化驗員手冊基礎(chǔ)知識.ppt

化驗員手冊基礎(chǔ)知識,主要內(nèi)容,一、化學實驗室安全守則二、化學試劑的分類及保管三、實驗室常用儀器四、分光光度法基本原理及應(yīng)用,第一部分化學實驗室安全守則,（1）化驗室應(yīng)配備足夠數(shù)量的安全用品如滅火器、沖洗龍頭、急救藥箱（備創(chuàng)可貼、碘酒、棉簽、紗布等）。(2)分析人員必須認真學習分析規(guī)程和有關(guān)的安全技術(shù)規(guī)程，了解化學試劑特性，設(shè)備性能及操作中可能發(fā)生事故原因，掌握預防和處理事故的方法。(3)試驗室內(nèi)嚴禁吸煙；工作時應(yīng)穿實驗服，不應(yīng)在公共場所穿實驗服。(4)稀釋濃硫酸的容器最好是放在塑料盆中，只能將濃硫酸慢慢倒入水中，并不斷攪動，不能相反!必要時用水冷卻。切勿將水倒入濃硫酸中，以免迸濺，造成灼傷。（5）打開濃鹽酸、濃硝酸、濃氨水試劑瓶時要注意防護，在通風櫥中進行。,第一部分化學實驗室安全守則,(6)若遇酸堿液灼燒時，速用大量自來水沖洗患處。屬酸液燒傷，用2%碳酸氫鈉沖洗；屬堿液燒傷，用2%硼酸沖洗，再用清水沖洗。（7）夏季打開易揮發(fā)溶劑瓶塞前，應(yīng)先用冷水冷卻，瓶口不要對著人，在通風櫥內(nèi)中進行。（8）操作中不得離開崗位，必須離開時要委托能負責任者看管。(9)化驗室每瓶試劑必須貼有明顯的與內(nèi)容物相符的標簽。嚴禁將用完的原裝試劑空瓶不更換標簽而裝入別種試劑。發(fā)現(xiàn)試劑瓶上標簽掉落或?qū)⒁：龝r應(yīng)立即貼好標簽。(10)不使用絕緣損壞或老化的線路及電器設(shè)備。保持電器及電線的干燥。,第一部分化學實驗室安全守則,(11)正確操作閘刀開關(guān)，應(yīng)使閘刀處于安全合上或完全拉斷的位置，不能若即若離，以防接觸不良打火花。(12)若局部起火，應(yīng)立即切斷電源，用濕抹布或石棉布覆蓋熄滅。若火勢較猛，應(yīng)立即與有關(guān)部門聯(lián)系，請求救援。(13)打開高溫烘箱前，須確認箱內(nèi)溫度小于100后方可打開。（14）玻璃管與膠管、膠塞等拆裝時，應(yīng)先用水潤濕，手上墊棉布，以免玻璃管折斷扎傷。（15）禁止隨意混合各種試劑，以免發(fā)生意外事故。（16）實驗完畢，將實驗臺面整理干凈，洗凈雙手，關(guān)閉水、電、氣等閥門后方可離開實驗室。,第二部分化學試劑的分類及保管,第二部分化學試劑的分類及保管,化學試劑中的部分試劑具有易燃、易爆、腐蝕性或毒性等特性，除使用時注意安全和操作規(guī)程外，保管時也要注意安全，要防火、防水、防揮發(fā)、防曝光和防變質(zhì)。應(yīng)根據(jù)不同試劑的不同特性，采用不同的保存方法。（一）一般單質(zhì)和無杌鹽類的固體應(yīng)放在試劑柜內(nèi)，無機試劑要和有機試劑分開存放。危險性試劑應(yīng)嚴格管理，必須分類隔開放置，不能混放在一起。（二）易燃液體主要是有機溶劑、極易揮發(fā)成氣體，遇明火即燃燒。試驗中常用的有苯、乙醇、乙醚和丙酮（即甘油）等，應(yīng)單獨存放，要注意陰涼通風，特別要注意遠離火源。,第二部分化學試劑的分類及保管,（三）易燃固體無機物中如硫磺、黃磷、鎂粉和鋁粉等，著火點都很低，也應(yīng)單獨存放。存放處應(yīng)通風、干燥。白磷在空氣中可自燃，應(yīng)保存在水里，并放于避光陰涼處。（四）遇水燃燒的物品金屬鋰、鈉、鉀、電石和鋅粉等，可與水劇烈反應(yīng)，放出可燃性氣體。鋰要用石蠟密封，鈉和鉀應(yīng)保存在煤油中，電石和鋅粉等應(yīng)放在干燥處。（五）強氧化劑氯酸鉀、硝酸鹽、過氧化物、高錳酸鹽和重鉻酸鹽等都具有強氧化性，當受熱、撞擊或混入還原性物質(zhì)時，就可能引起爆炸。保存這類物質(zhì)，一定不能與還原性物質(zhì)或可燃物放一起，應(yīng)存放在陰涼通風處。,第二部分化學試劑的分類及保管,（六）見光分解的試劑硝酸銀、高錳酸鉀等；與空氣接觸易氧化的試劑：如氯化亞錫、硫酸亞鐵等，都應(yīng)存于棕色瓶中，并放在陰涼通風處。（七）容易侵蝕玻璃的試劑氫氟酸、含氟鹽、氫氧化鈉等應(yīng)保存在塑料試劑瓶中。（八）劇毒試劑氰化鉀、三氧化二砷（砒霜）、砷、汞等，應(yīng)特別注意有專人妥善保管，取用時應(yīng)嚴格做好記錄，以免發(fā)生事故。（雙人雙鎖）,第二部分化學試劑的分類及保管,試劑的使用和處理注意事項：無論是固體還是液體試劑，一般都要保存玻璃容器內(nèi)，并用塞蓋好。容器外壁上應(yīng)貼上標簽，注明試劑名稱，液體試劑還應(yīng)注明濃度、配制日期，有效期和配制人。使用和處理試劑時還應(yīng)注意：1、不要用手去接觸試劑，不要去嘗試劑的味道。在聞物質(zhì)的氣味時，只能用手扇動少量氣體入鼻。2、取用固體試劑時，要用干凈的藥匙。3、取用液體試劑時，須用左手將承接試劑的瓶口向右手方向傾斜，用右手持試劑瓶（試劑標簽在靠近虎口一側(cè)）向左手方向傾斜倒入承接的試劑瓶瓶口。4、使用強酸、強堿等腐蝕試劑時，要特別小心。萬一酸、堿液體濺到手上或衣服上，要立即用較多的水沖洗。5、試劑濺在操作臺臺面上，要立即擦拭干凈，以防腐蝕臺面或衣物。6、取用試劑時應(yīng)注意保持純凈，不要把瓶塞蓋錯，取出用剩的試劑不要放回原瓶。,第三部分實驗室常用儀器,第三部分實驗室常用儀器,燒杯錐形瓶碘量瓶圓（平）底燒瓶,圓底蒸餾燒瓶凱氏燒瓶,洗瓶量筒、量杯容量瓶,酸式滴定管堿式滴定管吸量管移液管,容量瓶試漏方法：使用前,應(yīng)先檢查容量瓶瓶塞是否密合,為此,可在瓶內(nèi)裝入自來水到標線附近,蓋上塞子,用手按住塞子,倒立容量瓶,觀察瓶口是否有水滲出,如果不漏,把瓶直立后,轉(zhuǎn)動瓶塞約180后再倒立試一次,為使塞子不丟失不混亂,常用塑料線繩將其拴在瓶頸上。使用容量瓶注意事項：(1)在精密要求高的分析工作中,容量瓶不允許放在烘箱中烘干或加熱(2）不要用容量瓶長期存放配好的溶液(3)容量瓶長期不用時,應(yīng)該洗凈,把塞子用紙墊上,以防時間久后,塞子打不開。,容量瓶,滴定管有無色、棕色兩種，一般需避光的滴定液（如硝酸銀滴定液、碘滴定液、高錳酸鉀滴定液等），需用棕色滴定管。酸式滴定管涂油：將活塞取下,用干凈的紙或布把活塞和塞套內(nèi)壁擦干,用手指蘸少量凡士林在活塞的兩頭涂上薄薄一圈,在緊靠活塞孔兩旁不要涂凡士林,以免堵隹活塞孔,涂完后把活塞放回套內(nèi),向同一方向旋轉(zhuǎn)活塞幾次,使凡士林分布均勻呈透明狀態(tài),然后用橡皮圈套住,將活塞固定在塞套內(nèi),防止滑出。,滴定管,滴定管試漏,酸式滴定管試漏：關(guān)閉活塞,裝入蒸餾水至一定刻線,直立滴定管約2min,仔細觀察刻線上的液面是否下降,滴定管下端有無水滴滴下,及活塞隙縫中有無水滲出,然后將活塞轉(zhuǎn)動180等待2min再觀察,如有漏水現(xiàn)象應(yīng)重新擦干涂油。堿式滴定管試漏：裝蒸餾水至一定刻線,直立滴定管約2min,仔細觀察液面是否下降,或滴定管下端尖嘴上有無水滴滴下,如有漏水,則應(yīng)調(diào)換膠管中玻璃珠,選擇一個大小合適比較圓滑的配上再試,玻璃珠太小或不圓滑都可能漏水,太大操作不方便。,酸式滴定管如何裝溶液：裝之前應(yīng)將瓶中標準溶液搖勻,使凝結(jié)在瓶內(nèi)壁的水混入溶液,為了除去滴定管內(nèi)殘留的水分,確保標準溶液濃度不變,應(yīng)先用此標準溶液淋洗滴定管2-3次,每次用約10mL,從下口放出少量(約1/3)以洗滌尖嘴部分,應(yīng)關(guān)閉活塞橫持滴定管并慢慢轉(zhuǎn)動,使溶液與管內(nèi)壁處處接觸,最后將溶液從管口倒出棄去,但不要打開活塞,以防活塞上的油脂沖入管內(nèi)。盡量倒空后再洗第二次,每次都要沖洗尖嘴部分,如此洗2-3次后,即可裝入標準溶液至“0”刻線以上。堿式滴定管如何趕氣泡：堿式滴定管應(yīng)將膠管向上彎曲,用力捏擠玻璃珠使溶液從尖嘴噴出,以排除氣泡，堿式滴定管的氣泡一般是藏在玻璃珠附近,則必須對光檢查膠管內(nèi)氣泡是否完全趕盡,趕盡后再調(diào)節(jié)液面至0.00mL處,或記下初讀數(shù)。,酸式滴定管裝溶液：裝之前應(yīng)將瓶中標準溶液搖勻,使凝結(jié)在瓶內(nèi)壁的水混入溶液,為了除去滴定管內(nèi)殘留的水分,確保標準溶液濃度不變,應(yīng)先用此標準溶液淋洗滴定管2-3次,每次用約10mL,從下口放出少量(約1/3)以洗滌尖嘴部分,應(yīng)關(guān)閉活塞橫持滴定管并慢慢轉(zhuǎn)動,使溶液與管內(nèi)壁處處接觸,最后將溶液從管口倒出棄去,但不要打開活塞,以防活塞上的油脂沖入管內(nèi)。盡量倒空后再洗第二次,每次都要沖洗尖嘴部分,如此洗2-3次后,即可裝入標準溶液至“0”刻線以上。堿式滴定管趕氣泡：堿式滴定管應(yīng)將膠管向上彎曲,用力捏擠玻璃珠使溶液從尖嘴噴出,以排除氣泡，堿式滴定管的氣泡一般是藏在玻璃珠附近,則必須對光檢查膠管內(nèi)氣泡是否完全趕盡,趕盡后再調(diào)節(jié)液面至0.00mL處,或記下初讀數(shù)。,滴定的正確方法：滴定時,應(yīng)使滴定管尖嘴部分插入錐形瓶口(或燒杯口)下約1-2cm處,滴定速度不能太快,以每秒3-4滴為宜,切不可成液柱流下,邊滴邊搖，向同一方向作圓周旋轉(zhuǎn)而不應(yīng)前后振動,因那樣則會濺出溶液，臨近終點時,應(yīng)1滴或半滴地加入,并用洗瓶吹入少量沖洗錐形瓶內(nèi)壁,使附著的溶液全部流下,然后搖動錐形瓶,觀察終點是否已達到，如終點未到，繼續(xù)滴定，直至準確到達終點為止。滴定管讀數(shù)應(yīng)遵守的規(guī)則：1)注入溶液或放出溶液后,需等待30s-1min后才能讀數(shù)(2)滴定管應(yīng)垂直地夾在滴定臺上讀數(shù)或用兩手指拿住滴定管的上端使其垂直后讀數(shù)(3)對于無色溶液或淺色溶液,應(yīng)讀彎月面下緣實際的最低點,對于有色溶液,應(yīng)使視線與液面兩側(cè)的最高點相切,初讀和終讀應(yīng)用同一標準。,手動移液管器移液管的使用,移液管使用方法,1、檢查移液管的管口和尖嘴有無破損，若有破損則不能使用；2、洗凈移液管先用自來水淋洗后，用鉻酸洗滌液浸泡，操作方法如下：用右手拿移液管或吸量管上端合適位置，食指靠近管上口，中指和無名指張開握住移液管外側(cè)，拇指在中指和無名指中間位置握在移液管內(nèi)側(cè)，小指自然放松；左手拿吸耳球，持握拳式，將吸耳球握在掌中，尖口向下，握緊吸耳球，排出球內(nèi)空氣，將吸耳球尖口插入或緊接在移液管（吸量管）上口，注意不能漏氣。慢慢松開左手手指，將洗滌液慢慢吸入管內(nèi)，直至刻度線以上部分，移開吸耳球，迅速用右手食指堵住移液管（吸量管）上口，等待片刻后，將洗滌液放回原瓶。并用自來水沖洗移液管（吸量管）內(nèi)、外壁至不掛水珠，再用蒸餾水洗滌3次，控干水備用。,3、吸取溶液搖勻待吸溶液，將待吸溶液倒一小部分于一洗凈并干燥的小燒杯中，用濾紙將清洗過的移液管尖端內(nèi)外的水分吸干，并插入小燒杯中吸取溶液，當吸至移液管容量的1/3時，立即用右手食指按住管口，取出，橫持并轉(zhuǎn)動移液管，使溶液流遍全管內(nèi)壁，將溶液從下端尖口處排入廢液杯內(nèi)。如此操作，潤洗了34次后即可吸取溶液。將用待吸液潤洗過的移液管插入待吸液面下12cm處用吸耳球按上述操作方法吸取溶液（注意移液管插入溶液不能太深，并要邊吸邊往下插入，始終保持此深度）。當管內(nèi)液面上升至標線以上約12cm處時，迅速用右手食指堵住管口（此時若溶液下落至標線以下，應(yīng)重新吸?。瑢⒁埔汗芴岢龃好?，并使管尖端接觸待吸液容器內(nèi)壁片刻后提起。（在移動移液管或吸量管時，應(yīng)將移液管或吸量管保持垂直，不能傾斜）,4、調(diào)節(jié)液面左手另取一干凈小燒杯，將移液管管尖緊靠小燒杯內(nèi)壁，小燒杯保持傾斜，使移液管保持垂直，刻度線和視線保持水平（左手不能接觸移液管）。稍稍松開食指（可微微轉(zhuǎn)動移液管或吸量管），使管內(nèi)溶液慢慢從下口流出，液面將至刻度線時，按緊右手食指，停頓片刻，再按上法將溶液的彎月面底線放至與標線上緣相切為止，立即用食指壓緊管口。將尖口處緊靠燒杯內(nèi)壁，向燒杯口移動少許，去掉尖口處的液滴。將移液管或吸量管小心移至承接溶液的容器中。,5、放出溶液將移液管或吸量管直立，接受器傾斜，管下端緊靠接受器內(nèi)壁，放開食指，讓溶液沿接受器內(nèi)壁流下，管內(nèi)溶液流完后，保持放液狀態(tài)停留15s，將移液管或吸量管尖端在接受器靠點處靠壁前后小距離滑動幾下（或?qū)⒁埔汗芗舛丝拷邮芷鲀?nèi)壁旋轉(zhuǎn)一周），移走移液管（殘留在管尖內(nèi)壁處的少量溶液，不可用外力強使其流出，因校準移液管或吸量管時，已考慮了尖端內(nèi)壁處保留溶液的體積。除在管身上標有“吹”字的，可用吸耳球吹出，不允許保留）。6、洗凈移液管，放置在移液管架上。,稱量瓶細口瓶,廣口瓶下口瓶,廣口瓶:一般保存固體細口瓶:一般保存液體棕色瓶:保存見光分解的物質(zhì)塑料瓶:保存氫氟酸等易與玻璃反應(yīng)的物質(zhì)帶玻璃塞:不宜保存堿性物質(zhì)帶橡皮塞:不宜保存強酸性、溴、強氧化性物質(zhì)和大多數(shù)有機物,滴瓶,玻璃漏斗布什漏斗,梨形分液漏斗筒形分液漏斗球型分液漏斗,普通試管具支試管平底試管離心試管,分液漏斗的使用：用分液漏斗進行液-液萃取時，操作應(yīng)選擇容積體積大2倍左右的分液漏斗，把活塞擦干，涂以少許潤滑脂，轉(zhuǎn)動活塞使其均勻透明，檢查分液漏斗頂端的玻璃塞和活塞是否嚴密。然后將分液漏斗放在固定的鐵環(huán)中，關(guān)好活塞，裝入待萃取溶液和萃取溶劑，蓋好玻璃塞，使兩相之間充分接觸。,震蕩過程中要使漏斗傾斜至上口低于下口，并將下口朝向無人處，右手捏住上口頸部，用食指根部壓住玻璃塞，左手握住活塞，并以拇指和食指捏住活塞柄，握持方式以既要防止震蕩時活塞轉(zhuǎn)動或脫落，又便于轉(zhuǎn)動活塞為準。,開始震蕩要慢，每搖幾次后，將漏斗仍保持傾斜狀態(tài)，旋轉(zhuǎn)活塞，放出因溶劑揮發(fā)或反應(yīng)產(chǎn)生的氣體，這常稱為“放氣”，這對低沸點溶劑或有氣體生成的萃取過程來講是十分重要的，反復地震蕩、放氣數(shù)次之后，將分液漏斗靜置于鐵環(huán)上，待乳濁液分層后，旋轉(zhuǎn)頂端玻璃塞，對好放氣孔，慢慢旋開下端活塞將下層液體放出，當兩相界面接近活塞時，關(guān)閉活塞，靜置片刻或輕輕振搖，再把下層液體放出，上層的液體由上口倒出，切不可經(jīng)活塞口放出，以免被漏斗頸部的下層殘液所污染。,比色管蛇形冷凝管直型球型,抽濾瓶表面皿,玻璃研缽坩堝坩堝鉗,蒸發(fā)皿普通干燥器真空干燥器,Q2W03-使用干燥器的注意事項：,1、干燥劑不可放得太多，以免沾污坩鍋底部。2、搬移干燥器時，要用雙手拿著，用大拇指緊緊按住蓋子。3、打開干燥器時，不能往上掀蓋，應(yīng)用左手按住干燥器，右手小心地把蓋子稍微推開，等冷空氣徐徐進入后，才能完全推開，蓋子必須仰放在桌子上。4、不可將太熱的物體放入干燥器中。5、有時較熱的物體放入干燥器中后，空氣受熱膨脹會把蓋子頂起來，為了防止蓋子被打翻，應(yīng)當用手按住，不時把蓋子稍微推開(不到1s)，以放出熱空氣。6、灼燒或烘干后的坩鍋和沉淀物，在干燥器內(nèi)不宜放置過久，否則會因吸收一些水分而使質(zhì)量略有增加。7、變色硅膠干燥時為藍色，受潮后變粉紅色。可以在120烘受潮的硅膠待其變藍后反復使用，直至破碎不能用為止。,托盤天平,最大稱量：又稱最大載荷，表示天平可稱量的最大值。天平的最大稱量必須大于被稱物體可能的質(zhì)量。分度值：天平標尺一個分度對應(yīng)的質(zhì)量。常用托盤天平的最大稱量為200g,分度值為0.1g。,托盤天平的使用,同一實驗應(yīng)使用同一臺天平和砝碼。托盤天平稱量物品時遵循“左物右碼”原則。砝碼使用與保養(yǎng)要點：必須使用鑷子夾取砝碼，不得用手直接拿取。鑷子應(yīng)用有骨質(zhì)或塑料尖的，不能使用合金鋼鑷子，以免劃傷砝碼。砝碼表面應(yīng)保持清潔，可以用軟毛刷刷去塵土。如有污物可用綢布蘸無水乙醇擦凈。砝碼如有跌落碰傷、發(fā)生氧化污痕及發(fā)碼頭松動等情況要立即進行檢定，合格的砝碼才能使用。按使用頻繁程度定期檢定砝碼，一般不超過1年。,萬分之一電子天秤最小讀數(shù)0.0001g/0.1mg,電子天平的使用和維護,稱量前后應(yīng)檢查天平是否完好，并保持天平清潔，如在天平內(nèi)灑落藥品應(yīng)立即清理干凈，以免腐蝕天平。天平載重不得超過最大負荷，被稱物應(yīng)放在干燥清潔的器皿中稱量，揮發(fā)性、腐蝕性物體必須放在密封加蓋的容器中稱量。不要把熱的或過冷的物體放到天平上稱量。應(yīng)在物體和天平室溫度一致后進行稱量。,天平應(yīng)放在水泥臺上或堅實不易振動的臺上，天平室應(yīng)避開附近常有較大振動的地方。安裝天平的室內(nèi)應(yīng)避免日光照射，室內(nèi)溫度也不能變化太大，保持在1723范圍為宜；室內(nèi)要干燥，保持濕度5575%范圍為宜。對天平不利的水蒸汽、腐蝕性氣體、粉塵切忌侵入天平和室內(nèi)。天平室應(yīng)保持清潔干燥。天平箱內(nèi)應(yīng)放置變色硅膠干燥劑。如發(fā)現(xiàn)部分硅膠由藍色變色為粉紅色，應(yīng)立即更換，天平箱應(yīng)加防塵罩。天平室應(yīng)注意隨手關(guān)門。天平放妥后不宜經(jīng)常搬動。若天平位置發(fā)生移動后，應(yīng)校正后，方可使用。,玻璃器皿清洗方法,（1）一般的玻璃儀器（如燒瓶、燒杯等）：先用自來水沖洗一下，然后用肥皂、洗衣粉用毛刷刷洗，再用自來水清洗，最后用純化水沖洗3次（應(yīng)順壁沖洗并充分震蕩，以提高沖洗效果）。計量玻璃儀器（如滴定管、移液管、量瓶等）：也可用肥皂、洗衣粉的洗滌，但不能用毛刷刷洗。（2）精密或難洗的玻璃儀器（滴定管、移液管、量瓶、比色管等）：先用自來水沖洗后，瀝干，再用清潔液處理一段時間（一般放置過夜），然后用自來水清洗，最后用純化水沖洗3次。（3）洗刷儀器時，應(yīng)首先將手洗凈，免得手上的油污物沾附在儀器壁上，增加洗刷的困難。（4）一個洗凈的玻璃儀器應(yīng)該不掛水珠（洗凈的儀器倒置時，水流出后器壁不掛水珠）。,玻璃儀器的干燥（1）晾干不急等用的儀器，可放在儀器架上在無塵處自然干燥。（2）急等用的儀器可用玻璃儀器氣流烘干器干燥（溫度在6070為宜）。（3）計量玻璃儀器應(yīng)自然瀝干，不能在烘箱中烘烤。玻璃儀器的保管要分門別類存放在試驗柜中，要放置穩(wěn)妥，高的、大的儀器放在里面。需長期保存的磨口儀器要在塞間墊一張紙片，以免日久粘住。,第四部分分光光度法基本原理及應(yīng)用,分光光度的概述吸光光度法定義：基于物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立的分析方法稱為吸光光度法，包括紫外可見分光光度法及紅外光譜法等。紫外可見分光光度法所用的光譜區(qū)域為200780nm，其中紫外分光光度法為200400nm，可見分光光度法為400780nm。紅外光譜法為2.51000um。,分光光度法概述,分光光度法的發(fā)展歷程：最初人們發(fā)現(xiàn)很多物質(zhì)都具有顏色，例如MnO4-為紫紅色，F(xiàn)e3+為黃色，當含有這些物質(zhì)的溶液濃度改變時，溶液顏色的深淺度也就隨著改變。溶液越濃顏色越深，溶液越稀顏色越淺，因此利用比較溶液顏色深淺的方法來確定溶液中有色物質(zhì)的含量，這種方法稱為“目視比色法”。隨后人們又認識到溶液的顏色是由于對光的選擇性吸收而產(chǎn)生的，可以利用濾光片和光電池客觀的測量溶液的濃度，從而出現(xiàn)了“光電比色法”。隨著近代測試儀器的發(fā)展，用分光光度計代替比色計，出現(xiàn)了分光光度法。,分光光度法基本原理,溶液顏色與光吸收的關(guān)系日常所見的白光，如日光、白熾燈光，都是混合光，即它們是由波長400780nm的電磁波按適當強度比例混合而成的，這段波長范圍的光是人們視覺可覺察到的，所以稱為可見光。當電磁波的波長小于400nm時稱為紫外光，大于780nm的稱為紅外光，都是人們視覺覺察不到的光?；パa色光：當將某兩種顏色的光按適當強度比例混合時，可以形成白光，這兩種色光就稱為互補色光。,分光光度法基本原理,當一束白光（混合光）通過某溶液時，如果該溶液對可見光區(qū)各種波長的光都沒有吸收，即入射光全部通過溶液，則溶液呈無色透明狀。,完全透過,無色透明,白光,光譜示意,表觀現(xiàn)象示意,分光光度法基本原理,當該溶液對可見光區(qū)各種波長的光全部吸收時，則該溶液呈黑色。,完全吸收,黑色,光譜示意,白光,表觀現(xiàn)象示意,分光光度法基本原理,如某溶液對可見光區(qū)某種波長的光選擇性地吸收，則該溶液即呈現(xiàn)出被吸收波長光的互補色光的顏色。例如當一束白光通過KMnO4溶液時，該溶液選擇性的吸收了綠色波長的光，而將其它的色光兩兩互補成白光而通過去，只剩下紫色光未被互補，所以KMnO4溶液呈現(xiàn)紫色。,吸收綠色光,光譜示意,紫色,白光,表觀現(xiàn)象示意,光吸收曲線,光吸收曲線：將不同波長的光依次通過某一定濃度和一定厚度的溶液，分別測出它對各種波長光的吸光度，以波長為橫坐標，以吸光度為縱坐標，繪制成的曲線（亦稱吸收光譜）。最大吸收波長（max）：在吸收曲線上吸收峰最大處所對應(yīng)的波長。,300,400,500,600,700,0.2,0.6,0.8,0.4,1.0,525nm,MnO4-的吸收光譜,/nm,A,KMnO4溶液對波長為525nm左右的綠色光的吸收程度最大，即KMnO4溶液的max=525nm。,A,B,A,最大吸收波長max,物質(zhì)對光的選擇性吸收,定性分析基礎(chǔ),在一定實驗條件下,Ac,定量分析基礎(chǔ),光的吸收定律,透光率或透射比,吸光度,透射光強度,吸收光強度,入射光強度,反射光強度,朗伯比爾定律Lambert-BeersLaw,A吸光度K比例常數(shù)，與入射光的波長和物質(zhì)性質(zhì)有關(guān)而與光的強度、溶液的濃度及液層厚度無關(guān)；b液層厚度；c溶液的濃度。,當一束平行單色光通過均勻、透明的吸光介質(zhì)時，其吸光度與溶液的濃度和吸收層厚度的乘積成正比。,標準曲線的繪制,配制一系列不同濃度的標準溶液，在一定條件下顯色，使用同樣厚度的吸收池，測定吸光度，然后以濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標作圖，得一條直線，在同樣條件下測出試樣溶液的吸光度，就可以從工作曲線上查出試樣溶液的濃度。但在實際工作中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)標準曲線不成直線的情況，特別是當吸光物質(zhì)的濃度高時，明顯的向上或向下偏離標準曲線，這種情況稱為偏離朗伯-比耳定律現(xiàn)象,引起偏離朗伯-比爾定律的原因,（1）入射光為非單色光。嚴格講朗伯-比耳定律只適用于單色光。應(yīng)選用max處或肩峰處測定.（2）溶液中的化學反應(yīng)。離解、絡(luò)合、締合會破壞線性關(guān)系,應(yīng)控制條件(酸度、濃度、介質(zhì)等).（3）比耳定律的局限性引起偏離。嚴格說，比耳定律是一個有限定律，它只適用于濃度小于0.01mol/L的稀溶液。,定量分析溶液濃度的測定,1、工作曲線法(標準曲線)y=a+bx式中：x為標準溶液的濃度，y為相應(yīng)的吸光度,01.02.03.04.0c(mg/mL),A,。,*,0.800.600.400.200.00,Ax,cx,一般來說：透光度在20%65%或吸光度值在0.20.7之間時，測定誤差相對較小。,2、對比法(直接比較法)對比法實際相當于工作曲線法的一個特例。y=bx實際就是只配制一個標準溶液，其中待測組分的濃度與試液盡量相近，選用最大吸收波長，在相同條件下依次測定二者的吸光度，按下式直接計算試液中待測組分的濃度。c樣=（A樣/A標）c標,需注意：標準樣品和待測樣品濃度應(yīng)接近，且標準樣品的吸光度在0.4-0.8以內(nèi)較好。在只測一、二個樣品，且含量大致已知時很方便。,分光光度計,基本部件：,光源,單色器,檢測器,吸收池,顯示裝置,鎢燈(3202500nm)：可見光區(qū)氫燈、氘燈(180375nm)：紫外區(qū)氙燈（1801000nm）：紫外、可見光區(qū),光源：發(fā)出所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光譜。,氙燈,氫燈,鎢燈,吸收池（比色皿、比色杯、比色池）：用于盛待測及參比溶液。玻璃吸收池（3703200nm）：可見光區(qū)石英吸收池（1854000nm）：紫外光區(qū)、可見光區(qū),選用比色皿應(yīng)該考慮的主要因素測定波長。比色液吸收波長在370nm以上時可選用玻璃或石英，在370nm以下時必須使用石英比色皿。光程。比色皿有不同光程長度，通常多用10.0mm的比色皿，選擇比色皿的光程長度應(yīng)視所測溶液的吸光度而定，以使其吸光度在0.10.7之間為宜。,吸收池的清洗,分光光度測定樣品時，比色皿表面不清潔是造成測量誤差的常見原因之一，每當測定有色溶液后，一定要充分洗滌。根據(jù)污染情況，可以用冷的或溫熱的（40-50）陰離子表面活性劑的碳酸鈉溶液（%2）浸泡，可加熱10min左右。也可用（1+3）硝酸溶液浸泡，注意浸泡時間不宜過長，以防比色皿脫膠損壞。對于有色物質(zhì)的污染可用HCl(3mol/L)-乙醇（1+1）溶液洗滌，如急用，可用乙醇、乙醚潤洗后用吹風機吹干。光度測定前可用柔軟的棉織物或擦鏡紙吸去光學窗面的液珠，將擦鏡紙折疊為四層輕輕擦拭至透明。,分光光度計實驗室具備條件,（1）儀器室室溫宜保持在1528。相對濕度宜控制在45%65%，不要超過70%。防塵、防震和防電磁干擾。儀器周圍不應(yīng)有強電磁場，應(yīng)遠離電場及發(fā)生高頻波的電器設(shè)備。防腐蝕。應(yīng)防止腐蝕性氣體，如SO2、NO2及酸霧等侵蝕儀器部件。應(yīng)與化學操作室隔開。當測量具有揮發(fā)性或腐蝕性樣品溶液時，吸收池應(yīng)加蓋。防日光照射。（2）