內(nèi)皮祖細(xì)胞與動(dòng)脈瘤的發(fā)生與發(fā)展.doc

www.CRTER.org梁超杰，等. 內(nèi)皮祖細(xì)胞與動(dòng)脈瘤的發(fā)生與發(fā)展內(nèi)皮祖細(xì)胞與動(dòng)脈瘤的發(fā)生與發(fā)展*梁超杰1，閔國文2，郭 庚1 (山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，1神經(jīng)外科，2神經(jīng)內(nèi)科，山西省太原市 030001)文章亮點(diǎn)：1 此問題的已知信息：內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞，在生理或病理因素刺激下，可從骨髓動(dòng)員到外周血參與損傷血管的修復(fù)。內(nèi)皮祖細(xì)胞是一群具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。2 文章增加的新信息：目前研究認(rèn)為內(nèi)皮祖細(xì)胞可修復(fù)血管損傷，從而為臨床診斷、治療和預(yù)防動(dòng)脈瘤提供一定的理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。3 臨床應(yīng)用的意義：內(nèi)皮祖細(xì)胞取材方便，在血管再生和心血管疾病的細(xì)胞治療和基因治療中具有廣闊的應(yīng)用前景。例如，利用內(nèi)皮祖細(xì)胞修復(fù)心肌梗死患者的心臟，治療臨床肢體缺血，治療冠狀動(dòng)脈疾病，改善血管移植物的通暢率，改善糖尿病患者的血管形成能力，定向抑制腫瘤血管生成，作為基因治療導(dǎo)向載體和靶細(xì)胞等等，應(yīng)用內(nèi)皮細(xì)胞治療心血管疾病將是很有前途的新方法。關(guān)鍵詞：組織構(gòu)建；組織構(gòu)建綜述；內(nèi)皮祖細(xì)胞；動(dòng)脈瘤；顱內(nèi)動(dòng)脈瘤；頸動(dòng)脈瘤；胸主動(dòng)脈瘤；腹主動(dòng)脈瘤；干細(xì)胞；生物學(xué)特性；省級(jí)基金主題詞：內(nèi)皮細(xì)胞；動(dòng)脈瘤；干細(xì)胞；生物學(xué)基金資助：山西省高等學(xué)校創(chuàng)新人才支持計(jì)劃資助項(xiàng)目*摘要背景：內(nèi)皮祖細(xì)胞具有修復(fù)血管損傷及預(yù)測(cè)早期血管損傷程度的功能。這一生物學(xué)特性被引入到動(dòng)脈瘤的研究之中，為動(dòng)脈瘤的發(fā)生、發(fā)展、早期診斷及治療提供新的思路。目的：從內(nèi)皮祖細(xì)胞的生物學(xué)特性(增殖、遷移、黏附、衰老)及其在外周循環(huán)血中的數(shù)量和內(nèi)皮祖細(xì)胞用于動(dòng)脈瘤的相關(guān)臨床實(shí)驗(yàn)資料進(jìn)行總結(jié)分析。方法：以“內(nèi)皮祖細(xì)胞、前體細(xì)胞、動(dòng)脈瘤、干細(xì)胞”，“ endothelial progenitor cells、precursor、aneurysm、stem cell”為檢索詞，應(yīng)用計(jì)算機(jī)檢索期刊萬方數(shù)據(jù)庫、中國知網(wǎng)(CNKI)數(shù)據(jù)庫及Pubmed數(shù)據(jù)庫、Springer數(shù)據(jù)庫，Sciencedirect數(shù)據(jù)庫、Ovid數(shù)據(jù)庫。排除與動(dòng)脈瘤研究無關(guān)或內(nèi)容重復(fù)的文獻(xiàn)，對(duì)納入文獻(xiàn)做進(jìn)一步分析。結(jié)果與結(jié)論：動(dòng)脈瘤患者的外周循環(huán)血中內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量減少并伴有功能受損。在接受動(dòng)脈瘤的相關(guān)治療后內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量上升。內(nèi)皮祖細(xì)胞可早期預(yù)測(cè)動(dòng)脈瘤的發(fā)生、發(fā)展和破裂，也可作為一種治療方法去阻止動(dòng)脈瘤的發(fā)生。如何將內(nèi)皮祖細(xì)胞廣泛的應(yīng)用到臨床當(dāng)中去預(yù)防和防止動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展是亟待解決的問題。Endothelial progenitor cells and occurrence and development of aneurysm Liang Chao-jie1, Min Guo-wen2, Guo Geng1 (1Department of Neurosurgery, 2Department of Neurology, the First Hospital, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China)梁超杰，男，1990年生，山西省介休市人，漢族，山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)外科在讀碩士，主要從事腦血管病研究。通訊作者：郭庚，博士，副主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師。山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)外科，山西省太原市 030001 中圖分類號(hào):R318文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):2095-4344(2013)50-08752-06 修回日期：2013-10-16(201308053/WW)Liang Chao-jie, Studying for masters degree, Department of Neurosurgery, the First Hospital, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, CCorresponding author: Guo Geng, M.D., Associate chief physician, Masters supervisor, Department of Neurosurgery, the First Hospital, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, C Accepted: 2013-10-16AbstractBACKGROUND: Endothelial progenitor cells can be used to repair vascular injuries and predict severity of early vascular injuries. These biological characteristics have been recommended to the research of aneurysm, which provide new ideas for studying the occurrence, expansion and early staging diagnosis of aneurysm.OBJECTIVE: To elaborate the effects of endothelial progenitor cells on the aneurysm in the clinical trials based on the biological characteristics of endothelial progenitor cells, including proliferation, migration, adherence and senescence.METHODS: A computer-based search of Wanfang, CNKI, Springer, PubMed, ScienceDirect, and Ovid was performed using the keywords of “endothelial progenitor cells, precursor cell, aneurysm, stem cell”. Irrelevant and repetitive articles were excluded, and the result analysis was conducted. RESULTS AND CONCLUSION: Aneurysms patients display decreased endothelial progenitor cells in the peripheral circulating blood accompanied by functional impairment. After aneurysm-related treatment, the number of endothelial progenitor cells can increase. Application of endothelial progenitor cells can early predict occurrence, development, and rupture of aneurysms, which is also a therapeutic method to prevent aneurysms. 8753ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAHHow endothelial progenitor cells are used clinically to prevent occurrence and development of aneurysms is a serious problem to be solved.Subject headings: endothelial cells; aneurysm; stem cells; biologyFunding: the Program for the Innovative Talents of Higher Learning Institutions of Shanxi Province*Liang CJ, Min GW, Guo G. Endothelial progenitor cells and occurrence and development of aneurysm. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2013;17(50):8752-8757.8757ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH0 引言 Introduction1997年 Asahara等首次發(fā)現(xiàn)外周血存在內(nèi)皮祖細(xì)胞后，內(nèi)皮祖細(xì)胞逐漸成為研究熱點(diǎn)。內(nèi)皮祖細(xì)胞是內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞，是一種多能干細(xì)胞。大量研究表明其既參與了胚胎時(shí)期的血管發(fā)育和形成，也對(duì)出生后成體血管的新生、修復(fù)、重建等有重要作用，這一生物學(xué)特性被越來越多的引入到相關(guān)血管疾病的基礎(chǔ)與臨床研究之中，為血管病的發(fā)生發(fā)展、早期診斷、新型治療、預(yù)后判斷提供了新思路。1 資料和方法 Data and methods1.1 資料來源 檢索人相關(guān)內(nèi)容：第一作者。 檢索時(shí)間范圍：1990年1月至2013年7月。 檢索詞：英文檢索詞“endothelial progenitor cells，precursor cell，aneurysm、stem cell”； 中文檢索詞“內(nèi)皮祖細(xì)胞，前體細(xì)胞，動(dòng)脈瘤、干細(xì)胞”。 檢索數(shù)據(jù)庫：Pubmed 數(shù)據(jù)庫，網(wǎng)址：/PubMed/；CNKI數(shù)據(jù)庫，網(wǎng)址: /；Spinger數(shù)據(jù)庫，網(wǎng)址：/；Sciencedirect數(shù)據(jù)庫，網(wǎng)址: /；Ovid數(shù)據(jù)庫，網(wǎng)址: /。檢索文獻(xiàn)量：共檢索到243篇文獻(xiàn)。 1.2 檢索方法 納入標(biāo)準(zhǔn)：與內(nèi)皮祖細(xì)胞有關(guān)的文獻(xiàn)。與未破裂和已破裂動(dòng)脈瘤實(shí)驗(yàn)有關(guān)的文獻(xiàn)。 排除標(biāo)準(zhǔn)：與納入標(biāo)準(zhǔn)無關(guān)及重復(fù)的文獻(xiàn)。 質(zhì)量評(píng)估：計(jì)算機(jī)初檢得到243篇文獻(xiàn)，包括中文45篇，英文198篇。閱讀標(biāo)題和摘要進(jìn)行初篩，排除研究目的與本文無關(guān)及內(nèi)容重復(fù)的研究195篇，最后保留其中48篇?dú)w納總結(jié)。 2 結(jié)果 Results2.1 內(nèi)皮祖細(xì)胞 1997年，Asahara等1首次從外周血中分離出了CD34+造血干細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)其可向內(nèi)皮表型細(xì)胞分化，表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志并參與血管形成，后將此類細(xì)胞命名為內(nèi)皮祖細(xì)胞，隨之人類進(jìn)入了對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞的研究熱潮中。2.1.1 生物學(xué)特性 繼Asahara在外周血分離出內(nèi)皮祖細(xì)胞后，Murohara等2又在臍血中發(fā)現(xiàn)其的存在。隨后，人們又相繼在胎兒肝臟、骨髓、動(dòng)脈外膜、脂肪組織中分離出內(nèi)皮祖細(xì)胞3-4，其中骨髓中的內(nèi)皮祖細(xì)胞含量豐富，增殖能力最強(qiáng)。內(nèi)皮祖細(xì)胞具有游走與增殖分化功能，但其缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的表面標(biāo)志，且無管腔樣結(jié)構(gòu)，故僅從形態(tài)學(xué)上難以辨認(rèn)。CD34、CD133和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2是目前分辨內(nèi)皮祖細(xì)胞最常用的表面抗原分子5。內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離方法有多種，主要有密度梯度離心法和免疫磁珠分選法6。根據(jù)國內(nèi)外報(bào)道，對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞的培養(yǎng)較常采用的培養(yǎng)基是M199。在人體，影響外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量的因素有多種，主要分為促進(jìn)因素和抑制因素。促進(jìn)因素包括：雌激素、運(yùn)動(dòng)、心肌梗塞、血管損傷、充血性心力衰竭、HMG-CoA還原酶抑制劑、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、促紅細(xì)胞生成素、G-CSF、胚胎發(fā)育、-級(jí)心衰；抑制因素有：抽煙、家族史、高血壓、肢體缺血、2型糖尿病、鐮狀細(xì)胞性貧血、內(nèi)毒素、立克次體感染、-級(jí)心衰等。2.1.2 臨床應(yīng)用 內(nèi)皮祖細(xì)胞參與出生后的血管再生，為臨床疾病的血管重建提供了一種新的治療策略。與此同時(shí)，它也參與了腫瘤生長(zhǎng)、創(chuàng)傷愈合等過程7。內(nèi)皮祖細(xì)胞可從外周血獲取并進(jìn)行體外擴(kuò)增，通過回輸提高循環(huán)血中內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量，且可避免免疫細(xì)胞移植與異源問題，而達(dá)到修復(fù)損傷血管的目的。 抗腫瘤治療：內(nèi)皮祖細(xì)胞可向腫瘤血管形成部位聚集并促進(jìn)腫瘤周圍血管新生，腫瘤血管形成主要靠?jī)?nèi)皮祖細(xì)胞動(dòng)員合成。Davidoff等8研究認(rèn)為通過血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2的中和抗體拮抗血管內(nèi)皮成長(zhǎng)因子對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞的募集作用能夠延遲腫瘤血管的建立，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)。他們通過編碼血管新生抑制因子的基因轉(zhuǎn)染內(nèi)皮祖細(xì)胞，使血管抑制劑持續(xù)表達(dá)，腫瘤生長(zhǎng)速度明顯減慢。因此通過抑制內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖和功能來抑制腫瘤組織的生長(zhǎng)將有很大的研究空間。缺血性腦血管疾病的治療：Taguchi等9利用卒中動(dòng)物模型證實(shí)，應(yīng)用CD34+細(xì)胞注射入腦卒中小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腦缺血區(qū)的新生血管形成增加，而且增強(qiáng)了神經(jīng)發(fā)生并改善其功能。同樣，在卒中大鼠模型中，靜注人臍血細(xì)胞可以順利進(jìn)入腦組織，并在缺血的腦組織內(nèi)發(fā)生分化，構(gòu)成神經(jīng)再生的微環(huán)境，從而改善神經(jīng)功能10。不同的研究已經(jīng)證實(shí)，內(nèi)皮祖細(xì)胞可以參與缺血后新生血管的形成。這為缺血性腦卒中的治療提供了新的治療思路。缺血性心血管疾病的治療：研究表明內(nèi)皮祖細(xì)胞自體注入后可以作為介入治療后預(yù)防血栓形成和再狹窄的措施11。注入的內(nèi)皮祖細(xì)胞遷移至支架處的血管再內(nèi)皮化，并分泌多種細(xì)胞因子促進(jìn)周圍內(nèi)皮細(xì)胞遷移至損傷區(qū)域，同時(shí)刺激損傷出的內(nèi)皮祖細(xì)胞分化為內(nèi)皮細(xì)胞。另有研究發(fā)現(xiàn)，為了減少病理性的心室重構(gòu)，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑被應(yīng)用到心肌梗死患 者12，這類藥可以增加循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)目。創(chuàng)傷性疾病中的應(yīng)用：研究發(fā)現(xiàn)，顱腦損傷患者在外傷后的24 h內(nèi)，內(nèi)皮祖細(xì)胞從骨髓動(dòng)員至外周血并遷移到腦血管損傷部位參與血管再生13。內(nèi)皮祖細(xì)胞作為血管再生的必要條件，可以通過增加其數(shù)量來促進(jìn)血管再生，加快神經(jīng)恢復(fù)。2.2 動(dòng)脈瘤與內(nèi)皮祖細(xì)胞2.2.1 顱內(nèi)動(dòng)脈瘤 顱內(nèi)動(dòng)脈瘤破裂出血是蛛網(wǎng)膜下腔出血的主要原因。蛛網(wǎng)膜下腔出血位居腦血管意外的第3位，發(fā)病僅次于腦血栓形成及高血壓腦出血，具有高致殘率和致死率的特點(diǎn)。到目前為止，對(duì)顱內(nèi)未破裂和已破裂動(dòng)脈瘤的主要治療手段為開顱夾閉或通過介入栓塞治療，但這兩種治療方式均有一定的治療風(fēng)險(xiǎn) 14。內(nèi)皮功能障礙是顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成過程中的早期病理生理變化，是顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的始動(dòng)環(huán)節(jié)和促發(fā)因素15。大量研究發(fā)現(xiàn)，血管內(nèi)皮的損傷和修復(fù)失衡是顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的形成條件16。損傷和修復(fù)失衡可以引起一系列瀑布鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，最終導(dǎo)致動(dòng)脈壁結(jié)構(gòu)的破壞，誘發(fā)動(dòng)脈瘤的形成，而內(nèi)皮祖細(xì)胞修復(fù)內(nèi)皮的功能為人們提供了新思路。徐勇等17將40只SD大鼠分為兩組，一組建立顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型，另一組為正常對(duì)照組。通過流式細(xì)胞儀分別記錄造模后2周、1個(gè)月末、2個(gè)月末循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量，發(fā)現(xiàn)模型組循環(huán)血中內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)于2周后開始下降，并一直持續(xù)到2個(gè)月末。此外發(fā)現(xiàn)模型組大鼠動(dòng)脈瘤基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)明顯高于正常組大鼠，內(nèi)皮型一氧化氮合酶明顯低于正常組。該實(shí)驗(yàn)認(rèn)為循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量降低可能是動(dòng)脈瘤生成的一個(gè)重要因素。Wei等18通過對(duì)14例動(dòng)脈瘤破裂患者和18例健康對(duì)照者進(jìn)行循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈瘤破裂患者的循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)明顯下降。在進(jìn)行手術(shù)栓塞治療后，患者的外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)目開始增加，在術(shù)后14 d達(dá)到高峰；血小板和血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平的變化趨勢(shì)同內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量的變化趨勢(shì)平行。該研究認(rèn)為循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞水平可能會(huì)成為一個(gè)預(yù)測(cè)動(dòng)脈瘤發(fā)生發(fā)展、評(píng)估外科治療方法的標(biāo)志。Wei等19還研究了未破裂和已破裂顱內(nèi)動(dòng)脈瘤之間的外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞差異，他們通過納入56例顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者(含未破裂和已破裂)和40例健康人群，利用流式細(xì)胞儀分析動(dòng)脈瘤患者及正常志愿者循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞水平，發(fā)現(xiàn)與正常對(duì)照組相比，未破裂和已破裂動(dòng)脈瘤患者的循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量均明顯降低，其遷移能力降低、衰老百分比增加、血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平增加，但兩者之間無明顯差異。該研究指出顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者的循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量減少、功能受損，并認(rèn)為該改變是顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成和發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。他們還認(rèn)為循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞和血漿血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是參與血管損傷后修復(fù)的兩個(gè)重要因素，二者失衡在動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起著十分重要的作用。Xu等20研究了藥物對(duì)顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的影響，他們對(duì)建立顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型的SD大鼠進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn)，顱內(nèi)動(dòng)脈瘤大鼠循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量顯著減少，促紅細(xì)胞生成素能顯著提高顱內(nèi)動(dòng)脈瘤大鼠的循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量及血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平，并能抑制大鼠顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的發(fā)生與發(fā)展。與此同時(shí)，促紅細(xì)胞生成素還能降低大鼠顱內(nèi)動(dòng)脈瘤誘導(dǎo)性一氧化碳合酶、基質(zhì)金屬蛋白酶2及基質(zhì)金屬蛋白酶9這類血管損傷因子mRNA的表達(dá)，提高血管內(nèi)皮型一氧化氮合酶mRNA表達(dá)水平。該研究提示循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量和血管修復(fù)相關(guān)因子的基因表達(dá)水平與顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系，同時(shí)促紅細(xì)胞生成素是一種有前景的針對(duì)顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的藥物干預(yù)措施，而循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞可能成為顱內(nèi)動(dòng)脈瘤預(yù)防與治療的新靶點(diǎn)，為顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的預(yù)防和治療提供了新的方向。其他研究者也得出了類似的結(jié)果，封灝等21通過對(duì)未破裂顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)目的研究發(fā)現(xiàn)，顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞計(jì)數(shù)較正常對(duì)照組明顯減少。Liang等22通過收集24例未破裂顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者和24名正常對(duì)照組的外周血，提取CD34+、CD133+、EGFR-2陽性細(xì)胞，并對(duì)其數(shù)量、克隆形成能力、遷徙和黏附能力進(jìn)行了評(píng)估發(fā)現(xiàn)，未破裂顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞計(jì)數(shù)及其各項(xiàng)生物功能均顯著降低，均提示顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者體內(nèi)的內(nèi)皮祖細(xì)胞可能參與了顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的修復(fù)與重建。2.2.2 頸動(dòng)脈瘤 Fang等23將10只彈性蛋白酶誘導(dǎo)的頸動(dòng)脈瘤兔子模型隨機(jī)分為兩組，并用已標(biāo)記的自體內(nèi)皮祖細(xì)胞分別通過頸動(dòng)脈和靜脈輸注。3個(gè)星期后發(fā)現(xiàn)全部頸動(dòng)脈輸入組兔子和3個(gè)靜脈輸入組兔子的動(dòng)脈瘤部位存在標(biāo)記的內(nèi)皮祖細(xì)胞，并檢測(cè)到動(dòng)脈瘤的修復(fù)。Li等24建立了15只豬彈性蛋白酶誘導(dǎo)的頸動(dòng)脈瘤兔子模型，在接受血流導(dǎo)向支架療法后，隨機(jī)分為3組。第1組和第2組分別在術(shù)后第1天和第15天輸入雙標(biāo)記的自體內(nèi)皮祖細(xì)胞，第3組為空白對(duì)照組。用熒光電鏡觀察雙標(biāo)記內(nèi)皮祖細(xì)胞的存在，用電鏡觀察動(dòng)脈瘤的修復(fù)情況。第1組中的3/5可檢測(cè)到雙標(biāo)記的內(nèi)皮祖細(xì)胞出現(xiàn)在頸動(dòng)脈瘤的內(nèi)膜下層或支架旁，動(dòng)脈瘤頸被內(nèi)膜完全覆蓋，在新生內(nèi)膜上有許多分散的血小板和炎性細(xì)胞。第2組中的2/5可檢測(cè)到雙標(biāo)記的內(nèi)皮祖細(xì)胞出現(xiàn)在內(nèi)膜表面，動(dòng)脈瘤頸和載瘤動(dòng)脈的新生內(nèi)膜上有大量?jī)?nèi)皮樣細(xì)胞，在新生內(nèi)膜上有少量血小板和炎性細(xì)胞。此結(jié)果表明內(nèi)皮祖細(xì)胞可能根據(jù)內(nèi)膜形成的不同過程分化為不同類型的細(xì)胞，在接受血流導(dǎo)向支架療法后內(nèi)皮祖細(xì)胞參與了新生內(nèi)膜的形成和動(dòng)脈瘤的內(nèi)皮化。2.2.3 胸主動(dòng)脈瘤 胸主動(dòng)脈瘤是嚴(yán)重的血管外科疾病，其病理改變主要為內(nèi)皮細(xì)胞損傷及剝脫、中膜平滑肌細(xì)胞凋亡、細(xì)胞外基質(zhì)的病理性重塑，同時(shí)伴有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)25。 Eizawa等26招募了13例主動(dòng)脈瘤患者(胸主動(dòng)脈瘤7例，腹主動(dòng)脈瘤6例)，分別測(cè)量其在術(shù)前、術(shù)后6，12，24，48 h和術(shù)后7 d的外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量，并與10名正常對(duì)照組相比，發(fā)現(xiàn)術(shù)前外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量是降低的，直到術(shù)后48 h時(shí)，內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量仍未改變。但在術(shù)后7 d時(shí)，內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量是術(shù)前的2倍。同時(shí)他們還測(cè)量了血清的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平，發(fā)現(xiàn)術(shù)前患者和正常對(duì)照組的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平無明顯差異，但在術(shù)后48 h后，其水平顯著增高。該實(shí)驗(yàn)表明內(nèi)皮祖細(xì)胞可能促使新血管形成。2.2.4 腹主動(dòng)脈瘤 腹主動(dòng)脈瘤是一種慢性退行性疾病，主要影響老年男性，75歲的男性有12.5%或更高的發(fā)病率。隨著人口的增加，發(fā)病率正在增加。破裂的腹主動(dòng)脈瘤目前在美國的死亡原因中排第13位，該病已成為一巨大威脅。當(dāng)動(dòng)脈瘤直徑大于5 cm時(shí)，血管內(nèi)治療和手術(shù)治療是最主要的辦法。但不幸的是，目前并無有效的方法去治愈或停止腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)展，動(dòng)脈瘤也沒有具體的治療標(biāo)準(zhǔn)。越來越多的研究表示可能有一定的辦法去延遲動(dòng)脈瘤的增長(zhǎng)，但目前沒有一種方法可以廣泛應(yīng)用到臨床27。腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，動(dòng)脈瘤的膨脹模型顯示動(dòng)脈中膜和外膜有彈性蛋白和膠原的破壞，并有內(nèi)側(cè)平滑肌的缺失，這使得血管壁變薄28-29。此外，腹主動(dòng)脈瘤的組織學(xué)檢查中發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮完整性受損導(dǎo)致了血栓的形成30。在一個(gè)腹主動(dòng)脈瘤模型中，通過動(dòng)靜脈瘺創(chuàng)建高主動(dòng)脈血流與正常和低主動(dòng)脈血流的比較中發(fā)現(xiàn)，高主動(dòng)脈血流促進(jìn)了腹主動(dòng)脈瘤的再內(nèi)皮化并阻礙了腹主動(dòng)脈瘤的進(jìn)展31。由此看來，腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生與動(dòng)脈內(nèi)膜的損傷有關(guān)，而腹主動(dòng)脈瘤的進(jìn)展與內(nèi)皮的完整性相關(guān)。Sung等32登記了78例腹主動(dòng)脈瘤患者，對(duì)其外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量和各項(xiàng)功能(增殖、黏附、血管形成、衰老)進(jìn)行測(cè)量后發(fā)現(xiàn)，腹主動(dòng)脈瘤患者中的外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量減少且各項(xiàng)功能均受損。該實(shí)驗(yàn)表明，內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量減少和功能受損可能促使了腹主動(dòng)脈瘤的形成，而使用增加內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量的藥物干預(yù)治療可能會(huì)改善腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生和發(fā)展。Van spyk等33選取12例腹主動(dòng)脈瘤患者和12例周圍血管病變患者，對(duì)他們的外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)腹主動(dòng)脈瘤患者的外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量比周圍血管病變的多。該實(shí)驗(yàn)認(rèn)為通過測(cè)量外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量，可推斷周圍血管病變的危險(xiǎn)性比腹主動(dòng)脈瘤的高，并認(rèn)為CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)可能可以作為一個(gè)評(píng)估血管性疾病危險(xiǎn)度的指標(biāo)。雖然上述得到的結(jié)果都為腹主動(dòng)脈瘤患者體內(nèi)循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞減少，但有學(xué)者卻得到相反的結(jié)果。Dawson等34通過對(duì)25名年齡相仿的腹主動(dòng)脈瘤患者和18名正常人進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，腹主動(dòng)脈瘤患者外周血的內(nèi)皮祖細(xì)胞比正常人的內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量多，他們認(rèn)為患者的內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)目的增加是因?yàn)槠湔趪L試修復(fù)動(dòng)脈瘤。內(nèi)皮祖細(xì)胞在腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生、發(fā)展各階段所發(fā)揮的不同作用機(jī)制仍需進(jìn)一步的觀察研究，為臨床治療腹主動(dòng)脈瘤提供了新思路。3 問題與展望 Problems and prospects內(nèi)皮祖細(xì)胞存在于外周血、臍血和骨髓中，取材方便，為血管再生和心血管疾病的細(xì)胞治療和基因治療提供了廣泛的細(xì)胞來源35-47。內(nèi)皮祖細(xì)胞在動(dòng)脈瘤的研究還有很大的空間48，雖然有些實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同，但目前大致認(rèn)為動(dòng)脈瘤患者的循環(huán)血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量減少并伴有功能受損，在接受治療后這一情況得到改善，但更深層的機(jī)制尚未見闡述，例如該如何利用內(nèi)皮祖細(xì)胞去早期診斷動(dòng)脈瘤的發(fā)生，在動(dòng)脈瘤發(fā)生發(fā)展的不同階段，內(nèi)皮祖細(xì)胞分別起到什么樣的作用，以及如何利用內(nèi)皮祖細(xì)胞去判斷手術(shù)愈后等?？傊?，如何將內(nèi)皮祖細(xì)胞廣泛的應(yīng)用到臨床當(dāng)中去預(yù)防和防止動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展是亟待解決的問題。作者貢獻(xiàn)：第一作者檢索、分析文獻(xiàn)，并完成本綜述，第一作者對(duì)文章負(fù)責(zé)，全體作者參與文獻(xiàn)篩選和質(zhì)量評(píng)估，通訊作者指導(dǎo)論文構(gòu)架、審校論文并提出了重要修改意見。利益沖突：課題未涉及任何廠家及相關(guān)雇主或其他經(jīng)濟(jì)組織直接或間接的經(jīng)濟(jì)或利益的贊助。倫理要求：沒有與相關(guān)倫理道德沖突的內(nèi)容。學(xué)術(shù)術(shù)語：內(nèi)皮祖細(xì)胞-1997年Asahara等首次證明循環(huán)外周血中存在能分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,并將其命名為血管內(nèi)皮祖細(xì)胞，內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞，在生理或病理因素刺激下,可從骨髓動(dòng)員到外周血參與損傷血管的修復(fù)。作者聲明：文章為原創(chuàng)作品，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，內(nèi)容不涉及泄密，無一稿兩投，無抄襲，無內(nèi)容剽竊，無作者署名爭(zhēng)議，無與他人課題以及專利技術(shù)的爭(zhēng)執(zhí)，內(nèi)容真實(shí)，文責(zé)自負(fù)。4 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