冰片對(duì)鹽酸川芎嗪經(jīng)皮滲透的影響4900字

1、冰片對(duì)鹽酸川芎嗪經(jīng)皮滲透的影響4900字【摘要】目的研究冰片-薄荷腦二元低共熔混合物對(duì)鹽酸川芎嗪透皮經(jīng)皮滲透的影響，考察其作為藥物經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑的可行性。方法采用Franz擴(kuò)散池，以離體大鼠皮膚為透皮屏障，以紫外分光光度法測(cè)定藥物含量求算累積滲透量。結(jié)果8%冰片-薄荷腦低共熔混合物對(duì)鹽酸川芎嗪的體外經(jīng)皮滲透具有較好促進(jìn)作用，與對(duì)照組和氮酮組相比，滲透速率分別提高了5.8倍和4.7倍。結(jié)論該低共熔混合物對(duì)鹽酸川芎嗪經(jīng)皮滲透具有明顯促進(jìn)作用，是一種較好的新型促進(jìn)劑，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。經(jīng)皮給藥系統(tǒng)(TransdermalDrugDeliverySystems，TDDS)是近年來國(guó)內(nèi)外藥劑學(xué)研究

2、的熱點(diǎn)1。然而致密的角質(zhì)層結(jié)構(gòu)是藥物透過皮膚的最大的屏障，加上藥物本身理化性質(zhì)的原因，使許多藥物的經(jīng)皮滲透量遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到臨床上治療的要求2。因此，強(qiáng)效安全的經(jīng)皮滲透促進(jìn)方法的研究至關(guān)重要，其中使用安全高效的經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑是一較為理想的方法。鑒于化學(xué)促滲劑在發(fā)揮促滲作用的同時(shí)，自身也易滲透進(jìn)入皮膚，引起皮膚的刺激和炎癥反應(yīng)2，從中藥寶庫(kù)中尋找效果好、不良反應(yīng)小的滲透促進(jìn)劑正日益引起人們的重視。研究發(fā)現(xiàn)，冰片(Borneol，BO)與薄荷腦(Menthol，ME)都具有促進(jìn)藥物透皮吸收的作用3，將BO與ME在一定比例下常溫碾磨可以形成低共熔物，能顯著促進(jìn)藥物透皮吸收，并且冰片-薄荷腦二元(BO?ME

3、)低共熔混合物在常溫條件下長(zhǎng)期存放，其物化性質(zhì)保持穩(wěn)定4，5。鹽酸川芎嗪(Tetramethylpyrazinehydrochloride,TMPH)臨床多用于多種心腦血管病等的治療，療效深受醫(yī)患推崇，但其半衰期短(8h)，需頻繁給藥以維持有效血藥濃度，因而有必要研制其長(zhǎng)效制劑，且由于其相對(duì)分子量小(208.5Da)，熔點(diǎn)低且易揮發(fā)，已證實(shí)有良好的透皮性能。因此，本文以鹽酸川芎嗪(TMPH)為模型藥物，采用新型經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑：BO?ME低共熔混合物，以離體大鼠皮為透皮屏障，將BO?ME低共熔混合物與常用促滲劑氮酮等對(duì)TMPH凝膠貼劑經(jīng)皮滲透的影響進(jìn)行比較，考察BO?ME低共熔混合物作為經(jīng)皮滲透

4、促進(jìn)劑的開發(fā)應(yīng)用價(jià)值。1儀器材料UV?1700紫外分光光度計(jì)(島津)，TK?6H透皮擴(kuò)散試驗(yàn)儀(上海鍇凱科技)，DF?101S恒溫磁力攪拌器(鞏義市英峪予華儀器廠)，501A超級(jí)數(shù)顯恒溫水浴(上海圣欣科學(xué)儀器有限公司)，KQ5200DE超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，Mill?Q超純水器(Millipore)。鹽酸川芎嗪原料藥(西安力邦制藥有限公司，批號(hào)：061002B)，鹽酸川芎嗪對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110817-202105)，冰片(純度98.0%，江西吉安市林科天然冰片廠)，薄荷(純度98.5%，上海雙香助劑廠)，氮酮(Azone，浦和浦西化工廠)，丙二醇(浙江

5、杭州雙林化工試劑廠)，甘油(上?；瘜W(xué)試劑公司)，聚乙烯醇(上?；瘜W(xué)試劑公司)，聚乙烯吡咯烷酮(上海德祥醫(yī)藥技術(shù)有限公司)，羧甲基纖維素鈉(上海化學(xué)試劑公司)，聚丙烯酸樹脂壓敏膠(德國(guó)羅姆公司上海公司)。清潔級(jí)雄性SD大鼠，體重300350g，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均按照浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物飼養(yǎng)和使用指南進(jìn)行，合格證號(hào)：SZSK(浙2021-0010)。2方法與結(jié)果2.1TMPH凝膠貼劑的制備2.1.1貼劑處方TMPH100mg，聚乙烯醇(PVA)0.2g，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.6g，羧甲基纖維素鈉(CMC?Na)0.06g，甘油0.15ml，蒸餾水12ml。2.1.

6、2BO?ME低共熔物制備以BO/ME質(zhì)量比為3:1、12、12.5、13、14，分別置于研缽中在常溫下充分研磨，然后在顯微鏡下觀察。以澄清，無鏡下顆粒為BO?ME低共熔物最佳質(zhì)量配比。結(jié)果：BO、ME質(zhì)量比為13的低共熔溶液澄清，無鏡下顆粒。2.1.3貼劑制備稱取處方量的PVP、PVA、CMC?Na分別放入燒杯中，各加2.5ml蒸餾水，浸泡過夜使其完全溶脹。將各溶脹液置于90水浴中，加熱溶解，再加入甘油攪勻，水浴保溫脫氣。稱取處方量的TMPH(先用2ml蒸餾水溶解)和促滲劑，加入上述基質(zhì)中混合均勻，水浴保溫脫氣后，涂膜于預(yù)熱的玻璃板上，鋪膜200cm2，置50烘箱中干燥至表面固化且骨架薄片有良

7、好彈性，切割成55cm大小藥膜。貼片最下層用鋁塑膜覆蓋，第二層為藥物骨架薄片，第三層為黏膠層，部分涂在鋁塑膜外緣和背襯層內(nèi)側(cè)的外周(藥片四周無黏膠)，最上層為背襯層。2.2TMPH測(cè)定方法的建立2.2.1TMPH紫外吸收光譜的確定取TMPH標(biāo)準(zhǔn)品適量，溶于生理鹽水中，以生理鹽水為空白對(duì)照，在200400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定其紫外吸收光譜，結(jié)果表明TMPH在295nm有最大吸收，且生理鹽水在此波長(zhǎng)無吸收干擾，因此本文選擇295nm作為樣品檢測(cè)波長(zhǎng)。2.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取TMPH標(biāo)準(zhǔn)品50mg置10mL容量瓶中，生理鹽水定容，得標(biāo)準(zhǔn)貯備液。精密量取標(biāo)準(zhǔn)貯備液2L、5L、10L、15L、20

8、L、30L、40L、50L分別置10mL容量瓶中，生理鹽水定容，于295nm處測(cè)定吸光度(A)，以吸光度(A)對(duì)濃度(C)進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A=0.0452C+0.0055，r=0.9999(線形范圍125g/mL)。2.2.3精密度實(shí)驗(yàn)配置低、中、高3個(gè)濃度(2g/ml、10g/ml、50g/ml)的TMPH生理鹽水溶液，于室溫25進(jìn)行精密度試驗(yàn)，測(cè)得其日內(nèi)精密度分別為1.38%，0.73%，1.63%，日間精密度分別為2.15%，0.91%，1.56%(n=5)，表明精密度良好。2.2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)取2.2.3項(xiàng)中各濃度樣品于室溫25進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)，分別在0h、2h、4h、8h

9、、12h、24h測(cè)定吸光度，RSD分別為1.22%、0.67%和0.82%，結(jié)果表明，TMPH生理鹽水溶液24h內(nèi)穩(wěn)定。2.2.5回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知含量的貼劑樣品0.05g，分別精密加入50g/mlTMPH標(biāo)準(zhǔn)品溶液1mL，在295nm處測(cè)定吸收度，計(jì)算藥物的濃度和回收率，測(cè)得回收率平均值為99.80%，RSD為1.25%。2.3體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)2.3.1離體鼠皮的制備取SD雄性大鼠(300g350g),斷頸處死。即刻用Oster電動(dòng)脫毛器剔除腹部的鼠毛，取下皮膚。用刀片小心剔除皮下的脂肪組織及粘連物，將鼠皮用生理鹽水反復(fù)沖洗干凈,加入少量生理鹽水浸潤(rùn),密閉放于冰箱(-18)中保存。2.3

10、.2經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)冰箱中取出鼠皮，恢復(fù)至室溫，生理鹽水沖洗，用濾紙吸干表面液體，將自制的TMPH凝膠貼劑貼在皮膚角質(zhì)層面，并固定于水平式Franz擴(kuò)散池的兩個(gè)半池之間，角質(zhì)層面向供給池，真皮層面向接受池。擴(kuò)散池有效面積為0.785cm2，擴(kuò)散池容積為5mL。恒溫(370.5)，分別于2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h定時(shí)從接受池取樣2ml(接受液為生理鹽水)，取樣后立即補(bǔ)充同體積的接受液，經(jīng)0.45m微孔濾膜過濾后，用紫外分光光度法測(cè)定。根據(jù)每個(gè)取樣點(diǎn)樣品的濃度，計(jì)算累積滲透量Q(g?cm-2)。2.3.3不同促滲劑對(duì)TMPH經(jīng)皮滲透影響根據(jù)各促進(jìn)劑的性質(zhì)及預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，將促滲劑在貼劑

11、中質(zhì)量比含量設(shè)為3%，分別考察Azone、BO、Menthol、BO與ME簡(jiǎn)單物理混合物、BO?ME低共熔混合物對(duì)TMPH經(jīng)皮滲透的影響。2.3.4BO?ME低共熔混合物對(duì)TMPH經(jīng)皮滲透影響按2.1.2項(xiàng)方法制備BO?ME低共熔混合物作為促滲劑，考察該低共熔混合物在貼劑中含量為分別為2%、4%、6%、8%、10%、12%時(shí)對(duì)TMPH經(jīng)皮滲透的影響。2.4數(shù)據(jù)處理方法及結(jié)果以不同時(shí)間點(diǎn)Q對(duì)時(shí)間t作圖，繪制經(jīng)皮滲透曲線，該圖直線部分的斜率為穩(wěn)態(tài)透皮速率J，與X軸交點(diǎn)的X值為時(shí)滯TL。本文以促滲倍數(shù)(ER)來衡量促滲劑對(duì)藥物經(jīng)皮滲透促進(jìn)作用的大小。ER=JEJO：JE：為用促滲劑后藥物的穩(wěn)態(tài)滲透速

12、率;JO：未加促滲劑時(shí)藥物的穩(wěn)態(tài)滲透速率。不同促滲劑對(duì)TMPH凝膠貼劑經(jīng)皮滲透量、穩(wěn)態(tài)透皮速率、促滲倍數(shù)計(jì)算結(jié)果見表1，經(jīng)皮滲透曲線見圖1。Table1TheeffectofenhancersonthetransdermalpermeationofTMPH(n=3)(略)Table2TheeffectofeutecticmixtureonthetransdermalpermeationofTMPH(n=3)(略)Fig.1ThetransdermalpermeationprofilesofTMPHacrossskin(n=3)(略)不同濃度的BO?ME低共熔混合物對(duì)TMPH凝膠貼劑經(jīng)皮滲透量、

13、穩(wěn)態(tài)透皮速率、促滲倍數(shù)計(jì)算結(jié)果見表2，經(jīng)皮滲透曲線見圖2。Fig.2ThetransdermalpermeationprofilesofTMPHacrossskinusingeutecticmixtureasenhancers(n=3)(略)3討論在經(jīng)皮給藥系統(tǒng)中，促滲劑對(duì)藥物經(jīng)皮滲透的影響受藥物理化性質(zhì)、載體、促滲劑濃度以及其他多種因素的影響，其中促滲劑的影響較為顯著，因此促滲劑對(duì)經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的研制具有相當(dāng)大的影響。對(duì)于混合促進(jìn)劑，促進(jìn)劑之間的比例不同，其促滲透作用亦相差甚遠(yuǎn)。經(jīng)皮給藥系統(tǒng)中選擇最佳的促進(jìn)劑及促進(jìn)劑的配比優(yōu)化成為經(jīng)皮給藥制劑開發(fā)的首要任務(wù)。BO?ME低共熔混合物在常溫條件下可

14、長(zhǎng)期存放，其物理及化學(xué)性質(zhì)保持穩(wěn)定，這種穩(wěn)定性使其適合用于制作貼劑。BO?ME低共熔混合物具有較高的熱力學(xué)活性，絕大部分處于油相并以非離子分散狀態(tài)存在，具有較高的經(jīng)皮滲透推動(dòng)力7，能降低角質(zhì)層對(duì)藥物經(jīng)皮滲透的阻力，提高TMPH向皮膚表面分配的能力。本文對(duì)分別含5種不同促滲劑與6種不同濃度BO?ME低共熔混合物促滲劑的共11種TMPH凝膠貼劑分別進(jìn)行了體外透皮實(shí)驗(yàn)?？紤]到離體皮膚滲透實(shí)驗(yàn)中，可能存在皮膚干擾直接影響樣品的紫外檢測(cè)，進(jìn)行空白試驗(yàn)，結(jié)果表明鼠皮透過液在檢測(cè)波段對(duì)測(cè)定影響小。不同促滲劑對(duì)TMPH凝膠貼劑經(jīng)皮滲透的影響見表1和圖1，結(jié)果表明，5種不同促滲劑對(duì)TMPH均有促滲作用，其中以3%BO?ME低共熔混合物為促滲劑的貼劑，經(jīng)皮滲透能力高于其他濃度組;不同濃度BO?ME低共熔混合物促滲劑對(duì)TMPH凝膠貼劑透皮吸收的影響見表2和圖2，結(jié)果表明：低濃度BO?ME低共熔混合物促滲劑(2%組、4%組與6%組)之間無明顯差別，高濃度BO?ME低共熔混合物促