血清總膽紅素

1、所屬專業(yè) 生化項目名稱 血清總膽紅素測定適用儀器 HITACHI系列自動生化分析儀文件編號 203版本 第五版總頁數 7頁批準實施日期 2009年06月09日文件有效期 兩年復審日期 2010年06月09日復審人（簽名）文件編寫 陳奉暉文件審批者（簽名）批準日期 2009年06月08日文件發(fā)放部門/個人1. 醫(yī)務科（保管者簽名）2. 院長辦公室（保管者簽名）3. 醫(yī)院檔案室（保管者簽名）4. 檢驗科（保管者簽名）5. 專業(yè)實驗室（保管者簽名）1 檢驗申請 單獨檢驗項目申請：血清總膽紅素（縮寫TBIL）測定；組合項目申請：肝功能測定項目組合。臨床醫(yī)生根據需要提出檢驗申請。2標本采集與處理2.1

2、標本采集和接收2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，置于含分離膠黃色蓋子真空采血管，顛倒混勻5次。2.1.2真空管外貼條形碼作為唯一的標識符。2.1.3標本采集后及時運送至檢驗科。由專人負責標本的接收并記錄標本的狀態(tài)。對不合格標本予以拒收，并在“不合格標本拒收反饋記錄單”上逐項填寫，及時反饋給病區(qū)，若為門診標本，則填寫“重抽血復查通知”及時送到門診服務臺。2.1.4 下列標本為不合格標本 標本量不足。 對反應吸光度有干擾的標本，包括嚴重溶血、嚴重混濁的標本。 無法讀取標本信息（條形碼不清晰、不完整或粘貼不規(guī)范等原因）。 標本類型與條形碼上信息不符 標本容器上無條形碼或標簽 真空管用錯 標本污染 未按

3、標本采集要求采集與送檢2.2標本處理及保存2.2.1 標本采集后靜置10-20分鐘（室溫），然后離心5-8分鐘（離心力1000G）要求血清與血塊被分離膠完全隔離，血清中不能含有顆粒物或微量纖維蛋白。2.2.2 不能當天檢測的標本置280C冰箱保存待檢測，已完成測試的標本保持完整的識別號，置280C冰箱內保存7天后，按污物處理規(guī)范作廢棄處理。2.3 標本采集的注意事項2.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹狀態(tài)。2.3.2 不建議采集抗凝血標本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3 方法原理釩酸鹽氧化法。血清中膽紅素在一定條件下被釩酸鹽氧化成膽綠素，膽紅素的減少引起在波長450 nm處

4、吸光度的下降，通過測定反應前后吸光度值可求出總膽紅素的濃度。4 試劑及其他用品4.1 試劑：釩酸鹽氧化法測定總膽紅素試劑盒，由日本和光純藥工業(yè)株式會社，貨號997-22301。4.2 試劑盒保存：保存于2350C，不開蓋情況下保存至標簽的失效期。開蓋后放于儀器的試劑倉庫冰箱中至少穩(wěn)定30天。4.3 試劑盒準備：液態(tài)試劑型，即開即用，無特殊準備。4.4 試劑盒主要成分：氫氧化鈉600mmol/L, 酒石酸鉀鈉32 mmol/L，硫酸銅12 mmol/L，碘化鉀30 mmol/L。含有保護劑。5 校準品與校準模式5.1 校準品：由羅氏公司提供的校準液（Cat.No.）,其總蛋白濃度可溯源至美國國家

5、標準技術研究所（NIST）標準參考材料（SRM）470。5.2 校準類型和校準點數目：線性模式，3個校準點。5.3 校準周期：校準間隔時間為Full，1d。但在：更換試劑批號或出現質控漂移時；儀器進行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后；均需進行一次校準。5.4 校準液重建方法：用3.00ml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。6 質控品與室內質控規(guī)則6.1 質控品采用有美國貝克曼公司提供的兩個不同水平定值質控液。6.2 質控液重建方法：用5.00ml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。6.3 質控品測定：在每一批標本中測定兩個水平質控血清各一次。6.4 質控規(guī)則：采用Westga

6、rd多規(guī)則質控規(guī)則，由計算機程序進行檢索與判斷。QC數據12S 不符合 在控，報告結果 符合 13S不符合22S不符合 R4S不符合41S不符合10不符合 符合 符合 符合 符合 符合失控，拒發(fā)報告 6.5 如出現失控情況，按室內質控標準操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認重新回復到控制狀態(tài)后開始標本檢測。6.6 失控的處理：6.6.1 發(fā)現失控應向科主任或專業(yè)主管(組長或負責人)報告,并協同一起分析控制圖,確定誤差類型,若符合13S,R4S,增大造成的失控,通常提示隨機誤差。如屬于22S，41S，10規(guī)則的失控，往往提示系統誤差問題。6.6.2 造成系統誤差的因素：包括使用不同批

7、號的試劑、不同批號的校準品、校準品過期、加樣器或加液器的核準或調試錯誤使樣品或試劑體積變化、孵育箱或反應加熱塊的溫度變化、檢驗人員的變動等。造成隨機誤差的因素：試劑瓶中有氣泡、試劑沒有充分混勻、電源電壓不穩(wěn)、檢驗人員操作不熟練以及重現性差等。6.6.3 確認解決問題，做好記錄，并填寫失控整改記錄。7 適用儀器 適用Hitachi系列各種型號的全自動生化分析儀器。8 標本檢測步驟 裝載試劑進行校準進行質控輸入標本檢測項目加載標本標本測定結果復核報告。9 主要分析參數（以Hitachi7170為例，其他Hitachi生化分析儀型號根據最少比色量修改標本量及試劑量，根據加樣及比色時間修改Assay

8、Point，校準品濃度建議使用20g/L100g/L三個及以上濃度，S1ABS Limit與校準品第一個濃度有關） Assay Method 2 point End Reaction Time 10 min Assay Point 1634 Wave (sub/main) 546/450 Sample Volume 8 R1 Volume 200 R3 Volume 50 Inc/Dec Dec Calibration Type Linear Calibration Point 2 Span Point 2 SD Limit 0.1 Duplicate Limit 300 Unit umol/

9、L STD (3) * 10 結果計算 計算公式：總膽紅素濃度（mol/L）=樣本吸光度 標準吸光度 標準液總膽紅素濃度（mol/L） 儀器根據此公式自動給出每個標本測定結果11 檢驗結果的報告及范圍11.1 結果報告11.1.1 結果經審核確認準確無誤后發(fā)出報告。11.1.2 報告單上標明結果的計量單位、參考區(qū)間、標本接收及報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與條形碼相同的病人信息。11.1.3 如收到標本的質量可能對測定結果有影響的也在報告單上指出。11.2 報告范圍：1.71026mol/L，超出此范圍的結果報告時必須附有證明該結果準確可靠的文字說明，并經上級主管技師審核后報告。12

10、 操作性能12.1 精密度：總CV0.8%3.6% 。12.2 線性范圍：1.71026mol/L。12.3 方法的有限性及干擾因素：甘油三酯達10.2mmol/L時影響小于6%，血紅蛋白達250mg/L時影響小于10%。13 參考范圍及醫(yī)學決定水平 參考范圍：322mol/L 。14 臨床意義14.1 血清總膽紅素和結合膽紅素多用于黃疸的診斷和鑒別診斷。由于膽紅素和肝臟功能密切相關，總膽紅素是重要的常規(guī)肝功能指標。14.2 各種原因引起的黃疸都有血清總膽紅素的升高，如膽汁性肝硬化、膽道梗阻、阻塞性膽紅素、肝細胞性膽紅素，如肝炎、肝硬化、溶血性黃疸、新生兒膽紅素或輸血錯誤。14.3 血清總膽紅

11、素可作為暴發(fā)型肝衰竭（FHF）和自身免疫性肝炎（AIH）預后死亡的獨立危險因子，TBIL 255mol/L預測FHF預后死亡的敏感性為75%，特異性為46.8%。15 結果審核以及分析與相關項目的聯系15.1 由資深專業(yè)人員負責檢驗結果的審核。15.2 審核者認真審核每一個測定結果，對發(fā)出報告結果的可靠性負責，并在報告單的審核者處簽名。15.3 相關項目：審核與結合膽紅素（DBIL）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酸轉移酶的關系，如出現與臨床不符甚至相悖的情況，應分析與查找原因。16 威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定16.1 成人 255mol/L；新生兒 307.8mo

12、l/L為應引起臨床重視的緊急值，可能有較嚴重的肝細胞壞死或暴發(fā)性肝衰竭的情況。16.2 處理程序16.2.1 檢驗人員立即報告審核者。16.2.2 審核者首先根據審核程序，分析質控、定標、試劑的情況是否正常，當天其它已做標本本項目的總體情況有無異常，確認實驗有關的基礎是在正常狀態(tài)中。16.2.3 出現緊急值的標本有無異常，該標本其它項目有無異常，尤其是該患者其他肝功能的情況。16.2.4 對該標本進行一次重復測定，確認緊急值是否重現。16.2.5 報告技術質量主管及科主任，立即與臨床聯系，了解臨床相關情況。16.2.6 確認此緊急值是可報告的，由技術主管或科主任立即電話向主管臨床醫(yī)生報告，并作好電話報告記錄，包括電話報告時間和對方接聽人員的標識。16.2.7 及時簽發(fā)正式檢驗結果報告。17 有關引用程序與文件17.1 Hitachi 7170A型、7600型自動生化分析