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ABI7300使用方法-絕對(duì)定量1 打開電腦，待電腦完全打開后打開熒光定量機(jī)器，預(yù)熱十分鐘，期間布板子2 File-new 新建一個(gè)程序，進(jìn)入界面做絕對(duì)定量時(shí) ASSay 選擇 Standard Curve（Absolote Quantitation）做相對(duì)定量時(shí) 選擇 ddCt（Relative Quantitation）Plate做完相對(duì)定量時(shí)分析數(shù)據(jù)選擇ddCt（Relative Quantitation）Study 其他不用改Plate Name 一欄給板子命名 點(diǎn)擊“下一步” 不要點(diǎn)擊“完成”3初次做時(shí)選擇“New Detector”添加引物Name 一欄命名基因的名字 Reporter Dye 一欄選擇FAM Quencher Dye一欄選擇none Color一欄自己選顏色 其他內(nèi)容不選選擇Add 將命名的引物添加進(jìn)去 以后做實(shí)驗(yàn)就可以直接添加了右上角的Passive Reference 選擇 none (切記)點(diǎn)擊“下一步”4 布板 樣品選擇UnKnown標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒選擇 Standard點(diǎn)擊完成4進(jìn)入界面 點(diǎn)擊Setup-Plate 雙擊樣品加樣孔 在彈出的界面里 對(duì)樣品進(jìn)行命名 其他不填 同理 雙擊標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒加樣孔 Sample Name 對(duì)質(zhì)粒命名 注意在Quantity一欄寫上質(zhì)粒的拷貝數(shù) （切記）5 完成后點(diǎn)擊Insteument步驟程序 第一步 95攝氏度 十分鐘第二步 95攝氏度 5秒 65攝氏度 34秒 循環(huán) 40次 第三步 溶解曲線 修改Sample Volume 為20ul DateCollection 為Stage2，Step2（65 0:34）（熒光收集信號(hào) 切記要從循環(huán)那步開始，切記切記）6設(shè)好之后將程序保存 7 整完之后開始Start待出現(xiàn)運(yùn)行時(shí)間后方可離開8 運(yùn)行結(jié)束后 分析數(shù)據(jù) 點(diǎn)擊Results 里的Standard Curve 看標(biāo)準(zhǔn)曲線 可以將不正常的樣舍棄 打開Results里的 Plate 點(diǎn)擊

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