（浙江選考）2021版新高考生物一輪復(fù)習(xí)專題12現(xiàn)代生物科技專題第35講克隆技術(shù)教學(xué)案新人教版.docx

第35講克隆技術(shù)知識(shí)內(nèi)容考試要求知識(shí)內(nèi)容考試要求1植物的克隆,b2.動(dòng)物的克隆a植物的克隆1原理：植物細(xì)胞的全能性，即植物體的每個(gè)生活細(xì)胞都具有遺傳上的全能性，因而都具有發(fā)育成完整植株的潛能。從單個(gè)細(xì)胞分裂、分化和發(fā)育成植株胚狀體，同受精卵分裂、分化和發(fā)育成胚的過程相似。2技術(shù)基礎(chǔ)：植物組織培養(yǎng)。一般程序：3細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)通過平衡的植物激素配比可以調(diào)控器官發(fā)生和形態(tài)建成。處于適當(dāng)?shù)囊后w培養(yǎng)條件的單個(gè)植物細(xì)胞，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可經(jīng)歷從單細(xì)胞依次到細(xì)胞團(tuán)、球形胚、心形胚和胚狀體，最后再生出完整的植株。有的植物(如風(fēng)信子)可以在愈傷組織的基礎(chǔ)上直接發(fā)育出花器官。4原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程項(xiàng)目原生質(zhì)體培養(yǎng)植物細(xì)胞工程操作過程聯(lián)系原生質(zhì)體培養(yǎng)成功標(biāo)志著植物細(xì)胞工程技術(shù)的進(jìn)步。在此基礎(chǔ)上，形成了原生質(zhì)體融合(體細(xì)胞雜交)和基因工程技術(shù)結(jié)合的研究領(lǐng)域(1)原生質(zhì)體：細(xì)胞中有代謝活性的原生質(zhì)部分，包括質(zhì)膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。例如，去掉細(xì)胞壁的植物細(xì)胞等。(2)原生質(zhì)層：包括質(zhì)膜、液泡膜，以及兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)(細(xì)胞核、細(xì)胞液除外)，原生質(zhì)層具有選擇透性。一般成熟的植物細(xì)胞才具有原生質(zhì)層。5植物克隆實(shí)踐的事例(1)通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)。(2)通過花藥(花粉)培養(yǎng)，進(jìn)行單倍體克隆，在育種中產(chǎn)生了巨大效益。(3)細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生出遺傳變異的新植株，為選擇有益性狀的新作物創(chuàng)造了條件。(4)在培養(yǎng)基中加入不同濃度的NaCl或病原體的毒蛋白，誘發(fā)和篩選了抗鹽或抗病突變體。(5)在培養(yǎng)基中加入不同濃度的賴氨酸類似物，篩選出抗賴氨酸類似物突變體。(1)植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有全能性()(2)通過液體懸浮培養(yǎng)，可將愈傷組織分散成單細(xì)胞()(3)愈傷組織是一團(tuán)未分化的薄壁細(xì)胞，可通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的激素配比誘導(dǎo)愈傷組織分化()(4)胚性細(xì)胞具有細(xì)胞核大，細(xì)胞質(zhì)豐富，液泡大的特點(diǎn)()(5)去掉植物細(xì)胞壁常用的酶是纖維素酶與果膠酶()(6)單細(xì)胞發(fā)育成胚的過程為單細(xì)胞細(xì)胞團(tuán)心形胚球形胚胚狀體()(7)植物組織培養(yǎng)過程中，器官發(fā)生和形態(tài)重建主要是通過平衡植物激素的種類進(jìn)行調(diào)控()(8)制備原生質(zhì)體時(shí)，采用低滲甘露醇，防止原生質(zhì)體失水過多失去生物活性()(9)不同種類植物或同種植物的不同基因型個(gè)體，其細(xì)胞全能性的表達(dá)程度大不相同()(10)植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原因有染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等，但其結(jié)果是可逆的()(11)原生質(zhì)體培養(yǎng)需要先對原生質(zhì)體的活力進(jìn)行檢測，可以采用質(zhì)壁分離的方法()(12)獲得植物次生代謝產(chǎn)物(如某些中藥：紫草素等)，通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系即可(獲得愈傷組織即可)，無須獲得植株()(選修3 P22圖22改編)如圖表示植物組織培養(yǎng)過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是()A植株根尖細(xì)胞的全能性比植株根尖細(xì)胞的強(qiáng)B試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑，不含有機(jī)物C試管中的細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)豐富、細(xì)胞核和液泡都大的特性D調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官解析：選D。由于是由上的組織經(jīng)培養(yǎng)形成的個(gè)體，故二者的全能性應(yīng)該相同，故A項(xiàng)錯(cuò)誤；由到的過程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用，因而試管中含有有機(jī)物如蔗糖等，故B項(xiàng)錯(cuò)誤；試管中細(xì)胞為愈傷組織細(xì)胞，液泡小，故C項(xiàng)錯(cuò)誤。1細(xì)胞的全能性(1)含義：植物體的每個(gè)生活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整植株的潛能。(2)基礎(chǔ)：植物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含該物種所特有的全部遺傳信息。(3)全能性表達(dá)的條件離體、無菌。一定的營養(yǎng)物質(zhì)，如水、無機(jī)鹽、蔗糖、維生素等。植物生長調(diào)節(jié)劑。(4)在生物體內(nèi)細(xì)胞并沒有表現(xiàn)出全能性的原因：基因在特定的時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá)，細(xì)胞分化為不同的組織、器官。(5)全能性表達(dá)的程度(由易到難)受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞。植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞。2植物組織培養(yǎng)過程3植物細(xì)胞工程 (1)植物組織培養(yǎng)中脫分化和再分化的比較項(xiàng)目脫分化再分化過程離體器官、組織或細(xì)胞愈傷組織愈傷組織幼苗或胚狀體實(shí)質(zhì)細(xì)胞恢復(fù)分裂能力基因選擇性表達(dá)形成體的特點(diǎn)相對沒有分化的排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán)形成芽和根的頂端分生組織，并再生出新植株條件離體、適宜的營養(yǎng)物質(zhì)、適當(dāng)?shù)闹参锷L調(diào)節(jié)劑，避光離體、適宜的營養(yǎng)物質(zhì)、適當(dāng)配比的植物生長調(diào)節(jié)劑，需光(2)植物組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)的關(guān)系植物細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)統(tǒng)稱為植物組織培養(yǎng)，最終都能得到完整植株，但由于培養(yǎng)目的不同，有時(shí)需對愈傷組織進(jìn)行特殊處理。它們之間的關(guān)系如下圖所示： 題組沖關(guān)1下列對如圖所示的培養(yǎng)過程的敘述，正確的是 ()Aa、b、c、d中的植物細(xì)胞都具有完全相同的DNA和RNABab與bc的培養(yǎng)過程中，植物生長調(diào)節(jié)劑的種類可能相同，但比例不同C此為植物花藥離體培養(yǎng)，其中花藥經(jīng)ad發(fā)育成試管苗的過程中可能存在基因突變、基因重組和染色體畸變等變異Dd中的試管苗可以直接轉(zhuǎn)移至土中培養(yǎng)解析：選B。a、b、c、d中的植物細(xì)胞都具有完全相同的DNA，但因細(xì)胞分化，細(xì)胞中的RNA不同；ab與bc分別是脫分化和再分化，兩過程均需要相同的植物激素調(diào)節(jié)，但比例不同；花藥經(jīng)ad發(fā)育成試管苗的過程中可能存在基因突變和染色體畸變等變異；d為單倍體，需要用秋水仙素處理后再移栽到土中。2下圖表示通過克隆技術(shù)獲得煙草植株的過程，請回答下列問題：(1)過程往往選取煙草葉片的幼嫩部位，需經(jīng)過_處理，才能置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)。(2)過程稱為_，過程稱為_。(3)通過懸浮培養(yǎng)形成的單細(xì)胞可發(fā)育成_，繼而形成植物幼體；也可利用_水解細(xì)胞壁，獲得_，其經(jīng)培養(yǎng)后也可形成完整植株。(4)在培養(yǎng)過程中，若要誘導(dǎo)芽的產(chǎn)生，則配制植物激素時(shí)要_。A添加適量的生長素和適當(dāng)減除某些其他激素B添加適當(dāng)配比的生長素和細(xì)胞分裂素C添加適量的生長素和適當(dāng)增加某些其他激素D適當(dāng)增加細(xì)胞分裂素和生長素的量(5)煙草細(xì)胞很容易再生出新植株，但在長期培養(yǎng)過程中，其胚胎發(fā)生和器官形成能力下降，其原因不可能是_。A染色體畸變或細(xì)胞核變異B組織或細(xì)胞中的激素平衡被打破C產(chǎn)生了缺乏成胚性的細(xì)胞系D植物細(xì)胞全能性喪失解析：(1)自然環(huán)境中獲取的植物組織、器官攜帶較多微生物，會(huì)影響培養(yǎng)過程中植物細(xì)胞的生長，因此需先進(jìn)行消毒處理。(2)高度分化的植物細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)形成相對未分化的愈傷組織細(xì)胞，此過程稱為脫分化；而相對未分化的愈傷組織細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化成胚的過程，稱為再分化。(3)據(jù)圖可知，通過懸浮培養(yǎng)形成的單細(xì)胞可發(fā)育成幼胚；細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠，因此可使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞壁；植物細(xì)胞的細(xì)胞壁去除后，其內(nèi)部的結(jié)構(gòu)稱為原生質(zhì)體。(4)營養(yǎng)物質(zhì)和植物生長調(diào)節(jié)劑配比會(huì)影響愈傷組織的分化方向，例如適量的生長素和細(xì)胞分裂素配比可以誘導(dǎo)芽的分化，適量的生長素和適當(dāng)減除某些其他激素則可以誘導(dǎo)生根，故要誘導(dǎo)芽的產(chǎn)生，應(yīng)按照B選項(xiàng)操作。(5)在長期培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的原因可能有染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生、細(xì)胞或組織中的激素平衡被打破、細(xì)胞對外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變等，以及隨著時(shí)間推移，由于其他各種原因產(chǎn)生了缺乏成胚性的細(xì)胞系，A、B、C正確；植物細(xì)胞仍保留了該物種全套的遺傳物質(zhì)，故全能性并未喪失，但由于各種原因，其全能性的表達(dá)受到了阻礙，D錯(cuò)誤。答案：(1)消毒(2)脫分化再分化(3)幼胚(或胚狀體)纖維素酶和果膠酶原生質(zhì)體(4)B(5)D動(dòng)物的克隆1動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在人工控制的培養(yǎng)條件下，使這些細(xì)胞得以生存，并保持生長、分裂(繁殖)乃至接觸抑制和有規(guī)律的衰老、死亡等生命活動(dòng)現(xiàn)象。2動(dòng)物組織培養(yǎng)動(dòng)物組織在體外及人工條件下維持生活狀態(tài)或生長特性。動(dòng)物組織培養(yǎng)過程中可以伴隨組織分化。3原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)(1)原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)。(2)傳代培養(yǎng)：將原代培養(yǎng)的細(xì)胞分成若干份，接種到若干份培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長、增殖。4細(xì)胞系和細(xì)胞株(1)細(xì)胞系：指可連續(xù)傳代的細(xì)胞。原代培養(yǎng)物在首次傳代時(shí)就成為細(xì)胞系。(2)細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞，一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型、病毒敏感性和生化特性等。5克隆培養(yǎng)法(1)概念：把一個(gè)單細(xì)胞從群體中分離出來單獨(dú)培養(yǎng)，使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體的技術(shù)。(2)基本要求：必須肯定所建成的克隆來源于單個(gè)細(xì)胞。(3)提高成功率的措施：選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清、以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長、激素刺激、使用CO2培養(yǎng)箱、調(diào)節(jié)pH等。6動(dòng)物的克隆繁殖(1)動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度(2)動(dòng)物難以克隆的根本原因：在動(dòng)物的個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞分化使得細(xì)胞發(fā)生了基因的差異表達(dá)，細(xì)胞基因組中基因的活動(dòng)很不完全。(3)細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物的克隆繁殖核移植：利用一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核來取代另一個(gè)細(xì)胞中的細(xì)胞核，形成一個(gè)重建的“合子”。動(dòng)物的克隆繁殖(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，用胰蛋白酶處理可使動(dòng)物細(xì)胞分散開來()(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通入CO2的目的是刺激細(xì)胞呼吸()(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，涉及兩次使用胰蛋白酶，第一次是原代培養(yǎng)時(shí)，主要目的是使組織細(xì)胞分散開，獲得單個(gè)細(xì)胞；第二次是傳代培養(yǎng)時(shí)，目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫落，以便于傳代培養(yǎng)()(4)有限細(xì)胞系大多是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系，具有異倍體核型()(5)惡性細(xì)胞系具有異體致瘤性，不死性細(xì)胞系保留接觸抑制()(6)理論上各種細(xì)胞都可被克隆，但是單細(xì)胞通常不如群體細(xì)胞；原代細(xì)胞、有限細(xì)胞系通常不如無限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化或腫瘤細(xì)胞()(7)克隆培養(yǎng)必須保證分離出來的細(xì)胞是一種類型的多個(gè)細(xì)胞，而不是多種類型細(xì)胞()(8)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的化學(xué)方法有聚乙二醇(PEG)或滅活的仙臺(tái)病毒作為誘導(dǎo)劑()(9)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體()(10)在單克隆抗體的制備中，取小鼠的B淋巴細(xì)胞之前，一定要給小鼠注射相應(yīng)的抗原(或相應(yīng)的疫苗)()(選修3 P32圖28改編)某實(shí)驗(yàn)室做了如圖所示的實(shí)驗(yàn)研究，下列與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的敘述正確的是()A過程導(dǎo)入的誘導(dǎo)基因使成纖維母細(xì)胞發(fā)生基因突變B丙細(xì)胞既能持續(xù)分裂，又能分泌單一的抗體C過程屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的原代培養(yǎng)D過程所用的培養(yǎng)基中都含有聚乙二醇解析：選B。外源基因的導(dǎo)入過程屬于基因重組，A項(xiàng)錯(cuò)誤；丙細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體，說明丙細(xì)胞具有連續(xù)分裂且能分泌單一抗體的能力，B項(xiàng)正確；表示細(xì)胞分化過程，C項(xiàng)錯(cuò)誤；是誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過程，所用的培養(yǎng)基含有聚乙二醇或滅活的仙臺(tái)病毒，而過程不用聚乙二醇，D項(xiàng)錯(cuò)誤。1動(dòng)物細(xì)胞克隆和動(dòng)物克隆繁殖的比較項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞克隆動(dòng)物克隆繁殖原理細(xì)胞增殖細(xì)胞核全能性過程技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)細(xì)胞核移植、胚胎移植等技術(shù)結(jié)果獲得細(xì)胞群獲得動(dòng)物個(gè)體應(yīng)用制備單克隆抗體、細(xì)胞株等動(dòng)物的無性繁殖2.制備單克隆抗體中兩次篩選的比較項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中受到多種抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選。其中未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔中只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始單克隆培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選結(jié)果得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞 題組沖關(guān)1實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是 ()A甲過程需要對實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒 B乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶消化 C丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型 D丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性 解析：選C。甲過程表示從實(shí)驗(yàn)小鼠身上取皮膚組織小塊，該過程需要對小鼠進(jìn)行消毒，故A項(xiàng)正確。乙過程表示將皮膚組織分散為單個(gè)細(xì)胞，可用胰蛋白酶進(jìn)行酶解消化，故B項(xiàng)正確。丙過程表示由組織細(xì)胞培養(yǎng)到細(xì)胞系的過程，小鼠細(xì)胞是二倍體細(xì)胞，其細(xì)胞系大多數(shù)為有限細(xì)胞系，能繼續(xù)培養(yǎng)下去具有異倍體核型的連續(xù)細(xì)胞系很少，故C項(xiàng)錯(cuò)誤。丁過程表示通過選擇或純化從細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞株的過程，細(xì)胞株具有異質(zhì)性，故D項(xiàng)正確。2(2020浙江模擬)小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)、皮膚細(xì)胞誘導(dǎo)出多種細(xì)胞及制備單克隆抗體的操作流程如下。請回答：(1)操作流程中過程可用_處理獲得一個(gè)胚胎干細(xì)胞；過程中的細(xì)胞_(填“可能”或“不可能”)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象；過程中細(xì)胞內(nèi)核酸的種類_(填“不變”或“改變”)；過程的核心步驟是_。(2)過程常用的促融劑是_(要求寫出2種)。單克隆抗體的制備過程中，運(yùn)用了動(dòng)物克隆技術(shù)中的_兩大技術(shù)。(3)下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述，正確的是_。A傳代培養(yǎng)效應(yīng)B細(xì)胞是單克隆抗體制備的必要操作之一B丙細(xì)胞能夠無限增殖，實(shí)質(zhì)上就是癌變的效應(yīng)B細(xì)胞C經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選出來的丙細(xì)胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)D操作流程中過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同解析：(1)胰蛋白酶可使細(xì)胞間的粘連蛋白水解，使細(xì)胞彼此分散開來，獲得單細(xì)胞；只有惡性細(xì)胞系(癌細(xì)胞)的表面粘連蛋白減少或缺失，失去接觸抑制，胚胎干細(xì)胞屬于非惡性細(xì)胞，保留接觸抑制特征；過程為細(xì)胞分化，實(shí)質(zhì)是基因的差異性表達(dá)，雖然遺傳物質(zhì)并未改變，但基因表達(dá)過程中產(chǎn)生的mRNA種類和數(shù)量發(fā)生了變化；基因工程的核心是構(gòu)建重組DNA分子。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇促融；制備單克隆抗體需將經(jīng)免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞，然后對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，使其增殖并產(chǎn)生特異性抗體，故需運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)兩大技術(shù)。(3)效應(yīng)B細(xì)胞無增殖能力，無法傳代培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；丙是經(jīng)免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞，并非癌變的效應(yīng)B細(xì)胞，B錯(cuò)誤；選擇培養(yǎng)基只是將雜交瘤細(xì)胞篩選出來，但該雜交瘤細(xì)胞是否能產(chǎn)生特異性抗體，還需將該雜交瘤細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并利用抗原抗體雜交反應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步篩選，C錯(cuò)誤；流程與植物原生質(zhì)體融合都利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，D正確。答案：(1)胰蛋白酶可能改變構(gòu)建重組DNA分子(2)聚乙二醇、滅活的仙臺(tái)病毒動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(3)D1如圖是某植物組織培養(yǎng)過程的簡圖。下列有關(guān)說法中正確的是()花粉粒愈傷組織胚狀體植株A花藥離體培養(yǎng)的條件與種子萌發(fā)的條件完全相同B若花粉粒核中有兩個(gè)或多個(gè)染色體組，則所得植株為二倍體或多倍體C過程都是細(xì)胞分化過程，因此起作用的激素只有生長素D該過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性解析：選D?；ㄋ庪x體培養(yǎng)所需條件要求高，需要培養(yǎng)基，另外還需要適宜的pH、溫度和光照，而種子萌發(fā)需要適宜的溫度、水分等，A項(xiàng)錯(cuò)誤；花粉粒培養(yǎng)形成的植株稱為單倍體，B項(xiàng)錯(cuò)誤；在細(xì)胞分化過程中多種激素起作用，其中起主要作用的是細(xì)胞分裂素和生長素，C項(xiàng)錯(cuò)誤；在該過程中，單個(gè)細(xì)胞最終培養(yǎng)成了植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，D項(xiàng)正確。2下列有關(guān)細(xì)胞系和細(xì)胞株的說法錯(cuò)誤的是()A原代培養(yǎng)得到的細(xì)胞也可以是細(xì)胞系B細(xì)胞株是特殊的細(xì)胞系C連續(xù)細(xì)胞系都獲得了不死性D連續(xù)細(xì)胞系不一定都發(fā)生了轉(zhuǎn)化解析：選D。原代培養(yǎng)得到的細(xì)胞也可以是細(xì)胞系；細(xì)胞株是特殊的細(xì)胞系；連續(xù)細(xì)胞系都獲得了不死性；連續(xù)細(xì)胞系肯定都發(fā)生了轉(zhuǎn)化。3下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是()A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒解析：選B。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需加入動(dòng)物血清，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需加入植物激素等，A項(xiàng)正確。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需利用胰蛋白酶將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞再進(jìn)行培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)中不需要將細(xì)胞分離，B項(xiàng)錯(cuò)誤。葉片細(xì)胞高度分化，但仍具有全能性，可以通過植物組織培養(yǎng)形成新個(gè)體；小鼠雜交瘤細(xì)胞具備瘤細(xì)胞的遺傳特性，能夠不斷分裂增殖，C項(xiàng)正確。有毒物質(zhì)會(huì)影響細(xì)胞正常的生命活動(dòng)，故可根據(jù)細(xì)胞在培養(yǎng)過程中生命活動(dòng)的變化情況檢測有毒物質(zhì)；植物莖尖細(xì)胞分裂較快，細(xì)胞中幾乎無病毒，故可用莖尖通過植物組織培養(yǎng)形成脫毒苗，D項(xiàng)正確。4(2017浙江11月選考)回答與植物克隆和動(dòng)物克隆有關(guān)的問題：(1)利用植物愈傷組織獲得再生植株主要有兩條途徑：一是由愈傷組織的細(xì)胞先分化產(chǎn)生芽和根后再形成一個(gè)完整植株的_途徑，二是由愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生胚狀體后再萌發(fā)形成完整植株的胚胎發(fā)生途徑。另外也可不通過愈傷組織階段而直接采用帶腋芽的莖段培養(yǎng)成叢狀苗，再誘導(dǎo)生根獲得再生植株，其原因是腋芽中存在_。(2)利用植物克隆培育新品種，一方面可利用帶有目的基因的_侵染植株，或?qū)⒛康幕蛲ㄟ^_方法導(dǎo)入植物細(xì)胞、組織或器官獲得轉(zhuǎn)基因植株，另一方面利用異源植株的_進(jìn)行融合產(chǎn)生雜種植株，或利用異源植物在試管內(nèi)進(jìn)行_，對其產(chǎn)生的胚進(jìn)行培養(yǎng)產(chǎn)生雜種植株。(3)下列屬于植物克隆和動(dòng)物克隆共有培養(yǎng)方法是_。A懸浮培養(yǎng)、器官培養(yǎng)B貼壁培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)C器官培養(yǎng)、愈傷組織培養(yǎng)D原生質(zhì)體培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)解析：(1)愈傷組織不經(jīng)過胚狀體而是通過直接得到芽和根等器官再形成完整植株的培養(yǎng)稱為器官培養(yǎng)。不通過愈傷組織階段直接采用帶腋芽的莖段培養(yǎng)得到胚狀體，再誘導(dǎo)生根，主要是因?yàn)橐秆恐写嬖诜稚M織。(2)轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法很多，如果受體細(xì)胞是植物細(xì)胞，則可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，如果受體細(xì)胞是去除細(xì)胞壁的原生質(zhì)體，則可采用顯微注射的方法。轉(zhuǎn)基因可使不同來源的遺傳物質(zhì)重新組合，也可以通過原生質(zhì)體融合將不同來源的遺傳物質(zhì)重新組合，或通過在試管內(nèi)進(jìn)行受精來生產(chǎn)植株。(3)動(dòng)物和植物細(xì)胞都有懸浮培養(yǎng)和器官培養(yǎng)，A正確；貼壁生長是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法，B錯(cuò)誤；愈傷組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞培養(yǎng)的方法，C錯(cuò)誤；原生質(zhì)體培養(yǎng)是植物細(xì)胞培養(yǎng)的方法，傳代培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法，D錯(cuò)誤。答案：(1)器官發(fā)生分生組織(2)農(nóng)桿菌顯微注射原生質(zhì)體受精(3)A5回答下列關(guān)于單克隆抗體制備的相關(guān)問題：(1)利用抗原抗體反應(yīng)的高度特異性，可以診斷和防治各種疾病，可以研究抗原物質(zhì)在細(xì)胞中的定位及其功能，所以制備高純度抗體十分必要，_技術(shù)的發(fā)明，使得這一目標(biāo)得以實(shí)現(xiàn)，此外該技術(shù)也可解決抗血清的_問題。(2)下圖為制備單克隆抗體的技術(shù)流程圖：圖中用_(生物方法)處理得到細(xì)胞群體1，利用HAT培養(yǎng)基獲得細(xì)胞群體2的類型有多種，所以需用_方法獲得產(chǎn)生抗體且能_的陽性細(xì)胞。產(chǎn)生抗體的陽性細(xì)胞克隆的最基本要求是_，提高細(xì)胞克隆形成率的措施：選擇適宜培養(yǎng)基、添加血清、以_支持生長等。解析：(1)雜交瘤技術(shù)的發(fā)明，使得制備高純度抗體這一目標(biāo)得以實(shí)現(xiàn)，此外該技術(shù)也可解決抗血清的異質(zhì)性問題。(2)滅活的仙臺(tái)病毒能促使動(dòng)物細(xì)胞融合，融合后的細(xì)胞有多種，利用在HAT培養(yǎng)基中骨髓瘤細(xì)胞不能增殖，B淋巴細(xì)胞可以增殖的特點(diǎn)，篩選得到能產(chǎn)生抗體且能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞，但類型有很多種，所以還需利用抗體檢驗(yàn)的方法篩選得到產(chǎn)生針對羊紅細(xì)胞抗原的特異性抗體陽性細(xì)胞。細(xì)胞克隆的最基本要求是來源于單個(gè)細(xì)胞，提高細(xì)胞克隆形成率的措施有：選擇適宜培養(yǎng)基、添加血清、以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長等。答案：(1)雜交瘤異質(zhì)性(2)滅活的仙臺(tái)病毒抗體檢驗(yàn)無限增殖來源于單個(gè)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞1如圖是植物體細(xì)胞雜交過程示意圖，如果A、B植物均為二倍體，據(jù)圖分析回答：(1)圖中所示過程的原理有：_。(2)圖中的過程是_。(3)植物體細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是_，其產(chǎn)生與細(xì)胞內(nèi)_(細(xì)胞器)有關(guān)。(4)和過程分別是_和_的過程。則該雜交植物有_個(gè)染色體組。(5)該技術(shù)的最顯著優(yōu)勢是：_。解析：(1)植物體細(xì)胞雜交過程中有原生質(zhì)體A和原生質(zhì)體B的融合過程，其原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性；將雜種細(xì)胞培育成新的個(gè)體，其原理是植物細(xì)胞具有全能性。(2)圖中的過程是去除植物細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體。(3)植物體細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁，植物細(xì)胞壁的形成與高爾基體有關(guān)。(4)雜種細(xì)胞通過脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)再分化形成雜種植株。圖中雜種植株是由兩個(gè)二倍體的細(xì)胞融合成的雜種細(xì)胞培育成的新個(gè)體，含有四個(gè)染色體組。(5)植物體細(xì)胞雜交可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。答案：(1)細(xì)胞膜具有流動(dòng)性、植物細(xì)胞具全能性(缺一不可)(2)(去壁)制備原生質(zhì)體(3)形成新的細(xì)胞壁高爾基體(4)脫分化再分化四(5)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙2(2020浙江黃巖選考模擬)下面是煙草葉片原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)的流程圖，請回答：(1)酶解時(shí)，在纖維素酶和果膠酶的混合液中，還需添加_來提高混合液的滲透壓，獲得的完整的原生質(zhì)體呈_(填形狀)。(2)獲得原生質(zhì)體后，可用_方法檢測原生質(zhì)體是否存活，然后將原生質(zhì)體制成懸浮液，滴加在_上，用顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)。要判定原生質(zhì)體是否已形成細(xì)胞壁，可用_方法鑒別。(3)欲通過原生質(zhì)體培養(yǎng)得到愈傷組織，從培養(yǎng)基的成分考慮，配制培養(yǎng)基時(shí)需要注意的主要方面有_和_的適當(dāng)配比。解析：(1)在獲得原生質(zhì)體時(shí)，混合液中需添加甘露醇來維持較高滲透壓，以免原生質(zhì)體吸水漲破。獲得的原生質(zhì)體是球形的。(2)可用紅墨水染色法檢測原生質(zhì)體的死活，若細(xì)胞內(nèi)部被染成紅色，說明原生質(zhì)體已經(jīng)死亡；在顯微鏡下一般用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對原生質(zhì)體進(jìn)行計(jì)數(shù)；可用質(zhì)壁分離方法鑒別原生質(zhì)體是否已形成細(xì)胞壁。(3)在配制獲得愈傷組織的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)注意營養(yǎng)物質(zhì)和植物生長調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)配比。答案：(1)甘露醇球形(2)紅墨水染色血細(xì)胞計(jì)數(shù)板質(zhì)壁分離(3)營養(yǎng)物質(zhì)植物生長調(diào)節(jié)劑3(2020浙江臺(tái)州高三模擬)某科研團(tuán)隊(duì)利用植物細(xì)胞工程技術(shù)，把基因序列已知的抗除草劑(Bar)基因?qū)朐|(zhì)體獲得抗除草劑大豆。請回答下列相關(guān)問題：(1)對于已獲得的Bar基因可以用_技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。圖中的a過程通常使用相同的_酶和DNA連接酶，使目的基因與載體連接形成重組DNA。 (2)在b過程中，獲得原生質(zhì)體除了需要纖維素酶和果膠酶，還需要用到的試劑是_。(3)成功導(dǎo)入重組DNA的原生質(zhì)體經(jīng)脫分化形成_，進(jìn)而生長發(fā)育成植株。下列不屬于細(xì)胞應(yīng)具有的特征是_。A薄壁細(xì)胞B細(xì)胞質(zhì)豐富C液泡小 D細(xì)胞核小(4)若要判斷轉(zhuǎn)基因抗除草劑大豆是否成功，比較簡便的檢測方法是_。解析：(1)可通過PCR技術(shù)進(jìn)行體外擴(kuò)增，獲得大量Bar基因。a過程為形成重組DNA分子，需要相同的限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理，使目的基因與載體連接形成重組DNA。(2)在獲得植物原生質(zhì)體時(shí)，需在0.50.6 mol/L的甘露醇溶液環(huán)境(較高滲透壓)下用纖維素酶和果膠酶混合液處理實(shí)驗(yàn)材料，將細(xì)胞壁消化除去，獲得球形的原生質(zhì)體。(3)成功導(dǎo)入重組DNA的原生質(zhì)體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過再分化，分化出芽和根，進(jìn)而生長發(fā)育成植株。細(xì)胞為愈傷組織，該類單細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小、細(xì)胞核大等特征，故D錯(cuò)誤。答案：(1)PCR限制性核酸內(nèi)切(2)(較高濃度的)甘露醇(3)愈傷組織D(4)用一定濃度的除草劑噴灑，觀察轉(zhuǎn)基因大豆的生長情況4(2020杭州名校測試)科學(xué)家利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)成功獲得了番茄馬鈴薯雜種植株，為了便于雜種細(xì)胞的篩選和鑒定，科學(xué)家利用紅色熒光和綠色熒光分別標(biāo)記番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體膜上的蛋白質(zhì)，其培育過程如圖所示：(1)植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的生物學(xué)原理有_。(2)過程常用的酶是_，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是_。(3)植物原生質(zhì)體融合過程常利用化學(xué)試劑_誘導(dǎo)融合，在鑒定雜種原生質(zhì)體時(shí)可用顯微鏡觀察，根據(jù)細(xì)胞膜表面熒光的不同可觀察到_種不同的原生質(zhì)體，當(dāng)觀察到_時(shí)可判斷該原生質(zhì)體是由番茄細(xì)胞和馬鈴薯細(xì)胞融合而成的。(4)過程和過程依次為_，過程中的培養(yǎng)基常添加的植物激素是_。(5)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞中含n條染色體，則“番茄馬鈴薯”細(xì)胞在有絲分裂后期含_條染色體。若雜種細(xì)胞培育成的“番茄馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植株屬于_植株。解析：(1)植物體細(xì)胞雜交包括原生質(zhì)體融合和培育雜種植株兩大步驟，兩者的原理分別是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。(2)去除細(xì)胞壁常用的酶是纖維素酶和果膠酶，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁。(3)化學(xué)促融劑是聚乙二醇，兩兩融合的原生質(zhì)體有三種：番茄番茄、馬鈴薯番茄、馬鈴薯馬鈴薯，其中雜種細(xì)胞的細(xì)胞表面有兩種顏色的熒光。(4)過程和過程分別表示脫分化和再分化，誘導(dǎo)細(xì)胞分化所用的植物激素主要是生長素和細(xì)胞分裂素。(5)“番茄馬鈴薯”體細(xì)胞有mn條染色體，有絲分裂后期染色體數(shù)目加倍。由配子發(fā)育成的個(gè)體均為單倍體。答案：(1)細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性(2)纖維素酶和果膠酶形成了新的細(xì)胞壁(3)聚乙二醇(或PEG)3融合的細(xì)胞表面既有紅色熒光又有綠色熒光(4)脫分化和再分化生長素和細(xì)胞分裂素(5)2(mn)單倍體5如圖可表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程，請據(jù)圖回答下列問題：(1)若A、B到C過程是體外受精過程，則對已取得的精子必須先進(jìn)行_處理，若需獲取更多的卵細(xì)胞一般要對雌性個(gè)體注射_，使其_。(2)若該過程是制備單克隆抗體的過程，在A、B到C的過程中，A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，B細(xì)胞為能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，那么D細(xì)胞稱為_細(xì)胞。從融合細(xì)胞中選擇出它的方法是在特定的選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)，篩選出該類細(xì)胞后還需進(jìn)行_培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選可獲得數(shù)量足夠的能分泌所需抗體的細(xì)胞。(3)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞，D細(xì)胞在植物組織培養(yǎng)時(shí)，先配制_培養(yǎng)基，再加入一定比例的植物激素，當(dāng)生長素相對較少時(shí)，愈傷組織可發(fā)育形成_。(4)若要培育轉(zhuǎn)基因植物，則可采用_法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中。受體細(xì)胞應(yīng)該是_(A.體細(xì)胞B卵細(xì)胞C受精卵D雄配子)。為了得到農(nóng)桿菌的單菌落，常采用的分離方法有兩種，即_和_。解析：(1)受精之前，對已取得的精子先進(jìn)行獲能處理；若需更多的卵細(xì)胞，一般要對雌性個(gè)體注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵。(2)依據(jù)題中信息可確定圖中D細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞；對獲得的雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)以擴(kuò)大數(shù)量。(3)若要培育轉(zhuǎn)基因植物，則可采用誘導(dǎo)生芽或生根的培養(yǎng)基(MS培養(yǎng)基)培養(yǎng)；當(dāng)生長素相對較少時(shí)，愈傷組織可發(fā)育形成叢狀苗。(4)若要培育轉(zhuǎn)基因植物，通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中；受體細(xì)胞應(yīng)該是植物體細(xì)胞；為了得到農(nóng)桿菌的單菌落，常采用的分離方法有兩種，即劃線分離法和涂布分離法。答案：(1)獲能促性腺激素超數(shù)排卵(2)雜交瘤克隆化(3)MS叢狀苗(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化A劃線分離法涂布分離法6(2020浙江綠色評(píng)估聯(lián)盟高三考試)科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖。(1)由過程獲得的A為_。(2)在核移植之前，必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核，目的是_。受體應(yīng)選用_期卵母細(xì)胞。(3)進(jìn)行胚胎移植時(shí)，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生_，這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。(4)采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊，這是因?yàn)開。解析：(1)分析圖示可知，過程構(gòu)建的A為含目的基因的表達(dá)載體。(2)核移植以前，必須去掉受體卵母細(xì)胞的核，目的是保證核遺傳物質(zhì)來自含目的基因的成纖維細(xì)胞。受體應(yīng)該選用處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞。(3)在進(jìn)行胚胎移植時(shí)，受體即代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的外來胚胎基本上不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。(4)轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆產(chǎn)生的重組細(xì)胞具有全能性，培養(yǎng)產(chǎn)生的含目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，因此理論上可獲得無限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊。答案：(1)含目的基因的表達(dá)載體(2)保證核遺傳物質(zhì)來自含目的基因的成纖維細(xì)胞M中(3)免疫排斥反應(yīng)(4)整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)7(2020浙江超級(jí)全能生聯(lián)考)如圖表示動(dòng)物細(xì)胞克隆和制備單克隆抗體的相關(guān)過程，請回答相關(guān)問題：(1)過程常應(yīng)用_法導(dǎo)入重組誘導(dǎo)基因后得到干細(xì)胞；部分干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)可分化成全身的不同組織或器官，說明這些細(xì)胞具有_性。(2)該過程利用了甲細(xì)胞具有_的能力，甲和乙細(xì)胞可經(jīng)過生物誘導(dǎo)劑_的作用形成丙細(xì)胞。取一個(gè)丙細(xì)胞，放在含大量失去_的小鼠成纖維細(xì)胞的特定培養(yǎng)體系中培養(yǎng)，最后產(chǎn)生大量的細(xì)胞群，這種方法為_法。(3)下列關(guān)于經(jīng)和過程得到單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是_。A該過程應(yīng)用了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性的原理B丙細(xì)胞要具有分泌多種抗體的能力C該過程應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D丙細(xì)胞的形成