4-2-培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化(內(nèi)容全)PPT優(yōu)秀課件

1、一、血球計(jì)數(shù)板,1、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu),血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。,大方格,中方格,小方格,方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供微生物計(jì)數(shù)用。,大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，即1mm1mm0.1mm，其容積為0.1mm3； 大方格的長(zhǎng)和寬各為2mm，深度為0.1mm，即2mm2mm0.1mm，其容積為0.4mm3,計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格,1625型： 即大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為

2、25小格,2516型： 即大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。,不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，其每一大方格都是由1625=2516=400個(gè)小方格組成。,2、計(jì)數(shù),1625型： 一般取四角的四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù),2516型： 一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。,3、計(jì)算,以1mm1mm0.1mm型為例,計(jì)數(shù)室容積為0.1mm3，則每個(gè)小方格的容積為1/4000 mm3 。,100個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/ 100 40010000稀釋倍數(shù),酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)1mL =,80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/ 80 40010000稀釋倍數(shù),例1 通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)

3、數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm1mm0.1mm方格，由400個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個(gè)。,2108,例2 檢測(cè)員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由2516400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為01 mm3。,現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻 個(gè)mL。,5n105,探究,培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,一般步驟: (1)提出問(wèn)題：培養(yǎng)液中酵

4、母菌種群是怎樣隨時(shí)間變化的？ (2)作出假設(shè)： 。 (3)討論探究思路：?jiǎn)栴} (4)制定計(jì)劃： (5)實(shí)施計(jì)劃： (6)分析結(jié)果，得出結(jié)論： (7)表達(dá)和交流： (8)進(jìn)一步探究：,怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？,對(duì)一支試管中的培養(yǎng)液(可定為10ml)中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測(cè)的方法：先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計(jì)算中的酵母菌總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為0.1mm，可算出10ml培養(yǎng)液中酵母菌總

5、數(shù)的公式：4107x(x為小方格內(nèi)酵母菌數(shù)),從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么？ 本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要請(qǐng)討論對(duì)照組應(yīng)怎樣設(shè)計(jì)和操作；如果不需要，請(qǐng)說(shuō)明理由。 需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？,目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保證估算的準(zhǔn)確性，減少誤差。,不需要，本實(shí)驗(yàn)旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實(shí)驗(yàn)，獲得平均數(shù)值即可。,不用重復(fù)，只要分組實(shí)驗(yàn)獲得平均值即可。 重復(fù)是為了使結(jié)果更準(zhǔn)確。本實(shí)驗(yàn)酵母菌種群數(shù)量足夠多， 樣本足夠大。其數(shù)據(jù)是80-100個(gè)小方格的平均值，足夠精確。,5、怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？ 如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母

6、菌過(guò)多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)采取怎樣的措施？,搖勻試管取1mL酵母菌培養(yǎng)液稀釋幾倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。,7 對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？,探究,培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,一般步驟: (1)提出問(wèn)題：培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時(shí)間變化的？ (2)作出假設(shè)： 。 (3)討論探究思路： (4)制定計(jì)劃： (5)實(shí)施計(jì)劃： (6)分析結(jié)果，得出結(jié)論： (7)表達(dá)和交流： (8)進(jìn)一步探究：,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,單細(xì)胞真核生物 生長(zhǎng)周期短，增殖速度快 還可以用酵母菌作為實(shí)驗(yàn)材料研究 探究酵母菌的呼吸方式 判斷細(xì)胞的死活（探究膜的透性）,種群

7、數(shù)量的變化包括增長(zhǎng)、波動(dòng)、穩(wěn)定、下降等 “S”型曲線有一個(gè)K值，即環(huán)境容納量。 種群數(shù)量的增長(zhǎng)也受到許多環(huán)境因素（如溫度、培養(yǎng)液的pH、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產(chǎn)物等）的影響。,培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時(shí)間的變化關(guān)系,實(shí)驗(yàn)原理： 種群的數(shù)量變化有一定的規(guī)律。在理想條件下，種群呈“J”型增長(zhǎng)，在有限的環(huán)境下，種群呈“S”型增長(zhǎng)。 酵母菌生長(zhǎng)周期短，增殖速度快，在實(shí)驗(yàn)室條件下，用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，可以觀察酵母菌種群數(shù)量隨時(shí)間變化的情況。,血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器。 計(jì)數(shù)時(shí)，常采用樣方法。,對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計(jì)數(shù)。,第 1 天,第 4

8、 天,第 6 天,第 7 天,死亡,活菌數(shù),在計(jì)數(shù)前，還應(yīng)有哪些步驟？需注意些什么？,培養(yǎng)液配制 滅菌 接種 培養(yǎng),無(wú)菌操作,培養(yǎng)條件,針對(duì)“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化”，有人提出了新的問(wèn)題，某同學(xué)按下表完成了有關(guān)實(shí)驗(yàn)。,溫度、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)酵母菌生長(zhǎng)的影響,培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,探究：,探究過(guò)程,1提出問(wèn)題： 2作出假設(shè)： 3設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)： 4進(jìn)行實(shí)驗(yàn)： 5分析結(jié)果和 表達(dá)交流： 6得出結(jié)論：,培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？,酵母菌在開(kāi)始一段時(shí)間呈“J”型增長(zhǎng)，隨著時(shí)間的推移，由于資源和空間有限，呈“S”型增長(zhǎng)。,連續(xù)培養(yǎng)5天，每天用顯微鏡和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)出酵母菌種群密度

9、,各小組匯報(bào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合前4天的結(jié)果，畫出酵母種群增長(zhǎng)的曲線圖并進(jìn)行分析。,酵母菌在開(kāi)始一段時(shí)間呈“J”型增長(zhǎng)，但隨著時(shí)間的推移，由于資源和空間有限，將呈“S”型增長(zhǎng)，并最終將全部死亡。,3設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：,將10mL無(wú)菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中； 將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻； 將試管在28條件下連續(xù)培養(yǎng)5d； 每天取樣計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量； 分析結(jié)果，得出結(jié)論。,是否設(shè)置對(duì)照組和多組重復(fù)實(shí)驗(yàn)？,為什么要連續(xù)培養(yǎng)？,如何取樣計(jì)數(shù)？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？計(jì)數(shù)時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？,計(jì)數(shù)室,計(jì)數(shù)室（中間大方格）的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為_(kāi)mm3 ，合_mL。,1mm,0.1,110-4,血球計(jì)數(shù)板:一種專門計(jì)數(shù)較大單細(xì)胞微生物的儀器,計(jì)數(shù)室,計(jì)數(shù)室分為25中格（雙線邊）,每一中格又分為16小格,計(jì)數(shù)室是由_個(gè)小格組成,2516=400,如何計(jì)數(shù)？,五點(diǎn)取樣法,樣方法,每mL培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量=,=A (平均每個(gè)中格酵母細(xì)胞數(shù))25104,稀釋倍數(shù),A1,A2,A5,A3,A4,酵母菌數(shù)量變化記錄表,計(jì)數(shù)時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？,從試管中吸