黑龍江出入境檢驗檢疫局實驗室技術(shù)比武醫(yī)學(xué)實驗室考核要求

1 黑龍江出入境檢驗檢疫局實驗室技術(shù)比武醫(yī)學(xué)實驗室考核要求 黑龍江國際旅行衛(wèi)生保健中心鞠文東 2 1理論考試的總體原則 A應(yīng)知 理論上應(yīng)該掌握的基礎(chǔ)知識B應(yīng)會 實踐操作中應(yīng)了解關(guān)鍵環(huán)節(jié)C應(yīng)用 主要是日常工作中經(jīng)常應(yīng)用的項目 而不是提高難度D理論結(jié)合實踐E促進日常工作 大比武的目的在于加強培訓(xùn) 提高人員素質(zhì)和業(yè)務(wù)水平 3 2理論考試的總體范圍 A醫(yī)學(xué)檢驗基本知識B醫(yī)學(xué)檢驗質(zhì)控方式和方法C醫(yī)學(xué)檢驗結(jié)果的臨床意義與合理解釋D醫(yī)學(xué)檢驗正常值 4 3理論考試的參考資料 A全省醫(yī)學(xué)實驗室管理體系文件B實驗室檢驗標準 全國艾滋病檢測規(guī)范 全國臨檢驗操作規(guī)程 C生物安全資料 實驗室生物安全通用要求 醫(yī)療廢棄物處理 D內(nèi)部培訓(xùn)考核試題 5 醫(yī)學(xué)實驗室管理體系文件 1全省醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量方針2醫(yī)學(xué)實驗室管理要求 作業(yè)指導(dǎo)書第一部分 6 全國艾滋病檢測規(guī)范 2004版本共10章樣品的采集和處理HIV抗體檢測艾滋病實驗室安全防護和職業(yè)暴露預(yù)防艾滋病實驗室質(zhì)量管理 7 其它參考文獻 全國臨檢驗操作規(guī)程 第三版 只涉及日常操作中的常規(guī)項目GB實驗室生物安全通用要求醫(yī)療廢棄物分類目錄內(nèi)部培訓(xùn)考核熟悉題型和考核模式 8 4理論考試的參考題型 A填空B判斷C選擇D簡答E論述F應(yīng)用 9 5理論和實踐考試的分數(shù)分配 1理論考試 100分內(nèi)容 A17025標準B醫(yī)學(xué)檢驗基本知識指定的參考資料2實踐操作 100分內(nèi)容 兩個項目各50分 10 醫(yī)學(xué)實驗室生物安全要求 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范 第七章艾滋病實驗室安全防護和職業(yè)暴露預(yù)防A實驗室生物安全級別B實驗室安全防護C廢棄物處置和消毒D實驗室意外和事故處理E艾滋病的職業(yè)暴露后預(yù)防 11 12 醫(yī)學(xué)實驗室生物安全要求 GB19489 2004實驗室生物安全通用要求6 2BSL 2實驗室9管理要求管理資任員工健康管理安全設(shè)計安全計劃危險標識事故報告 13 14 醫(yī)療廢物分類 1感染性廢物2病理性廢物3損傷性廢物4藥物性廢物5化學(xué)性廢物 15 感染性廢物攜帶病原微生物具有引發(fā)感染性疾病傳播危險的醫(yī)療廢物 1 被病人血液 體液 排泄物污染的物品 包括 1 棉球 棉簽 紗布及其他各種敷料 2 一次性用品 一次性醫(yī)療器械 3 廢棄的被服 4 其他被病人血液 體液 排泄物污染的物品 2 傳染病病人或者疑似傳染病病人產(chǎn)生的生活垃圾 16 感染性廢物 3 病原體的培養(yǎng)基 標本和菌種 毒種保存液 4 各種廢棄的醫(yī)學(xué)標本 5 廢棄的血液 血清 6 使用后的一次性使用醫(yī)療用品及一次性醫(yī)療器械視為感染性廢物 17 損傷性廢物能夠刺傷或者割傷人體的廢棄的醫(yī)用銳器 1 醫(yī)用針頭 縫合針 2 各類醫(yī)用銳器 包括 解剖刀 手術(shù)刀 備皮刀 手術(shù)鋸等 3 載玻片 玻璃試管 玻璃安瓿等 18 藥物性廢物過期 淘汰 變質(zhì)或者被污染的廢棄的藥品 1 廢棄的一般性藥品 如 抗生素 非處方類藥品等 2 廢棄的細胞毒性藥物和遺傳毒性藥物 包括 1 致癌性藥物 2 可疑致癌性藥物 3 免疫抑制劑 3 廢棄的疫苗 血液制品等 19 化學(xué)性廢物具有毒性 腐蝕性 易燃易爆性的廢棄的化學(xué)物品 1 醫(yī)學(xué)影像室 實驗室廢棄的化學(xué)試劑 2 廢棄的過氧乙酸 戊二醛等化學(xué)消毒劑 3 廢棄的汞血壓計 汞溫度計 20 病理性廢物診療過程中產(chǎn)生的人體廢棄物和醫(yī)學(xué)實驗動物尸體等 1 手術(shù)及其他診療過程中產(chǎn)生的廢棄的人體組織 器官等 2 醫(yī)學(xué)實驗動物的組織 尸體 3 病理切片后廢棄的人體組織 病理臘塊等 21 臨床實驗室質(zhì)量管理要素 分析前質(zhì)量保證臨床實驗室溯源質(zhì)量控制基礎(chǔ)室內(nèi)質(zhì)量控制能力驗證要求分析后質(zhì)量保證 22 醫(yī)學(xué)實驗室內(nèi)部質(zhì)控基礎(chǔ) Levey Jennings質(zhì)控圖法室內(nèi)質(zhì)控的實際操作1 設(shè)定質(zhì)控圖的中心線 均值 2 標準差的建立3 由質(zhì)控規(guī)則決定質(zhì)控限 質(zhì)控限通常是以標準差的倍數(shù)表示 4 更換質(zhì)控品 23 醫(yī)學(xué)實驗室內(nèi)部質(zhì)控基礎(chǔ) 5 質(zhì)控規(guī)則的應(yīng)用6 質(zhì)控圖的圖形分析1 曲線漂移2 趨勢性變化3 連續(xù)多點分布在中心線一側(cè)4 其他劇律性變化 24 醫(yī)學(xué)實驗室內(nèi)部質(zhì)控基礎(chǔ) Westgard多規(guī)則質(zhì)控方法質(zhì)控規(guī)則以符號AL表示 其中A是超過質(zhì)控界限的質(zhì)控測定值的個數(shù)或統(tǒng)計量 L為質(zhì)控界限 如13s指的是質(zhì)控界限為均數(shù) 3s 有一個質(zhì)控結(jié)果超出此界限 25 醫(yī)學(xué)實驗室內(nèi)部質(zhì)控基礎(chǔ) Westgard多規(guī)則使用了下列質(zhì)控規(guī)則12s 個質(zhì)控結(jié)果超過均值 2s 僅用作 警告 規(guī)則 并啟動由其他規(guī)則來檢驗質(zhì)控數(shù)據(jù) 13s 一個質(zhì)控結(jié)果超過均值 3s 就判斷失控 該規(guī)則主要對隨機誤差敏感 26 醫(yī)學(xué)實驗室內(nèi)部質(zhì)控基礎(chǔ) 22s 兩個連續(xù)的質(zhì)控結(jié)果同時超過均值 2s或均值 2s 就判斷失控 該規(guī)則對系統(tǒng)誤差敏感 R4s 一個質(zhì)控結(jié)果超過均值 2s 另一個質(zhì)控結(jié)果超過均值 2s 就判斷失控 該規(guī)則對隨機誤差敏感 27 醫(yī)學(xué)實驗室內(nèi)部質(zhì)控基礎(chǔ) 41s 四個連續(xù)的質(zhì)控結(jié)果同時超過均值 1s或均值 1s 就判斷失控 該規(guī)則對系統(tǒng)誤差敏感 10X 10個連續(xù)的質(zhì)控結(jié)果落在均值的一側(cè) 高或低于均值 對偏離的大小沒有要求 就判斷失控 該規(guī)則對系統(tǒng)誤差敏感 28 29 30 31 32 33 34 35 繪制和分析質(zhì)控圖的要點 要在常規(guī)條件下建立質(zhì)控圖參數(shù) 用S CO比值繪制質(zhì)控圖 對同一批質(zhì)控物連續(xù)測定得到20個數(shù)據(jù) 求均值 x 和標準差 s 由專人負責(zé)建立質(zhì)控圖 每月質(zhì)控分析 討論本月的質(zhì)量控制情況 長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒 更換不同廠家的試劑盒后 必須重新繪制質(zhì)控圖 36 繪制和分析質(zhì)控圖的要點 質(zhì)控結(jié)果失控 應(yīng)填寫失控記錄 上交質(zhì)量負責(zé)人 分析原因并決定是否發(fā)出檢測報告 使用新批次的外部對照質(zhì)控物時 必須重新繪制質(zhì)控圖 37 醫(yī)學(xué)實驗室內(nèi)部質(zhì)控基礎(chǔ) 建立質(zhì)控圖分析及失控情況處理程序 當質(zhì)控已有計劃并恰當?shù)貓?zhí)行時 要求可靠的平均值和標準差用于計算質(zhì)控限 將假失控概率降到最低 當出現(xiàn)失控時進行如重復(fù)質(zhì)控測定或重新分析新的質(zhì)控物不是最有效的方法 必須找出問題原因 找出解除故障的方法 并消除原因 防止將來出現(xiàn)同樣的問題 38 醫(yī)學(xué)實驗室樣品管理 樣品的管理是質(zhì)量管理中的核心問題之一 一 樣品的采集 傳遞和準備二 樣品的登記三 檢測樣品的處理 39 醫(yī)學(xué)實驗室常規(guī)檢驗各論 一 免疫學(xué)常規(guī)項目檢測 一 了解各項目意義 原理 二 艾滋病病毒抗體 HIV Ab 檢測 ELISA法 三 梅毒血清學(xué)檢測 RPR TPPA 四 丙型肝炎抗體檢測 ELISA法 五 乙型肝炎病毒標志物檢測 ELISA法 40 重點關(guān)注內(nèi)容 了解乙型肝炎病毒標志物的常見模式 如俗稱 大三陽 小三陽 等模式的內(nèi)容 意義了解梅毒RPR TPPA項目檢測的目的和意義掌握艾滋病篩查檢測流程掌握ELISA方法的質(zhì)量管理和操作 41 ELISA的質(zhì)量管理 ELISA 一種敏感性高 特異性強 重復(fù)性好的實驗診斷方法 由于其試劑穩(wěn)定 易保存 操作簡便 結(jié)果判斷較客觀等因素 以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測 既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點 已廣泛應(yīng)用 加強質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點 42 ELISA的質(zhì)量管理 各檢驗項目的基本原理 ELISA原理 各檢驗項目臨床意義 熟悉各檢驗項目檢測技巧 了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點 熟悉各檢測試劑性能 包括試劑盒組成 包被片段及其組成 熟悉檢測儀器的原理及性能 掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識 43 ELISA原理 根據(jù)檢測目的和操作步驟不同有三種基本方法 雙抗體 原 夾心法檢測抗原 體 的常見方法 間接法檢測抗體的方法 競爭法檢測抗原或小分子半抗原 抗體 44 ELISA方法檢測影響因素1 反應(yīng)時間溫度酶結(jié)合物的穩(wěn)定性加標本量 45 ELISA方法檢測影響因素2 試劑盒的因素 妥善保存試劑 在有效期內(nèi)使用試驗操作 成良好的操作習(xí)慣 加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部 避免加在孔壁上部 并注意不可濺出 不可產(chǎn)生氣泡 嚴格按試劑說明書操作 空白孔不加樣品和酶標試劑 操作過程中集中精力 避免加樣錯誤 46 ELISA檢測試劑 篩查試劑要求 注冊批準 批批檢合格 評估優(yōu)良 有效期內(nèi)使用首選使用酶免試劑 按要求使用快速試劑 47 ELISA檢測要點 嚴格按照試劑說明書操作 不得擅自更改注意防止交叉污染嚴格遵守實驗操作規(guī)程 48 ELISA檢驗標本的采集和保存 可用作的標本十分廣泛 如血清 血漿均可 一般使用血清 標本采集時應(yīng)盡量避免溶血 因紅細胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì)干擾 可造成假陽性 抗凝不完全的標本因纖維蛋白元的干擾而造成假陽性 盡量不用抗凝血尤其是用肝素抗凝劑 ELISA的靈敏度 1ng ml水平上 標本間的污染要盡量避免 尤其不應(yīng)與生化試驗用同一管標本 最起碼應(yīng)先做免疫后做生化 49 免疫學(xué)檢驗的特點是靈敏度高 其檢驗的靈敏度高于生化檢測106倍 因此 微小的檢測數(shù)值的變異 會造成很大的S和CV值的變異 國際上尚未有對免疫檢驗室內(nèi)質(zhì)控給出明確規(guī)定 標準和方法 均處于借鑒生化的原則 方法 開展免疫檢驗的室內(nèi)質(zhì)控階段 50 ELISA檢驗的質(zhì)控要求 1 試驗首先應(yīng)成立 滿足試劑盒要求 陰 陽性對照結(jié)果符合要求 cut off值 CO值 判定公式滿足試劑盒要求 該試驗結(jié)果可以發(fā)出報告 2 在試驗成立 基本合格的基礎(chǔ)上 免疫質(zhì)控的重點 著重整體分析 做質(zhì)控圖分析每一階段的變化趨勢 尋找有無問題發(fā)生和發(fā)生了什么問題 并提出解決問題的辦法 不斷提高 51 生物化學(xué)常規(guī)檢測項目 一 了解各項目意義 原理 二 主要掌握谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT檢測的意義 關(guān)鍵控制點 三 了解肝功能檢測各項目的意義 52 53 應(yīng)掌握內(nèi)容 標本的正確采集與處理 空腹 抗凝要求 室內(nèi)質(zhì)量控制 實施及注意事項 室內(nèi)質(zhì)控圖的繪制和誤差分析 酶類測定 連續(xù)監(jiān)測法的原理 血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 糖測定 血糖測定 54 ALT檢測基本方法 1速率法IFCC推薦 目前公認的國際參考方法2賴氏比色法面臨淘汰 55 ALT檢測臨床意義 1 ALT活性增高 1 肝膽疾病傳染性肝炎 肝癌 中毒性肝炎 脂肪肝和膽管炎等 2 心血管疾病心肌梗死 心肌炎 心力衰竭時肝淤血和腦出血等 3 藥物和毒物 氯丙嗪 奎寧 水楊酸制劑及乙醇 鉛 示 四氯化碳或有機磷等引起ALT活性增高 56 ALT檢測生物參考區(qū)間 反應(yīng)溫度37C 健康成年人參考區(qū)間為 男性 5 40U L 女性 5 35U L 57 臨檢常規(guī)項目檢測 一 血液分析 二 尿液分析 58 一 血液分析 各項目意義 參考值1白細胞計數(shù)2紅細胞計數(shù)3血紅蛋白量4血小板計數(shù) 59 1 血液有形成分的組成 血細胞占全血40 50 稱之有形成分1 白細胞中性粒細胞 淋巴細胞 單核細胞 嗜酸性粒細胞 嗜堿性粒細胞2 紅細胞 主要成分是血紅蛋白 3 血小板 60 2 紅細胞增加與減少的臨床意義 紅細胞增加相對性增高 血漿容量減少 使紅細胞相對增多 劇烈嘔吐 嚴重腹瀉 大面積燒傷 多汗 多尿 絕對性增高 缺氧而致紅細胞代償性增多 程度與缺氧程度成正比生理性 胎兒 新生兒 高原地區(qū)居民 劇烈體力勞動 情緒激動時 紅細胞可一過性增多病理性 嚴重慢性心 肺疾患 如阻塞性肺氣腫 肺源性心臟病 真性紅細胞增多癥紅細胞減少生理性 妊娠中 后期 6個月 2歲的兒童 老年人造血功能明顯減低致紅細胞減少 月經(jīng)期暫時引起下降 病理性 各種類型貧血 如缺鐵性貧血等 61 3 白細胞增加與減少的臨床意義 白細胞增高生理性增高 見于妊娠期 分娩時 新生兒 劇烈運動 淋浴 嚴寒 高溫 午后高于清晨 飲食后高于飲食前等 病理性增高 A急性感染如肺炎 扁桃體炎 急性闌尾炎 B嚴重組織損傷 大量細胞破壞 如術(shù)后12 76h 急性心肌梗死后1 2d 急性溶血 急性大出血 急性中毒 代謝性酸中毒 C白血病及惡性腫瘤白細胞減少A傷寒 副傷寒桿菌感染 B病毒感染 C某些血液病 E慢性理化損傷 電離輻射 如X線 放射性核素等 F服氯霉素 G自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡 62 4 血小板增加與減少的臨床意義 血小板增多見于血小板增多癥 慢性粒細胞增多癥 真性紅細胞增多癥 骨髓纖維化 脾切除等 血小板減少見于血小板減少紫癜 再生障礙性貧血 急性白血病 X射線照射 63 5白細胞自動化分類 二項式分類粒細胞和非粒細胞三項式分類淋巴 中性粒細胞和中間細胞五項式分類嗜中 嗜堿 嗜酸 淋巴 單核細胞 64 二 尿液分析 1尿液干化學(xué)分析 掌握尿液十項分析的意義 影響因素 2尿液沉渣分析 了解 65 尿液干化學(xué)分析試劑 使用儀器與試劑帶應(yīng)配套 若使用不同廠商生產(chǎn)的試劑帶 必須經(jīng)嚴格對照 確定無顯著性差異時方可代用 66 尿液分析的標本 尿液留取后盡快送實驗室 并應(yīng)在2小時內(nèi)完成檢驗 如果尿后2小時內(nèi)無法完成分析 可置2 8 冰箱冷藏 6小時內(nèi)完成檢驗 67 干化學(xué)分析試劑的使用要求 試劑條貯放于原裝容器