除蟲菊酯類農(nóng)藥.doc

Keywords: Pyrethrin；colorimetry；fast measure 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥是20世紀(jì)70年代研發(fā)成功的一類仿生殺蟲劑,具有性質(zhì)穩(wěn)定,不易光解,無特殊臭味及安全系數(shù)高,使用濃度低,觸殺作用強(qiáng),滅蟲速度快,殘效時間長等優(yōu)點(diǎn),被稱為是殺蟲劑農(nóng)藥的一個新的突破；是殺蟲劑歷史上的第三個里程碑。目前,人工合成的擬除蟲菊酯類化合物數(shù)以萬計(jì),新產(chǎn)品相繼投產(chǎn),銷售猛增,迄今已商品化的擬除蟲菊酯類有50多種，現(xiàn)已占世界農(nóng)藥市場的1/4。擬除蟲菊酯類殺蟲劑已成為農(nóng)用及衛(wèi)生殺蟲劑的主要支柱之一。高毒有機(jī)磷農(nóng)藥被禁止使用后,擬除蟲菊酯類殺蟲劑便有了更廣泛的使用空間,同時也帶來了環(huán)境污染和食品安全等問題。氰戊菊酯是中國廣為應(yīng)用的一種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥。又由于擬除蟲菊酯類殺蟲劑殘留期較長,對某些非目標(biāo)生物如蜜蜂、家蠶及天敵昆蟲毒性較大,對魚、蝦、蟹、貝類等水生生物毒性也很高。隨著人們生活水平的不斷提高，食品的安全性也越來越受到重視，故對農(nóng)藥最高殘留限量的要求也日益嚴(yán)格。因此，建立一套高效、快速、準(zhǔn)確的測定食品中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留速測方法迫在眉睫。目前國內(nèi)外對常規(guī)擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的殘留分析方法包括分光光度法、色譜法、免疫分析法等等。但這幾種分析方法各有利弊,都仍需改進(jìn)和研究。色譜法和免疫分析法具有特異性強(qiáng),靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),但其儀器價格昂貴，開發(fā)難度大,且只適用于單一化合物或結(jié)構(gòu)相似的化合物,應(yīng)用具有局限性。分光光度法的主要優(yōu)點(diǎn)是簡便快捷,設(shè)備簡單便宜,但靈敏度和精確度都較低，因此我們針對此方法，了硫化二鈉顯色以測定丙烯菊酯等擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的殘留量1和將樣品用石油醚提取后加85 %磷酸和醋酸乙酯（41）加熱顯色測定擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的殘留量2兩篇論文，開發(fā)出了一種能夠簡單快速準(zhǔn)確檢測食品中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的速測方法。1 試驗(yàn)部分1.1 儀器和試劑儀器：YN-CLVI農(nóng)藥殘留檢測儀（河南農(nóng)大迅捷測試技術(shù)有限公司）、KQ2200E型超聲波振蕩器（昆山市超聲波儀器有限公司）、恒溫水浴槽（YN-CLVI農(nóng)藥殘留檢測儀配帶）。試劑（主要藥劑均為分析純）：硫化鈉、硫酸鈉、氫氧化鉀、硅藻土、四氯化碳、乙醇、石油醚、乙腈；顯色劑：準(zhǔn)確稱量5.6gKOH溶于適量無水乙醇中，加入0.25gNa2S，用無水乙醇定容至100mL刻度線。氰戊菊酯儲備液（1000ppm）:吸取20%氰戊菊酯0.5ml于100ml容量瓶中，用石油醚（沸程60-90）定容至100ml刻度線。氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)液（10ppm）:吸取0.25ml氰戊菊酯儲備液于25ml的容量瓶中，用石油醚（沸程60-90）定容至25ml刻度線。1.2 樣品前處理將蔬菜洗凈，用剪刀剪成碎塊，稱取40g樣品，置于250ml三角瓶中, 同時做空白和標(biāo)準(zhǔn)，其中，標(biāo)準(zhǔn)中加入10ppm氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)液1ml。四個三角瓶中各加5060ml丙酮，加入40g無水硫酸鈉脫水，同時加入1g左右活性炭脫色（空白與標(biāo)準(zhǔn)中可適量少加一些）。用保鮮膜封住瓶口，充分搖勻后用超聲波振蕩器振蒎提取20min,拿出三角瓶浸泡在涼水中冷卻至蔬菜與硫酸鈉結(jié)晶成塊后用濾紙過濾溶液于100 ml小燒杯中，將燒杯放入6070水浴鍋中加熱，蒸發(fā)近干、無溶液存在后冷卻至室溫，然后加入1ml石油醚充分溶解后移至25ml帶塞比色管中封口待測。1.3試驗(yàn)操作方法分別取20ppm的菊酯農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1ml于25ml比色管中，不足1ml的用石油醚補(bǔ)足。向每個比色管中分別加入3mlCCl4溶液，搖勻，再加入3ml顯色劑試劑，蓋蓋，充分搖勻15秒。于70水浴中加熱3分鐘，至溶液顯橙紅色時取出比色管，加入少量硅藻土沉淀懸浮物，搖勻，靜置10分鐘。溶液過濾于25ml比色管中，在YN-CLVI農(nóng)藥殘留檢測儀505nm波長處測吸光度。樣品經(jīng)過前處理后，測定方法與標(biāo)準(zhǔn)曲線方法相同。2 結(jié)果與討論2.1樣品前處理中浸提液的選擇擬除蟲菊酯類農(nóng)藥是親酯性化合物,用有機(jī)溶劑提取比較容易。目前常用的提取菊酯類農(nóng)藥的溶劑有乙腈、丙酮、丙酮石油醚、丙酮正己烷等溶劑。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果表明對于糧谷類樣品用乙腈浸提效果較好,對于水果樣品而言,用丙酮或乙腈浸提效果相近。2.2反應(yīng)條件的選擇2.1.1反應(yīng)溫度的確定本方法中要使用水浴加熱提高反應(yīng)溫度促使反應(yīng)加快進(jìn)行，分別升高反應(yīng)溫度到55、60、70、75，比較低濃度的線性顯色試驗(yàn)結(jié)果可知，在70、75都能出現(xiàn)線性顯色，但在75反應(yīng)時線性顯色的重現(xiàn)性較差、結(jié)果不穩(wěn)定，因此選擇最佳水浴溫度為70。2.1.2反應(yīng)時間的確定本方法使用水浴加熱會使反應(yīng)加劇，顯色速度加快，因此必須選取最佳的反應(yīng)時間。反應(yīng)時間過短會使顯色不充分，增加反應(yīng)時間雖可增加顯色強(qiáng)度但精確性降低。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定當(dāng)反應(yīng)時間超過5min會使空白的吸光度大于1，當(dāng)反應(yīng)時間為3min時空白的吸光度在0.50.7之間，可以正常測定。2.1.3測定時間的確定因?yàn)橛袡C(jī)溶劑顯色有遞變性，使用本方法在經(jīng)過水浴之后分別取不同時間點(diǎn)測量樣品吸光度值，結(jié)果在3050分鐘內(nèi)樣品回收率為122%81%。經(jīng)過多次試驗(yàn)，結(jié)果都基本相近，由此可知經(jīng)過水浴之后3050分鐘內(nèi)為最佳檢測時間。為了提高速測時間，在不影響測定結(jié)果的前提下，我們將測定點(diǎn)定為30min。2.3方法的線性范圍本試驗(yàn)方法在020ppm的線性范圍內(nèi)符合比爾定律，其回歸方程為y=0.014x-0.0551 （r=0.9897）,方法檢出限為0.7mg/kg。2.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)表1 樣品結(jié)果分析Tab.1 Analytical results of samples 樣品空白標(biāo)準(zhǔn)樣品樣品添加回收率（%）100.0520.0660.128119200.0550.0530.116115300.0540.0120.068104400.0540.0420.098104500.0600.0860.14090600.0490.0410.0961122.5注意事項(xiàng)（1）由于硫化鈉對光和溫度敏感、吸水性強(qiáng)，性質(zhì)非常不穩(wěn)定，配制顯色劑時應(yīng)盡量快速稱量，避光保存。（2）顯色劑配制后使用的最佳時間為配制半天后至第八天，使用前應(yīng)先檢查試劑是否變質(zhì)，變?yōu)樯铧S色時不能使用。（3）配制好顯色劑后要盡量避免搖晃容量瓶，使沉淀物沉淀，吸取時要取上清液使用。（4）由于有機(jī)溶解揮發(fā)性強(qiáng)，四氯化碳又有毒性，在實(shí)驗(yàn)中比色管要隨時蓋蓋，避免吸入有害氣體，做好防護(hù)措施。3 總結(jié)本方法的開發(fā)，我們找到了一種能夠快速準(zhǔn)確的測定蔬菜中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥含量的方法，整個測定時間不超過4小時，加標(biāo)回收率能控制在80%120%之間。另外，將測定的標(biāo)準(zhǔn)改變，方法略作調(diào)整應(yīng)該可用于茶葉中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘量的測定。本方法的不足之處是加熱程度不同影響結(jié)果較大、較難控制，如果這一點(diǎn)能夠改善將會提高測定的穩(wěn)定性。原分光光度法的方法檢出限為200mg/kg,本方法檢出限降低為0.7 mg/kg。文獻(xiàn)1 Cuets C, Dale WE. Rapid Colorimetric determination of total Pyrethrin by Reaction with sulfur, allethrin and furethrin J . Anal Chem,1953, 25 （8）: 13671369.2 W