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1、微生物遺傳育種一、 、名詞解釋(20分)1. Promoter up啟動子上升突變:突變位點存在于啟動子區(qū)域,能增強啟動子對于轉錄的啟動作用。2. auxotroph營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株由于發(fā)生基因突變,而喪失合成一種或幾種生長因子的能力,因而無法在基本培養(yǎng)基上正常生長繁殖的變異類型。3. transposable elements轉座元件:原核或真核細胞基因組中可以從一個位置轉移到另一個位置的遺傳因子。4. mutator genes增變基因:生物體內(nèi)有些基因與整個基因組的突變率直接相關,當這些基因突變時,整個基因組的突變率明顯增高。 5.photoreactivation 光復活:可見光
2、對紫外線的殺菌或誘變作用的修復過程 6.W-reactivation W復活:經(jīng)紫外線照射的噬菌體感染的E.coli由于大部分的噬菌體已經(jīng)被殺死,不具有感染活性,而存活下來的噬菌體出現(xiàn)許多突變。如果把經(jīng)紫外線照射的噬菌體感染用低劑量的紫外線照射的E.coli,存活的噬菌體數(shù)量大為增加,同時突變的噬菌體數(shù)目也增加。7.Amest test Ames實驗:1975年,美國學者Ames發(fā)明的能夠利用微生物來檢測藥物致癌性的試驗方法,同時支持了致癌物質是誘變劑的說法。8.mutat on rate 突變率:微生物在某一段時間內(nèi)的突變速率。 9.SOS reaction SOS 應答:在細胞內(nèi)存在一種應
3、答系統(tǒng),這種應答依賴于某些蛋白質的誘導合成,它是細胞內(nèi)的一種新的修復機制。10.leaky mutation 滲漏突變:由于DNA的堿基置換造成氨基酸密碼子改變,只是蛋白質只具有部分功能的基因突變。二、 在時間0時取3.00105個細菌涂于培養(yǎng)皿上,立即噴上噬菌體T4,然后培養(yǎng)。另取同樣的培養(yǎng)皿培養(yǎng)5小時(這時細菌數(shù)為3.07108),然后噴上噬菌體后培養(yǎng),前一培養(yǎng)皿上不出現(xiàn)菌落,而后一培養(yǎng)皿上出現(xiàn)307個菌落,計算突變率。(5分)三、 有三只斜面菌種,一只為Strr菌株,一只為Strs菌株,一只為Strd菌株,但現(xiàn)在三只菌種管上均無標簽,請你設法通過實驗,為它們貼上標簽。(5分)37 培養(yǎng)T
4、he strd圓形濾紙片敏感型(明o個培養(yǎng)基中 strs)遠離濾紙抗性(strr)依賴型(strd)靠近濾紙生長用strs菌株劃線strs四、 簡述烷化劑誘發(fā)突變的機理(5分)烷化劑可以與許多DNA位點反應,在DNA上加上烷基,故通過這種改變DNA結構的方法從而引發(fā)突變。五、 簡述自發(fā)突變的機理(5分)輻射或環(huán)境因子引發(fā)突變微生物自身產(chǎn)生誘變劑DNA分子內(nèi)部的改變環(huán)出效應六、 已知谷氨酸棒桿菌產(chǎn)生賴氨酸的代謝途徑如下: 天冬氨酸 i AK 天冬氨酰磷酸 i 天冬氨酰半醛l m賴氨酸 高絲氨酸 l m蘇氨酸 蛋氨酸AK為天冬氨酸激酶,不存在同功酶,該酶受Lys, Thr的協(xié)同反饋抑制,根據(jù)你所學
5、到的育種知識要選育賴氨酸高產(chǎn)菌株,應通過育種手段選擇什么樣的菌株?說明你的理由。(10分)答:應篩選高絲氨酸缺陷的營養(yǎng)缺陷型菌株。(或蘇氨酸缺陷型)在高絲氨酸缺陷型中,由于缺乏催化天門冬氨酸-半醛為高絲氨酸的高絲氨酸脫氫酶,因而喪失了合成高絲氨酸的能力。這就一方面切斷了生物合成蘇氨酸和蛋氨酸的支路代謝,使天門冬半醛這一中間產(chǎn)物全部轉入賴氨酸的合成,另一方面通過限量添加高絲氨酸,可使蛋氨酸蘇氨酸的生成有限,因而解除了蘇氨酸、賴氨酸對天門冬氨酸激酶的協(xié)同反饋抑制,使賴氨酸得以積累。十一、用NTG和紫外線對枯草芽孢桿菌進行誘變,經(jīng)用生長譜法初步鑒定,leu, met, thr發(fā)生了突變,在這一發(fā)生突變的群體中,可能有一缺、二缺和三缺的突變菌株,請設計一實驗,將這些突變一一加以分離和鑒別出來。(10分)答案見下圖:MM:基本培養(yǎng)基、CM:完全培養(yǎng)
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