儀器法血細胞檢查課件

1、儀器法血細胞檢查1 儀器法血細胞檢查儀器法血細胞檢查 儀器法血細胞檢查2 概述 儀器法測定原理 方法學(xué)評價 分析儀應(yīng)用進展 先進技術(shù)預(yù)覽 儀器法血細胞檢查3 1.手工法手工法： 原理簡單、方便實用，但是比較費時費力、影響因 素較多。 2.儀器法儀器法： 靈敏度高、技術(shù) 先進、信息含量大、容易標(biāo)準(zhǔn)化， 規(guī)范化。 1)電阻式 2)光學(xué)式 3)離心式 儀器法血細胞檢查4 l 電阻式儀器法測定原理及臨床意義 l 光學(xué)式儀器法測定原理 l 離心式儀器法測定原理 儀器法血細胞檢查5 一白細胞分析原理 二紅細胞分析原理 三血小板分析原理 四分析儀檢測參數(shù)及臨床意義 （一）細胞直方圖的應(yīng)用 （二）RDW的臨床

2、意義 （三）血小板參數(shù)的臨床意義 儀器法血細胞檢查6 1電阻抗法血細胞 分析儀基本結(jié)構(gòu)示意 圖 2W.H.Coulter原理: 根據(jù)血細胞非傳導(dǎo) 的性質(zhì),以電解質(zhì)溶液 中懸浮的白細胞，在通過計數(shù)小孔時引起的電阻變化，而進行 血細胞的計數(shù)和體積測定。 3根據(jù)檢測項目的不同設(shè)定小孔直徑的不同。 4根據(jù)細胞大小的不同，所形成的脈沖信號強弱不同。 白細胞體積的大小經(jīng)過溶血劑的處理后，形成大小不等的 顆粒。小細胞區(qū)小細胞區(qū)主要是淋巴細胞；中間細胞區(qū)中間細胞區(qū)主要是M、E、B 等；大細胞區(qū)大細胞區(qū)主要是中性粒細胞。 WBC Analyzer 儀器法血細胞檢查7 5血細胞的脈沖信號經(jīng)過放大、甄別、整形后，送

3、入 計數(shù)系統(tǒng)，得出計數(shù)結(jié)果。（細胞分布直方圖） 圖1-2 白細胞體積分布直方圖 小細胞 中間細胞 大細胞 fl REL NO R1R2R3R4 WBC 儀器法血細胞檢查8 1紅細胞計數(shù)（RBC）和紅細胞比積（Hct） 1）RBC原理（脈沖數(shù)的多少） 2）Hct/PCV原理（脈沖的高度與疊加） 3）白細胞數(shù)的干擾 4）紅細胞體積分布直方圖 2血紅蛋白（Hb）含量測定 1）原理： 血液稀釋劑溶血劑 Hb溶血劑 血紅蛋白衍生物（HiCN,SLS-Hb） Hb檢測系統(tǒng) 2）溶血劑配方不同所形成的Hb衍生物也不同 3）ICSH推薦HiCN法為儀器校正的標(biāo)準(zhǔn)方法 4）HiCN最大吸收在540nm，含毒性。

4、 100 200 fl RBC RBC溶解 RBC Analyzer 儀器法血細胞檢查9 3各項紅細胞指數(shù)檢測原理 1）MCV,MCH,MCHC計算原理同手工法 2）RDW(紅細胞體積分布寬度） RDW反映外周血液紅細胞體積異質(zhì)性的參數(shù)， 或是反映外周血紅細胞體積大小不等的客觀指標(biāo)。 3）RDW的表示方法 RDW-CV RDW-SD L1L2 X軸上的68.28% (可信區(qū)間) RDW-CV 100% 20% RDW-SD 儀器法血細胞檢查10 1與RBC共一系統(tǒng)，不同的域值（230fl）為PLT 1）脈沖多少PLT 2）脈沖大小MPV 2 專門設(shè)置：鞘流技術(shù)、浮動界標(biāo)、擬合曲線等血 小板 準(zhǔn)

5、確性技術(shù)。 1020 30 fl PLT PLT Analyzer 儀器法血細胞檢查11 （一）細胞直方圖的應(yīng)用 1WBC直方圖/及“分類”計數(shù) 1）初步估計細胞群體的變化 2）技術(shù)因素或病理變化 100 200 300 400 fl fl 100 200 300 400 儀器法血細胞檢查12 2RBC體積直方圖 要注意觀察圖形峰的位置、峰底的寬度、峰頂?shù)?形狀及有無雙峰現(xiàn)象。 1）缺鐵性貧血 2）輕型Hb合成障礙 3）鐵粒幼細胞性貧血 4）葉酸缺乏的巨幼細胞性貧血 5）其他 100200fl 儀器法血細胞檢查13 3血小板直方圖 當(dāng)血小板計數(shù)和血小板體積直方圖呈現(xiàn)異?，F(xiàn)象時，均 應(yīng)檢查血液是

6、否有血小板凝聚和微小血塊，必要時作血涂片 檢查，觀察是否有小紅細胞、紅細胞碎片或大血小板增多現(xiàn) 象。 10 20 30 fl 儀器法血細胞檢查14 （二）RDW的臨床意義 1鑒別缺鐵性貧血和-珠蛋白生成障礙性貧血 1）共同點：小細胞性貧 血，峰左移。 2）鑒別點： aRDW增高，峰底寬 bRDW正常，峰底窄 2診斷缺鐵性貧血 為小細胞低色素性貧血，伴有RDW異常增高者 （RDW正常可排除） 3進行貧血的新的形態(tài)學(xué)分類（MCV/RDW） a 大細胞不均一性正細胞不均一性小細胞不均一性異常 大細胞均一性正細胞均一性小細胞均一性正常RDW 增 高正 常減 低 MCV b N fl 100 200 儀

7、器法血細胞檢查15 1PLT 正常參考范圍（100300）109 /L 2MPV的變化： 1）鑒別血小板減少 PLT而MPV：Pt破壞增多（如DIC、ITP等） PLT而MPV：M增生不良、AIDS、M纖維化、 再障、M瘤、白血病化療、敗血癥等 2）鑒別血小板增高 PLT而MPV：反應(yīng)性Pt增多癥，失血等。 PLT而MPV正常：M增生性疾病，如PLT增多癥。 3）其他 PLT正常而MPV ：慢性M性白血病、脾切等 因MPV先于PLT變化，MPV可用于觀察病情變化， 如MPV 表示BM恢復(fù)，局部炎癥MPV正常，敗血癥MPV 升高。 對于出血傾向評估：MPV與出血傾向呈負(fù)相關(guān)。 （三）血小板參數(shù)的

8、臨床意義 儀器法血細胞檢查16 根據(jù)每個細胞所產(chǎn)生的散射角度判斷細胞的體積和 形態(tài)特征進行白細胞分類。 一原理示意圖： 二原理： 1又稱光散射式計數(shù)法。由 細胞懸液中的血細胞通過流通檢 測器阻斷一次光束，細胞不斷阻 斷光束使檢測器在單位時間內(nèi)檢 出光束阻斷的次數(shù)，從而計算出 細胞數(shù)。 儀器法血細胞檢查17 一原理： （干式細胞計數(shù)儀）血液AC熒光染色劑 離 心 紅細胞、粒細胞、淋巴細胞、血小板、血漿 二細胞著色的特點 1紅細胞不著色，為 暗紅色。 2粒細胞呈桔黃色。 3淋巴細胞呈綠色。 4血小板呈淡黃色。 5血漿為透明的淺 黃色。 細胞著色 儀器法血細胞檢查18 一WBC計數(shù)及分類計數(shù) 1手工

9、法：用顯微鏡目視計數(shù)是基礎(chǔ)方法，但是存 在固有誤差（計數(shù)板、吸管等系統(tǒng)誤差）、技術(shù)誤差 （重復(fù)性、準(zhǔn)確性相對較差）。 2儀器法：可標(biāo)準(zhǔn)化，便于質(zhì)控。精密度、準(zhǔn)確性 較高（需經(jīng)嚴(yán)格校正后） 二儀器法分類計數(shù)為大致的分群不是真正的分類，不 能完全代替手工法 儀器法血細胞檢查19 1人員培訓(xùn) 1）儀器原理、操作規(guī)程、注意事項、異常報警的含義。 2）運用質(zhì)控圖的變化進行儀器的調(diào)試。 2儀器的鑒定 包括總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準(zhǔn)確性。 3儀器的校正：隨機的標(biāo)準(zhǔn)品、或者嚴(yán)格的手工法。 4標(biāo)本的采集和運送 1）要求用抗凝的靜脈血 2）抗凝血在室溫下，WBC、RBC、PLT可以穩(wěn)定24h，血 小

10、板不適合在低溫下保存。 5注意分析中的幾個問題 1）最適宜溫度為1822 2）溶血劑用量及溶血時間 3）儀器的半堵孔現(xiàn)象 6分析后的注意事項 三儀器法的應(yīng)用必須全面實行質(zhì)量管理 儀器法血細胞檢查20 一儀器測試原理的改進。 1容量、電導(dǎo)、光散射白細胞分類法 2阻抗與射頻技術(shù)聯(lián)合的白細胞分類法 3光散射與細胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于白細胞分類法 4多角度偏振光散射白細胞分類技術(shù) 二儀器自動化水平的提高。 三各種特殊技術(shù)的應(yīng)用。 儀器法血細胞檢查21 圖圖1半自動分析儀半自動分析儀 這是一個容易操作的 系統(tǒng)。接通電源后，儀器 處于正常的操作待機狀態(tài) 時，只要把20l 血液樣 品在機外稀釋，混勻后放 在樣品架上，按下計數(shù)鍵 它就可以對15種血液指標(biāo) 和3個細胞直方圖進行一 次分析。測定完成后結(jié)果 會立即在LCD上顯示并將 結(jié)果打印出來。 儀器法血細胞檢查22 圖圖2全自動分析儀全自動分析儀 這是一臺用于臨 床實驗室體外診斷的 全自動血液分析儀， 能為血液異常病人提 供準(zhǔn)確的篩選結(jié)果， 并提示其需作進一步 檢查。能每小時分析 80份樣品，打印出18 份參數(shù)和3種細胞分布 曲線圖。操作簡便， 快速。 儀器法血細胞檢查23 圖圖3CD-3500 血球計數(shù)分析儀血球計數(shù)分析儀 30個參數(shù)，10項白細胞分類，7個分布圖，7個散射表示圖 可以做網(wǎng)織紅細胞分析，以及動物血液測試高