煙草與煙草制品中纖維素半纖維素木質素的測定洗滌劑法

1、煙草與煙草制品中纖維素、半纖維素、木質素的測定 洗滌劑法試驗報告一. 概述纖維素、半纖維素和木質素是構成植物細胞壁的主要物質，占植物所有多糖的50%以上，以往的研究表明，各等級煙葉總細胞壁物質含量在2030左右，在煙梗和煙草薄片中甚至要占到總質量的三分之一以上。他們對于煙葉的燃燒性能和煙絲的填充值以及卷煙的香吃味都有很直接的影響，例如，纖維素會對卷煙燃吸品質產生副作用，會產生一種尖刺的刺激性和一種“燒紙”的氣味。另外，對他們的測定為進一步加強對煙草及其制品的認識，對提高煙葉原料品質評價水平、加強對卷煙、梗絲和造紙法薄片制造工藝研究等具有較大的指導意義。對于纖維素、半纖維素和木質素的分析測定工作

2、大致可以分為三個階段：粗纖維法、纖維洗滌劑法和酶法，當然還有其他一些方法和最新的方法，各國各行業(yè)采用的標準主要還是這三類方法。這三類方法有一個共同點，就是它們的基本原理都是基于纖維素、半纖維素和木質素的化學性質，使其與試樣中的其他物質分離而進行測定。100多年前德國科學家Henneberg和Stohmann提出的粗纖維法，是采用稀酸稀堿的一系列浸提、干燥后得到的纖維總量，由于通過這種方法測定出來的粗纖維是一個比較模糊的概念，里面包含著大部分的纖維素以及部分的半纖維素和木質素，是一個“粗”的總量。但由于其分析過程較為簡單，所以一些行業(yè)現(xiàn)在仍然也還在使用粗纖維法。1963年，美國人Van Soes

3、t提出了纖維洗滌劑法，也叫凡氏方法，提出了中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）及酸性洗滌木質素（ADL）的概念，一般認為，用中性洗滌劑洗滌已被有機溶劑提取過的樣品，樣品中的糖、淀粉、蛋白質、果膠等物質被溶解除去，不能消化的殘渣為NDF，主要包括幾乎全部的纖維素、半纖維素和木質素和少量的蛋白質。在酸性洗滌劑的作用下，除NDF體系被除去的物質以外，半纖維素亦被去除得到ADF，ADF經(jīng)過72硫酸消化得到的不溶物即為ADL。通過以上幾個公式就可以分別得出纖維素、半纖維素和木質素的量，這一方法目前已經(jīng)是較為主流的方法。洗滌劑法的主要流程見下圖，AOAC和GB分別有相應的方法和標準。圖1 煙草中

4、纖維素測定試驗路線圖20世紀70年代末80年代初，日本人阿布亮提出了酶法，而且由于對于食品營養(yǎng)的不斷關注，對于食品中膳食纖維的測定也越來越采用這一方法。這種方法主要還是模擬人體的消化過程，利用各種酶對試樣進行分離，就象凡氏方法把細胞壁物質分為NDF、ADF、ADL一樣，他把之分為可溶性纖維和不可溶性纖維，主要還是針對人體和動物的吸收來說的，簡而言之，與凡氏方法相比，就是用酶處理代替了洗滌劑處理，但對于纖維素和半纖維素、以及木質素并沒有明確的界定。對于纖維素、半纖維素和木質素的測定也有其他的一些方法，例如我國造紙行業(yè)采用的綜纖維法，還有菲莫公司利用核磁共振技術進行的研究，以及通過一系列的分離、水

5、解將纖維素、半纖維素轉化為單糖進行分析的方法。表1 國內外對于纖維素、半纖維素和木質素的一些測定標準方法主要標準粗纖維法AOAC 920系列 茶葉、烘焙咖啡、可可制品中的粗纖維GB/T 8310-2002 茶 粗纖維的測定GB/T 6434-94 飼料中粗纖維測定方法洗滌劑測定法（Van Soest法）AOAC973.18 動物飼料中的酸性洗滌纖維和木質素ASTM D1106-96 木材中酸洗木質素的標準測定方法GB/T 12394-90 食物中不溶性膳食纖維的測定方法GB/T 9822-88 谷物不溶性膳食纖維的測定方法GB/T 2677.894 造紙原料酸不溶木素含量的測定GB/T 208

6、05-2006 飼料中酸性洗滌木質素的測定GB/T 20806-2006 飼料中中性洗滌纖維的測定酶法AOAC985.29 食品中總的膳食纖維酶重量法其他方法GB/T 2677.101995 造紙原料綜纖維素含量的測定可以說不同時期不同國家不同行業(yè)對于不同原料中纖維素、半纖維素和木質素含量進行測定的目的、側重點、條件都有所不同，例如造紙行業(yè)，往往是考慮在加工過程中不要造成纖維素的過多損失以及盡量取出木質素，在食品、飼料行業(yè)主要考慮的是營養(yǎng)價值。現(xiàn)階段我們煙草行業(yè)還沒有一個較為統(tǒng)一的方法，在不同文獻調研和不同研究過程中，給許多研究造成了困難。 為此，本標準制訂工作希望以洗滌劑法為基礎，并在此基礎

7、上考證酶法的可行性，借鑒已有國標，結合煙草行業(yè)實際，建立較為科學、適合我們煙草行業(yè)推廣使用的纖維素、半纖維素以及木質素的測定標準。二. 實驗部分2.1 儀器2.1 植物樣品粉碎機2.2 試驗篩：孔徑0.42mm（40目）2.3 分析天平：分度值：0.0001g2.4 電熱恒溫箱2.5 抽濾裝置：抽濾瓶和真空泵或水抽泵2.6 pH計2.7 纖維分析儀（FOSS 2010型），配置石英坩鍋 P2（孔徑大小）2.8 馬弗爐2.9 干燥器：無水氯化鈣或變色硅膠為干燥劑2.10 脫脂裝置：配冷凝管的250mL圓底燒瓶2.11 電加熱裝置（可調功率）2.2 試劑所有試劑均為分析純級試劑，水為蒸餾水或同等純

8、度的水。苯，乙醇，乙醚，十二烷基硫酸鈉，乙二胺四乙酸二鈉，四硼酸鈉（Na2B4O710H2O），無水磷酸氫二鈉，乙二醇乙醚，正辛醇（消泡劑），丙酮，98濃硫酸，十六烷基三甲胺溴，a-高溫淀粉酶（活性100kU/g，105），石英砂。2.3 試劑配制2.3.1 中性洗滌劑（3十二烷基硫酸鈉）：稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉和6.8g四硼酸鈉，放入100mL燒杯中，加入適量蒸餾水，震蕩溶解（可加熱），再加入30g十二烷基硫酸鈉（C12H25OSO3Na）和10mL乙二醇乙醚；稱取4.65g 磷酸氫二鈉置于另一燒杯中，加蒸餾水加熱溶解，冷卻后將上述兩溶液轉入1000mL在電熱煲上加熱后震蕩溶解。用玻

9、璃棒將其轉移至1000mL 容量瓶中并用水定容。此溶液pH值應在6.97.1之間（pH值一般不用調整）。2.3.2 酸性洗滌劑（2十六烷基三甲胺溴）：量取約27.87mL98濃硫酸，緩慢加入已裝有500mL蒸餾水的燒杯中，冷卻后注入1000mL容量瓶定容配置成1N硫酸；稱取20g十六烷基三甲胺溴于1000ml燒杯中，加入配置好的1N硫酸，攪拌溶解，注入1000mL容量瓶定容。2.3.3 72硫酸：將98%濃硫酸稀釋至72%。2.4 樣品測試2.4.1 抽取煙草或煙草制品為實驗室樣品，粉碎后過40目篩，測定樣品含水率。2.4.2 試樣脫脂準確稱取約5g樣品（記作m1），置于250mL圓底燒瓶中。

10、向圓底燒瓶中依次加入 50mL苯、50mL乙醇和10mL乙醚。將加入試劑后的圓底燒瓶中置于電加熱裝置上，并在圓底燒瓶上搭好冷凝管開啟冷凝水后，開始加熱。待液體沸騰后，調節(jié)電加熱裝置功率至維持其微沸狀態(tài)，保持微沸4h。另取小燒杯和已按上述流程脫脂和丙酮沖洗后的濾紙置于烘箱中烘干至恒重，測定其準確質量，記作m2后，放入干燥器中備用。待停止加熱后，將燒瓶靜置、冷卻，將燒瓶中的液體全部轉移到濾紙上進行抽濾，用丙酮沖洗至濾出液無色，然后將濾紙和濾渣一起轉移到小燒杯中，放入（1052）烘箱中烘干至恒重。稱出其總質量（記作m3）。最后濾渣置于干燥器中備用。2.4.3 中性洗滌纖維的測定稱取約2g石英砂放入實

11、驗用石英坩堝中，然后準確稱取脫脂后的試樣約0.5g（記作m4）放于石英砂的上面，將坩堝樣品放在纖維分析儀的熱浸提單元上，加入大約100mL 中性洗滌劑（如遇淀粉含量較高，可加入0.2mL-高溫淀粉酶），并加入1.0mL正辛醇作為消泡劑。將加熱強度調至最大。待溶液沸騰后，保持微沸1h，結束后，立即開始抽濾。并用熱水（90100）沖洗管壁和剩余物，直至濾出液無泡沫為止。將熱浸提后的試樣和坩鍋放在纖維分析儀的冷浸提單元上，用丙酮沖洗剩余物3次，確保剩余物與丙酮充分混和。抽干后將坩鍋和剩余物放入（1052）烘箱中烘干34h至恒量。在干燥器中冷卻后稱量。再烘干30min，冷卻，稱量，直至兩次稱量之差小于

12、0.002g為恒量。記錄坩鍋和剩余物的總重為m5。然后將坩堝和剩余物置于馬弗爐中，在（51010），灰化6h，于干燥器冷卻后稱重，記作m6。2.4.4 酸性洗滌纖維的測定稱取約2g石英砂放入實驗用石英坩堝中，然后準確稱取脫脂后的試樣約0.5g（記作m7）放于石英砂的上面，將坩堝樣品放在纖維分析儀的熱浸提單元上，加入大約100mL 酸性洗滌劑，并加入1.0mL正辛醇作為消泡劑。將加熱強度調至最大。待溶液沸騰后，保持微沸1h，結束后，立即開始抽濾。并用熱水（90100）沖洗管壁和剩余物，直至濾出液無泡沫為止。將熱浸提后的試樣和坩鍋放在纖維分析儀的冷浸提單元上，用丙酮沖洗剩余物3次，確保剩余物與丙酮

13、充分混和。抽干后將坩鍋和剩余物放入（1052）烘箱中烘干34h至恒量，在干燥器中冷卻后稱量。再烘干30min，冷卻，稱量，直至兩次稱量之差小于0.002g為恒量。記錄坩鍋和剩余物的總重為m8。然后將坩堝和剩余物置于馬弗爐中，在（51010），灰化6h，于干燥器冷卻后稱重，記作m9。2.4.5 酸洗木質素的測定稱取約2g石英砂放入實驗用石英坩堝中，然后準確稱取脫脂后的試樣約0.5g（記作m10）放于石英砂的上面，將坩堝樣品放在纖維分析儀的熱浸提單元上，加入大約100mL 酸性洗滌劑，并加入1.0mL正辛醇作為消泡劑。將加熱強度調至最大。待溶液沸騰后，保持微沸1h，結束后，立即開始抽濾。并用熱水（

14、90100）沖洗管壁和剩余物，直至濾出液無泡沫為止。將熱浸提后的試樣和坩鍋放在纖維分析儀的冷浸提單元上，用丙酮沖洗剩余物3次，確保剩余物與丙酮充分混和。抽干后在每個坩鍋內放置一玻棒，加入25mL 72硫酸，并不時攪拌，3小時后過濾。過濾后用熱水（90100）沖洗管壁和剩余物，直至濾出液無酸性為止。將坩鍋和剩余物放入（1052）烘箱中烘干34h至恒量，在干燥器中冷卻后稱量。再烘干30min，冷卻，稱量，直至兩次稱量之差小于0.002g為恒量。記錄坩鍋和剩余物的總重為m11。然后將坩堝和剩余物置于馬弗爐中，在（51010），灰化6h，于干燥器冷卻后稱重，記作m12。（在每個坩鍋內放置一玻棒以便攪拌

15、）。2.5 結果的計算與表述2.5.1 樣品脫脂剩余率（）的計算煙草及煙草制品樣品脫脂剩余率按下式（1）計算得出： （1）2.5.2以干基計的中性洗滌纖維（NDF）含量的計算 （2）式中：NDF樣品的中性洗滌纖維含量，單位為質量百分數(shù)（）； 樣品脫脂剩余率；W樣品含水率，單位為質量百分數(shù)（%）。2.5.3以干基計的酸性洗滌纖維（ADF）含量的計算 （3）式中：ADF樣品的酸性洗滌纖維含量，單位為質量百分數(shù)（）； 樣品脫脂剩余率；W樣品含水率，單位為質量百分數(shù)（%）。2.5.4以干基計的酸洗木質素（ADL）含量的計算 （4）式中：ADL樣品的酸洗木質素含量，單位為質量百分數(shù)（）； 樣品脫脂剩余率

16、；W樣品含水率，單位為質量百分數(shù)（%）。2.5.5 以干基計的纖維素含量 （5）式中：C樣品的纖維素含量，單位為質量百分數(shù)（）；ADF樣品的酸性洗滌纖維含量，單位為質量百分數(shù)（）；ADL樣品的酸洗木質素含量，單位為質量百分數(shù)（）。2.5.6 以干基計的半纖維素含量 （6）式中：S樣品的半纖維素含量，單位為質量百分數(shù)（）；NDF樣品的中性洗滌纖維含量，單位為質量百分數(shù)（）；ADF樣品的酸性洗滌纖維含量，單位為質量百分數(shù)（）。2.5.7 以干基計的木質素含量 （7）式中：S樣品的木質素含量，單位為質量百分數(shù)（）；ADL樣品的酸洗木質素含量，單位為質量百分數(shù)（）。三. 結果與討論3.1助濾劑的選擇及

17、空白實驗由于煙草及其制品在用洗滌劑法進行纖維分析時過濾較為困難，殘渣容易堵塞石英坩鍋濾芯，影響測試效率和準確性。因此，選擇了國內外標準常用的助濾劑進行了常規(guī)的空白實驗，考察助濾劑的流失和空白實驗情況。選擇一定量的酸洗硅藻土和石英砂分別進行中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）和酸洗木質素（ADL）的測定，數(shù)據(jù)見下表。表2 助濾劑的損失和空白實驗（N=7）損失/g酸洗硅藻土/1g石英砂/2gNDF測試0.00080.0006ADF測試0.00150.0008ADL測試0.00320.0013試驗表明，石英砂的損失要小于酸洗硅藻土，同時，石英砂的過濾效果也較好于酸洗硅藻土，因此本標準選擇石

18、英砂作為助濾劑。同時，本空白實驗表明，因為一般的煙草及其煙草制品的上樣量約為1.0g（根據(jù)實際情況略有差異），因此，可以判定根據(jù)本標準煙草及其制品中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維和酸洗木質素的檢測限約為煙草干物質的0.1%左右。3.2 樣品脫脂方式的選擇和對測定結果的影響由于煙草樣品種類較多，成分較其他分析樣品更為復雜、且差異較大，為了有效去除脂溶性干擾物質的影響，一般需先脫脂才能進行樣品分析。對煙草樣品脫脂后分析，一方面可以減小干擾物質帶來的誤差，提高分析的準確性，另一方面，經(jīng)過脫脂，可以增加分析檢測的上樣量，提高分析的重復性，此外脫脂對提高后續(xù)步驟的過濾速度、延長坩鍋壽命都有一定的好處。脫脂的

19、方法有冷浸提、熱浸提、索氏抽提等方法，浸提的效果略有不同。在借鑒文獻、其他國內外標準，同時考慮方便快捷的基礎上，本研究對脫脂的方式、溶劑、時間等條件進行了選擇，研究表明，雖然部分樣品即使不進行脫脂，最后檢測結果的差異很小，但部分樣品的數(shù)據(jù)差異較大（見表3），主要原因是洗滌劑并不能完全將煙草及其制品中的非纖維類物質洗脫干凈，由于待測樣品的不確定性，本研究還是選擇了采取熱抽提的脫脂方式，并經(jīng)過傅立葉紅外光譜對抽提前后的樣品進行了驗證，基本確認用苯、乙醇、乙醚混合溶劑回流4小時基本能除去大部分酯溶性的干擾物質。表3 脫脂對部分樣品檢測結果的影響單位/%樣品A樣品BNDFADFADL纖維素半纖維素ND

20、FADFADL纖維素半纖維素脫脂21.4916.401.3015.105.0916.0613.200.8712.332.86未脫脂21.5716.451.3515.105.1218.6214.911.4413.473.71圖2 煙草樣品脫脂的失重曲線抽提后抽提前抽提后抽提前圖3 脫脂前后的煙草制品的傅立葉紅外光譜圖（上圖為吸收光譜，下圖為光譜的二階倒數(shù)處理） 運用紅外光譜比較了抽提前后煙草主要成分的變化（見圖3）。上圖顯示為抽提前后煙草的吸收光譜，箭頭所示的兩處吸收峰2922 cm-1和 1732 cm-1左右（肩峰）分別為-CH2和R-C=O-O化合物的吸收區(qū)域。特別是1720-1750 c

21、m-1間的吸收峰，常被用來判定脂質化合物存在與否。同時在1100 cm-1附近有該兩類化合物強烈的伸縮振動區(qū)域，表明該兩處吸收峰主要是脂類化合物引起的分子振動，且在煙草中含有較高的比重。洗滌后，2922 cm-1和 1732 cm-1兩處的吸收峰難以辨認，基本可以確認脂類化合物被去除。下圖為上圖的二階導數(shù)處理，有利于辨別難以用吸收光譜直接觀測出的微小差別。從抽提前后的二階導數(shù)譜中可以看出，原始譜中脂質判定峰1745 cm-1洗滌后同測試噪音相似，可以判定該樣本中無脂質類化合物。因此確認該煙草前處理方法對脂質類化合物去除有效。3.3 煙草和煙草制品中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維和酸洗木質素的測定根

22、據(jù)2.4和2.5相關內容，對烤煙、白肋煙、曬煙、煙梗、造紙法薄片等不同煙草和卷煙制品中的中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維和酸洗木質素的含量進行了測定，并根據(jù)計算得到煙草和煙草制品中的纖維素、半纖維素和木質素含量。具體數(shù)據(jù)見表4。表4 不同煙草和煙草制品中NDF、ADF、ADL及纖維素、半纖維素和木質素的含量單位/%NDFADFADL纖維素半纖維素木質素國內烤煙A19.96 12.30 1.18 11.127.66 1.18 國內烤煙B19.73 10.70 2.19 8.519.03 2.19 國內烤煙C17.89 10.97 1.20 9.776.92 1.20 國外烤煙21.33 12.58 2

23、.15 10.438.75 2.15 白肋煙16.06 13.20 0.87 12.332.86 0.87 曬煙20.86 14.02 1.47 12.556.84 1.47 香料煙16.93 8.77 1.12 7.658.16 1.12 煙草薄片40.36 37.69 1.64 36.052.67 1.64 煙梗26.96 25.81 2.12 23.691.15 2.12 烤煙型卷煙A20.75 13.75 1.45 12.37.00 1.45 烤煙型卷煙B21.49 16.40 1.30 15.15.09 1.30 混合型卷煙A21.78 15.12 1.29 13.836.66 1.

24、29 混合型卷煙B24.09 17.24 1.65 15.596.85 1.65 可以看出，煙梗、造紙法薄片的纖維素含量相對較高，半纖維素含量較低，而香料煙的纖維素含量相對較低；卷煙中由于梗絲和薄片的使用，纖維素的含量也較高；另外，煙草制品的木質素含量基本都在3以下，這些都是與以往的研究結果相一致的。3.4 重復性實驗選擇某樣品進行重復性分析測試，數(shù)據(jù)如下：表5 重復性實驗數(shù)據(jù)NDFADFADL纖維素半纖維素木質素119.87 12.69 1.27 11.41 7.18 1.27 220.04 13.51 1.43 12.08 6.53 1.43 318.23 12.40 1.36 11.04

25、 5.83 1.36 418.72 11.99 1.43 10.55 6.73 1.43 518.70 12.62 1.25 11.37 6.08 1.25 619.36 12.41 1.45 10.96 6.95 1.45 719.27 12.37 1.60 10.78 6.90 1.60 819.06 12.56 1.40 11.16 6.50 1.40 平均值/%19.16 12.57 1.40 11.17 6.59 1.40 SD0.61 0.44 0.11 0.47 0.45 0.11 RSD3.19%3.48%7.82%4.19%6.89%7.82%可以看出，NDF、ADF的測試重

26、復性較好，ADL的含量由于相對較低，RSD略大。而纖維素、半纖維素是根據(jù)NDF、ADF、ADL的差值計算得到，RSD會較實測值略大。3.5 回收率實驗取微晶纖維素樣品0.50g按2.4相關步驟分別進行NDF、ADF、ADL的實驗，測試表明，微晶纖維素的中性洗滌纖維和酸性洗滌含量在96.99和99.89，而酸洗木質素含量為0.01%，表明本方法是對檢測樣品中的纖維素含量有較好的選擇性和靈敏度。另取煙草樣品分別加入0.05g左右微晶纖維素標準品按2.4和2.5相關步驟分別進行NDF、ADF、ADL的實驗，數(shù)據(jù)（如下表6）表明本方法對纖維素的回收率較好。由于半纖維素和酸洗木質素的標準品無法獲取，因而

27、，對于半纖維素和木質素的回收率未進行考察。表6 樣品回收率、檢出率測試結果 單位：樣品名稱NDF加入纖維素量測定值回收率ADF加入纖維素量測定值回收率ADL加入纖維素量測定值檢出率空白樣品0.00100.0096.9996.990.00100.0099.8999.890.00100.000.010.01樣品一24.098.3931.5889.2917.248.3625.0893.821.658.321.720.80樣品二18.478.7827.38101.4412.548.4620.6996.281.568.291.55-0.11樣品名稱纖維素加入纖維素量測定值回收率半纖維素加入纖維素量測定值

28、檢出率木質素加入纖維素量測定值檢出率空白樣品0.00100.0099.8899.880.00100.00-2.90-2.900.00100.000.010.01樣品一15.588.3623.4393.826.858.396.50-4.201.658.321.720.80樣品二10.998.4619.1396.285.938.786.698.671.568.291.55-0.11備注：1. 半纖維素、酸洗木質素的標樣無法獲取； 2. 纖維素不應在ADL（木質素）、半纖維素測試中檢出，故標注“檢出率”。3.6 對于酶法測試纖維素的探索洗滌劑法是對纖維素等細胞壁物質分析的經(jīng)典方法，但是方法還是存在分

29、析周期長、低含量時重現(xiàn)性不高等弊端，因此，本研究對可否利用酶催化專一性的特性，采用纖維素酶將纖維素水解為單糖，然后用分析精度較高的液相色譜對水解所得的單糖進行分析做了一定的探索性研究，以圖為纖維素的分析開辟新的方法。采用一定的前處理方法，使纖維素從半纖維素和木質素的包裹中脫離出來，并使纖維素結晶區(qū)無定形化，是纖維素完全酶解的先決條件。綜合目前該領域的研究成果，前處理方法一般有：機械粉碎、高溫高壓爆破、酸處理、堿處理、微波處理、超聲處理等等。針對不同的應用條件，這些方法各有自身的特點。在本標準研究中，我們原計劃在堿處理、微波處理、超聲處理這3種手段中找出一種組合，獲得最優(yōu)的前處理效果，以最大程度

30、提高后續(xù)的酶解處理效率。但是無論利用堿處理、微波處理還是超聲處理，然后再進行酶解處理，效果都不是十分理想，測試結果（47）（見圖4）與經(jīng)典方法測試結果（12左右）相比差距較大，主要原因一方面時由于無論那種處理都不能有效地把纖維素從半纖維素及木質素的包圍中剝離出來，或者使微晶纖維素無定形化，利于酶的降解；更為主要的是，纖維素內部的1,4-糖苷鍵的鍵能要遠大于淀粉內部的1,6-糖苷鍵，分子量也遠大于淀粉，因此，要用酶完全降解纖維素使之成為葡萄糖仍然存在十分大的難度。加上針對半纖維素、木質素的酶也無法獲取，因此，本標準在進行一定的探索之后，仍然以經(jīng)典的洗滌劑法作為對煙草及其制品中纖維素、半纖維素和木

31、質素的測定方法，不采用酶法對纖維素等細胞壁物質進行分析和測定。圖4 不同前處理方式和時間對酶法測定結果的影響3.7 實驗室比對上海煙草（集團）公司、湖南中煙工業(yè)公司、上海交通大學農學院和山東大學生命科學學院等4家實驗室參加了方法的比對試驗，根據(jù)標準的初稿，分別測試了6個代表樣品的中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維和酸洗木質素等數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)見表7。比對試驗結果表明，NDF、ADF和ADL的比對情況總體良好，半纖維素由于是根據(jù)NDF和ADF的差值計算得到的，NDF、ADF的標準偏差會帶入到半纖維素的標準偏差中（主要是NDF的標準偏差），而半纖維素的含量相對較低，因此，會造成部分半纖維素測試結果的相對標準偏差

32、較大。但總體而言，比對結果仍是較為滿意的。表7 四家實驗室的分析檢測數(shù)據(jù)比對單位/%實驗室一實驗室二實驗室三實驗室四平均SDRSD國內烤煙ANDF18.4716.1216.6118.2317.361.176.73 ADF12.5412.5512.9312.4012.610.231.79 ADL/木質素1.561.331.421.271.400.139.04 纖維素10.9911.2211.5011.1311.210.221.95 半纖維素5.933.573.685.834.751.3027.40 煙梗NDF26.9628.1527.2727.2027.400.521.90 ADF25.8126.4125.5626.0525.960.361.39 ADL/木質素2.122.002.181.982.070.104.69 纖維素23.6924.4123.3824.0823.890.451.87 半纖維素1.141.741.711.151.440.3323.27 曬煙NDF20.8618.8720.7120.9820.361.004.89 ADF14.0213.0214.1713.0113.550.634.63 ADL/木質素1.461.631.691.811.650.158.84 纖維