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1、醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實驗,免疫學(xué)教研室 Tel:3831939,第 二 講免疫器官的觀察與免疫細(xì)胞的分離,實驗?zāi)康?掌握小白鼠的捉拿與處死方法 掌握免疫細(xì)胞分離的方法及其效果的判斷 熟悉血細(xì)胞計數(shù)板的構(gòu)造及使用方法,免疫器官的觀察,免疫細(xì)胞種類,免疫細(xì)胞分離技術(shù),密度梯度離心法,免疫吸附分離法,熒光激活細(xì)胞分選儀分離法,磁珠分離法,抗原肽-MHC分子四聚體技術(shù),花環(huán)沉降法,外周血單核細(xì)胞的分離,密度梯度離心法,淋巴細(xì)胞及其亞群的分離,小白鼠的抓取和固定,通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時,用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,翻轉(zhuǎn)后將小鼠置于左手掌心、無名指和小指
2、夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠完全固定,小白鼠的抓取和固定,小白鼠的抓取和固定,小白鼠的處死方法,頸椎脫臼法:用拇指和食指用力往下按住鼠頭,另一只手抓住鼠尾,用力稍向后上方一拉,使之頸椎脫臼,造成脊髓與腦髓斷離,動物立即死亡,小白鼠的處死法(頸椎脫臼法,倒 T 字開腹,小白鼠脾臟,小白鼠脾臟,小白鼠脾臟,小白鼠胸腺,小白鼠胸腺,實驗器材,小白鼠 手術(shù)器械,解剖臺,血細(xì)胞計數(shù)板,顯微鏡 0.2的臺盼藍(lán)染液,實驗步驟,頸椎脫臼法處死小白鼠,取其脾臟 將脾臟放入適量(約15ml)生理鹽水中,除去筋膜 取綠豆大小的脾臟,用玻片研磨制成10ml細(xì)胞懸液 取ml細(xì)胞懸液于試管中,加入滴臺盼藍(lán)染液 混勻后靜置3分鐘,低倍鏡觀察,臺盼蘭拒染法原理,活細(xì)胞,死細(xì)胞,注意事項,脾臟去凈筋膜,棄邊緣,取其中間部分 研磨時不可用力過大,時間不宜過長 染色時間不宜過長或過短 血細(xì)胞計數(shù)板的使用方法(10倍鏡、暗視野,血細(xì)胞記數(shù)板,細(xì)胞計數(shù)池,血細(xì)胞計數(shù)池的構(gòu)造,白細(xì)胞計數(shù)區(qū),紅細(xì)胞計數(shù)區(qū),無效計數(shù)區(qū),計數(shù)原則,1,2、“ ”形隨機計數(shù),S,計左不計右,計上不計下,實驗
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