臨床檢驗方法的評價CLSIEP文件

1、臨床檢驗方法的評價,郭,健,衛(wèi)生部臨檢中心,方法選擇,方法評價,常規(guī)分析前準備,樣品,常規(guī)分析,方法發(fā)展,預防措施,統(tǒng)計質控,報告結果,分析方法分級,決定性方法,definitive method,經詳盡,研究尚未發(fā)現(xiàn)不準確度或不確定性原因,的方法,參考方法,reference method,經詳盡研,究證實其不準確度與不精密度可以忽略,的方法,常規(guī)方法,routing method,可滿足臨,床或其他目的需要的日常使用的方法,分,析,物,決,定,性,方,法,C,a,C,l,Fe,M,g,P,K,N,a,ID,M,S,電,量,滴,定,中,子,活,化,法,ID,M,S,ID,M,S,ID,M,S

2、,ID,M,S,中,子,活,化,法,重,量,分,析,法,中,子,活,化,法,參,考,方,法,原,子,吸,收,分,光,光,度,法,電,流,滴,定,法,沉,淀,蛋,白,后,亞,鐵,嗪,反,應,原,子,吸,收,分,光,光,度,法,火,焰,光,度,法,火,焰,光,度,法,分,析,物,A,l,b,T,P,C,r,e,a,U,r,e,a,U,A,B,i,l,G,l,u,C,h,o,l,T,G,決,定,性,方,法,參,考,方,法,免,疫,化,學,法,雙,縮,脲,法,I,D,M,S,中,子,活,化,法,I,D,M,S,I,D,M,S,離,子,交,換,層,析,尿,素,酶,法,尿,酸,酶,法,重,氮,法,I,D,

3、M,S,I,D,M,S,I,D,M,S,己,糖,激,酶,法,膽,固,醇,氧,化,酶,法,酶,法,不同方法的關系,常規(guī)方法,參考方法,決定性,方法,標準品分級,標準品,reference material,充分均勻并具有一,個或多個良好確定的特性值的材料或物質，用來校,準儀器設備、評估測定方法或給其它物質賦值,一級標準品,原級參考物,穩(wěn)定、均一，由高度,準確的若干方法定值，可用于校準決定性方法及為,二級標準品定值,二級標準品,用一級標準品校準，參考方法定值,校準品,用二級標準品校準，擬被用于校準的常規(guī),方法定值。用于對常規(guī)方法和儀器的校準,準確度的傳遞,一級標準品,決定性方法,參考方法,溯,源,

4、二級標準品,廠家方法,校,準,校,準,品,儀器參數(shù),試劑,常規(guī)分析,一級標準物質,人血清無機成分分析標準物質,GBW09135,血清膽固醇標準物質,GBW09138,二級標準物質,紅細胞微粒標準物質,GBW,E,090001,膽紅素標準物質,GBW,E,090002,氰化高鐵血紅蛋白溶液標準物質,GBW,E,090004,純化血紅蛋白標準物質,GBW,E,090011,方法的評價,評價內容,初步評價,NCCLS EP10,精密度,NCCLS EP5,對比及偏差,NCCLS EP9,線性,NCCLS EP6,抗干擾能力,NCCLS EP7,基質效應,NCCLS EP14,臨床準確度（敏感性和特異

5、性,NCCLS GP10,ROC,曲線,NCCLS,文件,EP9-A,用患者樣本進行方法對比,及偏差評估,批準指南,1995,年,12,月,目的,引進新方法前或用一種方法替代另一種方,法時進行偏差分析,用途,評價兩種分析方法（同一分析項目,的偏差,評價要求,熟悉儀器操作,熟悉評價方案,質控,足夠的數(shù)據(jù)（最少,5,個工作日,40,個樣本,實驗樣本,來源于健康人或患者，無干擾，盡量避免貯存,對比方法,廠家要求的實驗室常規(guī)方法或公認的參考方法,具有好的精密度,沒有已知的干擾物,相同單位,相對國家標準或參考方法的偏差是已知的,測定范圍,醫(yī)學決定水平范圍內（均勻分布,樣本數(shù),至少,40,例，增加可提高可

6、信性,測定方法,兩種方法分別做雙份測定,測定順序,每天,1,2,3,4,5,6,7,8,8,7,6,5,4,3,2,1,測定次數(shù),每天分別用兩種方法進行測定,至少測定,5,天，共,40,個樣本,數(shù)據(jù)監(jiān)督,系統(tǒng)誤差、人為誤差,質控,常規(guī)質控,實驗步驟,熟悉儀器及方法,收集數(shù)據(jù),檢查方法內的離群點,界限,雙份測定）相對差值均,值的,4,倍,繪圖,均值散點圖,X,Y,所有值散點圖,Yij,Xi,偏差圖,散點圖,Yij -Xij,Xi,表,1,病,人,樣,本,檢,驗,結,果,B,E,C,K,M,A,N,Y,g,l,樣,品,號,結,果,1,Y,1,1,2,3,4,5,6,7,8,2,5,4,6,3,6,

7、3,9,1,4,3,2,2,7,4,2,結,果,2,Y,2,2,5,4,7,3,6,4,0,1,4,3,2,2,8,4,3,均,值,Y,i,2,5,4,6,5,3,6,3,9,5,1,4,3,2,2,7,5,4,2,5,D,Y,i,結,果,1,X,1,0,1,0,1,0,0,1,1,2,8,3,4,7,5,3,8,4,4,1,3,1,8,7,3,6,1,3,1,2,4,3,8,H,I,T,A,C,H,I,X,g,l,Y,i,結,果,2,X,2,2,8,1,4,7,4,3,8,1,4,0,8,1,8,9,3,6,2,3,1,2,4,3,9,均,值,X,i,2,8,2,4,7,5,3,8,3,4,

8、1,1,1,8,8,3,6,2,3,1,2,4,3,9,D,X,i,X,i,0,2,0,1,0,2,0,5,0,2,0,1,0,0,1,3,2,1,2,3,0,6,4,8,4,2,3,7,1,4,33,34,35,36,37,38,39,40,平均數(shù),34,30,40,42,38,43,35,44,34,30,40,42,38,43,35,45,34,30,40,42,38,43,35,44.5,0,0,0,0,0,0,0,1,0.37,35.6,32.1,41.1,43.2,38.6,45,36.9,44.8,36.3,32.6,41,43.4,38.9,44.9,37,45.3,35.9,

9、32.3,41.1,43.3,38.7,44.9,36.9,45,0.3,0.5,0.1,0.2,0.3,0.1,0.1,0.5,0.41,1.9,2.3,1.1,1.3,0.7,1.9,1.9,0.5,2.7,均值散點圖,X,Y,y = 1.1722x - 9.0485,R = 0.9695,50,B,E,C,K,M,A,N,C,X,9,B,C,P,40,30,20,10,10,20,30,40,HITACHI 7170(BCG,50,偏差圖：每次測定的,Y,均值與,X,均值,之差,相應,X,均值圖,Yi-Xi對Xi偏倚圖,20,15,10,5,Y,i,X,i,30,40,50,0,5,10

10、,15,HITACHI 7170（BCG,線性相關目測檢查,兩種方法間離群值目測檢查,界限,4,倍兩種方法間絕對偏差的均值,絕對差值允許范圍,相對差值允許范圍,適合范圍,計算,r,r,2,0.95,范圍適合,2,r,0.95,擴大數(shù)據(jù)范圍,線性回歸,計算,均勻離散度的直觀檢查,X,最,適,范,圍,檢,查,相,關,A,L,B,x,ij,x,(y,ij,y,i,j,N,2,r,x,ij,x,y,ij,y,2,i,j,i,j,N,2,N,2,2,r,0.96,95,回,歸,系,數(shù),評,價,計,算,截,距,a = - 9.05,斜,率,b = 1.17,Y,1.17,X,9.05,預期偏差及可信范圍,

11、線性回歸方程,計算偏差（高、中、低,3,組,解釋實驗結果并與內部標準比較,BCP,與,BCG,法,測,定,血,清,ALB,時,結,果,的,預,期,偏,倚,估,計,BPG,法,g/l,30,40,50,BCP,法,g/l,26.5,37.8,49.1,預,期,偏,倚,g/l,相,對,偏,倚,3.5,2.2,0.9,11.6,5.5,1.8,定量分析方法的線性評價,Evaluation of The Linearity of,Quantitative Analytical Methods,EP6-P,目的,為實驗室中采用定量分析方法的用戶提,供評價儀器或方法是否滿足廠家線性指,標的評價方法,用戶可

12、為分析方法設定線性范圍,定義,Assay Range,Linear Range,The range of concentration or activity in,which the final output value of a system is,proportional to the analyte concentration or,activity within a stated tolerance,定義,Linearity,The measure of the degree to which a,curve approximates a straight line,It refers

13、 to overall system response (i.e,the final analytical answer rather than the,instrument output,Scope and Limitations,線性是分析方法的一個特征，不同于準,確性和精密度,線性實驗應該使用與待分析物基質相似,的樣本,線性檢驗系統(tǒng)反應，包括校準、線性化,技術、系數(shù)和儀器反應,使用者的需求,用簡單的實驗來檢驗廠家標示的線性范,圍及定量分析方法的分析范圍,在實驗室中作為方法學的信息（方法線,性,進行線性評價實驗,儀器的熟悉過程,執(zhí)行分析過程的實驗室人員必須掌握儀,器操作和維護程序、樣本準備

14、方法和校,準,對較簡單的設備需要,5,天或更少時間,對較復雜的多通道設備需要,5,天或更長時,間,實驗周期,在完成儀器熟悉過程后開始實驗并收集,數(shù)據(jù),全部實驗和數(shù)據(jù)采集應在同一工作日內,完成,線性評價實驗,樣本要求,最少,4,個濃度水平，推薦,5,個水平,基質效應,應使用與病人樣本相似的樣本或注明,基質類型,可以使用的樣本,病人混合血清,理想的樣本基質,高值樣本：高于上限,30,低值樣本：線性低限或更低,可以使用的樣本,Patient-Sample Pool Spiked with Analyte,加入品在沒有干擾物存在時不需高純度,Pool Diluted with Treated Pool

15、 Material,用于降低分析物濃度，如：透析、熱處,理、層析,可以使用的樣本,Pool Diluted with Saline,在線性實驗中使用此類樣本可掩蓋不同的基質,效應,Commercial Control/Calibrator Material,此類樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實,際的線性結果,可以使用的樣本,Underdiluted/Overdiluted Commercial,Control Material,Aqueous Solutions,一般無基質效應,Solution in Other Solvents,基質效應與,有機溶劑相似,推薦的樣本添加材料,ALB,白蛋

16、白干粉,human fraction V,乙醇：無水乙醇,ALP,純酶,AMS,腮腺或胰腺提取物,BIL,膽紅素純品,Ca: CaCO,3,Cl: NaCl,推薦的樣本添加材料,CHOL,膽固醇純品或稀釋質控品,CO,2,CaCO,3,CREA,標準液或高值血清,ALT,純酶,GLU,右旋糖,AST,純酶,ALT,純酶,推薦的樣本添加材料,HBD,純酶,LDH,純酶,Lipase,胰腺提取物,Mg,MgCl,2,P: K(H,2,PO,4,或,Na(H)PO,4,TP,白蛋白干粉、人或牛的成份,V,UA,在得不到高值病人樣本時，使用標準儲備液或,干燥尿酸,BUN,在得不到高值病人樣本時，使用標

17、準儲備液或,干燥尿素,樣本分析順序,分析序列應為隨機排列,有顯著攜帶污染時，應用空白隔開樣本,每個實驗組內應至少分析,4,個（最好是,5,個）不同濃度水平的樣本,樣本濃度范圍,應覆蓋待評線性范圍的上、下限,評價結果不滿意時應重新設定濃度,線性范圍內至少應保留有,4,個濃度,樣本的準備,足量的混合血清,低濃度混合血清,No1,；高濃度混合血,清,No5,血清,No2,3,份,No1,1,份,No5,血清,No3,2,份,No1,2,份,No5,血清,No4,1,份,No1,3,份,No5,樣本濃度計算,C1,V1 + C5,V5,濃度,V1 + V5,數(shù)據(jù)收集,x1 y1-1 y1-2 y1-3

18、 y1-4,x2 y2-1 y2-2 y2-3 y2-4,x3 y3-1 y3-2 y3-3 y3-4,x4 y4-1 y4-2 y4-3 y4-4,x5 y5-1 y5-2 y5-3 y5-4,數(shù)據(jù)評價,觀察有無明顯的數(shù)據(jù)錯誤,若有明顯異常時應判斷是否為離群點,如離群點超出,2,點，則保留全部數(shù)據(jù)或重,做全部實驗,離群點檢查,用于特定濃度,Y,值離群點的檢驗,將,4,個重復值從大到小排列,Y1,到,Y4,計算,D = Y1,Y4,若,Y1,可能是離群點，計算,D1,Y1,Y2,D,若,Y4,可能是離群點，計算,D4,Y3,Y4,D,離群點判斷,判斷值,Critical value,0.05,0.765,0.01,0.889,繪圖和評價,線性,X-Y,圖,X,軸為分析物濃度,反應值或儀器輸出值為,Y,軸,目測離群值,Y= aX + b,目測線性判斷是否符合要求,進行統(tǒng)計學判斷和評價,注意,統(tǒng)計學標準和臨床可接受限不同,慎用方法學線性范圍從,0,開始,有臨床意義的濃度應在線性評價中,最小的線性濃度,醫(yī)學決定水平,最大的線性濃度,參考文獻,Dixon W.J. and Massey F.J. introduction to,rd,statistical a