11DNA重組技術(shù)的基本工具課件人教版選修3.ppt

主題1，上課前預(yù)習(xí)教學(xué)欄，一個(gè)課堂上稍有精通的創(chuàng)新練習(xí)大鐘，重點(diǎn)突破，加強(qiáng)教學(xué)，知識(shí)目錄，案例師1.1，1。每堂課1。DNA重組技術(shù)所需的三種基本工具的作用2。基因工程載體必須具備的條件，一，基因工程的概念是根據(jù)人們的愿望進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)其他技術(shù)賦予生物新的東西，制造更適合人們需要的新生物種類和生物產(chǎn)品?；蚬こ淌窃贒NA分子水平設(shè)計(jì)和建造的，因此在體外，DNA重組、轉(zhuǎn)化、遺傳特性、DNA重組技術(shù)、第二，限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀”(1)縮寫詞：限制性核酸內(nèi)切酶。(2)資料來(lái)源：主要是分離純化。(3)作用：雙鏈DNA分子識(shí)別。切斷兩個(gè)核苷酸之間的特定部分。(4)結(jié)果：生成或。限制性內(nèi)切酶，原核，特定核苷酸序列，磷酸二酯鍵，粘性末端，扁平端，g，磷酸二酯鍵，限制性內(nèi)切酶，EcoR限制性內(nèi)切酶：Sma限制性內(nèi)切酶：恢復(fù)兩個(gè)切割的核苷酸之間的作用，將其結(jié)合成新的DNA分子。2.種類，限制酶，磷酸二酯結(jié)合，大腸桿菌T4噬菌體，相互，互補(bǔ)的粘著端，粘著端，扁平端，EcoR限制酶：gaat TC，作用傳遞給受體細(xì)胞。類型(1)質(zhì)粒：非常小。(2)其他載體：衍生物、等。特征(1)可以執(zhí)行。(2)有一個(gè)或多個(gè)切割部位插入外源基因。(3)重組DNA的鑒定和選擇有特殊之處。(4)對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害。外源基因，雙鏈環(huán)DNA分子，噬菌體，動(dòng)植物病毒，自我復(fù)制，限制性酶，標(biāo)記基因，1，限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀”1。閱讀教材P4 5，分析圖1-2，1-3，探討以下問(wèn)題。(1)酶切割DNA分子時(shí)，其切割位置在哪里？(？扮演什么角色？提示：切割部位是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。功能：a .有特異性。在雙鏈DNA分子中，具體表現(xiàn)在識(shí)別特定核苷酸序列的兩個(gè)方面。剪切特定順序的特定部位。b .可用于DNA切割、目的基因和切割載體。(2)用限制性內(nèi)切與粘性或扁平端有什么不同？提示：粘性末端：如下圖所示，限制酶在識(shí)別序列的中軸兩側(cè)分別切割兩條DNA。平端：限制酶在識(shí)別序列的中軸上切割形成，如下圖所示。有粘性末端的DNA片段可以通過(guò)互補(bǔ)堿基對(duì)重新組合，但有扁平末端的DNA片段不容易組合。2.閱讀教材P5，觀察分析圖1-4，討論以下問(wèn)題。(1)DNA連接酶的目的是什么？(？對(duì)什么化學(xué)結(jié)合起作用？提示：作用目的：把切下來(lái)的粘乎乎的端或平端重新接合和縫合，形成新的DNA分子?；瘜W(xué)鍵的作用：磷酸二酯鍵。(2)根據(jù)下圖進(jìn)行分析：圖中的a酶，b酶分別是什么酶？提示：a是限制性內(nèi)切酶(或限制性核酸內(nèi)切酶)。b是DNA連接酶。兩種酶在基因工程中的作用和應(yīng)用。提示：3。閱讀教材P6，觀察分析也讀1-5，討論以下問(wèn)題。(1)具備什么條件才能成為基因工程的載體？(？提示：向量必須具備的條件：在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存，并能大量復(fù)制。為了與外源基因連接，有多個(gè)限制性酶切部位。篩選有一定的標(biāo)記基因。當(dāng)然，載體對(duì)受體細(xì)胞沒(méi)有毒性，否則會(huì)損傷或死亡。(2)聯(lián)系活性運(yùn)輸?shù)妮d體，分析它們的化學(xué)性質(zhì)和作用方面的差異。提示：活躍運(yùn)輸?shù)妮d體是位于細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，負(fù)責(zé)運(yùn)輸離子、氨基酸、核苷酸等物質(zhì)，使它們進(jìn)出細(xì)胞?；蚬こ讨休d體的化學(xué)性質(zhì)是DNA。其作用是帶著a .目標(biāo)基因進(jìn)入受體細(xì)胞。b .在宿主細(xì)胞中使用載體克隆，克隆很多目的基因。下圖為DNA分子結(jié)構(gòu)圖，下圖準(zhǔn)確地()A名為細(xì)胞色素脫氧核苷酸b .分解酶作用部分為9321c。限制性核酸內(nèi)切酶可選擇為觸點(diǎn)。D. DNA結(jié)合劑可連接在9321斷開(kāi)的化學(xué)鍵。圖表包含前脫氧核苷酸的磷酸和包含后脫氧核苷酸的5碳糖和堿基，一個(gè)脫氧核苷酸以外的a錯(cuò)誤；限制性核酸內(nèi)切酶的作用部位是磷酸二酯結(jié)合，分解酶的作用是解開(kāi)DNA雙鏈。作用部位為氫鍵，b，c錯(cuò)誤；DNA連接酶可以連接9321中破裂的磷酸二酯連接，d是正確的。回答D，多種與DNA有關(guān)的酶，下圖顯示大腸桿菌和質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)圖，并回答了以下問(wèn)題。(4)以下遺傳工程中常用為載體的是()甲蘇云金桿菌抗昆蟲基因b .土壤農(nóng)桿菌環(huán)RNA分子c .大腸桿菌的質(zhì)粒d .動(dòng)物細(xì)胞的染色體分析，此問(wèn)題是質(zhì)粒結(jié)構(gòu)的模式基因工程的載體必須具備三個(gè)條件?？梢栽谒拗骷?xì)胞內(nèi)穩(wěn)定地保存和大量復(fù)制。有多個(gè)限制性酶切部位。標(biāo)記基因易于篩選，如大腸桿菌質(zhì)粒。用相同的限制性酶切割質(zhì)粒和目的基因，得到相同的粘性末端，然后利用DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒相互連接。大腸桿菌的質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，載體的本質(zhì)是DNA，抗蟲基因?qū)儆谀康幕?，不屬于載體，染色體的主要成分是DNA和蛋白質(zhì)，不屬于載體。回答(1)DNA可自我復(fù)制遺傳效應(yīng)(2) cgc gt-a-(3)重組DNA的標(biāo)記基因識(shí)別和選擇(4)C，DNA結(jié)合酶，基因工程的限制性酶和載體(1)載體上至少有一個(gè)限制如果用于切割載體的限制性內(nèi)切酶有多個(gè)觸點(diǎn)，那么在切割后質(zhì)?？赡軙?huì)失去特定的片段，如果丟失的片段有復(fù)制起點(diǎn)，那么DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞后就不能自我復(fù)制。(2)酶切部位應(yīng)位于不是所需標(biāo)記基因的地方，以確保標(biāo)記基因的完整性，有助于檢測(cè)目的基因。a，所有限制性內(nèi)切酶只有一個(gè)特定的核苷酸序列b，質(zhì)粒在基因工程中唯一的載體C，載體必須具備的條件之一是外源基因和d，DNA連接酶結(jié)合，粘著端段的堿基間氫鍵，練習(xí)，C，2，在基因工程中切割包含載體和目的基因的DNA片段。()同種限制酶b .兩種限制酶同種酶d .兩種結(jié)合酶，A，3。限制性核酸內(nèi)部酶能