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文檔簡介
1、2019 最新蘇教版生物選修1 第一節(jié)微生物的培養(yǎng)和應用教案重點知識歸納及講解(一)微生物需要的營養(yǎng)物質及功能1、微生物需要的營養(yǎng)物質:碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水五大類。2、碳源、氮源、生長因子的來源及功能。(二)培 養(yǎng)基的種類及配制原則(三)無菌技術1、無菌技術的內容(1) 對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進行清潔和消毒。(2) 將用于微生物培養(yǎng)的器 皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。(3) 已經滅菌處理的 材料用具不與周圍的物品接觸。1 / 6(4) 實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。2、消毒方法(1) 煮沸消毒法:如在 100 煮沸 56min 。(2) 化學藥劑消毒法:如用酒
2、精擦拭雙手,用氯氣消毒水源。3、滅菌方法(1) 灼燒滅菌。(2) 干熱滅菌。(3) 高壓蒸汽滅菌。(四)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1、計算根據配方比例,計算配制一定量的培養(yǎng)基所需各種成分的用量2、稱量3、溶化4、滅菌5、倒平板2 / 6思考:平板冷凝后,為什么要將平板倒置?平板冷凝后 ,皿蓋上會凝結水珠, 凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置 ,既 可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。(五)純化大腸桿菌1、平板劃線法 通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散 到培養(yǎng)基的表面。在數次劃線后,可以分離到由一個細胞繁殖而
3、來的肉眼可見的子細胞群體 ,即菌落。3 / 6思考:( 1 )為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結束時 ,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為 什么?操作的 第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數的增加,使每次劃線時菌種的數目逐漸減少,以便得到單個菌落。劃線結束后灼燒接種環(huán), 能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種 ,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。( 2 )在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?劃
4、線后 ,線條末端細菌的數目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細 菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。2、稀釋涂布平板法4 / 6 是將菌液進行一序列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞 ,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。課外拓展細菌的芽孢為數不多的產芽孢細菌生長到后期,在其菌體內形成的厚壁、折光性強、具抗逆性的孢子 芽孢。每個細菌一般只產生一個芽孢, 所以芽孢不是細菌的繁殖型,絕大多數產芽孢細菌為革蘭氏陽性桿菌 ,其中主要為好氧的芽孢桿菌屬
5、和厭氧的梭菌屬。放線菌中的高溫放線菌屬(Thermoactinomyces)也能產芽孢。芽孢是代謝活性很低 ,對干燥、熱、化學藥物(酸類)和 輻射等具有高度抗性的休眠體。例如 , 在很難覓到生物的沙漠中就有大量枯草桿菌和巨大芽孢桿菌的芽孢。芽 孢的抗 逆性和休眠能力有助于產芽孢細菌渡過困境,故芽孢對產芽孢細菌的生存具有重要意義。了解芽孢還有重要的實踐意義:芽孢是細菌分類鑒定中一項重要的形態(tài)特征;殺滅芽孢是制訂滅菌標準的主要依據:主要是以殺滅肉毒梭菌、破傷風梭菌、產氣莢膜梭菌和嗜熱脂肪芽孢桿菌等強致病性病菌或高耐熱性細菌的芽孢為標準的;許多產芽孢細菌是強致病菌:例如, 炭疽芽孢桿菌、肉毒梭菌和破傷風梭菌等;有些產芽孢細菌可伴隨產生有用的產物,如抗 生素短桿菌肽(gramicidin )、桿菌肽( bacit racin )等 。芽孢形成:產芽孢細菌通常在必需的養(yǎng)料(碳源/或氮源)
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