duì)照外 尚應(yīng)設(shè)溶媒或基質(zhì)對(duì)照 以了解其作用和對(duì)主要藥效的影響 5 4其它眼 耳 鼻 吸人劑及腔道內(nèi)給藥 如直腸 陰道 氣管內(nèi) 腹腔 胸腔等 對(duì)藥物也有嚴(yán)格要求 特別是氣霧劑 吸入劑及腔道內(nèi)給藥 供試藥物的要求基本與注射劑相同 二中藥藥效學(xué)研究的方法 6給藥途徑給藥途徑應(yīng)與臨床相同 如有困難可選用其它相似給藥途徑進(jìn)行試驗(yàn) 但應(yīng)該說(shuō)明原因 例如口服藥進(jìn)行心臟血流動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)難于顯示結(jié)果 可改用注射給藥 粗制劑可適當(dāng)精制后 皮下 肌內(nèi)或腹腔注入 不宜靜脈給藥 除非供試藥物符合注射劑要求 二中藥藥效學(xué)研究的方法 7給藥容量根據(jù)用藥劑量而定 但應(yīng)當(dāng)適宜 容量過(guò)大 過(guò)小易出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)誤差甚至假陽(yáng)性或動(dòng)物死亡 小鼠 常用灌胃 ig 容量0 1 0 2ml 10g體重 不超過(guò)0 4ml 10g體重 最大為lml 只 皮下 sc 腹腔 ip 靜脈注射 iV 不超過(guò)0 5ml 只 大鼠 灌胃容量一般為1 2ml 100g 體重 最大一般不超過(guò)5ml 只 腹腔注射1 5ml 只 皮下和靜脈注射不超過(guò)lml 只 肌內(nèi)注射0 4ml 只 兔和貓 灌胃20ml 只 皮下 肌內(nèi)注射2ml 只 腹腔注射5ml 只 靜脈注射10ml 只 二中藥藥效學(xué)研究的方法 8試驗(yàn)組給藥劑量試驗(yàn)至少設(shè)3個(gè)劑量組 大動(dòng)物 猴 犬等 試驗(yàn)或特殊情況下 可適當(dāng)減少劑量組 劑量選擇應(yīng)合理 盡量反映量效和 或時(shí)效關(guān)系 劑量偏低難于顯示藥效 劑量過(guò)高 甚至超過(guò)毒理試驗(yàn)劑量 其試驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有意義 甚至是中毒效應(yīng)被誤認(rèn)為治療作用 8 1根據(jù)半數(shù)致死量 LD50 計(jì)算凡是能夠測(cè)出LD50者 可用其1 10 1 20 1 40等相近劑量 作為藥效學(xué)試驗(yàn)的高 中 低劑量組 8 2根據(jù)臨床用量計(jì)算根據(jù)人用量的數(shù)倍至幾十倍 用作動(dòng)物試驗(yàn)劑量 可根據(jù)人用劑量按千克體重 g或mg生藥 kg體重 來(lái)折算動(dòng)物用量 其粗略的等效倍數(shù)為1 人 3 犬 猴 5 貓 兔 7 大鼠 豚鼠 10一11 小鼠 例如大鼠的一個(gè)劑量可選用相當(dāng)于臨床劑量的3 7倍 小鼠可10一15倍 8 3根據(jù)文獻(xiàn)估計(jì)劑量文獻(xiàn)中相似藥物的用量 若處方 提取工藝相似 可作為參考8 4根據(jù)體表面積估計(jì)劑量對(duì)一些安全系數(shù)小的藥物 如抗癌藥 強(qiáng)心苷等藥物按體表面積計(jì)算動(dòng)物用量 不論以何種方法選用的給藥劑量 都應(yīng)該通過(guò)預(yù)試 摸索到出現(xiàn)藥理效應(yīng)的適當(dāng)劑量 再確定正式試驗(yàn)劑量 9給藥方式 根據(jù)藥物特點(diǎn)及試驗(yàn)要求 可采用 預(yù)防性給藥 即先給藥若干天或若干次 使藥物在動(dòng)物體內(nèi)達(dá)到有效濃度后再造模型 觀察藥物的保護(hù)作用 治療性給藥 即先造成動(dòng)物病理模型 然后給藥 觀察藥物的治療作用 后者符合臨床實(shí)際情況 更為合理 兩種給藥方式 以治療性給藥為主 部分試驗(yàn)可根據(jù)需要采用預(yù)防性給藥 但不可全部試驗(yàn)均用預(yù)防性給藥 10對(duì)照藥的選擇 10 1陽(yáng)性對(duì)照藥即已知有效藥 其目的有二 檢查試驗(yàn)體系是否可靠 可用西藥作陽(yáng)性對(duì)照藥 陽(yáng)性對(duì)照藥的選擇應(yīng)注意 1 可比性其功效 主治 劑型 給藥途徑應(yīng)與新藥相似 便于比較新藥的優(yōu)劣與特點(diǎn) 2 合法性陽(yáng)性藥應(yīng)是 中國(guó)藥典 或部頒標(biāo)準(zhǔn) 或新批準(zhǔn)生產(chǎn)的合法藥物 否則不可作為陽(yáng)性對(duì)照藥 3 擇優(yōu)選用有多種同類藥可供選用時(shí) 應(yīng)擇優(yōu)選用當(dāng)前學(xué)術(shù)界或社會(huì)公認(rèn)有效的 有代表性的 好 藥 作為陽(yáng)性對(duì)照藥 而勿選用療效差 不良反應(yīng)嚴(yán)重 甚至即將淘汰的藥物 10 2原劑型對(duì)照改劑型新藥的陽(yáng)性對(duì)照藥 應(yīng)以該藥的原劑型為對(duì)照藥 進(jìn)行藥效試驗(yàn) 以了解新藥 新劑型 在那些方面優(yōu)于原劑型 10 3空白對(duì)照品空白對(duì)照包括正常動(dòng)物及模型動(dòng)物的空白對(duì)照 可用生理鹽水 蒸餾水 注射用水或食用水 據(jù)試驗(yàn)要求選用 新藥若含有特殊溶媒或基質(zhì)者 應(yīng)作溶媒 或基質(zhì) 對(duì)照 中藥復(fù)方藥理研究概況 中藥復(fù)方 由兩味及兩味以上中藥以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo) 按照 君臣佐使 組方原則及配伍理論而組成的方劑 優(yōu)點(diǎn) 療效強(qiáng) 毒性低 中藥復(fù)方藥理研究 1 闡明復(fù)方作用的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵 作用 機(jī)制 2 改造老方 創(chuàng)制新方3 開(kāi)發(fā)現(xiàn)代復(fù)方制劑4 揭示復(fù)方配伍關(guān)系5 探索藥效物質(zhì)基礎(chǔ) 研究目的和內(nèi)容 整方研究法拆方研究法單味藥研究法撤藥分析研究法藥物組間關(guān)系研究法正交設(shè)計(jì)研究法均勻設(shè)計(jì)研究法析因分析法 研究方法 一 研究藥理作用及作用機(jī)制 傳統(tǒng)古方研究主要探討復(fù)方作用及作用機(jī)制 并闡明中醫(yī)藥理論的科學(xué)性 發(fā)現(xiàn)新功能 提高臨床應(yīng)用的療效 由于藥效是復(fù)方整體起作用 則研究復(fù)方藥效一般首先進(jìn)行全方研究 如黃芩湯對(duì)醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)有顯著抑制作用 而組成藥味黃芩 芍藥 甘草 大棗單用卻無(wú)明顯影響 全方研究有助于藥效學(xué)的研究 反映配伍效應(yīng)與主治 證 之間的內(nèi)在聯(lián)系 但在揭示中藥復(fù)方的組成規(guī)律方面還存在不足 建立適宜的主治 證 模型 是中藥復(fù)方全方研究的關(guān)鍵 一 研究藥理作用及作用機(jī)制 二 研究復(fù)方配伍理論和規(guī)律 1 單味研究法中藥復(fù)方各組成藥物分別與全方進(jìn)行比較可發(fā)現(xiàn)起主要作用的藥物 2 藥對(duì)研究法藥對(duì)是復(fù)方最小的組方單位 具有復(fù)方基本的主治功能 3 藥物組間關(guān)系研究法指中藥復(fù)方按功效 性味關(guān)系分成不同組分 可探討藥物組與組之間作用關(guān)系和組方理論 如六味地黃湯可分成 三補(bǔ) 和 三瀉 兩種組方 4 撤藥分析法從復(fù)方中撤出一味或一組藥物后進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 用以判斷撤出的藥味對(duì)原方功效影響的研究方法 5 聚類分析法是通過(guò)對(duì)同類功效的中藥復(fù)方的數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析 建立多元回歸方程來(lái)揭示同類方的組方規(guī)律 6 正交設(shè)計(jì)法以最小的實(shí)驗(yàn)次數(shù)得出盡可能最佳的配伍關(guān)系 最佳應(yīng)用劑量 并可分析主要藥 次要藥 藥物之間的交互作用 7 均勻設(shè)計(jì)法按一定的均勻設(shè)計(jì)表安排 均勻設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)次數(shù)與各因素所取水平數(shù)相等 有利于進(jìn)行量效實(shí)驗(yàn) 8 量效關(guān)系法如四君子湯及其拆方對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響 當(dāng)全方中藥黨參 白術(shù) 茯苓 甘草以1 1 1 0 5的比例配方 可以提高吞噬功能 當(dāng)炙甘草量增加到1 3 則明顯減弱其功能 三 研究中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ) 中藥復(fù)方藥效物質(zhì)和作用機(jī)制研究是中藥現(xiàn)代化基礎(chǔ)研究的關(guān)鍵 可從本質(zhì)上闡明復(fù)方配伍的科學(xué)內(nèi)涵 并解決長(zhǎng)期以來(lái)復(fù)方中藥缺乏被國(guó)際認(rèn)可和接受的客觀 嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范這個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題 以藥效引導(dǎo)中藥復(fù)方進(jìn)行化學(xué)成分的分離 尋找到有效成分或有效成分群 是近期中藥復(fù)方研究的熱點(diǎn) 在單味中藥的化學(xué)成分分析基礎(chǔ)上 有目的地對(duì)中藥復(fù)方的活性物質(zhì)進(jìn)行定性定量研究 依據(jù)中藥復(fù)方中所含成分及其含量范圍進(jìn)一步做藥理實(shí)驗(yàn) 與全方比較主要藥效作用 在復(fù)方藥理研究及分析復(fù)方中各藥味已知化學(xué)成分藥理作用的基礎(chǔ)上 進(jìn)行藥效作用機(jī)制研究 這些研究可在整體 離體 細(xì)胞 分子生物學(xué)等水平上進(jìn)行 從而發(fā)現(xiàn)主要藥效成分 對(duì)炙甘草湯研究其活性成分 首先對(duì)炙甘草湯中皂苷及皂苷元成分進(jìn)行定性定量分析 初步認(rèn)為炙甘草湯抗心律失常的主要有效成分或部位為甘草酸單胺鹽 人參總皂苷和麥冬總皂苷 并按0 4 0 16 0 12配伍有明顯協(xié)同作用 從而為進(jìn)一步闡明炙甘草湯抗心律失常的作用機(jī)制及開(kāi)發(fā)出五類新藥 一 從單味藥有效成分分析研究分析研究復(fù)方作用的物質(zhì)基礎(chǔ) 二 將中藥復(fù)方視作一個(gè)整體分析其有效物質(zhì)基礎(chǔ)將中藥復(fù)方視作一個(gè)整體 運(yùn)用對(duì)單味藥的研究經(jīng)驗(yàn) 既往基礎(chǔ)和現(xiàn)代高新技術(shù)設(shè)備的使用 對(duì)中藥復(fù)方的有效物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行確定 把復(fù)方分離為性質(zhì)相近的化合物群 如皂苷類 黃酮類 生物堿類等 即復(fù)方有效部分 運(yùn)用現(xiàn)代分離方法提取有效部分 通過(guò)指紋圖譜定性 指標(biāo)成分定量等方法 可使含有幾百種化合物的中藥復(fù)方分成十多類 每類又含有可定量的幾十種化合物 從而達(dá)到質(zhì)量控制 可將中藥復(fù)方有效部位研制成中藥五類新藥 同時(shí)還可望在研究中發(fā)現(xiàn)強(qiáng)活性化學(xué)單體 為研究中藥一類新藥奠定基礎(chǔ) 使復(fù)方中藥與國(guó)際醫(yī)藥標(biāo)準(zhǔn)接軌 為中醫(yī)藥走向國(guó)際醫(yī)藥市場(chǎng)找到切入點(diǎn) 從中醫(yī)理論和臨床實(shí)踐出發(fā) 運(yùn)用現(xiàn)代科技手段 結(jié)合抗流感病毒活性追蹤 從銀翹散整個(gè)復(fù)方中篩選 分離出高效低毒的有效部位 抗病毒 解熱 鎮(zhèn)痛 抗炎 和化學(xué)成分 建立其TLC和HPLC指紋圖譜 對(duì)有效成分進(jìn)行確定和結(jié)構(gòu)鑒定 并建立HPLC含量測(cè)定的方法 在此基礎(chǔ)上深入研究有效成分及其量的變化與配伍 藥效學(xué)的關(guān)系 有望得到活性成分群間相互作用發(fā)揮最大藥效時(shí) 其藥量的最佳比例 最佳配伍 藥味數(shù)優(yōu)化 最佳藥味量的優(yōu)化方 銀翹散 三 中藥化學(xué)和藥理學(xué)結(jié)合系統(tǒng)研究中藥復(fù)方中藥復(fù)方系統(tǒng)研究應(yīng)該以臨床療效為中心 圍繞臨床 藥理與化學(xué)相結(jié)合 即中藥復(fù)方從臨床選方 再由藥效指導(dǎo) 進(jìn)行篩選有效成分的化學(xué)研究 目標(biāo)活性成分再配伍后的藥理研究 直至制劑的形成 形成一套系統(tǒng)化的研究步驟 血清藥理采用經(jīng)給藥后 在一定時(shí)間采集血液 分離血清 以含此藥物成分的血清進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的這種血清藥理學(xué)方法 客觀地模擬了藥物與機(jī)體相互作用過(guò)程 比較符合體內(nèi)環(huán)境中產(chǎn)生藥理效應(yīng)的真實(shí)過(guò)程 其血清所含的藥物成分也是經(jīng)過(guò)體內(nèi)一系列生物轉(zhuǎn)化后真正發(fā)揮作用的有效成分及藥物作用下機(jī)體所產(chǎn)生的內(nèi)生性有效成分 并通過(guò)測(cè)定血清的藥物成分 有利于尋找到機(jī)體內(nèi)真正發(fā)揮作用的有效物質(zhì)基礎(chǔ) 第三節(jié)中藥復(fù)方藥效研究新技術(shù)新方法 一 建立中醫(yī)藥信息系統(tǒng)建立中醫(yī)藥信息系統(tǒng) 將大大提高中藥復(fù)方藥效的研